双波长法快速测定蛋白质含量

目的 为了建立一种快速而灵敏的蛋白质检测方法。方法在考马斯亮兰法测定蛋白质含量时，通过采用５９０ｎｍ和４５０ｎｍ双波工代替单波长检测，并以酶标检测仪取代紫外－可见分光光度计作为检测仪。结果 此种改进不但提高了考马斯亮兰法检测蛋白质的灵敏度（０．１２７μｇ／ｍｌ）和检测范围（０．１２７￣３１．２５μｇ／ｍｌ），而且使大量标本的检测可在一次检测过程中完成。标准直线相关系数ｒ＾２＝０．９９６５，表明在检     

考马斯亮兰G-250法测定胃液蛋白质含量及其临床意义

目的：探讨考马斯亮兰Ｇ２５０法测定胃液蛋白质含量的方法和意义。方法：采用改进的Ｂｒａｄｆｏｒｄ法对２６例正常人、８例胃癌、２４例溃疡及慢性胃炎、４例肠上皮化生以及４例萎缩性胃炎患者胃液进行蛋白质含量测定。结果：Ｇ２５０与胃液蛋白结合后的最大吸收波长为５９５ｎｍ，反应体系中加入２０μｌ１０ｍｏｌ／ＬＮａＯＨ后明显提高光吸收值（Ｐ＜０．０５），线性范围在０～５００μｇ／ｍｌ间，比文献报道的高，胃液蛋白质与Ｇ２５０结合后３０ｍｉｎ内保持稳定，本法重复性好，回收率达９３．７％。结果还提示：胃癌组的胃液蛋白质含量明显高于正常对照组和其它胃疾病组（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５）。结论：用Ｇ２５０法测定胃液蛋白质含量是一种可靠、简便、快速、灵敏的方法，结果具有一定的临床意义。     

一种新的考马斯亮兰R—250固相染料结合法测蛋白质含量的方法

本文介绍了一种用考马斯亮兰Ｒ－２５０固相染料结合法测蛋白质含量的方法。将蛋白样品点在滤纸上，甲醇固定，考马斯亮兰Ｒ－２５０染色，脱色，用洗脱液洗脱下与染料结合的蛋白质，在波长６１０ｎｍ处测其光密度（ｏｐｔｉｃａｌ ｄｅｎｓｉｔｙ．Ｏ．Ｄ）值。方法简便，所用样品少，灵敏度高，检测线性范围在０．１ｇ／Ｌ￣５ｇ／Ｌ之间，重复性较好，批内变异３．５６％￣６．６７％，批间变异１．４８％￣７．０２％。样品稳定     

考马斯亮兰G—250染料测定蛋白质方法的改进

考马斯亮兰G-250(简称G-250)酸性溶液呈红棕色,与蛋白质结合时变为兰色,A_(max)从465nm移至595nm。在一定条件下,蛋白质浓度与A_(595nm)成正比,据此作蛋白质定量。本法有快速、简便、灵敏和抗多种化学试剂干扰等优点,已得到广泛使用。但此法对不同的蛋白质定量有时差异较大,并时有不稳定的染料蛋白复合物沉出,影响测定准确度~4。作行用正交试验法选出了试剂配制的最佳条件,对经典法作了改进。     

全蝎药材商品中水溶性蛋白质含量测定

目的:建立全蝎商品药材中水溶性蛋白质含量测定方法,为评价全蝎药材质量通过依据。方法:冰箱低温水浸渍、提取,考马斯亮蓝G-250溶液显色,可见分光光度法测定,10批不同全蝎药材商品中水溶性蛋白质的含量。结果:各样品中水溶性蛋白质的含量,以牛血清蛋白计,在60~464μg范围内线性关系良好,其回归方程为Y=0.001 6X+0.0734,相关系数r=0.9997。结论:该方法适用于全蝎药材的水溶性蛋白质的含量测定,可作为控制全蝎药材质量的方法之一。     

考马斯亮兰法测定壳聚糖中蛋白的含量

目的:运用考马斯亮兰G250显色剂测定壳聚糖中蛋白含量。方法:蛋白质分子均具有酰胺基团,考马斯亮兰G250染料上的阴离子与蛋白质上的酰胺结合,使溶液变为蓝色,于595nm处测定吸光度可计算出样品中蛋白质的含量。结果:考马斯亮兰G250分光光度法测定壳聚糖样品中蛋白质含量是可行的,相对标准偏差为3.6%～4.9%,回收率为93.2%～108.7%。结论:该法具有简便、快速、灵敏度高、重现性好等特点。     

改良的考马斯亮兰G-250染色法简便快速测定微量蛋白浓度

应用自制的考马斯亮兰 G- 2 50染色蛋白定量试剂进行微量蛋白测定。考马斯亮兰染料能与蛋白质定量结合 ,通过比色可测得蛋白浓度。蛋白浓度在 1 0 0～ 1 0 0 0 mg/ L范围内。该法的实测值与吸光度间呈良好的线性关系。其敏感性、稳定性、重复性及简便程度均优于经典的双缩脲法、Folin-酚法蛋白测定法。实验结果显示 ,改良的考马斯亮兰 G- 2 50染色法是一种简便、迅速且可靠的微量蛋白浓度测定法     

牛血清白蛋白键合的液相手性整体柱制备及其蛋白柱载量的研究

蛋白质柱载量的测定对优化蛋白质类手性整体柱的制备条件具有重要意义。采用热引发原位聚合方法制备了聚甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)-乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA)液相整体柱,而后采用环氧法直接键合手性选择剂牛血清白蛋白(BSA),制得高效液相手性整体柱,并且建立考马斯亮蓝(CBB)法测定手性整体柱上的蛋白柱载量。结果显示,BSA最大的柱载量为11.90 mg/g,此时致孔剂组成为环己醇-十二烷醇(65∶35)。将制备的高效液相手性整体柱用于色氨酸和华法林的拆分,色氨酸的两个对映异构体达到基线分离。高效液相手性整体柱的蛋白柱载量与手性拆分的效果呈现正相关。     

考马斯亮蓝微盘比色法测定蛋白质含量

目的 建立快速、灵敏的测定蛋白质的方法。方法 以考马斯亮蓝作为显色剂,用酶联免疫测定仪微盘比色测定牛血清白蛋白和小鼠肝组织匀浆的蛋白含量,并与常量比色法进行了比较,结果 考马斯亮蓝微盘比色法与常量法相比,对样品的测定结果相近,而前者样品用量少（只需几微升）,简便、快速、检测极限低（0.63ug)。结论 考马斯亮蓝微盘比色法是一种简单、快速、灵敏的蛋白质测定方法,尤其适用于大批量、微量样品的蛋白质含量测定。     

PAGE一步性低背景CBBR_（250）染色方法的探讨

传统的考马斯亮蓝Ｒ２５０（ＣＢＢＲ２５０）染色方法存在背景深，耗时长，试剂耗用多的缺点，考马斯亮蓝Ｇ２５０（ＣＢＢＧ２５０）虽然需时短，但其灵敏度效低。本文探讨了一步性低背景ＣＢＢＲ２５０染色方法在蛋白质ＰＡＧＥ中的应用，结果表明使用乙醇－乙酸－水染色系统，ＣＢＢＲ２５０的最佳工作浓度为０．００４‰～０．００８‰，染色时间为８～１０ｈ，灵敏度为０．５μｇ／带。一步性ＣＢＢＲ２５０染色方法与传统的ＣＢＢＲ２５０染色方法相比，有需时短，背景浅，试剂用量少的优点，可用于蛋白质的定性和定量研究。     

发色底物测定法检测血浆蛋白C活性的实验研究

本研究从七种发色底物中筛选出二种发色底物:PenfchromA和PenfchromB,并采用蛇毒激活物Protac建立起特异、快速的人血浆蛋白C活性的比色测定新方法,用于临床标本的测定,取得满意效果。该方法试剂用量少,操作简便、迅速,结果稳定,适合于国内临床单位推广应用。     

纳米金层析免疫法快速检测黄热病病毒

目的:探索快速、简便、高效、灵敏、低廉地检测黄热病病毒感染的方法。方法:用纳米金免疫层析试验原理研制了一种快速诊断试纸。将制备的纳米金颗粒用SPA标记形成金-SPA复合物,其复合物结合在聚酯膜上制成金标结合释放垫;通过基因工程技术在大肠杆菌中克隆和表达黄热病E蛋白,经纯化的抗原蛋白被固定在硝酸纤维素膜上,然后滴加待测血清,样品中的病毒抗体通过免疫反应与膜上的抗原蛋白结合,待其渗过膜片后,与金-SPA复合物结合形成肉眼可见的红色线条。结果:用已确证的21份黄热病阳性血清和30份阴性血清进行了试验,该快速检测方法与ELISA方法无显著差异。结论:该检测方法不需任何仪器,仅凭肉眼即可判定结果,整个检测过程不超过5min。与传统的ELISA法相比,具有方便快速、成本低廉、应用范围广等优点。     

快速胶体金免疫层析法在疟原虫感染诊断中的应用

目的探讨快速胶体金免疫层析法(GICA)在疟原虫感染诊断中的应用价值。方法以传统的血涂片法为金标准,以抗疟药治疗有效性作为回顾性诊断依据,分析GICA在疟原虫感染诊断中的特异性、敏感性。结果检测发热病人334例,其中间日疟特异性达94.16%,敏感性达75%;恶性疟特异性98%,敏感性81%。结论GICA敏感性、特异性较高,具有较高的可靠性,且方便快捷适于现场应用。