Morphological alterations of Vero cell exposed to coplanar PCB 126 and noncoplanar PCB 153

Polychlorinated biphenyls (PCBs) are widespread, persistent environmental contaminants that display a complex spectrum of toxicological properties. Exposure to PCBs has been associated with morphological anomalies in cell cultures. However, most mechanistic studies of PCBs' toxic activity have been focused on coplanar congeners. It is of importance to determine whether PCB treatment would influence cell configuration and whether these changes would depend on the structural characteristics of PCBs. In this study, we investigated cell morphological alteration in Vero cell cultures after exposure to coplanar PCB 126 and noncoplanar PCB 153. The survival of Vero cells was measured through the MTT (3‐(4,5‐dimethylthiazol‐2‐yl)‐2,5‐diphenyltetrazolium bromide) test. Cytotoxicity results suggested that PCB congeners had a toxic, antiproliferative effect on Vero cells. Morphological studies described structural modifications and provided evidence that apoptosis might be the main cell death pathway in PCB 153‐treated cells. The comparison between PCB 126 and PCB 153 indicated that the cell death mechanisms involved in coplanar or noncoplanar PCB congener exposure were different in Vero cells. © 2010 Wiley Periodicals, Inc. Environ Toxicol, 2012.     

蛇葡萄素对人宫颈癌SiHa细胞增殖、周期及凋亡的影响

目的探究蛇葡萄素(ampelopsin,AMP)对人宫颈癌SiHa细胞增殖、周期、凋亡的影响及其可能的作用机制。方法MTT法检测不同浓度(10、20、40、80、160、320μmol·L^-1)和不同干预时间(24、48、72 h)的AMP对SiHa细胞增殖抑制作用;Hoechst 33258法、Annexin-FITC/PI法检测AMP对SiHa细胞凋亡的影响;流式细胞术检测细胞周期变化;Rh-123法检测线粒体膜电位的变化;Western blot检测AMP对SiHa细胞中Bcl-2、Bax、Cleaved-caspase-3蛋白表达的影响。结果AMP对SiHa细胞抑制率呈浓度和时间依赖性(P<0.05),最低IC 50值为40.33μmol·L^-1;随着AMP浓度的增加或作用时间的延长,细胞凋亡率逐渐增加(P<0.05);当AMP浓度为80μmol·L^-1时,细胞周期阻滞在G 2/M期,呈一定的时间依赖性;线粒体膜电位随AMP浓度上升而下降;Bax/Bcl-2和Cleaved-caspase-3表达水平均上调,呈浓度和时间依赖性(P<0.05)。结论AMP明显抑制SiHa细胞的增殖,阻滞细胞周期于G 2/M期,可能通过线粒体途径诱导SiHa细胞凋亡。     

尼美舒利联合吉西他滨对人非小细胞肺癌NCI-H1975细胞增殖和凋亡的影响

目的研究尼美舒利联合吉西他滨对人非小细胞肺癌NCI-H1975细胞增殖和凋亡的影响。方法采用MTT法测定尼美舒利联合吉西他滨对NCI-H1975细胞生长的抑制作用。流式细胞仪检测尼美舒利(100μmol/L)组、吉西他滨(20 nmol/L)组和联合用药(尼美舒利100μmol/L+吉西他滨20 nmol/L)组对NCI-H1975细胞周期和凋亡的影响。Western blotting检测各组对Bcl-2、Bax、Cleaved caspase-3蛋白表达的影响。结果尼美舒利对NCI-H1975细胞的生长具有抑制作用,且呈剂量相关性,IC50为(298.76±2.79)μmol/L;吉西他滨的IC50为(78.64±3.14)nmol/L,尼美舒利与吉西他滨联合作用后,能明显增加后者对NCI-H1975细胞增殖的抑制作用,二者有明显的协同作用。尼美舒利联合吉西他滨将细胞阻滞在G0/G1期,而S和G2/M期均有所减少。与单药组相比,联合用药组能显著升高细胞的凋亡率(P0.05)。与单药组相比,联合用药组明显下调Bcl-2蛋白的表达(P0.05),上调Bax和Cleaved caspase-3蛋白的表达(P0.05)。结论尼美舒利联合吉西他滨能明显抑制肿瘤细胞的增殖,诱导细胞凋亡,其效果优于单用吉西他滨组,其机制与影响细胞周期调控,下调Bcl-2蛋白表达、上调Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达水平有关。     

木栓酮调控K562细胞增殖和细胞周期机制的初步研究

目的观察木栓酮对人慢性髓系白血病(CML)细胞株K562增殖和细胞周期的影响和机制。方法将K562细胞分为对照组和木栓酮组,木栓酮组包括10、20、50、100μmol/L组,培养24、48、72h。采用四甲基固氮唑盐(MTT)法测定木栓酮对K562细胞增殖的影响,流式细胞仪检测木栓酮对K562细胞细胞周期的影响。实时定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞中细胞周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)mRNA表达水平。蛋白印迹法检测细胞中CDK1蛋白表达水平。结果 50μmol/L木栓酮组和100μmol/L木栓酮组K562细胞的增殖抑制率明显高于对照组,并具有一定的时间和剂量依赖性。进一步研究发现,50μmol/L和100μmol/L木栓酮可以阻滞细胞周期于G0/G1期。高浓度木栓酮作用后,CDK1mRNA及蛋白表达均明显低于对照组。结论木栓酮能够抑制K562细胞的增殖,并使K562细胞周期阻滞在G2期,其机制可能与下调CDK1的表达有关。     

黄芪多糖对人肺癌A549 细胞增殖的作用及其机制的实验研究

目的探讨黄芪多糖（astragalus polysaccharide,APS）对人肺癌A549细胞增殖的作用及其机制。方法用不同浓度的APS（25μg.mL-1、50μg.mL-1、10μg.mL-1、200μg.mL-1、400μg.mL-1）作用于人肺癌A549细胞,用MTT法检测细胞增殖的抑制率,免疫细胞化学法检测bcl-2和bax的表达。结果 APS的浓度在25μg.mL-1～400μg.mL-1范围内均可抑制人肺癌A549细胞的增殖,100μg.mL-1的APS对A549细胞增殖的抑制率达最高,100μg.mL-1的APS作用于人肺癌A549细胞48和72小时后,均可下调bcl-2和上调bax的表达。结论 APS能够可抑制人肺癌A549细胞的增殖,可能与其下调bcl-2和上调bax的表达有关。     

4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯对MCF-7细胞增殖和分化的影响及其机制研究

目的研究4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯(4-ami-no-2-trifluoromethyl-phenyl retinate,ATPR)对人乳腺癌MCF-7细胞增殖和分化的作用及其可能机制。方法不同浓度的ATPR作用MCF-7细胞后,绘制细胞生长曲线,分析细胞增殖情况;瑞氏-吉姆萨染色法观察细胞形态学改变;酶联免疫法(ELISA法)检测粘蛋白(mucin 1,MUC-1)活性;RT-PCR法检测维甲酸受体(RARα、RARβ、RARγ)、维甲酸受体诱导基因1(RRIG1)、雌激素受体(ERα、ERβ)mRNA的表达;Western blot法检测RARα、RARβ、RARγ蛋白的表达。结果 ATPR明显抑制MCF-7细胞增殖,且随浓度和时间增加而逐渐增强;镜下观察ATPR作用72 h后MCF-7细胞形态趋向正常细胞分化;ELISA结果显示ATPR明显降低MCF-7细胞培养上清MUC-1浓度(P<0.05);ATPR作用MCF-7细胞72 h后,RARβ、RRIG1、ERβ表达增强(P<0.05),RARγ表达下调(P<0.05),RARα和ERα表达则无明显变化。结论 ATPR可明显抑制MCF-7细胞增殖并诱导其分化程度增高,其机制可能与调节维甲酸受体和雌激素受体平衡,并上调RRIG1表达有关。     

去氧鬼臼毒素抑制肺癌 NCI-H358 细胞增殖和 体外迁移的研究

摘要： 目的 探讨去氧鬼臼毒素对人肺癌 NCI-H358 细胞增殖和体外迁移的影响, 并初步探讨其作用机制。方 法 应用 CCK-8 法、 流式细胞术、 细胞划痕实验和 DCFH-D 法分别检测去氧鬼臼毒素对 NCI-H358 细胞增殖、 周期 分布、 凋亡、 体外迁移能力和细胞内活性氧（ROS）的影响, 并通过 Western blot 检测去氧鬼臼毒素对细胞周期蛋白 （Cyclin） B1、 细胞分裂周期蛋白 25 同源蛋白 （Cdc25c）、 细胞周期蛋白依赖性激酶 （CDK） 1、 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 （Caspase） -3、 p53 肿瘤蛋白、 B 淋巴细胞瘤 （Bcl） -2 和基质金属蛋白酶 （MMP） 9 的表达水平, 以及细胞外信号调节激 酶（ERK） 1/2、 p38 分裂原激活蛋白激酶（MAPK）和 c-Jun 氨基末端激酶（JNK）的磷酸化水平的影响。结果 去氧鬼 臼毒素能明显抑制肺癌 NCI-H358 细胞的生长, 流式细胞结果显示其能诱导细胞停滞在 G2/M 和 S 期, 诱导细胞凋 亡和细胞 ROS 产生, 同时细胞体外迁移能力也明显下调。Western blot 结果显示, 去氧鬼臼毒素能使 Cyclin B1、 Cdc25c、 CDK1、 Bcl-2 和 MMP9 的蛋白表达明显下调, 而 Caspase-3 和 p53 的表达明显上调, 且 ERK1/2、 p38MAPK 和 JNK 的磷酸化水平明显受到抑制。结论 去氧鬼臼毒素可抑制肺癌 NCI-H358 细胞的增殖和体外迁移, 是一种潜在 的抗肿瘤药物     

胰岛素对人乳腺癌细胞株MDA-MB-543生长的增殖作用

目的探讨胰岛素对人乳腺癌细胞株MDA-MB-543生长的增殖作用。方法将胰岛素直接作用于体外培养的人乳腺癌细胞株(MDA-MB-543),采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖,流式细胞仪测定细胞周期分布。结果胰岛素在1～10 mU/mL浓度范围内和作用时间2～16 h范围内,对MDA-MB-543增殖作用逐步增强,反映增殖活性的S期和G2/M期细胞比例逐渐增多,其中S期细胞比例与对照组比较有显著性差异(均P<0.05或0.01)。结论胰岛素能加快诱导MDA-MB-543细胞进入细胞周期S期增殖,呈剂量和时间依赖关系,但是短暂和可逆的。     

粉防已碱对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖及细胞周期的影响

目的观察粉防己碱对培养的人增生性瘢痕成纤维细胞增殖及周期的影响。方法培养人体增生性瘢痕的成纤维细胞,设实验组和对照组,实验组加入粉防己碱,用四甲基偶氮唑盐(MTT)法观察细胞的增殖率,用流式细胞仪观察细胞周期,比较两组之间的细胞增殖率和细胞周期。结果细胞增殖率实验组吸光度为(0.31±0.03),对照组为(0.53±0.04),两组比较差异有统计学意义(P<0.05);对照组处于增殖期的细胞占细胞总数的68.3%,实验组处于增殖期的细胞明显减少,为占总数的40.8%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论粉防己碱通过阻止成纤维细胞由静止期进入增殖期而抑制其增殖,可能具有防治瘢痕的作用。     

氯胺酮对胚胎大鼠培养神经干细胞增殖和细胞周期的影响

目的　探讨氯胺酮对体外培养的大鼠神经干细胞细胞增殖、细胞周期的影响。方法　采用MTT法检测氯胺酮对体外培养的大鼠神经干细胞细胞生长的抑制作用 ,流式细胞仪检测细胞周期分布。结果　氯胺酮对体外培养的大鼠神经干细胞细胞具有生长抑制作用 ,并存在量效关系。流式细胞仪分析表明G0 /G1期细胞百分率上升 ,S期细胞百分率下降。结论　氯胺酮对大鼠培养神经干细胞的增殖有抑制作用 ,其机制与细胞周期阻滞有关。     

芒柄花素对不同亚型乳腺癌细胞周期基因和蛋白表达的影响

目的 观察芒柄花素对不同亚型乳腺癌细胞周期相关基因和蛋白表达的影响。方法 乳腺癌细胞MCF-7、SK-BR-3、MDA-MB-231经0、40、80 μmol/L芒柄花素作用48 h后,分别采用Trizol和RIPA裂解细胞,收集细胞的总RNA和总蛋白,进一步采用实时定量PCR技术和Western blotting技术检测细胞周期调控因子cyclin D1、cyclin E、p21、p27的基因和蛋白表达情况。结果 3种乳腺癌细胞cyclin D1和cyclin E的基因及蛋白表达水平随着药物浓度的增加而降低,而p21和p27的基因和蛋白表达水平随药物浓度的增加而升高,与对照组比较,差异显著(P<0.05、0.01)。结论 芒柄花素可以通过调控cyclin D1、cyclin E、p21和p27基因和蛋白的表达,将乳腺癌细胞阻滞于G1期,从而抑制乳腺癌细胞的增殖。     

玛卡多糖抗非小细胞肺癌作用及其机制

目的:探讨玛卡多糖抗非小细胞肺癌作用及其机制.方法:采用一定浓度的玛卡多糖处理非小细胞肺癌A549细胞,CCK-8法、划痕实验和Transwell小室检测玛卡多糖对A549细胞增殖、迁移和侵袭的影响;流式细胞术检测玛卡多糖对A549细胞周期和凋亡的影响;实时荧光定量PCR和Western Blot法检测细胞周期和凋亡相...     

莪术油对直肠癌SW1463细胞株增殖、凋亡及Caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表达的影响

目的 探讨莪术油对直肠癌SW1463细胞株增殖、凋亡及相关蛋白Caspase-3、Bax、Bcl-2表达的影响。方法 水蒸气蒸馏法提取黔产莪术挥发油,配制成40、80、120、160、200、240、280 mg/L浓度梯度,干预SW1463细胞24、48、72 h,MTT法检测莪术油对SW1463细胞的增殖抑制率;Giemsa染色法观察莪术油对SW1463细胞凋亡形态的影响;蛋白免疫印迹法（Western blotting）检测Capase-3、Bax与Bcl-2蛋白表达。结果 莪术油对SW1463细胞的增殖有明显抑制作用,并呈现时间-剂量相关性,24、48、72 h的半数抑制浓度（IC₅₀）分别为144.33、134.11、120.04 mg/L;Giemsa染色可见细胞明显的凋亡形态学特征;莪术油干预SW1463细胞24 h后,与对照组比较,Caspase-3、Bax蛋白表达显著上调、Bcl-2蛋白表达显著下调（P<0.05）。结论 莪术油能明显抑制SW1463细胞增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能与上调Caspase-3和Bax蛋白表达、下调Bcl-2蛋白表达相关。     

番茄红素异构体对人卵巢癌HO-8910细胞增殖和凋亡的影响效果初探

目的研究番茄红素异构体对体外培养的人卵巢癌HO-8910细胞增殖和凋亡的影响。方法观察含不同比例的顺、反式异构体番茄红素对人卵巢癌HO-8910细胞的增殖抑制作用;采用PI流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果番茄红素异构体对人卵巢癌HO-8910细胞有一定程度的抑制增殖和诱导凋亡的作用,且呈浓度依赖性。结论对人卵巢癌HO-8910细胞,含较高比例顺式番茄红素的Ⅱ号药组抑制增殖与诱导凋亡的作用比全反式番茄红素的I号药组具更强的生物活性。     

美登木素对人乳头状甲状腺癌B-CPAP细胞增殖和凋亡的作用及机制

目的 探讨美登木素对人乳头状甲状腺癌B-CPAP细胞增殖、凋亡的影响及作用机制。方法 用不同浓度（0.19、0.76、3.05、12.21、48.83、195.31、781.25、3 125 nmol/L）的美登木素溶液处理B-CPAP细胞,SRB法检测B-CPAP细胞增殖情况。将B-CPAP细胞分为对照组及美登木素（0.1、1、10 nmol/L）组,光学显微镜观察B-CPAP细胞形态变化;流式细胞术检测B-CPAP细胞凋亡情况;Western blotting法测定B-CPAP细胞中B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3前体（Procaspase-3）的蛋白表达量。结果 与对照组比较,美登木素能有效抑制B-CPAP细胞增殖,且呈浓度及时间相关性;随美登木素浓度增加B-CPAP细胞凋亡率逐渐升高,Bcl-2和Procaspase-3蛋白表达水平下降（P＜0.05）,呈明确的浓度相关性。结论 美登木素具有抑制B-CPAP细胞增殖及诱导凋亡的作用,其机制可能与调控Bcl-2和Procaspase-3蛋白有关。     

盐酸青藤碱对乳腺癌MCF-7细胞增殖影响的初探

目的 研究盐酸青藤碱对体外培养乳腺癌MCF-7细胞增殖的作用.方法 体外培养人乳腺癌MCF-7细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定盐酸青藤碱(SIN)、5-氟尿苷(5-FUR)、SIN+5-FUR对乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响.结果 SIN对人乳腺癌MCF-7细胞有增殖抑制作用,且呈浓度依赖性.SIN、5-FUR、SIN+5-FUR对MCF-7细胞的抑制强弱为:SIN＞SIN+5-FUR＞5-FUR.结论 SIN具有抑制人乳腺癌MCF-7细胞增殖的作用,且抑制效果强于5-FUR及SIN+5-FUR.     

鱼藤素对非小细胞肺癌细胞体内外增殖的影响

目的探究鱼藤素(deguelin)对非小细胞肺癌细胞A549与裸鼠移植瘤增殖的影响。方法采用CCK-8法测定鱼藤素对A549细胞增殖的抑制作用;通过赫斯特染色和AnnexinV-FITC/PI双染实验探究鱼藤素对细胞凋亡形态以及细胞凋亡率的影响;流式细胞术测定鱼藤素对A549细胞周期的影响;此外,通过裸鼠移植瘤模型的体内实验和HE染色探究鱼藤素对裸鼠移植瘤的影响。结果鱼藤素呈浓度和时间依赖性抑制A549细胞增殖;赫斯特染色和AnnexinV-FITC/PI双染实验进一步证实了鱼藤素能诱导A549细胞凋亡;鱼藤素呈浓度依赖性阻滞A549细胞周期于G 2/M期;裸鼠移植瘤模型实验和HE染色实验发现,鱼藤素对A549裸鼠移植瘤的生长有明显抑制作用(P<0.01)。结论鱼藤素对肺癌细胞A549具有显著抑制作用,为鱼藤素的抗肿瘤活性提供新的基础。     

花旗松素对人肺癌细胞A549增殖的抑制作用及其机制研究

目的研究花旗松素对人肺癌细胞A549增殖的抑制作用,并探讨其诱导细胞凋亡的可能机制。方法 WST-1法检测不同质量浓度(0~200μg/m L)花旗松素对A549细胞增殖的影响;Annexin-V/PI双染法检测花旗松素对A549细胞凋亡的影响;细胞免疫荧光法观察花旗松素处理后A549细胞中凋亡蛋白Bax的表达;Western blotting法检测Bcl-2、Akt、P53蛋白表达的变化。结果 WST-1法检测到花旗松素能有效抑制A549细胞的增殖,呈现时间–剂量–效应关系。通过流式细胞仪分析,花旗松素诱导细胞凋亡,上调了促凋亡蛋白Bax的表达,下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,抑制Akt的过表达,并且促进P53的表达。结论花旗松素对A549细胞的增殖具有显著的抑制作用,其诱导的凋亡机制可能与Bcl-2、Akt相关信号通路的激活有关。