钩吻素子治疗银屑病样动物模型的疗效观察

目的 观察钩吻素子(Kou)对银屑病动物模型的疗效。方法 采用鼠尾鳞片表皮和鼠阴道上皮实验模型，不同组别的小鼠给以甲氨蝶呤或不同浓度的Kou，分别观察其对上皮细胞分裂和表皮细胞分化的影响，以及对血清IL-2含量的影响。结果 Kou中、高剂量组能显著抑制阴道上皮细胞有丝分裂、促进鼠尾鳞片表皮颗粒层的生成；Kou低、中、高剂量组均可明显降低小鼠血清IL-2的水平。结论 提示Kou可能通过抑制小鼠表皮细胞增殖与促进其分化并减少炎性因子的生成而发挥作用，为其用于银屑病的治疗提供了实验依据。     

钩吻素子注射液的一般药理学研究

目的 观察钩吻素子注射液对实验动物精神神经、呼吸及心血管系统的影响。方法 用光电计数仪测定钩吻素子注射液对小鼠自发活动的影响，用CYS-0．5型压力换能器测定犬股动脉血压。用TB-611型张力换能器记录犬呼吸曲线，针型电极刺入四肢皮下测二导联心电图。上述指标通过MPA2000多功能信号处理器输入到计算机，由计算机自动采样并处理。实验共观察了小鼠一般行为、15min内自发活动次数，犬的心率、心电电压最大值、最小值及平均值，犬的平均动脉压、呼吸频率及呼吸深度等9项指标，其中后7项指标观察了给药前及给药后10、20、30、60、90及120min共6个时间点的变化。结果 钩吻素子注射液中、高剂量可显著减少实验小鼠的自发活动次数；对实验犬的呼吸系统及平均动脉压、心电电压最大值、最小值及平均值均无影响。钩吻素子注射液低剂量对犬的心率无影响，但中、高剂量给药前后犬的心率有显著性差异。结论 钩吻素子注射液对实验小鼠有一定的镇静作用；而除了对实验动物心率有一定影响外，对呼吸及心血管系统无影响。     

钩吻总生物碱中钩吻素子的提取与分离

目的 研究钩吻中总生物碱的提取、总量测定方法及其中主要成分钩吻素子的分离、鉴定方法。方法 采用加热回流提取与氯仿萃取相结合的方法提取总生物碱；采用碱性硅胶柱层析、梯度洗脱法分离钩吻素子并用薄层层析法和紫外分光光度法定性鉴别。结果 从钩吻中分离得到了无色棱柱状钩吻素子晶体。结论 本实验所采用的提取钩吻总生物碱及分离钩吻素子的方法行之有效。     

钩吻素子注射液的一般药理学研究

目的 观察钩吻素子注射液对实验动物精神神经、呼吸及心血管系统的影响。方法 用光电计数仪测定钩吻素子注射液对小鼠自发活动的影响,用CYS-0.5型压力换能器测定犬股动脉血压,用TB-611型张力换能器记录犬呼吸曲线,针型电极刺入四肢皮下测二导联心电图。上述指标通过MPA2000多功能信号处理器输入到计算机,由计算机自动采样并处理。实验共观察了小鼠一般行为、15min内自发活动次数,犬的心率、心电电压最大值、最小值及平均值,犬的平均动脉压、呼吸频率及呼吸深度等9项指标,其中后7项指标观察了给药前及给药后10、20、30、60、90及120min共6个时间点的变化。结果 钩吻素子注射液中、高剂量可显著减少实验小鼠的自发活动次数;对实验犬的呼吸系统及平均动脉压、心电电压最大值、最小值及平均值均无影响。钩吻素子注射液低剂量对犬的心率无影响,但中、高剂量给药前后犬的心率有显著性差异。结论 钩吻素子注射液对实验小鼠有一定的镇静作用;而除了对实验动物心率有一定影响外,对呼吸及心血管系统无影响。     

钩吻总生物碱中钩吻素子的提取与分离

目的 研究钩吻中总生物碱的提取、总量测定方法及其中主要成分钩吻素子的分离、鉴定方法。方法 采用加热回流提取与氯仿萃取相结合的方法提取总生物碱;采用碱性硅胶柱层析、梯度洗脱法分离钩吻素子并用薄层层析法和紫外分光光度法定性鉴别。结果 从钩吻中分离得到了无色棱柱状钩吻素子晶体。结论 本实验所采用的提取钩吻总生物碱及分离钩吻素子的方法行之有效。     

钩吻素子抗外周神经损伤导致诱发痛的效应

目的：观察钩吻素子抗外周神经损伤致神经病理性疼痛中诱发痛的效应及其时效关系,分析脊髓是否为钩吻素子抗神经病理性疼痛的可能作用部位。方法在大鼠坐骨神经慢性束缚损伤（CCI）致神经病理性疼痛模型上,以热痛觉过敏为指标,观察连续皮下注射给予钩吻素子（0．28、7．0mg/kg,CCI术后第3～9d,每天2次）对CCI大鼠诱发痛的效应;观测单次皮下注射给予7．0mg/kg钩吻素子后第0．5,1,2,4,6h对CCI大鼠诱发痛的效应及时效关系;Dixon序贯法分别测定钩吻素子皮下和鞘内注射抗CCI大鼠诱发痛作用的ED50,分析脊髓是否为钩吻素子抗神经病理性疼痛的可能作用部位。结果连续皮下注射7．0mg/kg钩吻素子组在术后第3d首次给药后,痛阈即显著高于溶剂对照组,术后第9d效应最显著（翻转率为93．8％,有效率达100％）。单次皮下注射给予7．0mg/kg钩吻素子0．5h术侧足痛阈显著高于溶剂对照组（翻转率达62．9％,有效率达55．6％）;1h痛阈最高（翻转率达70．8％,有效率达77．8％）,随后痛阈有所下降,但6h仍显著高于CCI＋saline组。单次皮下注射钩吻素子抗CCI大鼠诱发痛作用的ED50为1．074mg/kg,单次鞘内注射的ED50为每只41．4μg,远低于皮下注射的ED50。结论钩吻素子具有抗外周神经损伤致神经病理性疼痛中诱发痛的效应,单次给予0．5h内起效,持效约5．5h;脊髓可能是其发挥抗神经病理性疼痛效应的作用部位。     

钩吻素子体外诱导人结肠腺癌LoVo细胞凋亡的实验研究

目的探讨钩吻素子(Kou)体外能否诱导LoVo细胞凋亡。方法以Kou(50 μmol/L)作用于LoVo细胞,经光镜、电镜和荧光显微镜观察细胞凋亡情况,并用流式细胞仪检测细胞增殖周期状态。结果通过光镜、电镜和荧光显微镜观察均证实Kou可诱导LoVo细胞凋亡,且凋亡百分率随Kou作用时间的延长而升高。经Kou作用后的肿瘤细胞,细胞周期状态发生明显变化,G0/G1期细胞从31.3%上升到42.3%,S期细胞从62.0%下降到38.7%。结论Kou可诱导LoVo细胞凋亡,且存在时间依赖关系,Kou可抑制细胞DNA的合成,阻止细胞由G1期向S期转化。     

闽产钩吻根茎叶中钩吻碱甲和钩吻素子及葫蔓藤碱甲的含量测定

钩吻[Gelsemium elegans(Gardn.et Champ.)Benth.]为马钱科葫蔓藤属植物,又名断肠草、猪人参等。钩吻始载于《神农本草经》,性温味辛、苦,有大毒,全草可入药,主要分布于福建、浙江等地,是我国传统的药用植物,也是世界著名的剧毒药物。我国民间以其毒性大,一直以外用为主,功能祛风散瘀,消肿止痛,攻毒杀虫。近年来的药理研究表明,钩吻还具有镇痛、镇静、抗炎、散瞳、抗肿瘤、减慢心率、抑制心脏收缩、升压、抑制平滑     

钩吻素子诱导人结肠腺癌细胞凋亡的细胞生物学机制研究

目的 探讨钩吻素子体外诱导人结肠腺癌LoVo细胞凋亡的细胞生物学机制.方法 利用激光共聚焦显微技术研究钩吻素子对LoVo细胞跨膜电位、线粒体跨膜电位、细胞内游离钙浓度、活性氧、细胞间通讯的影响.结果 钩吻素子可降低LoVo细胞跨膜电位、线粒体跨膜电位,能降低细胞内游离钙浓度、加入EDTA可使游离钙升高,能增高LoVo细胞的活性氧及细胞间通讯.结论 钩吻素子体外诱导LoVo细胞凋亡的细胞生物学机制可能与上述实验结果有关.     

A771726的抗银屑病作用及对免疫功能的影响

目的探讨A771726的抗银屑病作用及部分免疫功能。方法采用鼠尾鳞片表皮模型及小鼠阴道上皮模型,观察A771726对表皮细胞分化及上皮细胞有丝分裂的影响。并通过检测ConA诱导T淋巴细胞增殖及LPS诱导腹腔巨噬细胞产生IL-1,观察A771726对免疫功能的影响。结果A771726能促进小鼠尾部鳞片表皮颗粒层形成,抑制小鼠阴道上皮细胞的有丝分裂,对ConA诱导T淋巴细胞增殖反应及LPS诱导IL-1的产生均有抑制作用。结论A771726可能通过抑制表皮细胞增殖及促其分化,并通过一定的抗炎及免疫调节而发挥抗银屑病作用。     

钩吻素子对免疫磁珠分离纯化的小鼠CD4+T细胞体外增殖的影响

目的 探讨小鼠脾脏CD4⁺T细胞的分离方法,观察钩吻素子(Kou)对小鼠脾脏CD4⁺T细胞体外增殖的影响.方法 以免疫磁珠分选法从小鼠脾脏细胞中分离CD4⁺T细胞,流式细胞术检测所得细胞的纯度,台盼蓝法检测细胞活力.将10～20μg/ml Kou分别作用于经刀豆蛋白A或植物血凝素刺激的小鼠T淋巴细胞,四唑盐比色法检测细胞增殖情况,用酶联免疫法检测细胞上清中IL-2的含量.结果 经过流式细胞仪测定分离后的小鼠脾脏CD4⁺T细胞纯度达到90.%±5.8%:0.2%台盼兰染色细胞活力为94.9%±.6%;增殖试验表明分离后未加Kou的CD4⁺T细胞对刀豆蛋白A、植物血凝素的刺激保持了良好的增殖能力,当浓度范围为20～20μg/ml时,Kou均能抑制淋巴细胞的增殖(P<0.05),且表现出一定的剂量相关性;不同浓度的Kou(20、100、200μgm1)作用后,CD4⁺T细胞培养上清中的IL-2水平明显低于对照组(P<0.05).结论 免疫磁珠阴性分选法操作简单、快速,可获得较高纯化率、有活性的CD4⁺T细胞;Kou明显抑制小鼠CD4⁺T淋巴细胞增殖反应,此抑制作用可能与Kou抑制小鼠CD4⁺T细胞IL-2的分泌及免疫抑制作用相关.     

复方甘草酸苷在寻常型银屑病治疗中的应用效果

目的探究复方甘草酸苷在寻常型银屑病治疗中的应用效果。方法选取2014年3月至2015年3月南乐县人民医院收治的84例寻常型银屑病患者,随机分为对照组和观察组,各42例。对照组给予常规方法治疗,观察组在常规治疗基础上加用复方甘草酸苷治疗,比较两组患者治疗效果。结果观察组治疗总有效率为95.2%,对照组治疗总有效率为81.0%;观察组治疗总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗期间两组患者均未发生严重不良反应。观察组复发率为7.1%;对照组为23.8%;观察组复发率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论复方甘草酸苷治疗寻常型银屑病效果较好,可有效改善临床症状,降低复发率,且安全性高,值得临床推广应用。     

单纯吻合指动脉行末节断指再植疗效观察

目的探讨单纯吻合指动脉末节断指再植的方法和疗效。方法回顾性分析单纯吻合指动脉的末节断指再植34例(39指),按照常规方法行指动脉端端吻合,所有病例均行甲床放血,部分病例行再植指侧方切开放血,维持3～5d即可建立有效循环。结果 39指成活36指,失败3指,成活率92.3%。术后随访3～6个月,再植指体指腹饱满,皮色及皮温正常,再植指体远端痛温觉均有不同程度恢复,两点辨别觉为3～6mm。结论单纯吻合指动脉的末节断指再植,缩短手术时间,提高成活率,术后外形及功能恢复良好。     

GM-CSF-MA脂质体对急性白血病小鼠的治疗作用

目的:观察GM-CSF-MA(粒-巨噬细胞集落刺激因子-米托蒽醌及阿糖胞苷)脂质体对急性髓细胞白血病(AML)小鼠的治疗作用。方法:将AML小鼠随机分为5组,分别为GM-CSF-MA脂质体组、MA脂质体组、MA组、GM-CSF组和生理盐水对照组。观察各组小鼠的生存时间及外周血象、肝功(AST)、肾功(Cr)、磷酸肌酸激酶(CK)的变化。结果:GM-CSF-MA脂质体组小鼠的生存时间为(53.2±22.25)d,生命延长率为254.7%;外周血及骨髓中白血病细胞迅速减少,血象恢复快,与其它治疗组及对照组相比,有显著差异;治疗后GM-CSF-MA脂质体组AST、Cr恢复快,CK无明显变化,而MA组各项生化指标均明显升高,两组比较有显著差异。结论:GM-CSF-MA脂质体是一种高效、低毒的靶向治疗急性髓细胞白血病的新方法。     

银屑病实验动物模型研究

目的建立去胸腺小鼠银屑病实验动物模型,以进行银屑病的基础和临床研究。方法实验组小鼠切除胸腺后接受银屑病皮肤损害移植,成活的皮肤损害作病理组织检查;对照组小鼠仅接受银屑病皮肤损害移植。结果４只实验组小鼠,移植的银屑病皮肤损害成活时间分别为１５、２０、２１、３０ｄ银屑病皮肤损害移植之后出现典型的银屑病损害,并且具有银屑病的组织学特征。３只对照组小鼠,移植的银屑病皮肤损害全部坏死脱落。结论去胸腺小鼠是一种有希望的研究银屑病的实验动物模型。     

木蹄层孔菌多糖对小鼠免疫功能的影响

目的 初步探讨木蹄层孔菌多糖(FFP)的免疫调节作用.方法 MTT法检测免疫细胞的代谢活力, ELISA法检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素2(IL-2)的含量,鸡红细胞吞噬法检测巨噬细胞的吞噬功能,绵羊红细胞免疫法检测小鼠体液免疫功能.结果 发现FFP(100,50,25 ?滋g/ml)可以明显促进小鼠脾细胞代谢活力,促进脾细胞分泌细胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-2;显著增强腹腔渗出细胞代谢活力,促进腹腔渗出细胞分泌TNF-α.FFP(100、50、25 mg/kg)显著增强绵羊红细胞(SRBC)所致小鼠特异性抗体生成.FFP(100、50 mg/kg)可以增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞(CRBC)的吞噬率和吞噬指数.结论 木蹄多糖可促进小鼠免疫细胞分泌细胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-2和增强小鼠的体液免疫功能及巨噬细胞的吞噬功能.     

复方丙酸氯倍他索乳膏治疗寻常型银屑病

目的：观察复方丙酸氯倍他索乳膏治疗寻常型银屑病的疗效及安全性。方法：采用随机对照试验方法，将72例寻常型银屑病患者随机分试验组（复方丙酸氯倍他索乳膏组）和对照1组（迪维霜组）、对照2组（恩肤霜组），采用双盲法进行观察。结果：试验组痊愈率58.3%（14/24）、有效率100.0%（24/24）；对照1组痊愈率41.7%（10/24），有效率75.0%（18/24），对照2组痊愈率16.7%（4/24），有效率75.0%（18/24）。试验组分别与对照1组和对照2组比较，试验组痊愈率和有效率均高于对照组（P<0.05）；试验组和对照组均未发现药物局部和全身不良反应。结论：复方丙酸氯倍他索乳膏治疗寻常型银屑病安全、有效。     

磷酸肌酸钠对瓣膜置换术患者心肌缺血再灌注损伤的治疗作用

目的观察磷酸肌酸钠对二尖瓣或主动脉瓣置换术患者心肌缺血再灌注(I-R)损伤的治疗作用。方法 40例行二尖瓣或主动脉瓣置换术患者,随机分为治疗组(n=20)和对照组(n=20),治疗组在主动脉开放后10min注入磷酸肌酸钠1g(用20mL生理盐水溶解),术后1～5d每天静脉输注磷酸肌酸钠1g(用100mL生理盐水溶解),对照组注入等量生理盐水。观察和记录两组患者体外循环时间、主动脉阻断时间、体外循环辅助时间、术后呼吸机支持时间、心脏自动复跳情况,以及术后多巴胺和肾上腺素的使用情况。分别于术前、术后1d,术后5d采集患者颈内静脉血,测定肌酸激酶同工酶(CK-MB)和心肌钙蛋白I(cT-nI)浓度。结果两组体外循环时间、主动脉阻断时间、术后呼吸支持时间以及心脏自动复跳率方面比较差异均无统计学意义(P>0.05);治疗组体外循环辅助时间短于对照组(P<0.05);治疗组术后24h和48h使用肾上腺素的例数少于对照组(P<0.05)。两组CK-MB和cTnI在术后1d较术前明显升高(P<0.05),治疗组CK-MB和cTnI在术后1d和5d明显低于对照组(P<0.05)。结论磷酸肌酸钠主动脉开放后给药结合术后1～5d连续给药对二尖瓣或主动脉瓣置换术患者的心肌I-R损伤具有一定的治疗作用。