肝气逆证模型大鼠下丘脑中单胺类神经递质变化研究

目的:探讨肝气逆证模型大鼠微观机制。方法:采用电刺激及噪音干扰作为情志刺激造模方法制作肝气逆证模型大鼠,采用反相离子高效液相色谱测定法(RP-IP-HPLC)测定造模前后大鼠下丘脑中单胺类神经递质,分析其变化情况。结果:肝气逆证模型大鼠下丘脑中去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)、多巴胺(Da)显著升高,5羟色胺(5-HT)、高香草酸(HVA)无显著性变化。结论:肝气逆证模型大鼠下丘脑中NE、E、Da显著升高,5-HT、HVA无显著性变化,可以部分解释肝气逆证形成原因,说明肝气逆证与下丘脑中NE等升高关系密切。     

经前期综合征肝气逆、郁两证大鼠模型建立及宏观评价方法初探

目的改进经前期综合征肝气逆、郁两证大鼠模型建立及探讨宏观评价方法,为情志病证发病机理研究提供可资利用的证候动物模型。方法应用行为学判定结合改良阴道涂片法确定大鼠动情周期,采用昼夜颠倒配合旷场法筛选行为学得分相近大鼠进入实验减小误差,调整造模刺激强度及持续时间,应用昼夜颠倒配合旷场法对模型大鼠宏观表现予以量化评价。结果与正常对照纽比较大鼠造模后逆模纽水平得分、垂直得分及旷场实验总分均显著增加（P〈0.05）,而郁模组大鼠则显著减少（P〈0.05）,用药后这一趋势得到明显纠正（P〈0.05）。结论大鼠模型较好模拟了PMS病证临床表现及病理变化,造模方法成熟可靠,具有较好可信度及可重复性;应用旷场法可明确鉴别肝气逆、郁两证大鼠模型,为证候动物模型中医辨证提供直接依据。     

经前期综合征肝气郁证与血清性激素及单胺类神经递质的相关性研究

经前期综合征(prememstual syndrome,PMS)是女性多发病之一,在临床研究中发现本病以肝气郁证多见.本实验对经前期综合征肝气郁证患者进行研究观察,以进一步揭示该病证发病机理,为该病证的诊断、治疗提供客观依据.     

异丙酚预处理对大鼠脑缺血损伤不同脑区单胺类神经递质的影响

目的观察异丙酚预处理对大鼠大脑皮层、海马及纹状体区单胺类神经递质中NE，DA的影响。方法健康Wistar大鼠24只，共分3粗：假手术组、缺血模型组和异丙酚预处理组。采用结扎双侧颈总动脉合并血压下降法造成大鼠短暂性脑缺血损伤模型，缺血30min后大鼠断头处死分离各脑区，荧光分光光度计测定各组不同脑区NE，DA的含量。结果与对照组相比，缺血模型组在大脑皮层区DA的含量增加而NE的含量没有改变；在海马区NE，DA的含量均增加；在纹状体区DA的含量增加而NE的含量没有改变，异丙酚预处理组可降低皮层区DA含量的增加及海马区NE含量的增加。结论异丙酚预处理对短暂性大鼠脑缺血损伤保护作用显著，对脑内不同脑区NE，DA的改变有一定的脑区特异性及受体选择性。     

郁怒诱发经前期综合征肝气郁证猕猴模型血清单胺类神经递质含量分析

目的：观察猕猴血清中单胺类神经递质含量的变化,探讨血清中单胺类神经递质在郁怒诱发经前期综合征（premenstrualsyndrome,PMS）肝气郁证猕猴模型中的作用。方法：以雌性实验猕猴为对象,分为正常组、郁怒情绪反应组、PMS肝气郁证模型组和治疗组。应用社会等级压力应激法诱导猕猴出现“怒”的情绪反应,然后筛选出郁怒情绪反应猕猴进行择时挤压造模,制备PMS肝气郁证猕猴模型。造模成功后,采用雌性实验猕猴情绪评价量表进行行为学评价,并于卵泡期或黄体中晚期采集猕猴血清,分析血清去甲肾上腺素、多巴胺、5-羟色胺含量。结果：与正常对照组相比,PMS肝气郁证模型组和郁怒情绪反应组猕猴的量表抑郁情绪积分显著高于对照组（P〈0．01,P〈0．05）,且造模组显著高于情绪反应组（P〈0．05）,用药后恢复正常;与正常对照组相比,PMS肝气郁证模型组和郁怒情绪反应组猕猴血清单胺类神经递质含量显著升高（P〈0．05,P〈0．01）,肝气郁证模型组也显著高于情绪反应组（P〈0．05）,用药后恢复正常。结论：郁怒情绪极易诱发PMS肝气郁证,其机制与单胺类神经递质改变有关。     

衰老大鼠下丘脑单胺类神经递质含量的变化

目的:观察D-半乳糖衰老大鼠下丘脑单胺类神经递质含量的变化.方法:D-半乳糖连续腹腔注射制作亚急性衰老的大鼠模型,采用高效液相色谱-电化学法检测各组大鼠下丘脑单胺类神经递质去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)的含量.结果:D-半乳糖衰老大鼠下丘脑NE、DA、5-HT的含量明显降低(与正常大鼠相比P＜0.01).结论:D-半乳糖衰老大鼠脑单胺类神经递质含量下降,这可能是D-半乳糖致衰老的作用机制之一.     

5-HTR1A 基因在经前期综合征肝气郁证模型大鼠下丘脑区的表达

目的 通过研究5-羟色胺受体1A (5-HTR1A)基因在经前期综合征(PMS)肝气郁证模型大鼠下丘脑区的表达,探讨该证的发病机制及药物作用靶点.方法 束缚法制备PMS肝气郁证模型大鼠,经前舒颗粒干预,获得正常组、造模组、给药组;运用RT-PCR和Western Blotting方法检测大鼠下丘脑区5-HTR1A mRNA及其蛋白表达;应用软件SPSS 16.0,通过单因素方差分析及LSD法统计数据.结果 PMS肝气郁证模型组大鼠与正常组相比,下丘脑5-HTR1A mRNA及蛋白表达均显著降低;经前舒颗粒给药后与造模组相比,表达均显著升高;给药组与正常组相比,表达均无显著差异.结论 肝气郁证模型大鼠与正常大鼠相比,下丘脑5-HTR1A基因表达下降,通过经前舒颗粒干预后,恢复正常;说明5-HTR1A基因可能与PMS肝气郁证相关,并且可以作为经前舒颗粒治疗该证的作用靶点.     

柴胡对大鼠慢性应激抑郁模型脑单胺类神经递质及其代谢物含量的影响

目的:探讨柴胡的抗抑郁作用及其机制。方法:对慢性应激抑郁模型大鼠应用柴胡处理,使用高效液相色谱法检测抑郁模型组、柴胡治疗组和正常对照组脑组织中单胺类神经递质及其代谢物含量变化。结果:柴胡有抗抑郁作用,可降低前额叶5 羟色胺和多巴胺含量。结论:柴胡可能是通过降低脑组织中前额叶5 羟色胺和多巴胺含量而发挥抗抑郁作用的。     

慢性利血平抑郁模型大鼠海马单胺类神经递质的变化

目的探索利血平致慢性抑郁大鼠模型的合适剂量,观察不同剂量利血平对大鼠自发活动和体质量的影响,分析模型大鼠海马单胺类神经递质的变化特点。方法60只大鼠随机分为5组,空白组,利血平0．3mg／kg、0．4mg／kg、0．5mg／kg、0．6mg／kg组,每组n=12;动物造模给予腹腔注射利血平注射液1O（／d（按分组中的给药剂量给予）,空白组给予同体积蒸馏水,连续用药14d。分别对大鼠open—field得分和体质量进行测量,酶联免疫法检测大鼠海马单胺类神经递质的水平。结果慢性腹腔注射利血平（0．5、0．6mg／kg）可引起大鼠体质量减轻（P〈0．01,P〈0．05）,0．4、0．5、0．6mg／kg组出现抑郁样行为;0．3mg／kg组体质量、open-field得分变化不明显。与空白组体质量[（278．75．4-4．65）]和抑郁open．field评分[（60．3．4-19．9）分]比较,0．5mg／kg组14d大鼠体质量[（256．17±4．89）g]与open—field行为评分[（43．45-8．4）分]差异有显著性俨〈0．01）。0．5mg／kg利血平对7d组抑郁大鼠海马5一羟色胺（5-HT）含量有影响[（2．835-1．09）ng,／ml,P〈0．05],对14d组5-HT含量无明显影响。与空白组比较,0．5mg／kg组14d腹腔注射利血平对单胺类神经递5一羟色胺（5-HT）、多巴胺（DA）、去甲肾上腺素（NA）影响差异无统计学意义（P〉0．05）,但可见5-HT与NA含量呈显著负相关（r=-0．449,P〈0．01）。结论慢性腹腔注射0．5mg／kg利血平能引起大鼠抑郁样行为,利血平对海马单胺类神经递质的影响与用药时间相关。     

电针印堂、百会对获得性无助大鼠不同脑区内单胺类神经递质的影响

电针针刺抑郁模型大鼠印堂、百会穴,探讨针刺治疗抑郁症的机制并探索抑郁症对神经系统的影响.应用韩氏电针仪簇形波,频率10 Hz,强度使动物不挣扎嘶叫保持安静,20 min/ d针刺获得性无助大鼠的印堂、百会穴,连续治疗4 d后取大鼠下丘脑、海马及前额叶皮层,应用高效液相电化学检测仪检测单胺类神经递质.结果显示:电针印堂、百会穴后,增加了获得性无助大鼠下丘脑5-羟色胺(5-HT)、降低下丘脑5-羟吲哚乙酸(5-HIAA); 说明电针印堂、百会穴对抑郁症的调节机制可能与影响下丘脑内5-HT和5-HIAA的代谢有关.     

自发性蛛网膜下腔出血患者血清及脑脊液中单胺类递质的变化

目的 探讨自发性蛛网膜下腔出血(SAH)患者血清和脑脊液中单胺类递质水平与SAH发病的关系.方法 30例自发蛛网膜下腔出血患者与30例健康对照组分别采集血清和脑脊液,运用反相高效液相色谱荧光法,检测去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)和5-羟色胺(5-HT)含量.结果 SAH患者血清中DA含量较对照组显著升高(P＜0.05),而NE和5-HT含量与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).两组脑脊液中NE、DA比较差异无统计学意义(P＞0.05),SAH组5-HT含量低于对照组(P＜0.05).结论 血清DA升高和脑脊液中5-HT下降可能与SAH密切相关,其机制需进一步探讨.     

两种吗啡依赖大鼠模型脑内单胺神经递质水平的比较

目的 通过对吗啡诱导的躯体依赖与精神依赖两种大鼠模型脑内单胺类递质水平的比较,探讨其在吗啡依赖形成中的作用.方法 采用剂量递增法复制吗啡依赖大鼠模型,然后用纳洛酮催促,引起躯体戒断症状.连续给予吗啡 (5 mg/kg,ip) 6 d,引起大鼠产生显著的条件性位置偏爱效应.脑组织去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)和多巴胺(DA)含量采用荧光分光光度法测定.结果 吗啡依赖大鼠催促戒断后脑内NE和5-HT水平明显升高,DA水平下降.吗啡在引起大鼠明显位置偏爱的同时,使大鼠脑内DA和5-HT水平显著升高,NE无明显改变.结论 吗啡依赖的形成和戒断与脑内单胺神经递质有密切关系,吗啡依赖的躯体戒断症状与NE升高有关,而吗啡诱导的精神依赖则与脑内DA水平升高有关.     

高效液相色谱-电化学法测定大鼠不同脑区单胺类神经递质及其代谢产物的方法学研究

目的:建立使用高效液相色谱-电化学法测定大鼠下丘脑、海马、皮质中单胺类神经递质及其代谢产物的方法,所测指标包括去甲肾上腺素(NE)、五羟吲哚乙酸(5-HIAA)、高香草酸(HVA)、多巴胺(DA)、和5-羟色胺(5-HT)。方法:色谱柱采用Waters C18反相色谱柱(3.9mm×150mm,5μm),流动相为水相(每1L中含辛烷磺酸钠2.5g,磷酸二氢钾13.6g,乙二胺四乙酸36mg,pH值3.3):甲醇:乙腈=78:19:3,流速为0.8mL/min,柱温35℃;电化学检测器工作电极为玻璃碳电极,参比电极为银/氯化银(Ag/AgCl)电极,工作电压为0.7V[1]。结果:脑组织中五种神经递质的保留时间分别为:去甲肾上腺素3.4min、五羟吲哚乙酸4.2min,高香草酸4.8min,多巴胺5.8min,5-羟色胺11.4min;最低检测限为4～16ng/mL。线性范围为20～320ng。脑组织样品的相对回收率为87.5%～113.9%,日内、日间精密度RSD小于7%。结论:该方法具有快速、准确、灵敏且样品制备简便等优点,可用于大鼠部分脑区内单胺类神经递质的分离测定。     

复方柴金解郁片对慢性应激抑郁大鼠HPA轴及海马单胺神经递质的影响

目的 研究复方柴金解郁片对慢性应激抑郁模型大鼠HPA轴及海马单胺神经递质的影响,探讨其可能的抗抑郁机制.方法 将SD大鼠随机分为6组:对照组、模型组、氟西汀组(5.4 mg/kg)、复方柴金解郁片高、中、低剂量组(2.74、1.37、0.68 g/kg),采用慢性不可预见性温和应激建立抑郁模型,于造模同时给药,连续28 d.采用蔗糖偏好实验和旷场测试检测大鼠的抑郁样行为,Morris水迷宫检测大鼠的学习记忆能力,HE染色观察大鼠海马病理结果变化,ELISA法检测大鼠血浆促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮(CORT),以及海马5-羟色胺(5-HT)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)、去甲肾上腺素(NA)、多巴胺(DA)的含量.结果 与抑郁模型组比较,复方柴金解郁片组大鼠蔗糖偏嗜度及活动次数均显著提高,学习记忆能力提升,海马病理损伤情况得到缓解,血浆CRH、ACTH、CORT含量下降,海马组织内5-HT、NA、DA含量上升,5-HIAA含量下降(P<0.05).结论 复方柴金解郁片能显著改善模型大鼠情绪和学习记忆功能、缓解海马组织损伤,其作用可能与抑制HPA轴亢进、增加脑内单胺递质含量有关.     

PCOS与抑郁对雌鼠下丘脑单胺类神经递质和血清黄体生成素、睾酮分泌的影响

目的 研究多囊卵巢综合征(PCOS)及抑郁2种因素对雌性大鼠下丘脑中单胺类神经递质[多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)、促性腺素释放素(GnRH)]及血清中黄体生成素(LH)、睾酮(T)分泌的影响,分析抑郁与PCOS之间的相互关系. 方法 将40只雌性6周龄清洁级SD大鼠分为:空白组、抑郁组及PCOS组及PCOS合并抑郁组.采用放射免疫法测定大鼠血清T及LH水平;ELISA法检测大鼠下丘脑中GnRH水平;高效液相色谱-荧光检测流速梯度法检测大鼠下丘脑中NE,DA及5-HT水平. 结果 4组大鼠血清LH及T水平、下丘脑GnRH水平比较,差别具有统计学意义(P<0.05),且呈递增趋势.4组大鼠下丘脑的DA,NE及5-HT水平比较,差别具有统计学意义(P<0.05),NE呈递增趋势,DA及5-HT呈递减趋势.GnRH变化趋势与DA(P<0.05,r=-0.874)、5-HT(P<0.05,r=-0.821)变化趋势呈负相关,而与NE变化趋势呈正相关(P<0.05,r=0.809). 结论 PCOS及抑郁2种因素均会使机体中枢DA,NE及5-HT分泌异常,影响下丘脑GnRH、血清LH及T的分泌,影响雌性大鼠的神经内分泌系统,引起机体卵巢组织学、临床表征及心理等发生变化;抑郁可能是PCOS发生及产生远期并发症的重要诱因,而PCOS又可导致抑郁的发生及加剧其发展.     

不同剂量氟化钠对大鼠血清乳酸脱氢酶和α-羟丁酸脱氢酶活力的影响

目的：探讨不同剂量氟对大鼠血清乳酸脱氢酶和α-羟丁酸脱氢酶的影响。方法：给4组Wistar大鼠饲喂正常饲料,分别饮用含0、1 2 5、2 5 0、5 0 0 mg/L氟化钠去离子水溶液,复制慢性氟中毒大鼠模型。饲喂2个月时取血,测定血清中乳酸脱氢酶（LDH）和α-羟丁酸脱氢酶（HBDH）活力的变化。结果：染氟组血清中乳酸脱氢酶和α-羟丁酸脱氢酶活力明显增加,并且随氟浓度的增加呈上升趋势,LDH/HBDH显著增加。结论：氟能引起血清乳酸脱氢酶和α-羟丁酸脱氢酶活力升高以及LDH/HBDH显著增加,可能引起心肌损伤。     

氟中毒大鼠血清钙镁磷含量的变化

目的:探讨不同剂量氟对大鼠血清钙、镁、磷含量的影响。方法:给4组Wistar大鼠饲喂正常饲料,分别饮用含0、125、250、500 mg/L氟化钠去离子水溶液,复制慢性氟中毒大鼠模型;饲喂2个月时取血测定血清中钙、镁、磷的含量以及碱性磷酸酶(ALP)活力。结果:染氟组血清中钙、镁含量变化不明显,血清磷含量和ALP活力明显增加。结论:氟可能引起机体化学元素代谢紊乱。     

血液免疫学指标在过敏性紫癜大鼠和兔模型及患儿体内的比较

目的通过检测过敏性紫癜大鼠及兔模型的血液学指标的改变,并与人类患者血液学指标改变进行比较,为进一步探索该病的发病机制、明确诊断及治疗提供帮助。方法首先构建模型;进行过敏性紫癜大鼠及兔的症状观察和病理分析;血常规检测;检测大鼠、兔及患儿血清中细胞因子IL-2、IL-4、TNF-α,白细胞表面标记分子CD3、CD4、CD8等,免疫球蛋白IgA,IgE,IgG及补体c3,c4的含量。结果模型大鼠和兔皮肤均有不同程度的出血斑点,皮肤,胃肠道,关节及。肾脏也表现为不同程度的炎症反应;模型大鼠、兔及患者急性期血常规均有不同程度的白细胞（WBC）升高,淋巴细胞（LYM）及百分比（LYM％）下降,中性粒细胞（UEN）及百分比（UEN％）升高,血小板（TLP）正常;血清CD4＋T细胞减少,CD4／CD8比值下降,IL-4及TNF-α水平升高;IgA升高,C3、C4减少;差别有统计学意义。但这些指标改变的程度不同,血清IL-2、IgG、IgE水平改变不完全一致。结论过敏性紫癜大鼠及兔模型大部分血液学指标改变与人类相似,可为深入研究该病的发病机制、明确诊断及治疗提供帮助。