微量动态显色法检测奥拉西坦注射液中细菌内毒素含量

目的： 应用微量动态显色法对奥拉西坦注射液进行细菌内毒素定量检测,并与凝胶法结果比较。方法： 采用微量动态显色法鲎试剂对奥拉西坦注射液进行干扰试验,采用凝胶法鲎试剂对奥拉西坦注射液进行细菌内毒素检查。结果： 本品在终浓度为40 mg·mL^-1及以下浓度时对微量动态显色法鲎试剂与细菌内毒素的凝集反应无干扰作用,回收率在50%~200%之间,检测结果与凝胶法一致。结论： 本品可采用微量动态显色法定量检测细菌内毒素含量,进行质量控制。     

左旋奥拉西坦注射液细菌内毒素检查方法的研究

摘 要 目的：建立左旋奥拉西坦注射液的细菌内毒素检查方法。方法: 按中国药典2015年版四部通则1143细菌内毒素检查凝胶法,使用2个不同厂家的鲎试剂对3个批号的左旋奥拉西坦注射液进行了细菌内毒素检查法的方法学研究。结果: 样品浓度稀释至8.3 mg·mL^-1时,可排除干扰作用。结论:左旋奥拉西坦注射液可适用细菌内毒素检查法,其内毒素限值确定为3 EU·mL^-1。     

中国药典2020年版细菌内毒素检查法补充方法应用研究

目的 为了促进中国药典使用者对新增的内毒素检查方法的理解,保障中国药典2020年版顺利执行,介绍重组C因子法和微量凝胶法起草背景、增订和应用的相关内容。方法 结合9251细菌内毒素检查法应用指导原则和重组C因子与微量凝胶法的研究,梳理2种方法相关内容。结果 结合内毒素检查法与鲎资源现状以及补充方法分类,讨论重组C因子法和微量凝胶法简介、应用现状及使用,详细介绍2种补充方法。结论按照中国药典的要求使用重组C因子法和微量凝胶法,可缓解鲎资源短缺带来的问题,保障注射剂的质量安全。     

显色基质法检测乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液细菌内毒素含量

摘 要 目的: 建立快速的乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液细菌内毒素定量检查法。方法: 使用显色基质鲎试剂对不同批号的乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液分别进行干扰试验,考察确立乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液内毒素定量检查法。结果:表明标准曲线的线性相关系数r≥0.98,乳酸左氧氟沙星在2 mg·ml^-1浓度无干扰作用。结论:显色基质法与凝胶法比较,有灵敏、快速、能定量、重复性好的特点,可用于乳酸左氧氟沙星内毒素含量的测定。     

注射用红花黄色素细菌内毒素检查法可行性研究

摘 要 目的：建立注射用红花黄色素的细菌内毒素检查方法,以控制药物质量,减少临床热原反应的发生。方法: 按中国药典2015年版四部收载的细菌内毒素检测及指导原则进行操作,系统观察注射用红花黄色素对鲎试剂与细菌内毒素凝聚反应的干扰。确定凝胶法检测细菌内毒素的不干扰浓度。结果: 注射用红花黄色素在稀释到0.4 mg·ml^-1及以下浓度对鲎试剂干扰试验无干扰作用。结论:注射用红花黄色素可采用细菌内毒素检查法（凝胶法）进行细菌内毒素的限量检查,结果准确,重复性好。     

动态浊度法检测流感病毒裂解疫苗细菌内毒素的含量

摘 要 目的：探讨动态浊度法检测流感病毒裂解疫苗细菌内毒素含量的可行性。 方法: 参照《中国药典》2015年版通则1143细菌内毒素检测法,对流感病毒裂解疫苗进行标准曲线可靠性试验、干扰初筛试验、干扰验证试验及内毒素含量测定,并与凝胶法检定的同批疫苗的结果相比较。 结果: 标准曲线可靠性试验结果符合规定。干扰初筛试验,疫苗稀释160倍、320倍及640倍,回收率在50%～200%之间,均无干扰,干扰验证试验进一步证明疫苗稀释640倍对试验均无干扰作用,浊度法检测的10批流感疫苗细菌内毒素含量均小于该疫苗的限值20 EU·mL^-1,并与经凝胶法检定的同批疫苗结果一致。结论:采用动态浊度法检测流感病毒裂解疫苗细菌内毒素含量是可行的,值得推广应用。     

左乙拉西坦原料药细菌内毒素检查方法学研究

目的:研究左乙拉西坦原料药细菌内毒素检查方法,对凝胶法和动态显色法两种试验方法进行比较。方法:按照《中国药典》2020年版四部通则1143“细菌内毒素检查法”,用凝胶法和动态显色法两种试验方法,对3批样品进行干扰试验以及细菌内毒素检查。结果:将左乙拉西坦原料药细菌内毒素限值定为“每1mg左乙拉西坦中含内毒素的量应小于0.03 EU”,左乙拉西坦对凝胶法和动态显色法两种试验方法均无干扰作用,细菌内毒素检查结果符合规定。结论:凝胶法和动态显色法均可用于左乙拉西坦原料药细菌内毒素检测,可根据不同的需求,选择适合的检测方法。     

重组C因子检测银杏叶提取物注射液细菌内毒素的方法学研究

目的:建立银杏叶提取物注射液的重组C因子细菌内毒素检测方法。方法:使用重组C因子法进行细菌内毒素方法学研究,并用鲎试剂动态显色法、家兔法对银杏叶提取物注射液进行对比研究。结果:金纳多注射液稀释至400倍及以下浓度进行试验,回收率均在《中国药典》规定的50%～200%范围内,符合药典规定,并与动态显色法和热原法结果一致。结论:本研究为重组C因子检测中药注射液细菌内毒素的方法学和标准的建立提供了实验依据。     

一种难溶性原料药细菌内毒素检查方法的建立

摘 要 目的：建立原料药HSSYO 001 3S细菌内毒素检查方法。方法: 以二甲亚砜（DMSO）溶解HSSYO 001 3S,用适量细菌内毒素检查用水（BET水）稀释后,离心取上清液,按中国药典2015年版四部通则11431检查凝胶法,对HSSYO 001 3S进行细菌内毒素检查的方法学研究。结果:HSSYO 001 3S加助溶剂并以BET水稀释至1 mg·m^-1 ,经离心后取上清液稀释4倍及以上时对鲎试剂凝集反应无干扰作用。结论:HSSYO 001 3S可采用细菌内毒素检查法控制其质量。     

伤寒Vi多糖疫苗细菌内毒素检测

目的：建立动态浊度法检测伤寒Vi多糖疫苗的细菌内毒素。方法：参考《中国药典》三部（2010版）,采用动态浊度法对伤寒Vi多糖疫苗中细菌内毒素进行检测,并对标准曲线的可靠性和干扰试验进行验证。结果：本次试验内毒素浓度在0.03125~1.0 EU·mL^-1,r=-0.9972,具有良好线性关系。干扰试验样品回收率在50%~200%。伤寒Vi疫苗细菌内毒素限值确定为600 EU·mL^-1。样品的内毒素值从低于检测限到125.7 EU·mL^-1。结论：采用动态浊度法监控伤寒Vi多糖疫苗中的细菌内毒素是可行的。     

注射用福沙匹坦二甲葡胺中细菌内毒素检查法的建立

目的研究注射用福沙匹坦二甲葡胺细菌内毒素检查方法的建立。方法根据《中国药典》2010年版二部附录规定,确定试验溶液浓度和内毒素限度。结果在将样品稀释至3 g·L-1时无干扰,并将细菌内毒素限度为0.6 EU·mg-1。结论采用鲎试剂检查法对注射用福沙匹坦二甲葡胺中的内毒素检查是可行的。     

注射用重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子中内毒素的定量检测

目的建立定量检测注射用重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子（rhGM-CSF）的细菌内毒素含量的方法。方法参考《中国药典》2010年版中细菌内毒素的检测方法,通过建立标准曲线和预干扰实验确定样品的稀释倍数,采用终点显色法定量检测rhGM—CSF细菌内毒素含量。结果注射用重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子（rhGM-CSF）进行2倍稀释,用细菌内毒素定量法检测无明显干扰作用,内毒素回收率在50％～200％,检测结果与凝胶法结果一致。结论应用终点显色法测定注射用重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子（rhGM．CSF）中的细菌内毒素是可行的。     

胆固醇的细菌内毒素检查方法研究

目的 为难溶性辅料胆固醇(供注射用)建立细菌内毒素检测方法。方法 通过筛选出适合溶解胆固醇的有机溶剂,并经过9种排除干扰的方法筛选,采用凝胶法和动态浊度法进行干扰试验,排除了有机溶剂和胆固醇对内毒素检查法的干扰,最终建立了胆固醇的细菌内毒素质量控制方法。检测条件：取胆固醇用无水乙醇配制成20 mg·mL-1溶液,用0.5 mg·mL-1聚氧乙烯(35)蓖麻油水溶液代替细菌内毒素检查用水稀释100倍,按内毒素检查法动态浊度法检测。结果 3批样品使用2个厂家的动态浊度法鲎试剂的回收率均在50%～200%,并且内毒素检测值均<0.1 EU·mg-1。如使用凝胶法,该品种只能使用1个厂家最高灵敏度的试剂进行检测。因此,胆固醇不建议使用凝胶法进行检测。结论 建立了胆固醇(供注射用)细菌内毒素动态浊度法检测方法,用于质量控制。     

注射用布罗佐喷钠的细菌内毒素检查法可行性研究

目的：探讨应用细菌内毒素检查法控制Ⅰ类新药注射用布罗佐喷钠的热原物质的可行性。方法：应用2个厂家的鲎试剂和1批注射用布罗佐喷钠制剂进行干扰预试验,摸索出最大不干扰浓度;再分别对3批注射用布罗佐喷钠制剂进行正式干扰试验,根据供试品梯度稀释溶液对鲎试剂和细菌内毒素反应的干扰情况,确定细菌内毒素检查法的适用性;并根据限值应用适宜灵敏度的鲎试剂对3批制剂进行细菌内毒素检查。结果： 3个批次的制剂在有效浓度（3.125 mg·mL^-1）的9.5倍时对鲎试剂与内毒素的反应即无干扰作用,细菌内毒素检查结果均符合规定。结论：可应用细菌内毒素检查法检查注射用布罗佐喷钠的热原,该方法可快速、准确对制剂产品进行安全性质量控制。     

显色基质法定量检测盐酸多沙普仑注射液的细菌内毒素

目的:建立定量检测盐酸多沙普仑注射液中细菌内毒素的方法。方法:采用显色基质法,按照《中国药典》相关方法对不同批号的盐酸多沙普仑注射液分别进行干扰试验,确立其不干扰质量浓度。结果:盐酸多沙普仑注射液稀释至5 mg/ml时无干扰作用,回收率为50%¹00%。结论:显色基质法可用于盐酸多沙普仑注射液中细菌内毒素含量的定量检测。     

动态显色法定量检测磺达肝癸钠注射液中的细菌内毒素

目的:建立动态显色法测定磺达肝癸钠注射液中细菌内毒素含量。方法:依据2020年版《中华人民共和国药典》(通则1143细菌内毒素检查法)的要求,应用Pyros Kinetix^■Flex(PKF)细菌内毒素定量检测系统,使用动态显色法鲎试剂,建立细菌内毒素标准曲线,通过干扰预试验确定稀释倍数,测定供试品溶液中外加内毒素的回收率进行干扰试验,完成供试品中细菌内毒素含量的定量检测试验。Pyros^■EQS软件自动绘制并出具标准曲线,计算溶液中内毒素的绝对含量,生成报告储存在Oracle数据库中。结果:标准曲线的线性范围为0.001~0.125 EU·mL^-1(r=-0.9991),回归方程为lgT=-0.2658 lgC+2.818,供试品在稀释5000、10000、15000、16500倍时均对反应无干扰作用,细菌内毒素回收率在50%~200%范围内,4批供试品的内毒素定量检测结果均符合规定。结论:在Pyros Kinetix^■Flex(PKF)细菌内毒素定量检测系统平台,本法可用于磺达肝癸钠注射液中细菌内毒素含量的测定,可定量检测供试品中内毒素的含量。     

注射用二乙酰氨乙酸乙二胺细菌内毒素检查方法验证

目的： 建立注射用二乙酰胺乙酸乙二胺的细菌内毒素的检查方法。方法：按《中国药典》2015年版四部通则1143进行,用不同厂家的鲎试剂对不同批号的注射用二乙酰氨乙酸乙二胺进行干扰试验和细菌内毒素检查。结果：用细菌内毒素检查用水将本品稀释至96倍时,用灵敏度0.25 EU·mL^-1的鲎试剂检查细菌内毒素,无干扰作用,按拟定标准检查,该品种3批样品细菌内毒素检查结果均符合规定。结论：本品可采用细菌内毒素检查法检查,其细菌内毒素限值（L）为0.12 EU·mg^-1。     

注射用奥扎格雷钠细菌内毒素检查方法研究

目的：探讨注射用奥扎格雷钠细菌内毒素检查方法替代家兔热原检查法的可行性。方法：采用2个不同厂家的鲎试剂,用凝胶法进行干扰预试验及干扰试验;用灵敏度为0.5EU·mL^-1鲎试剂和0.8mg·mL-1的奥扎格雷钠溶液进行细菌内毒素检查。结果：注射用奥扎格雷钠稀释到0.8mg·mL^-1时,对鲎试剂与内毒素的凝集反应无干扰作用;样品的细菌内毒素限值确定为0.625EU·mL^-1。结论：注射用奥扎格雷钠可用细菌内毒素检查法替代原有的家兔热原检查法。