大黄附子汤佐治重症急性胰腺炎患者的临床研究——附206例患者的多中心临床疗效观察

目的 观察大黄附子汤治疗重症急性胰腺炎(SAP)患者的临床疗效,为中西医结合治疗SAP提供有价值的循证医学证据. 方法 采用前瞻性、多中心、随机对照临床试验.收集2007年1月至2010年2月大连地区3家三级甲等医院206例SAP患者的临床资料,采用随机数字表法分为温皂水灌肠对照组(101例)和大黄附子汤灌肠研究组(105例).两组于治疗前及治疗2、4、7 d分别取血测定淀粉酶、白蛋白(Alb)、D-乳酸、内毒素、二胺氧化酶(DAO)、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)、补体(C3、C4)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL-6和IL-8)水平;并观察患者肠鸣音、胃肠功能和急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分;记录28 d内患者机械通气时间、住重症监护病房(ICU)天数、病死率及平均住院费用. 结果 与对照组比较,研究组可降低淀粉酶、DAO、D-乳酸、内毒素水平,升高Alb,下调促炎因子TNF-α、IL-6、IL-8、hs-CRP,增强机体免疫功能,促进肠蠕动,改善胃肠功能及APACHEⅡ评分,缩短机械通气时间、住ICU天数,降低病死率,减少平均住院费用[4 d淀粉酶(U/L):357.35±137.54比492.95±189.42,2 d DAO(kU/L):5.20±0.59比5.45±0.72,4 d D-乳酸(mmol/L):3.31±0.48比4.15±0.55,2 d内毒素(kEU/L):0.29±0.11比0.34±0.14,4 d Alb(g/L):34.75±3.56比32.53±3.44,2 d TNF-α(ng/L):3.08±0.45比3.36±1.11,2 d IL-6(ng/L):298.54±67.82比313.56±73.91,4 d IL-8(ng/L):30.48±8.56比45.16±10.81,2 d hs-CRP(mg/L):32.56±11.83比40.42±15.10,4 d IgG(g/L):7.05±2.56比9.53±2.94,2 d IgA(mg/L):1 600±170比1 400±140,4 d IgM(mg/L):1 310±280比1 650±290,4 d C3(g/L):1.11±0.09比1.50±0.15,4 d C4(g/L):0.32±0.11比0.41±0.10,2 d肠鸣音(次/min):1.26±0.45比1.15±0.41,2 d胃肠功能评分(分):2.24±0.98比2.42±1.05,4 d APACHEⅡ评分(分):16.4±6.8比20.1±7.1,机械通气时间(d):6.5±3.1比10.1±4.6,住ICU天数(d):11.3±6.3比13.8±7.5,病死率:8.6%比16.8%,住院费用(万元):7.2比8.6,P<0.05或P<0.01]. 结论 大黄附子汤配合西医治疗可明显增加SAP患者肠动力、保护肠屏障功能,抑制细菌、内毒素移位及炎症介质释放,维护机体免疫功能,进而缩短机械通气时间、住ICU天数,降低病死率,减少平均住院费用,改善SAP患者的预后.     

烟碱对心肌缺血/再灌注损伤大鼠炎症细胞因子的影响

目的 探讨烟碱对心肌缺血/再灌注(I/R)损伤大鼠炎症细胞因子的影响.方法 50只健康雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、I/R组、烟碱高剂量(400μg/kg)组、烟碱低剂量(40μg/kg)组及α-银环蛇毒素(α-BGT,1μg/kg)组5组,每组10只.采用结扎心脏左冠状动脉前降支30 min、再灌注90 min制作大鼠心肌I/R损伤模型;假手术组仅穿线不结扎.制模前30 min各药物组颈静脉注射相应剂量药物干预,假手术组和I/R组给予等量生理盐水.于再灌注末取右颈动脉血,测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-8(IL-8)、IL-10浓度和肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)活性;然后处死动物,取缺血区心肌组织测定髓过氧化物酶(MPO)活性;采用免疫组化和逆转录-聚合酶链反应检测心肌组织细胞间黏附分子-1(ICAM-1)蛋白及mRNA表达,并观察心肌超微结构.结果 与假手术组比较,I/R组血浆TNF-α、IL-8、IL-10、CK-MB、cTnI、心肌MPO活性及ICAM-1蛋白和mRNA表达均显著升高[TNF-α(ng/L):158.7±32.7比31.5±5.8,IL-8(ng/L):0.71±0.06比0.30±0.04,IL-10(ng/L):69.0±7.8比41.4±4.3,CK-MB(U/L):2 540±169比1 120±102,cTnI(μg/L):26.2±4.6比0.9±0.2,MPO(U/g):4.2±0.6比1.6±0.4,ICAM-1蛋白:0.210±0.025比0.100±0.018,ICAM-1 mRNA:1.82±0.23比1.18±0.20,P＜0.05或P＜0.01],病理学显示心肌组织损伤较重.与I/R组比较,烟碱高剂量组血浆TNF-α、IL-8降低[TNF-α(67.3±9.8)ng/L,IL-8(0.47±0.04)ng/L],IL-10升高[(147.5±12.5)ng/L],CK-MB、cTnI及心肌MPO活性、ICAM-1蛋白和mRNA均降低[CK-MB(1 282±145)U/L,cTnI(4.7±1.4)μg/L,MPO(2.5±0.4)U/g,ICAM-1蛋白0.140±0.026,ICAM-1 mRNA 1.31±0.25,P＜0.05或P＜0.01],心肌组织损伤减轻;而烟碱低剂量组和α-BGT组上述指标与I/R组比较差异无统计学意义.结论 烟碱可阻断内皮细胞表达黏附分子,阻断中性粒细胞黏附、游出,改善抗炎/促炎反应平衡,从而拮抗大鼠心肌I/R损伤时的过度炎症反应.     

血清炎症因子在急性坏死性胰腺炎大鼠早期肠黏膜屏障损伤中的作用

目的:探讨急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠血清炎症因子水平与肠黏膜屏障损伤的相关性.方法:制备ANP大鼠模型,检测假手术组和造模后6、12、24 h大鼠血清TNF-α、IL-6,血清D-乳酸、小肠组织病理学、肠黏膜含水量.组间数据比较采用单因素方差分析,TNF-α、IL-6与血清D-乳酸、小肠组织学评分之间的相关性采用线性相关分析.结果;模型组造模后,随造模时间的延长,血清TNF-α[6 h:(155.56±12.83)ng/L、12 h:(311.81±14.12) ng/L、24 h:(276.79±11.72) ng/L],血清IL-6[6 h:(183.03-8.56)ng/L、12h:(358.64±11.43) ng/L、24 h:(383.42±20.32)ng/L],血清D-乳酸[6h:(3.30±0.12) μg/mL、12 h:(9.19±0.54) μg/mL、24 h:(16.02±0.82)μg/mL],小肠组织学评分[6h:(1.17±0.23)分、12h:(3.33-0.19)分、24h:(6.61±0.24)分]均升高,各时点与同时点假手术组相比,差异均有统计学意义(P＜0.05),血清TNF-α、IL-6与血清D-乳酸、小肠组织学评分之间呈明显的正相关(P＜ 0.01).结论:ANP大鼠早期存在肠黏膜屏障损伤,并且与血清TNF-α、IL-6水平升高有关.     

谷氨酰胺对内毒素血症大鼠肠道损伤的保护作用及对血红素加氧酶-1表达的影响

目的 探讨谷氨酰胺(Glu)对内毒素血症大鼠肠道损伤的保护作用以及对血红素加氧酶-1(HO-1)表达的影响.方法 按随机数字表法将32只雄性SD 大鼠分为正常对照组、模型组、Glu组和Glu+锌原卟啉(ZnPP)组,每组8只.腹腔注射内毒素脂多糖(LPS)10 mg/kg制备内毒素血症动物模型.Glu组注射LPS前12 h灌胃Glu 1 g/kg;Glu+ZnPP组注射LPS前12 h灌胃Glu 1 g/kg,注射LPS前1 h静脉注射ZnPP 10 mmol/kg.术后12 h取回肠组织,测定髓过氧化物酶(MPO)活性及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)含量,并进行肠组织学评分;用免疫组化法检测回肠组织HO-1表达.结果 与正常对照组比较,模型组回肠组织学评分、MPO活性及TNF-α、IL-10含量显著升高[组织学评分(分):3.3±0.4比1.1±0.6,MPO活性(U/g):0.40±0.08比0.26±0.07,TNF-α含量(ng/g):25.2±6.9比6.5±2.8,IL-10含量(ng/g):27.6±10.2比5.7±2.9,均P<0.01];HO-1表达较低.与模型组比较,Glu组组织学评分、MPO活性和TNF-α含量明显减低[组织学评分(分):1.6±0.5比3.3±0.4,MPO活性(U/g):0.25±0.05比0.40±0.08,TNF-α含量(ng/g):13.4±3.2比25.2±6.9,均P<0.01],IL-10含量(ng/g)显著升高(47.3±5.5比27.6±10.2,P<0.01),HO-1表达明显增加.Glu+ZnPP组与模型组各指标比较差异无统计学意义.结论 Glu能明显增强内毒素血症大鼠肠组织HO-1表达,明显减轻肠道炎症反应,从而保护肠黏膜.

Abstract：

Objective To investigate the protective effect of glutamine (Glu) pretreatment on intestinal injury induced by endotoxin and expression of heme oxygenase-1 (HO-1) in rats.Methods Thirty-two male Sprague-Dawley (SD) rats were randomly divided into four groups (n=8 in each group): normal control group, model group, Glu group and Glu+zinc protoporphyrin (ZnPP) group. In model group, endotoxemia was produced by intraperitoneal injection of lipopolysaccharide (LPS, 10 mg/kg). In Glu group, the rats received intragastraiclly 1 g/kg of Glu 12 hours before LPS intraperitoneal injection. In Glu+ZnPP group, the rats received 1 g/kg of Glu by gavage 12 hours before LPS intraperitoneal injection and ZnPP 10 mmol/kg intravenously via tail vein 1 hour before LPS injection. The distal ileum was harvested in full thickness 12 hours after LPS injection. The myeloperoxidase (MPO) activity, tumor necrosis factor-α (TNF-α) and interleukin-10 (IL-10) in the intestine were determined, the pathologic changes were observed and expressed in Chiu grade. The expression of HO-1 was evaluated by immunohistochemistry method. Results Compared with normal control group, the Chiu grade, MPO activity, the content of TNF-α and IL-10 were significantly increased in model group [Chiu grade: 3.3±0.4 vs. 1.1±0.6, MPO activity (U/g): 0.40±0.08 vs. 0.26±0.07, TNF-α (ng/g): 25.2±6.9 vs. 6.5±2.8, IL-10 (ng/g): 27.6±10.2 vs. 5.7±2.9, all P<0.01], and the expression of HO-1 was decreased. Compared with model group, the Chiu grade, MPO activity, the content of TNF-α in Glu group were significantly decreased [Chiu grade: 1.6±0.5 vs. 3.3±0.4, MPO activity (U/g): 0.25±0.05 vs. 0.40±0.08, the content of TNF-α (ng/g): 13.4±3.2 vs. 25.2±6.9, all P<0.01], while the level of IL-10 (ng/g) elevated (47.3±5.5 vs. 27.6±10.2, P<0.01), and the expression of HO-1 was increased. There was no difference in above mentioned indexes between model group and Glu+ZnPP group. Conclusion Glu pretreatment significantly ameliorates the expression of HO-1 of intestinal tissue induced by LPS in rats, and intestinal mucosa is protected with alleviation of inflammatory reaction in intestinal tract.     

肠淋巴途径在失血-脂多糖二次打击大鼠心肌损伤中的作用

目的 探讨肠系膜淋巴管结扎干预失血-脂多糖(LPS)致大鼠心肌损伤的作用机制.方法 将雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为假手术组、未结扎组、结扎组;以失血-LPS复制二次打击动物模型,结扎组于失血后行肠系膜淋巴管结扎术以阻断肠淋巴液回流.创伤后24 h处死各组大鼠制备心肌组织匀浆,检测髓过氧化物酶(MPO)、ATP酶活性以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)含量;制备心肌病理切片,用原位末端缺刻标记法(TUNEL)检测细胞凋亡率,免疫组化法检测bcl-2和bax蛋白表达.结果 未结扎组大鼠心肌MPO[(0.23±0.08)U/g]、TNF-α[(9.99士2.74)pg/g]、IL-6((31.57士12.71)pg/g;～均显著高于假手术组[MPO:(0.12士0.03)U/g、TNF-α:(4.17±1.35)μ/g、IL-6:(17.86±5.17)μg/g,均P＜0.01],ATP酶活性显著低于假手术组;结扎组大鼠心肌MPO[(0.13±0.03)U/g]、TNF-α[(5.57±1.65)μg/g]、IL-6[(23.24±5.95)μg/g]均显著低于未结扎组(P＜0.05或P＜0.01),ATP酶活性显著高于未结扎组.未结扎组心肌细胞凋亡率[(22.7±6.9)%)、心肌细胞bax蛋白表达(104.5±11.4)显著高于假手术组[凋亡率:(3.8±1.2)%,bax蛋白:142.1±10.9]和结扎组[调亡率:(8.4±2.8)%,bax蛋白;128.4±9.6],bcl-2蛋白表达(196.4±19.3)显著低于假手术组(132.2±12.3)和结扎组(165.1±11.6,均P＜0.01).结论 肠系膜淋巴管结扎通过降低炎症介质TNF-α、IL-6水平,提高bcl-2蛋白表达和心肌细胞膜ATP酶活性,从而干预失血-LPS致大鼠心肌损伤.     

参附注射液对内毒素所致大鼠全身炎症反应综合征的作用

目的:探讨参附注射液对内毒素所致大鼠全身炎症反应综合征(SIRS)的治疗作用及其机制.方法:静脉注射脂多糖(LPS)建立大鼠SIRS模型.健康雄性Wistar大鼠45只,按随机数字表法分为假手术对照组(C组)、LPS致伤组(L组)和参附注射液治疗组(T组).L、T组动物制模后分为1、2、4和6 h 4个亚组.在4个时间点分别取血,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测单个核细胞中核转录因子-κB(NF-κB)活性、血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-6(IL-6)水平,观察肺脏和肝脏的病理学变化,并与C组比较.结果:L组单个核细胞中NF-κB活性明显增高,2 h最明显(0.604±0.020),显著高于对照组(0.112±0.017);血清TNF-α浓度明显升高,2 h最明显[(1 644.8±25.9)ng/L],显著高于对照组[(55.9±19.2)ng/L];血清IL-6浓度随时间推移不断升高,显著高于对照组.病理结果显示,L组肺泡出血、水肿、大量炎症细胞浸润;肝脏毛细血管扩张、充血、水肿和炎症细胞浸润.参附注射液可以显著降低NF-κB活性、TNF-α及IL-6水平,减轻肺脏和肝脏病理损伤.结论:参附注射液可通过抑制NF-κB活性对大鼠SIRS起保护作用.     

阿魏酸钠对L-精氨酸诱导的重症急性胰腺炎大鼠的作用

目的 研究阿魏酸钠(soaium ferulate,SF)对L-精氨酸诱导的大鼠重症急性胰腺炎(severeacute pancreatitis,SAP)的治疗作用及其机制.方法 将60只成年SD大鼠随机分为对照组、SAP组、SF组,每组20只.采用腹腔内分两次注射大剂量L-精氨酸(2.5g/kg×2,间隔1 h)的方法制备SAP大鼠模型,SAP组和SF组大鼠分2次间隔1 h腹腔内注射20%L-精氨酸溶液(2.5 g/kg×2);对照组同法予等量生理盐水.5 min后,SF组大鼠再尾静脉注射SF注射液100 mg/kg,q d×3 d,其余两组同法予等量生理盐水.72 h后比较三组大鼠腹水性状、胰腺组织病理变化和血清淀粉酶(AMY)、内皮素-1(ET-1),TNF-α,IL-6水平和胰腺组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)含量及预后.计量资料组间比较用单因素方差分析,计数资料用Fisher确切概率法检验,以P<0.05为差异有统计学意义.结果 72 h后与对照组比较,SAP组出现典型的SAP病理形态改变,且大鼠血清AMY,ET-1,TNF-α,IL-6及胰腺组织NDA均显著升高[(9715.5±301.3)IU/L vs.(729.2±134.2)IU/L;(25.32±3.67)ng/L vs.(14.32±2.69)ng/L;(102.95±11.24)ng/L.vs.(38.62±3.87)ng/L;(538.63±9.53)ng/L vs.(186.35±1.19)ng/L;(34.8±3.9)mol/kg vs.(8.1±2.1)mol/kg,均P<0.01],胰腺组织抗氧化物质GSH,SOD明显降低[(7.1±0.6)mg/kg、vs.(16.9±1.9)mg/kg;(6423±1978)kU/kg vs.(29 905±z945)kU/kg,均P<0.01];与SAP组比较,SF组胰腺组织病理损害减轻且组织病理评分较低(P<0.05),血清AMY,ET-1,TNF-α,IL-6及胰腺组织NDA明显降低[(8104.6±149.9)IU/L vs.(9715.5±301.3)IU/L;(20.26±5.86)ng/L vs.(25.32±3.67)ng/L;(84.19±15.14)hg/L vs.(102.95±11.24)ng/L;(458±5.37)mol/kg vs.(538.63±9.53)ng/L;(28.3±2.5)mot/kg vs.(34.8±3.9)mol/kg,均P<0.05],胰腺组织GSH、SOD升高[(8.5±1.4)mg/kg vs.(7.1±0.6)mg/kg;(10316±2810)kU/kg、rs.(6423±1978)ldJ/kg,均P<0.05];SF组72 h死亡率低于SAP组,但差异无统计学意义(P=0.25).结论 SF能清除氧自由基、提高胰腺组织抗氧化物质SOD和GSH含量,降低血清促炎细胞因子及ET-1水平,减轻胰腺组织的病理损害,并且有可能降低死亡率,在SAP治疗中具有独特的优势.     

赤丹汤配合血浆置换治疗重型肝炎临床研究

目的:评价中药配合血浆置换治疗重型肝炎的疗效.方法:将106例重型肝炎患者随机分为治疗组和对照组.治疗组56例(亚急性重型肝炎8例,慢性重型肝炎48例)在内科综合治疗基础上加用血浆置换及自拟中药方赤丹汤(由赤芍、丹参、麦芽、茯苓、金钱草、生地、猪苓、五味子、甘草等组成);对照组50例(亚急性重型肝炎6例,慢性重型肝炎44例)仅用内科综合治疗.结果:治疗组治疗后血清总胆红素由(482.0±132.6)μmol/L降至(251.6±143.2)μmol/L(P<0.01);丙氨酸转氨酶由(230.8±169.2)U/L降至(110.6±139.4)U/L(P<0.05);内毒素由(0.15±0.09)kEU/L降至(0.09±0.12)kEU/L(P<0.05);肿瘤坏死因子-α由(1.59±0.58)μg/L降至(1.03±0.62)μg/L(P<0.01);白细胞介素-6由(86.6±39.2)ng/L降至(39.5±20.6)ng/L(P<0.01);凝血酶原活动度由(28.5±15.2)%升高至(38.9±9.5)%(P<0.01);消化道症状改善,总有效率(治愈及好转)为76.8%,显著优于对照组40.0%(P<0.01).结论:赤丹汤配合血浆置换是治疗重型肝炎的有效方法.     

二胺氧化酶、D-乳酸和内毒素在抑郁障碍中的临床研究

目的探讨血清二胺氧化酶、D-乳酸、细菌内毒素水平在抑郁障碍患者中的变化及其在肠道屏障功能评估中的临床意义。方法采用二胺氧化酶、D-乳酸、细菌内毒素联检试剂盒(酶法)定量检测人体血清中二胺氧化酶、D-乳酸、细菌内毒素水平,分析抑郁障碍患者二胺氧化酶、D-乳酸、细菌内毒素的变化。结果抑郁障碍组与健康组的血清二胺氧化酶水平分别为:(11.08±7.22)、(10.55±5.21)U/L,两组比较,差异无统计学意义(t=0.59,P0.05);D-乳酸水平分别为:(17.34±7.43)、(13.85±4.81)mg/L,两组比较,差异有统计学意义(t=3.91,P0.05);内毒素水平分别为:(15.49±8.30)、(8.21±5.41)U/L,两组比较,差异有统计学意义(t=7.30,P0.05)。健康组中,年龄40岁和年龄≥40岁之间比较,3种生化指标的差异均无统计学意义(P0.05)。患者组中,年龄40岁组和年龄≥40岁组血清二胺氧化酶水平分别为:(10.59±7.71)、(11.41±6.50)U/L,两组比较差异无统计学意义(P0.05);D-乳酸水平分别为:(15.17±6.89)、(20.45±7.13)mg/L,两组比较差异有统计学意义(t=5.38,P0.05);内毒素水平分别为:(14.24±8.09)、(17.30±8.37)U/L,两组比较差异有统计学意义(t=6.32,P0.05)。结论抑郁障碍患者血清D-乳酸和内毒素水平升高,且D-乳酸和内毒素水平与患者的年龄增长呈正相关。因此,抑郁障碍患者可能伴有肠黏膜上皮细胞受损、肠黏膜缺血、肠黏膜通透性改变、肠道细菌易位的特征,且年龄增长有影响肠黏膜屏障功能改变的趋势。     

缺氧诱导因子-1α对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护作用及其信号转导

目的 观察缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)对大鼠心肌缺血/再灌注损伤(IRI)的保护作用及蛋白激酶C(PKC)信号转导作用.方法 采用结扎冠状动脉左前降支30 min、再灌注180 min的方法建立IRI动物模型.将32只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为假手术组、IRI组、缺血预处理(IPC)组、IPC加PKC抑制剂组(IPC+Ⅰ组,IPC前静脉注射PKC抑制剂白屈菜季铵碱5 mg/kg),每组8只.再灌注180 min后取出心脏,测定HIF-1α、血红素氧合酶1(HO-1)的mRNA和蛋白以及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)蛋白的表达;心内取血测定白细胞介素-8(IL-8)和髓过氧化物酶(MPO)水平.结果 与假手术组比较,IRI组心肌HIF-1α、HO-1的mRNA和蛋白及caspase-3蛋白表达均明显增多(HIF-1α mRNA:0.849±0.032比0.356±0.022,HIF-1α蛋白:0.762±0.042比0.324±0.016,HO-1 mRNA:0.862±0.045比0.332±0.012,HO-1蛋白:0.792±0.044比0.335±0.031,caspase-3蛋白:0.371±0.015比0.061±0.012,均P＜0.01),血IL-8、MPO显著升高[IL-8:(812±26)ng/L比(72±13)ng/L,MPO:(78.7±2.9)kU/L比(13.3±1.5)kU/L,均P＜0.01].与IRI组比较,IPC组HIF-1α、HO-1的mRNA和蛋白表达(HIF-1α mRNA,1.412±0.039,HIF-1α蛋白:1.362±0.045,HO-1 mRNA:1.523±0.038,HO-1蛋白:1.420±0.041)明显增多,caspase-3蛋白表达(0.129±0.019)明显降低(均P＜0.01),血IL-8[(432±59)ng/L]和MPO水平[(43.2±5.9)kU/L)明显降低(均P＜0.01).IPC+Ⅰ组各指标与IRI组无明显差异.结论 HIF-1α对心肌IRI具有重要保护作用,HIF-1α的表达是依赖PKC激活的,PKC是HIF-1α表达的重要信号转导通路.     

大黄附子汤改善重症急性胰腺炎大鼠肠道动力障碍的机制研究

目的:通过观察大黄附子汤对重症急性胰腺炎(Severe acute pancreatitis, SAP)致肠道动力障碍大鼠血清胃动素、回肠Cajal间质细胞及胃动素受体的影响,探讨大黄附子汤改善肠道动力障碍的作用及机制。方法:清洁级雄性Sprague-Dawley大鼠,18只,随机（随机数字法）分为对照组、SAP组及大黄附子汤治疗组（n=6）。采用逆行胰胆管注射4％牛磺胆酸钠制备SAP大鼠模型。对照组开腹后,找到胰腺轻微翻动数次后关腹;SAP组在造模后12、24 h分别给予2 mL生理盐水（37℃）灌肠;治疗组在造模后12、24 h分别给予2 mL大黄附子汤（37℃）灌肠。于造模48 h后,各组大鼠取腹主动脉血,测定血清内毒素及淀粉酶含量,使用酶联免疫吸附法测定血清胃动素水平;取胰腺、回肠组织行苏木精伊红染色观察病理变化;采用免疫组织化学法检测回肠平滑肌组织中Cajal间质细胞(interstitial cells of cajal, ICC)表达蛋白c-kit及胃动素受体(Motilin receptor, MTL-R)蛋白的表达。结果:与对照组相比,SAP组大鼠血清内毒素、淀粉酶水平均显著增高[(504.98±88.81) pg/mL vs. (17.76±5.01) pg/mL; (532.28±66.53) U/L vs. (69.45±3.61) U/L,均 P<0.05],而血清胃动素水平显著降低[(195.4±6.7) ng/L vs. (301±8.10) ng/L, P<0.05],ICC表达蛋白c-kit及MTL-R免疫组织化学评分降低( P<0.05);与SAP组相比,大黄附子汤治疗组大鼠血清内毒素、淀粉酶水平均显著降低[(189.9±38.23) pg/mL vs. (504.98±88.81) pg/mL; (294.23±25.66) U/L vs. (532.28±66.53) U/L,均 P<0.05],而血清胃动素水平显著升高[(264.2±8.3) ng/L vs. (195.4±6.7) ng/L, P<0.05],同时c-kit及MTL-R免疫组织化学评分升高( P<0.05)。 结论:大黄附子汤通过促进胃动素的分泌、提高ICC细胞的活性及MTL-R的表达而改善SAP大鼠肠道动力障碍。     

高浓度氧对未成年大鼠肺部炎症反应的影响

目的 探讨高浓度氧对未成年大鼠肺部炎症反应的影响.方法 将40只出生21 d的SD大鼠按随机数字表法分为空气对照组及高氧暴露12、24、48、72 h组,每组8只,分别将大鼠置于空气和常压高氧箱(氧含量达92%～94%)中.于相应时间点采用放血法处死大鼠后取肺组织,并行支气管肺泡灌洗.采用硫代巴比妥酸法和比色法分别测定肺组织丙二醛(MDA)含量及髓过氧化物酶(MPO)活性;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和IL-10含量;观察肺组织病理改变,并进行肺损伤评分.结果 与空气对照组比较,高氧暴露12 h肺组织MDA含量(mmol/g)即显著升高(2.24±0.43比1.57±0.31),MPO活性(U/g)于高氧暴露24 h显著升高(1.24±0.25比0.69±0.22),并均随高氧暴露时间延长逐渐增加(P<0.05或P<0.01).BALF中TNF-α、IL-6和IL-10含量于高氧暴露24 h时较空气对照组显著增加[TNF-α(ng/L):135.2±44.0比94.5±22.3,IL-6(ng/L):73.1±14.2比55.7±17.3,IL-10(ng/L):67.9±21.7比48.2±7.6,P<0.05或P<0.01];但高氧暴露48 h时较24 h时显著降低(48 h时BALF中TNF-α、IL-6、IL-10分别为105.4±17.0,54.3±17.4,50.9±6.9,均P<0.05).高氧暴露12 h时肺损伤评分(分)即较空气对照组显著升高(4.5±1.4比1.3±0.5),并随高氧暴露时间延长进一步升高(P<0.05或P<0.01).结论 高浓度氧可引起未成年大鼠肺部炎症损伤;炎症细胞因子的出现高峰均在高氧暴露24 h.     

单孔胸腔镜与两孔胸腔镜手术治疗非小细胞肺癌的手术相关指标和实验室指标比较

目的比较单孔胸腔镜与两孔胸腔镜手术治疗非小细胞肺癌的临床效果,并比较两种手术的手术相关指标和实验室指标。方法采用回顾性研究方法选取2017年1月至2019年1月广西医科大学第一临床医学院心胸外科收治的105例非小细胞肺癌(NSCLC)患者作为研究对象,根据手术方式不同将患者分为两组:观察组(n=48)和对照组(n=57)。观察组患者行单孔胸腔镜手术,对照组患者行两孔胸腔镜手术。观察并比较两组患者的手术相关指标(手术成功率、术中中转开胸率、术中淋巴结清扫数量、手术时间、术中出血量、术后拔管时间、下床活动时间、术后3 d VAS评分)、实验室指标[血清癌胚抗原(CEA)、糖类抗原125(CA125)、鳞状细胞癌抗原(SCC-Ag)、白细胞介素-1(IL-1)、降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)、P物质(SP)、前列腺素E2、去甲肾上腺素(NE)]和术中并发症发生情况。结果对照组与观察组患者的手术成功率(96.49%vs.97.92%)、术中中转开胸率(3.51%vs.2.08%)、术中淋巴结清扫数量[(16.02±6.54)个vs.(17.52±5.24)个]比较,差异均无统计学意义(P>0.05);观察组患者的手术时间[(194.62±40.58)min vs.(157.62±33.62)min]、术中出血量[(114.65±25.94)ml vs.(89.57±22.41)ml]、术后拔管时间[(5.38±1.93)d vs.(3.47±1.07)d]、下床活动时间[(6.22±1.57)d vs.(4.99±1.72)d]、术后3 d VAS评分[(4.86±1.37)分vs.(3.04±0.57)分]显著优于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);两组患者的血清癌胚抗原(CEA)[(6.24±0.75)ng/ml vs.(6.16±0.71)ng/ml]、糖类抗原125(CA125)[(31.25±4.21)U/ml vs.(30.27±4.92)U/ml]、鳞状细胞癌抗原(SCC-Ag)[(1.25±0.42)ng/ml vs.(1.24±0.39)ng/ml]比较,差异均无统计学意义(P>0.05);观察组患者的血清白细胞介素-1(IL-1)[(24.58±5.23)ng/L vs.(10.37±1.24)ng/L]、降钙素原(PCT)[(0.88±0.24)ng/ml vs.(0.41±0.12)ng/ml]、C反应蛋白(CRP)[(19.65±2.73)mg/L vs.(11.25±2.04)mg/L]显著低于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05);观察组患者的P物质(SP)[(7.63±1.29)μg/ml vs.(18.24±3.24)μg/ml]、前列腺素E2(PGE2)[(146.7±24.93)pg/ml vs.(259.37±34.62)pg/ml]、去甲肾上腺素(NE)[(154.27±32.55)ng/L vs.(268.55±40.93)ng/L]显著低于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05);两组患者的肺不张、肺部感染、持续液气胸、房颤发生率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论单孔胸腔镜与两孔胸腔镜手术治疗非小细胞肺癌的效果相似但前者对患者的创伤程度更小,疼痛应激和炎症反应更轻,更有利于患者的术后康复。     

内毒素预处理对兔肝脏缺血-再灌注后肺损伤的保护效应

目的 探讨内毒素预处理对肝脏缺血-再灌注后肺损伤的影响及机制.方法 将48只新西兰大白兔随机分为一般对照组(C一般组)和预处理对照组(C预处理组),缺血-再灌注组(IR组)和预处理再灌注组(LPS+IR组),每组12只.C一般组仅行手术解剖;C预处理组手术解剖前3 d分别经腹腔注射0.5、0.5和1.0 mg/kg脂多糖(LPS)进行内毒素预处理;IR组夹闭肝门30 rmn,再灌注4 h,进行肝脏缺血.再灌注;LPS+IR组行内毒素预处理后再行肝脏缺血.再灌注.检测各组再灌注后4 h血清内毒素、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、肺湿干比、灌洗液蛋白含量、组织匀浆丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、肺损伤率及肺泡巨噬细胞核因子-KB(NF-kB)活性的变化.组间比较采用单因数方差分析.结果 C一般组和C预处理组各项检测指标差异无统计学意义(P>0.05).LPS+IR组血清TNF-α[(48.31±5.31)pg/ml vs.(56.47±5.09)pg/ml,P<0.01]、肺湿干比[(4.98±0.33)vs.(5.22±0.31),P=0.03]、灌洗液蛋白含量[(0.68±0.11)g/L vs.(0.76±0.10)g/L,P:0.04]、MDA[(0.86±0.06)mnol/mg vs.(0.93±0.07)nmoL/mg,P=0.02]、肺损伤率[(13.4±4.3)%vs.(17.4±4.1)%,P=0.03]及肺泡巨噬细胞NF-kB活性[(5.82±1.12)OD/m2 vs.(7.40±1.26)OD/mm2,P<0.01]明显低于IR组;同时LPS+IR组SOD[(90.30±7.38)U/mg vs.(84.44±7.90)U/mg,P=0.04]明显高于IR组.结论 内毒素预处理可以减轻肝脏缺血.再灌注后肺损伤,其机制与降低了血清TNF-α产生及抑制肺泡巨噬细胞中NF-kB活化有关.     

吸入糖皮质激素对哮喘儿童血清IgE的影响

目的 探讨哮喘儿童吸入糖皮质激素(ICS)治疗前后血清总IgE的变化及意义.方法 哮喘儿童520例,均给予ICS治疗.≤3岁142例,4～5岁169例,均给予储雾罐吸入丙酸氟替卡松气雾剂治疗;6～14岁209例,选用沙美特罗替卡松粉吸入剂治疗;剂量为200～375μg/d.治疗前与治疗后3个月复查IgE.结果 520例患儿治疗前IgE为(496.12±24.75)kU/L,治疗后IgE为(390.71±18.71)kU/L,差异有统计学意义(t=7.337,P<0.01).≤3岁组治疗前IgE为(307.05±34.71)kU/L,治疗后IgE为(483.09±41.78)kU/L,差异有统计学意义(t=2.963,P=0.004);4～5岁组治疗前ISE为(543.46±51.03)kU/L,治疗后IgE为(316.93±29.30)kU/L,差异有统计学意义(t=3.368,P=0.000);6～14岁组治疗前IgE为(586.30±37.19)kU/L,治疗后IgE为(387.61±27.60)kU/L,差异有统计学意义(t=4.827,P=0.000).氟替卡松治疗组治疗前IgE为(468.91±32.81)kU/L,治疗后IgE为(359.03±22.79)kU/L,差异有统计学意义(t=5.988,P<0.01);沙美特罗替卡松治疗组治疗前IgE为(586.30±37.19)kU/L,治疗后IgE为(387.61±27.60)kU/L,差异有统计学意义(t=4.827,P<0.01).治疗前IgE≤300 kU/L 260例,109例(41.92%,109/260)治疗后IgE升高;>300 kU/L 260例,45例(16.15%,45/260)治疗后血清总IgE升高,差异有统计学意义(χ<'2>=37.789,P=0.000).结论 ICS使IgE下降,IgE的检测有利于哮喘患者诊治过程中的病情观察.     

瘦素预处理和缺血预处理在小鼠心肌缺血/再灌注损伤中的心肌保护机制

目的 观察瘦素预处理和缺血预处理(IPC)对心肌缺血/再灌注损伤(MIRI)模型小鼠的心肌保护作用,探讨瘦素参与的机制.方法 将36只C57BL/6小鼠按随机数字表法分为5组:①假手术组(12只);②短暂缺血/再灌注(I/R)组(6只):缺血3 min后再灌注5 min,进行3个短暂的循环;⑨标准I/R组(6只):缺血30 min后再灌注120 min,④IPC组(6只):行3个短暂I/R循环后再进行标准I/R操作;⑤瘦素预处理组(6只):缺血前30min腹腔注射50μg/kg小鼠重组瘦素.假手术组和短暂I/R组分别于再灌注后0(RP刻)、5、30、120 min取血,动态监测血清瘦素水平;其余各组于再灌注后120 min处死小鼠,观察心肌梗死面积、心肌瘦素水平、髓过氧化物酶(MPO)活性,以及血清瘦素、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平.结果 短暂I/R处理后5 min血清瘦素水平即较假手术组同期显著升高[(6.24±2.34)μg/L比(1.35±0.45)μg/L],30 min达峰值[(12.36±1.33)μg/L],之后逐渐下降,与假手术组水平同期比较差异无统计学意义[(1.96±1.33)μg/L比(1.16±0.25)μg/L,P＞0.05].与标准I/R组比较,瘦素预处理组与IPC组均可显著缩小梗死面积[(11.50±2.86)%、(9.00±1.90)%比(37.00±2.53)%],降低心肌瘦素[(8.36±3.42)μg/g、(6.71±2.03)μg/g比(15.51±3.92)μg/g]、MPO((17.10±3.95)μg/g、(13.33±2.88)μg/g比(30.83±4.06)μg/g]以及血清瘦素[(15.03±1.87)μ/L、(11.85±0.72)μg/L比(29.55±2.31)μg/L]、TNF-α[(35.10±10.12)ng/L、(27.04±5.18)ng/L比(81.34±14.20)ng/L]、IL-6[(167.39±72.83)ng/L、(149.13±37.69)ng/L比(477.30±29.09)ng/L]水平(均P＜0.01).结论 低剂量瘦素预处理可模仿经典的IPC以减轻MIRI,瘦素参与IPC的心肌保护机制可能与减轻炎症反应有关.     

胆碱酯酶抑制剂中毒时血浆内毒素浓度变化的规律及宾赛克嗪的干预作用

目的 观察新型抗毒剂宾赛克嗪对维埃克斯染毒后不同时间点小鼠血浆内毒素浓度变化的影响及其机制.方法 306只雄性昆明小鼠被随机分为正常对照组、维埃克斯染毒模型组以及宾赛克嗪、阿托品和山莨菪碱3个治疗组;各治疗组分别于皮下注射维埃克斯0.02 mg/kg染毒前10 min经腹腔注射相应药物.各组均于染毒后1.5、3、6、24、48和72 h取血,检测血浆内毒素浓度.结果 与正常对照组[内毒素浓度为(1.90±0.41)kEU/L]比较,模型组1.5 h血浆内毒素浓度为(5.36±1.62)kEU/L,升高了约2倍;之后逐渐升高,至24 h达高峰,浓度为(11.47±3.90)kEU/L,较正常对照组升高了约5倍(P均<0.01),异常增高可持续至48 h,72 h后恢复至正常对照组水平.宾赛克嗪治疗组在1.5 h和3 h时内毒素浓度分别为(3.73±0.71)kEU/L和(3.95±1.26)kEU/L,显著低于模型组(p<0.01和P<0.05);6 h和24 h血浆内毒素浓度分别为(8.77±1.85)kEU/L和(11.47±2.51)kEU/L,与模型组比较差异无统计学意义,但显著高于正常对照组(P均<0.01);至48 h恢复至正常对照组水平.在相同实验条件下,阿托品治疗组血浆内毒素浓度在1.5～24 h显著高于模型组(P<0.05或P<0.01);而山莨菪碱治疗组血浆内毒素浓度在6 h达高峰,显著高于模型组(P<0.01).结论 维埃克斯染毒后1.5～48 h小鼠血浆内毒素浓度显著增高,使用宾赛克嗪能减轻胃肠道黏膜屏障功能的损伤,延缓内毒素进入血中的速度,并能缩短内毒素在血中的停留时间.而使用阿托品和山莨菪碱后则能加重胃肠道黏膜屏障功能的损伤.