酸枣仁汤对老年慢性睡眠剥夺大鼠视交叉上核中血管活性肠肽、精氨酸加压素肽能神经细胞的影响

目的:研究酸枣仁汤对老年慢性睡眠剥夺大鼠视交叉上核中血管活性肠肽(VIP)、精氨酸加压素(AVP)肽能神经细胞的影响。方法:利用"多平台水环境法"建立老年大鼠慢性睡眠剥夺模型,将实验大鼠随机分为4组,环境对照组,慢性睡眠剥夺模型组,舒乐安定组以及酸枣仁汤组。用免疫组织化学方法观察睡眠剥夺21 d后各组大鼠视交叉上核中VIP、AVP肽能神经细胞的变化,用Real Time-PCR法检测视交叉上核中VIP mRNA、AVP mRNA的表达。结果:与环境对照组相比较,慢性睡眠剥夺模型组VIP表达明显降低、AVP表达明显升高(P0.05);与慢性睡眠剥夺模型组比较,治疗组VIP则有不同程度的升高(P0.05),AVP则出现明显下降,其中酸枣仁汤组上下浮动最为显著。与环境对照组比较,慢性睡眠剥夺模型组VIP、AVPmRNA表达下调;与慢性睡眠剥夺模型组比较,舒乐安定组和酸枣仁汤组VIP、AVPmRNA表达上调。结论:酸枣仁汤能够调控大脑视交叉上核VIP、AVP的表达,有效调节老年睡眠剥夺大鼠的昼夜节律。     

酸枣仁汤对慢性睡眠剥夺老年失眠大鼠下丘脑GABA及其受体表达的影响

目的:研究酸枣仁汤对慢性睡眠剥夺老年失眠大鼠下丘脑GABA及其受体表达的影响。方法:利用"多平台水环境法"建立老年大鼠慢性睡眠剥夺模型,将实验大鼠随机分为4组,环境对照组,慢性睡眠剥夺模型组,舒乐安定组以及酸枣仁汤组。应用免疫组织化学方法观察睡眠剥夺21 d后各组大鼠下丘脑GABA含量的变化,Realtime-PCR法检测大鼠下丘脑GABAARα1和γ2亚单位mRNA表达水平。结果:免疫组化法检测结果表明,与环境对照组比较,慢性睡眠剥夺模型组较环境对照组GABA含量降低(P0.05);与慢性睡眠剥夺模型组比较,舒乐安定组和酸枣仁汤组GABA相对表达量相对升高(P0.05)。Realtime-PCR法检测结果表明,与环境对照组比较,慢性睡眠剥夺模型组GABAARα1、GABAARγ2表达下调(P0.05);与慢性睡眠剥夺模型组比较,酸枣仁汤组和舒乐安定组GABAARα1、GABAARγ2表达明显上调(P0.05)。结论:酸枣仁汤改善睡眠机制与调控大鼠下丘脑GABA的含量及其受体表达有关。     

酸枣仁汤对慢性睡眠剥夺老年失眠大鼠下丘脑5-HT及其受体表达的影响

目的研究酸枣仁汤对慢性睡眠剥夺老年失眠大鼠下丘脑5-HT及其受体表达的影响。方法利用"多平台水环境法"建立老年大鼠慢性睡眠剥夺模型,将实验大鼠随机分为4组,即环境对照组,慢性睡眠剥夺模型组,舒乐安定组以及酸枣仁汤组。应用荧光分光光度法检测5-HT含量的变化,Realtime-PCR法检测大鼠下丘脑5-HT_(1A)R、5-HT2ARmRNA表达水平。结果荧光分光光度法检测结果表明,与环境对照组比较,慢性睡眠剥夺模型组5-HT含量明显降低(P0.05);与慢性睡眠剥夺模型组比较,舒乐安定组和酸枣仁汤组5-HT含量明显升高(P0.05)。Realtime-PCR法检测结果表明,与环境对照组比较,慢性睡眠剥夺模型组下丘脑5-HT_(1A)RmRNA表达下调,5-HT_(2A)RmRNA表达上调;与慢性睡眠剥夺模型组比较,舒乐安定组和酸枣仁汤组下丘脑5-HT_(1A)RmRNA表达上调,5-HT_(2A)RmRNA表达下调。结论酸枣仁汤改善睡眠机制与调控大鼠下丘脑5-HT的含量及其受体表达有关。     

酸枣仁汤对慢性睡眠剥夺大鼠学习记忆及TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的:基于Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路探讨酸枣仁汤改善睡眠剥夺诱导学习记忆障碍的作用机制。方法:将实验大鼠随机分为正常组、模型组、褪黑素组(2. 5×10~(-4)g·kg~(-1)·d~(-1))和酸枣仁汤组(12. 96 g·kg~(-1)·d~(-1)),除正常组外,其他各组构建慢性睡眠剥夺模型。各组连续给药28 d后,采用Morris水迷宫评价大鼠的学习记忆力,采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠血清中白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)法检测大鼠海马中TLR4,NF-κB p65及核转录因子抑制蛋白α(IκBα)的m RNA表达水平,采用免疫组化(IHC)检测大鼠海马中TLR4,IκBα,p-IκBα和NF-κB p65的蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠上平台潜伏期、游泳总路程和第1次抵原平台时间明显增加(P 0. 01),而穿越平台次数和目标象限时间显著减少(P 0. 01);与模型组比较,褪黑素组和酸枣仁汤组大鼠上平台潜伏期、游泳总路程和第1次抵原平台时间减少(P 0. 05,P 0. 01),而穿越平台次数和目标象限时间增加(P 0. 05,P 0. 01)。与正常组比较,模型组大鼠血清中TNF-α,IL-1β,IL-6表达水平显著升高(P 0. 01);与模型组比较,褪黑素组和酸枣仁汤组大鼠血清中TNF-α,IL-1β,IL-6表达水平下降(P 0. 05,P 0. 01)。与正常组比较,模型组大鼠海马中TLR4,NF-κB p65 m RNA及蛋白表达水平升高(P 0. 01),而IκBαm RNA及蛋白表达水平下降(P 0. 01)。与模型组比较,褪黑素组和酸枣仁汤组大鼠海马中TLR4,NF-κB p65 m RNA及蛋白表达水平降低(P 0. 05,P 0. 01),而IκBαm RNA及蛋白表达水平升高(P 0. 05,P 0. 01)。与正常组比较,模型组大鼠海马中p-IκBα的蛋白表达水平显著升高(P 0. 01);与模型组比较,褪黑素组和酸枣仁汤组大鼠海马中IκBα的蛋白表达水平升高(P 0. 05,P 0. 01)。结论:酸枣仁汤具有改善睡眠剥夺大鼠学习记忆的作用,其机制可能与其抑制海马中TLR4/NF-κB信号通路相关。     

酸枣仁汤对慢性睡眠剥夺大鼠海马5-HT1AR和5-HT2AR表达的影响

目的:观察酸枣仁汤对慢性睡眠剥夺大鼠海马5-HT_(1A)R和5-HT_(2A)R表达的影响。方法:将SPF级雄性SD大鼠随机分为空白组和造模组,造模组用多平台水环境法制造慢性睡眠剥夺模型,造模成功后再将造模组大鼠随机分为模型组、西药组(舒乐安定)和酸枣仁汤组。用自主活动测试仪记录大鼠自主活动时间,用免疫组化和Western blot法检测大鼠海马中5-HT_(1A)R和5-HT_(2A)R的表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠tL、tD、tall增加,大鼠活动时间增加(P0.01);与模型组比较,西药组大鼠tL、tall和酸枣仁汤组大鼠tL、tD、tall减少,大鼠活动时间减少。空白组大鼠海马中5-HT_(1A)R水平较高而5-HT_(2A)R水平较低;造模后模型组大鼠海马中5-HT_(1A)R水平下降而5-HT_(2A)R水平上升;给药后西药组和酸枣仁汤组大鼠海马中5-HT_(1A)R水平上升而5-HT_(2A)R水平下降。结论:酸枣仁汤能调节大鼠海马中5-HT_(1A)R和5-HT_(2A)R的表达,从而改善睡眠剥夺大鼠睡眠状态,效果与舒乐安定相当。     

天王补心丹对慢性睡眠剥夺模型大鼠心肌、下丘脑视交叉上核VIP、AVP表达的影响

目的 :探讨天王补心丹对慢性睡眠剥夺模型大鼠药物干预的可能机制。方法:40只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、天王补心丹组和艾司唑仑组。采用多平台水环境联合咖啡因注射复制慢性睡眠剥夺模型。造模完成后用天王补心丹和艾司唑仑对模型大鼠进行治疗。以行为学测试检测大鼠学习记忆水平,取心肌和下丘脑视交叉上核(SCN)观察形态学改变,ELISA法检测VIP、AVP的表达水平。结果:行为学测试:与模型组比较,治疗组大鼠对位训练与探查训练结果有显著性差异(P0.05,P0.01)。透射电镜:与模型组比较,治疗组大鼠心肌组织及SCN损伤程度减轻。ELISA:与模型组比较,治疗组大鼠心肌中VIP、AVP的表达下调(P0.05,P0.01),SCN中VIP、AVP的表达上调(P0.05,P0.01)。结论:天王补心丹"心脑相关"的药物干预机制可能和调节心肌、SCN中VIP、AVP的表达有关。     

痫宁片对氯化锂-匹罗卡品致痫大鼠大脑神经元损伤及c-fos表达的影响

目的观察痫宁片对氯化锂-匹罗卡品致痫大鼠大脑神经元损伤及c-fos表达的影响,探讨其抗痫的可能机制。方法将52只SD大鼠随机分为空白组、模型组、对照组和中药组,采用氯化锂-匹罗卡品制成慢性癫痫大鼠模型,分别给予蒸馏水、丙戊酸钠、痫宁片灌胃。常规病理切片观察大鼠大脑神经元损伤情况,免疫组化SABC法检测大鼠大脑c-fos的表达。结果对照组与中药组大鼠大脑神经元水肿、固缩等损伤较模型组明显减轻(P0.05),对照组与中药组大鼠大脑c-fos表达较模型组明显降低(P0.05),中药组与对照组比较,差异无统计学意义。结论痫宁片可明显减轻氯化锂-匹罗卡品致痫大鼠大脑神经元水肿、固缩等损伤,降低大脑内c-fos水平,对癫痫大鼠大脑具有保护作用,是理想的抗癫痫中成药,其抗痫机制可能与降低大脑内c-fos的表达有关。     

酸枣仁汤对老年血亏阴虚失眠证候模型大鼠脑组织谷氨酸、γ-氨基丁酸及γ-氨基丁酸A受体表达的影响

目的:观察酸枣仁汤对老年血亏阴虚失眠证候模型大鼠脑组织谷氨酸(Glu)及γ-氨基丁酸(GABA)含量及GABAA受体α1和γ2亚单位表达的影响。方法:用D-半乳糖致亚急性衰老、环磷酰胺及氢化可的松致阴血亏虚,及自制改良多平台法剥夺睡眠48 h,制作复合型老年血亏阴虚失眠证候大鼠模型。采用高效液相色谱法检测模型大鼠大脑皮质及下丘脑氨基酸类神经递质Glu及GABA含量变化,采用免疫组化染色和mRNA半定量反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测大脑皮质及海马部位γ-氨基丁酸A受体(GABAAR)α1和γ2亚单位的表达变化,并考察酸枣仁汤对这些指标的影响。结果:与环境对照组比较,证候模型组大鼠大脑皮质及下丘脑Glu及GABA含量显著升高(P0.01,P0.05),且Glu/GABA比值增高,大脑皮质及海马部位的GABAARα1和γ2亚单位免疫化学累积光密度明显较高(P0.01),皮质部位GABAARα1和γ2 mRNA的表达均显著上调(P0.01),经酸枣仁汤干预后各指标明显下降(P0.01,P0.05),并趋于正常范围。结论:皮质及海马部位GABAARα1和γ2亚单位表达的明显上调是老年失眠证候的可能病理机制之一,酸枣仁汤的治疗机制可能与其减少脑内氨基酸毒性作用,下调大脑皮质及海马部位GABAARα1和γ2亚单位的表达有关。     

益气活血药物对脑梗死恢复期大鼠c-fos基因表达的影响

目的:基于c-fos mRNA观察益气活血药物对脑梗死恢复期大鼠的影响。方法:以Longa的方法略作改良制作大鼠左侧大脑中动脉阻塞模型,按照随机数字表的方法随机分为正常组、模型组、假手术组、益气组、活血组、益气活血组、ERK抑制剂7组,采用RT-PCR技术,在治疗28 d观察益气活血药物对脑梗死恢复期大鼠梗死皮层c-fos mRNA表达的影响。结果:在治疗28 d后,模型组较正常组c-fos mRNA表达明显下降(P0.05),益气活血组与ERK抑制组较模型组有一定程度提高(P0.05),活血组与模型组比较,无明显统计学意义(P0.05),益气组的c-fos mRNA表达低于其他各组(P0.05)。结论:在脑梗死恢复期,益气活血药物在一定程度上可改善脑缺血,优于单纯益气与单纯活血,其疗效机制可能与提高c-fos mRNA的表达有关。     

酸枣仁中斯皮诺素对睡眠剥夺大鼠下丘脑MCH、Orexin-A表达的影响

目的探讨酸枣仁中斯皮诺素对睡眠剥夺大鼠下丘脑黑色素浓集激素(MCH)、食欲素-A(Orexin-A)表达的影响。方法 120只大鼠随机分为对照组、模型组、地西泮组、斯皮诺素组,每组30只,对照组大鼠正常环境下常规饲养,模型组大鼠灌胃给予生理盐水,地西泮组大鼠灌胃给予地西泮(0.8 mg/kg),斯皮诺素组大鼠灌胃给予斯皮诺素(15 mg/kg),剂量10 mL/kg,连续2 d。然后,免疫组化染色法检测大鼠下丘脑MCH、Orexin-A阳性表达,RT-PCR法检测两者mRNA表达,ELISA法检测两者水平。结果与模型组比较,斯皮诺素组MCH阳性表达光密度、面密度、阳性细胞数、mRNA表达、水平显著升高(P0.01),而Orexin上述指标显著降低(P0.01)。结论酸枣仁中斯皮诺素可改善睡眠剥夺大鼠睡眠,其机制可能与上调下丘脑MCH表达、下调Orexin表达有关。