垂体瘤转化基因和C-myc基因在多发性骨髓瘤中表达的研究

本研究探讨垂体瘤转化基因（pituitary tumor transforming gene,阿TG）和c—myc基因在多发性骨髓瘤（multiplemyeloma,MM）患者中的表达并分析它们与MM发生的关系。采用RT—PCR方法检测33例MM患者及10例正常人骨髓单个核细胞（bone marrow mononuclear cell,BMMNC）中mG和c—myc基因的表达。结果表明：MM患者PTTG和c—myc基因的表达明显高于正常对照组（P〈0．05）。PTTG基因与c—myc基因的表达呈正相关（r=0．801,P〈0．05）。结论：mG和c—myc基因的过度表达与MM的发生发展有关。     

垂体瘤转化基因在急性淋巴细胞白血病患者中表达的研究

本研究旨在探索垂体瘤转化基因(pituitary tumor-transforming gene,PTTG)在急性淋巴细胞白血病(acutelymphoblastic leukemia,ALL)患者中的表达及其与ALL发病机理的关系,同时探讨PTTG在Ph1染色体阳性和阴性ALL中的表达是否存在差异性。采用实时荧光定量PCR方法检测28例ALL患者及28例正常对照骨髓中PT-TG的表达水平。结果表明:ALL患者PTTG的表达水平(1.9428E5±1.8372E5)明显高于正常对照组(4.5766E3±1.1817E3)(P<0.05),一个周期诱导缓解治疗后达完全缓解(complete remission,CR)患者中PTTG的初始表达水平低于未缓解(non-complete remission,non-CR)患者;Ph1染色体阳性ALL(Ph1+ALL)患者中PTTG的初始表达水平高于Ph1染色体阴性ALL(Ph1-ALL)患者。结论:PTTG的过度表达可能和ALL的发生发展有关,可能与Ph1染色体阳性ALL的发生关系更加密切,这为ALL的发病机制及其基因靶向治疗的研究提供了新的思路。     

子宫内膜样腺癌中PTTG1、BRCA1、VEGF的表达及相关性

目的探讨子宫内膜样腺癌中垂体瘤转化基因1(PTTG1)、抑癌基因1(BRCA1)和血管内皮生长因子(VEGF)基因的表达和意义。方法用western blot检测138例子宫内膜样腺癌、32例子宫内膜不典型增生、40例正常子宫内膜组织中PTTG1、BRCA1和VEGF蛋白的表达水平;用实时荧光定量PCR检测上述组织中PTTG1、BRCA1和VEGF mRNA表达水平;分析3个指标的相关性及与患者5年生存率的关系;western blot检测子宫内膜样腺癌中PTTG1相关的信号通路Akt和STAT3蛋白的激活情况。结果 PTTG1、VEGF mRNA在子宫内膜癌中的表达量为5.44±1.04、3.62±0.78,在不典型增生内膜组织中的表达量为3.24±0.72、2.32±0.73,在正常内膜组织中的表达量为1.65±0.40、1.02±0.25,差异均有统计学意义(P0.01);PTTG1、VEGF蛋白在子宫内膜癌中的表达量为1.23±0.14、1.57±0.24,在不典型增生内膜组织中的表达量为0.89±0.13、0.86±0.08,在正常内膜组织中的表达量为0.54±0.10、0.42±0.06,差异均有统计学意义(P均0.05);而BRCA1 mRNA和蛋白质在3种组织中表达差异无统计学意义(P0.05)。子宫内膜样腺癌组织中PTTG1与VEGF的表达呈正相关(r=0.385,P0.01),与BRCA1的表达无相关关系(r=0.028,P0.05)。与正常内膜组织相比,子宫内膜样腺癌组织中Akt、STAT3可被磷酸化激活(P均0.05)。结论子宫内膜样腺癌患者PTTG1过度表达可伴随VEGF表达上调及p-Akt和pSTAT3的激活,推测PTTG1可能参与子宫内膜样腺癌的发生、发展。     

靶向干扰Survivin基因对结直肠癌细胞PTTG蛋白的影响

目的探讨重组载体介导的Survivin小干扰RNA(siRNA)对人结肠癌细胞株Lovo中PTTG蛋白的影响。方法运用靶向Survivin siRNA真核表达载体转染结肠癌Lovo细胞,western blot检测PTTG蛋白的表达水平。结果 Survivin基因沉默后24-72h,与正常对照组相比,Survivin和PTTG蛋白表达均明显降低,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论 Survivin基因沉默后结直肠癌细胞PTTG蛋白表达显著下调,提示Survivin和PTTG可能相互促进共同参与结直肠癌的发生发展。     

非小细胞肺癌中垂体瘤转化基因的表达及临床意义

目的：研究垂体瘤转化基因在非小细胞肺癌组织、肺良性病变组织和正常支气管黏膜上皮组织中的表达,初步探讨其与非小细胞肺癌发生发展,侵袭转移的关系。方法：（1）用SP免疫组化法检测76例临床石蜡组织标本（44例非小细胞肺癌、20例肺良性病变组织和12例正常支气管黏膜上皮组织）中的PTTG蛋白的表达。（2）用RTPCR法分析PTTG mRNA在不同性质肺组织中的表达情况。结果：（1）PTTG蛋白在不同性质肺组织中的表达差别具有明显差异;在TNM分期、淋巴结转移组间差别有统计学意义。（2）PTTG mRNA在不同性质肺组织中的表达差别具有明显差异（P〈0.001）;在TNM分期、淋巴结转移组间差别有统计学意义。结论：细胞肺癌的发生发展及转移有关。     

P14基因启动子区甲基化在上皮性卵巢癌中的检测及临床意义

目的: 研究P14基因启动子异常甲基化在上皮性卵巢癌发生发展中的作用及临床意义。 方法: 选取我院收治的上皮性卵巢癌患者45例、卵巢良性肿瘤患者30例以及卵巢组织正常患者20例为研究对象,通过甲基化特异性聚合酶链式反应法检测所有研究对象P14基因启动子区甲基化情况,并观察各组患者之间的差异。荧光定量PCR(FQ-PCR)检测组织标本P14mRNA表达。采用并采用免疫组织化学法检测P14蛋白表达。 结果: 正常卵巢组织、良性肿瘤组织和上皮性卵巢癌组织未检测到P14基因启动子区甲基化。P14在正常卵巢组织中的水平为0.57±0.41,在卵巢癌组织的水平为0.83±0.07,在良性肿瘤组织中的水平为0.62±0.39。卵巢癌与正常组织和良性肿瘤比较差异有统计学意义(p<0.05), 正常组织和良性肿瘤比较差异无统计学意义(p>0.05)。免疫组织化学法测P14蛋白突变,在上皮性卵巢癌、良性卵巢肿瘤和正常卵巢组织中,P14表达的阳性率分别为37.8%、73.3%和85.0%。3组中P14表达的阳性率有统计学意义(p<0.05)。 结论: P14低表达可能与卵巢癌的发生、发展有关,但蛋白的异常表达与甲基化无关。     

PTTG基因在肺癌组织中的表达及意义

目的：研究垂体瘤转化基因（PTTG）在肺癌中的表达及其与临床病理特征之间的关系。方法：用PT-RCR法检测56例肺癌组织及相对应的癌帝正常组织、12例肺良性病变组织的mRNA。结果：肺癌组织PTTG基因表达阳性率60.7%高于相应癌帝正常组织（90.7%）和肺良性病变（25.0%）（P<0.01,P<0.05）,腺癌高于鳞癌（P<0.01),但与患者的年龄、性别、TNM分期及肿瘤组织的分化程度无明显相关（P>0.05),结论：PTTG基因在肺癌组织尤其是肺腺癌中表达上调,提示该基因对肺癌的发生、发展起重要作用。PTTG基因有望成为肺癌基因治疗新的靶位点。     

多发性骨髓瘤患者正常免疫球蛋白合成受抑与细胞因子活性改变有关

大多数多发性骨髓瘤(MM)患者的正常免疫球蛋白合成受抑,其机理尚不明确。本文作者对一些调节B细胞增殖的细胞因子(Cytokinc)活性与MM患者正常免疫球蛋白(Ig)合成受抑的关系进行了研究。研究对象为28例MM和7例良性单克隆γ-球蛋白病(BMG),均为初治患者。28例MM患者的Ig合成均显著受抑,而7例BMG患者Ig合成不受抑。外周血B细胞含量测定表明:MM患者比正常人显著减少(P<0.01),而BM(i患者则正常。对患者外周血T细胞或粘附细胞体外培养时产生的细胞因子活性测定结果为:MM患者B细胞刺激因了I(BSF-1)活性(0.55±0.26U/ml)比正常人(1.03±0.21 U/ml)显著减     

垂体肿瘤转化基因及碱性成纤维细胞生长因子在乳腺癌组织中的表达及意义

目的研究垂体肿瘤转化基因（PTTG）及碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）在乳腺癌中的表达及意义。方法收集乳腺癌患者手术标本72例,癌旁正常乳腺组织20例。通过免疫组化方法检测PTTG和bFGF的表达,随访观察发生转移情况及5年生存率。结果 PTTG及bFGF在正常乳腺组织中呈阴性表达,在乳腺癌组织中呈阳性表达,高表达者其发生远处转移的几率及死亡率均明显高于低表达者,且PTTG及bFGF间存在相关关系。结论 PTTG及bFGF参与乳腺癌的形成及发展,其表达高低与乳腺癌的恶性程度及预后相关。在标本中对其行半定量分析可对乳腺癌患者的治疗及预后提供重要的参考。     

骨髓增生异常综合征细胞周期调控基因表达谱的研究

目的研究骨髓增生异常综合征(MDS)细胞周期调控基因的异常表达。方法通过半定量RTPCR分析29名正常对照、27例MDS和19例原发性急性髓系白血病(AML)患者骨髓细胞周期素(cyclins)家族(cyclinD2,cyclinD3,cyclinA1和cyclinE)、细胞周期素依赖性激酶(CDKs)家族(CDK2,CDK4和CDK6)、CDKs抑制剂家族(p21,p27和p57)以及RbE2Fs通路中Rb和E2F1基因的表达率和表达量。结果MDS组cyclinD3和cyclinA1基因表达量(分别为0.65±0.17,0.48±0.04)均明显高于正常对照(0.49±0.04,0.32±0.06),且低于原发性AML组(0.84±0.15,0.65±0.09)(P值均<0.05)。MDS组cyclinD2和cyclinE基因表达率(表达量)分别为40.7%(0.78±0.21)和51.9%(0.52±0.10),均明显高于正常对照[13.8%(0.49±0.09);17.2%(0.33±0.13)]和原发性AML组[10.5%(0.38±0.08);21.1%(0.33±0.03)]。MDS组CDK2基因表达量(0.66±0.19)明显高于正常对照(0.42±0.04)(P<0.001),而且CDK6基因表达率(25.9%)明显高于正常对照(3.4%)(P<0.05)。MDS组、原发性AML组及正常对照组CDK4基因表达率和表达量差异无统计学意义。MDS组p21基因(77.8%;1.18±0.21)和p27基因(48.1%;1.14±0.40)有较高的表达率和表达量,明显高于正常对照和原发性AML组。MDS组p57基因表达量(0.69±0.06)明显高     

PTTG基因在人乳腺癌中的原位表达及其意义

目的　研究PTTG基因在乳腺癌表达的临床病理意义。方法　应用原位杂交 (DNA RNA)技术检测 66例人乳腺癌、2 7例乳腺小叶增生及 5 4乳腺正常组织中PTTGmRNA。结果　PTTGmRNA在乳腺癌、乳腺小叶增生和乳腺正常组织阳性率分别为 71 2 % (4 7/66)、5 1 9% (14 /2 7)和 11 1% (6/5 4) ,乳腺癌和乳腺正常组织之间有显著差异 (P <0 0 5 ) ,乳腺小叶增生和乳腺正常组织之间也有显著差异 (P <0 0 5 ) ;PTTGmRNA的表达与淋巴结转移无统计学意义 (P >0 0 5 )。结论　PTTG基因的过度表达可能参与了人乳腺癌的发生发展过程     

中期因子在急性髓系白血病患者的表达及临床意义

为了探讨中期因子(midkine,MK)与急性髓系白血病(AML)患者预后的关系,本研究采用半定量RT-PCR方法检测65例AML患者与15例正常人骨髓单个核细胞(MNC)MK、bcl-2mRNA的表达,并对20例AML患者和5例正常人采用Westernblot检测MNC中MK基因的表达。结果显示:初治组、复发组和化疗缓解组MK基因表达水平分别为0.331±0.436,0.374±0.463和0.067±0.190,正常人MK基因表达阴性;MK基因表达阳性与表达阴性患者的首次完全缓解(CR)率分别为63.16%和93.55%(P=0.01),MK基因表达阳性患者的复发率(100%)明显高于表达阴性者(40%)(P=0.019);多药耐药组与药物敏感组MK基因的表达率分别为57.69%和25.64%(P<0.01);MK与bcl-2基因表达呈正相关(r=0.556,P<0.001)。结论:AML患者白血病细胞可以产生MK,且MK阳性率的高低与AML病期相关,是影响AML患者近期预后的重要因素之一。MK可能通过上调bcl-2的表达抑制白血病细胞凋亡。     

cmpl在真性红细胞增多症患者骨髓CD34阳性细胞及血小板上的表达

本研究了解真性红细胞增多症(PV)患者血小板膜及骨髓CD34阳性细胞表面TPO受体(c-mpl)蛋白及骨髓造血细胞c-mpl mRNA表达情况。应用双色流式细胞术检测13例PV患者及15名正常对照者骨髓CD34阳性细胞表面c-mpl蛋白表达;应用单色流式细胞术检测15例PV患者及15名正常对照者血小板表面c-mpl蛋白表达;应用RT-PCR方法检查PV患者及正常对照者骨髓造血细胞c-mpl mRNA的表达情况。结果表明:CD34阳性细胞c-mpl蛋白表达在PV患者为0.99%±0.14%,与正常对照(0.92%±0.12%)相比无差别(p>0.05);血小板c-mpl蛋白表达在PV患者为20.33%±4.84%,与正常对照(23.50%±3.64%)相比无差别(p>0.05);骨髓造血细胞c-mpl mRNA与正常组相比也无明显差别(p>0.05。)结论:PV患者骨髓CD34阳性细胞、血小板膜c-mpl蛋白及骨髓造血细胞c-mpl的mRNA表达无明显异常。     

真性红细胞增多症患者骨髓CD34阳性细胞凋亡相关蛋白的表达

目的　了解真性红细胞增多症 (PV)患者骨髓CD34 细胞凋亡受体FAS(CD95 )及凋亡相关蛋白Bcl 2、Bax的表达。方法　应用双色流式细胞仪检测 2 1例PV患者及 8例原发性血小板增多症(ET)患者和 11名正常人骨髓CD34 细胞CD95、Bcl 2、Bax的表达 ;应用RT PCR方法检查PV患者及对照组骨髓造血细胞Bcl 2、BaxmRNA的表达情况并分析其相关性。结果　CD34 细胞CD95表达率PV患者为 (4 2 .6 5± 15 .5 6 ) % ,ET患者为 (4 5 .31± 17.6 2 ) % ,与正常对照组的 (37.5 5± 15 .19) %差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;Bax表达率PV患者为 (35 .83± 9.33) % ,与正常对照组的 (4 1.6 5± 9.0 4 ) %差异无显著性(P >0 .0 5 ) ;Bcl 2表达率PV患者为 (79.35± 14 .4 3) % ,明显高于正常对照组的 (5 5 .84± 13.4 3) % ,(P <0 .0 1) ;Bax/Bcl 2的比值PV患者为 0 .4 7± 0 .14 ,明显低于正常对照组的 0 .76± 0 .2 4 (P <0 .0 1) ;骨髓造血细胞Bcl 2mRNA的表达PV患者明显高于正常对照组 (P <0 .0 1) ,BaxmRNA的表达PV患者与正常对照组差异无显著性 (P >0 .0 5 )。PV患者CD34 细胞Bcl 2高表达与CD34 细胞的凋亡呈负相关 (r=- 0 .4 97,P =0 .0 2 6 )。结论　PV患者骨髓CD34 细胞低凋亡的机制之一是抗凋亡蛋白Bcl 2高表达     

性连锁凋亡抑制蛋白及其拮抗蛋白在急性白血病中的表达及意义

为了研究急性白血病(AL)性连锁凋亡抑制蛋白(X-linkedinhibitorofapoptosisproteins,XIAP)和XIAP相关因子1(XIAP-associatedfactor1,XAF1)的表达及其临床意义,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测116例AL患者和17名正常人骨髓单个核细胞中XIAP、XAF1、Smac和HtrA2mRNA的表达,并分析其与临床治疗效果的关系。结果表明初治AL患者XIAPmRNA表达水平(0.990±0.337)明显高于正常对照(0.395±0.148)(P<0·01);初治AL患者XAF1mRNA阳性率及表达水平(56.3%,0.246±0.267)明显低于正常对照(100%,0.964±0.387)(P<0.01);69例初治AL患者中高表达XIAP患者完全缓解率明显低于低表达患者(P<0.01);XAF1阳性表达患者完全缓解率明显高于阴性表达患者(P<0.01)。结论XIAP在AL中异常高表达,XAF1在AL中异常低表达,XIAP高表达及XAF1低表达或阴性可能是AL患者不良预后的指标。     

急性白血病细胞的乳腺癌耐药蛋白基因表达与化疗耐药的关系

为了探讨急性白血病 (AL)患者乳腺癌耐药蛋白 (BCRP)基因表达与化疗耐药及预后的关系 ,本研究应用半定量逆转录 -聚合酶链反应 (RT PCR)的方法 ,以 β2 微球蛋白 (β2 MG)作阳性对照 ,检测了 72例AL患者的白血病细胞及 15名正常对照者白细胞的BCRPmRNA的表达 ,将BCRP/ β2 MG≥ 0 .5定为BCRP基因表达阳性。结果显示 :初治组BCRP基因表达的阳性率为 37.6 % ,BCRP基因表达阳性与BCRP基因表达阴性患者的首次完全缓解 (CR1)率分别为 31.6 %和 79.3% (P =0 .0 0 1) ;临床耐药组 (NR组 )与化疗敏感组 (CR组 )BCRP基因的表达水平分别为 0 .96 2± 0 .4 2 6和 0 .315± 0 .2 96 (P =0 .0 0 0 1) ;复发 /难治组BCRP基因表达水平显著高于初治组 (P =0 0 0 2 5 ) ;正常对照组及长期生存组BCRP基因表达的水平较低 ;BCRP基因表达与FAB分型有关。结论 :BCRPmRNA过度表达可导致临床化疗耐药 ,是AL患者 (除M3 外 )预后的重要不利因素。     

Pdcd5基因在多发性骨髓瘤患者中的异常表达

本研究探讨骨髓瘤患者骨髓细胞中pdcd5基因的表达。应用ELISA方法和实时定量逆转录．聚合酶链反应（real—time quantitative RT-PCR,RQ—RT-PCR）技术,检测多发性骨髓瘤（MM）患者及正常人PDCD5蛋白和基因的表达,比较pdcd5基因的表达与患者临床特征的关系。结果表明：45例初治及难治复发MM患者血浆PDCD5蛋白水平显著低于20例健康人和20例治疗有效患者,分别为（16．91±0．28）ng／ml,（19．11±0．29）ng／ml,（17．94±0．154）ng／ml（P均〈0．05）。45例初治及难治复发MM患者骨髓细胞pdcd5基因表达量显著低于正常人,分别为0．64±0．47和1．28±1．21,P〈0．05。结论：多发性骨髓瘤患者低表达PDCD5,pdcd5基因可能参与了MM的发病机制。     

垂体瘤转化基因在急性髓系白血病患者中表达的研究

本研究探讨垂体瘤转化基因（pituitarytumor-transforming gene,pttg）在急性髓系白血病（acute myeloid leukemia,AML）患者中的表达及其与AML发生的关系,以及pttg基因在FAB亚型中的表达是否存在差异性。采用实时荧光定量PCR方法检测47例AML患者及28例正常对照者骨髓中pttg基因的表达水平。结果表明：AML患者pttg基因的表达水平[（1.1323±1.3934）×105]明显高于正常对照组[（4.5766±1.1817）×103]（p〈0.05）,急性早幼粒细胞细胞白血病（M3）患者中pttg基因的表达水平高于其他FAB亚型,其中包括急性髓系白血病未分化型（M1）、急性粒细胞白血病部分分化型（M2）、急性粒细胞单核细胞白血病（M4）、急性单核细胞白血病（M5）。结论：pttg基因的过度表达可能与AML的发生发展有关,其中可能与M3发生的关系更加密切,本研究为AML的发病机制及其基因靶向治疗的研究提供了新的思路。