高脂饮食对2型糖尿病大鼠肾脏核因子-κB表达的影响

目的研究高血脂状态对2型糖尿病(DM)大鼠肾脏核转录因子-κB(NF-κB)及细胞间黏附分子1(ICAM-1)表达的影响。方法将纯种雄性Wistar大鼠分为正常对照组(A组,10只),糟尿病高脂饮食组(B组,10只)。糖尿病高脂饮食+非诺贝特干预组(C组,10只)。22周后,应用Western印迹方法检测肾组织NF-κBp65的含量;免疫组化SP法检测ICAM-1的表达。结果与A组相比,B组及C组NF-κB在肾脏组织的含量均明显增高,且差异具有统计学意义(P<0.01)。与B组相比,非诺贝特处理后,NF-κB的表达明显下调(P<0.01)。ICAM-1在各组的表达的变化与NF-κB的趋势相同。结论高脂饮食可诱导糖尿病大鼠NF-κB以及其下游的黏附分子ICAM-1在肾脏中的高表达,降脂药非诺贝特可减少NF-κB和ICAM-1的高表达,提示降脂治疗对延缓糖尿病肾病(DN)的发展有一定的作用。     

缺血预处理对大鼠肝脏移植物再灌注早期NF-κB活性的影响及意义

目的 观察缺血预处理对大鼠肝脏移植后再灌注早期核转录因子-κB(NF-κB)活性和TNF-α、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达的影响,探讨缺血预处理的保护机理.方法 建立大鼠肝脏移植模型,供肝在林格液中保存2 h,实验分假手术组、对照组和缺血预处理组(IP组)3组,IP组于供肝切取前夹闭第一肝门10 min,然后开放10 min.分别于移植再灌注后1、2、4及6 h抽血进行肝酶学检查,切取肝脏作NF-κB活性、TNF-α和ICAM-1表达的测定.结果 IP组肝功能得到有效改善.与假手术组比较,对照组及IP组再灌注后移植物的NF-κB活性明显增强,且在1、2 h达高峰,4 h后减弱,TNF-α和ICAM-1表达也随之增加;同对照组相比,IP组的NF-κB活性降低,并且在1、2 h差异具有统计学意义(P＜0.05),TNF-α和ICAM-1表达亦降低.结论 缺血预处理对于供肝的保护作用可能是通过抑制再灌注早期NF-κB的活性,减少了TNF-α和ICAM-1炎症介质的释放,从而减轻了移植物再灌注早期的炎症反应实现的.     

核因子кB诱捕物寡核苷酸对肾小管上皮细胞炎症因子表达的影响

目的 研究核因子(NF)κB结合位点诱捕物寡核苷酸(NF-κB decoy ODN)对肾小管上皮细胞的NF-κB活性及下游炎症因子表达的影响。方法 (1)鱼精蛋白-脂质体法转染NF-κB decoyODN:将NF-κB decoy ODN与鱼精蛋白、脂质体混合,转染至TNF-α刺激培养的大鼠肾小管上皮细胞内,测定转染率。(2)凝胶电泳迟滞分析测定转染 NF-κB decoy ODN后细胞NF-κB活性。(3)RT-PCR方法检测转染NF-κB decoy ODN后细胞 ET-1、iNOS、ICAM-1、VCAM-l以及MCP-1 mRNA表达水平。结果 当+/-比例为4时,鱼精蛋白-脂质体法转染率高达93.20％;转染NF-κB decoy ODN可抑制TNF-α激活的NF-κB活性,从而进一步抑制ET-1、iNOS、ICAM-1、VCAM-I和MCP-1的mRNA表达。结论(1)鱼精蛋白-脂质体法是一种不受血清影响的高效率转染方法。(2)NF-κB decoy ODN在体外通过抑制NF-κB活性,进而影响肾小管上皮细胞炎症因子的表达。     

异丙酚对脑缺血再灌注损伤大鼠海马组织细胞间粘附分子-1及核转录因子-κB表达的影响

目的观察异丙酚对大鼠脑缺血再灌注损伤后海马组织细胞问粘附分子-1(ICAM-1)及核转录因子-κB(NF-κB)基因表达的影响,探讨异丙酚脑保护作用的机制。方法雄性Wistar大鼠40只,随机分为假手术组(A组)、缺血再灌注对照组(B组)和缺血再灌注异丙酚预处理组(C组),按异丙酚用量又分为50mg·kg-1、100mg·kg-1和150mg·kg-1三个亚组,缺血前10min腹腔注射。全脑缺血10min再灌注24h时,断头处死大鼠。用逆转录-聚合酶链反应技术检测海马组织ICAM-1与NF-κBmRNA的表达,用免疫组织化学方法检测海马组织ICAM-1及NF-κB蛋白的表达,用电镜检测海马组织超微结构的改变。结果脑缺血再灌注后海马组织ICAM-1与NF-κBmRNA的表达水平增高,异丙酚可下调ICAM-1与NF-κBmRNA的表达;缺血再灌注亦可明显诱导ICAM-1与NF-κB蛋白在海马的表达,异丙酚预处理可显著抑制ICAM-1与NF-κB蛋自在海马的表达;缺血再灌注后海马线粒体超微结构发生明显损害,异丙酚可减轻海马线粒体的损伤程度。结论异丙酚可能通过抑制:ICAM-1与NF-κB基因的表达而对脑缺血再灌注损伤起一定的保护作用。     

蛛网膜下腔出血后核转录因子-kB、细胞间黏附分子-1的表达

核转录因子-kB（NF-kB）是炎症介质表达的主要转录因子，细胞间黏附分子-1（ICAM-1）是参与介导痉挛血管壁炎症反应中起关键作用的黏附分子。我们在兔蛛网膜下腔出血（SAH）模型上观察基底动脉形态学改变及其与NF—kB、ICAM-1活性表达的关系。[第一段]     

核因子κB诱捕物寡核苷酸对肾小管上皮细胞炎症因子表达的影响

目的 研究核因子(NF)κB结合位点诱捕物寡核苷酸(NF—κBdecoyODN)对肾小管上皮细胞的NF-κB活性及下游炎症因子表达的影响。方法 (1)鱼精蛋白-脂质体法转染NF-κBdecoy ODN：将NF-κBdecoyODN与鱼精蛋白、脂质体混合，转染至TNF—α刺激培养的大鼠肾小管上皮细胞内，测定转染率。(2)凝胶电泳迟滞分析测定转染NF-κBdecoy ODN后细胞NF-κB活性。(3)RT—PCR方法检测转染NF-κB decoy ODN后细胞ET-1、iNOS、ICAM-1、VCAM-1以及MCP-1mRNA表达水平。结果 当 ／一比例为4时，鱼精蛋白-脂质体法转染率高达93．20％；转染NF-κB decoy ODN可抑制TNF—α激活的NF-κB活性，从而进一步抑制ET-1、iNOS、ICAM-1、VCAM-1和MCP-1的mRNA表达。结论 (1)鱼精蛋白-脂质体法是一种不受血清影响的高效率转染方法。(2)NF—κBdecoy ODN在体外通过抑制NF-κB活性，进而影响肾小管上皮细胞炎症因子的表达。     

PS-341对小鼠重症急性胰腺炎核因子-κB活化的影响

目的观察PS-341对重症急性胰腺炎(SAP)小鼠胰腺组织核因子-κB(NF-κB)活化的影响,阐明PS-341对SAP的作用机制。方法采用连续7次腹内注射雨蛙素(每次间隔1h)及脂多糖制作小鼠SAP模型,将60只ICR雌性小鼠随机分为PS-341治疗组(注射脂多糖前0.5h腹内注射0.5mg/kgPS-341),模型对照组(注射脂多糖前0.5h腹内注射50%DMSO),空白对照组(生理盐水制模)。最后一次注射雨蛙素后2h麻醉小鼠,取血检测血淀粉酶,光镜下观察小鼠胰腺和肺脏的病理形态,测定胰腺组织中髓过氧化物酶水平,实时荧光定量PCR测定胰腺组织中黏附分子(ICAM-1)的含量,免疫印迹法(Westernblotting)检测胰腺组织中IκBα的表达,电泳迁移率实验(EMSA)测定NF-κB活性。结果 PS-341治疗组和模型对照组比较,胰腺组织中I-κB降解减少,NF-κB活性显著下降,血清淀粉酶、MPO、胰腺组织中细胞黏附分子ICAM-1的表达都明显降低(P<0.05)。胰腺和肺脏组织病理学有明显的改善(P<0.05)。结论 PS-341通过抑制胰腺内NF-κB活化而抑制炎症反应。PS-341可能是治疗SAP的一个新措施。     

核因子-κB在缺血／再灌注肠粘膜损伤中的研究进展（文献综述）

核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)是一种多向性核转录调节蛋白，参与多种炎症介质基因的转录和调控，在炎症、免疫反应中发挥重要作用。近年来研究发现肠粘膜在缺血／再灌注过程中NF-κB活化的分子机制及其与缺血／再灌注肠粘膜损伤关系的研究进展作一综述。     

NF-κB与缺血/再灌注肠粘膜损伤

核转录因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)是一种多向性核转录调节蛋白,参与多种炎症介质基因的转录和调控,在炎症、免疫反应中发挥重要作用。近年来研究发现肠粘膜缺血/再灌注过程中NF-κB对细胞因子、粘附分子等因子的基因转录调控发挥了重要作用。现就NF-κB活化的分子机制及其与缺血/再灌注肠粘膜损伤关系的研究进展作一综述。     

丙泊酚对大鼠移植肝NF-κB活化、ICAM-1、IL-1β和TNF-α表达的影响

目的 探讨丙泊酚对供肝保护的机理.方法 24只健康雄性SD大鼠,采用Kamada袖套法建立大鼠原位肝移植动物模型,随机均分为三组.移植肝再灌注前30 min,P100组和P50组分别腹腔注射丙泊酚100 mg/kg和50 mg/kg;C组腹腔注射生理盐水15 ml/kg作为对照.于肝脏再灌注6 h抽取下腔静脉血,测定谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性,ELISA法测定肝组织核因子(NF)-κB p65转录因子,免疫组织化学染色检测肝组织细胞间黏附分子(ICAM)-1、白细胞介素(IL)-1β和肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达.结果 再灌注6 h后,P100组、P50组大鼠血浆ALT、AST活性较C组明显降低(P<0.01);P50组ALT、AST活性较P100组增高(P<0.01).与C组相比,P100组和P50组在再灌注6 h大鼠肝组织NF-κB p65转录因子活化水平、TNF-α、IL-1β、ICAM-1 mRNA明显降低(P<0.01).P100组大鼠在再灌注6 h肝组织NF-κB p65转录因子活化水平、TNF-α、IL-1β、ICAM-1 mRNA表达明显低于P50组(P<0.01).结论 丙泊酚能抑制大鼠局灶性肝缺血-再灌注时NF-κB的活化,进而抑制炎症反应.这可能是其肝保护作用的机制之一.     

核因子-κB与肝损伤

目的探讨核因子κB(NF-κB)在各种形式肝损伤发生、发展中的作用。方法对近年来有关NF-κB结构、分子生物学特性和功能及其与肝损伤关系方面的文章进行综述。结果NF-κB是一种重要的核转录因子,广泛存在于机体各种细胞中。在各种原因引起肝损伤时它可被诱导活化,活化的NF-κB可通过对细胞因子、黏附因子和活化因子转录活性的调节影响免疫反应、炎症反应及细胞凋亡,从而参与肝损伤。结论NF-κB在肝损伤的发生、发展中起重要作用,将成为肝损伤治疗的新靶点。     

核因子κB——急性肺损伤基因治疗的新焦点

核因子-κB(NF-κB)是一类能与多种基因启动子部化的κB位点发生特异性结合并促进转录的蛋白质的总称。体内外实验发现，NF-κB活化与TNF-α，IL-6,IL-8,ICAM-1,VCAM-1等细胞因子的基因过度表达有关，后者在急性肺损伤(ALI)的发病中起着重要作用。NF-κB的激活可能是ALI的重要发病机制。因此，通过抑制NF-κB的激活能对ALI起到防治作用。     

心脏不停跳手术中心肌NF-κB转录活性、ICAM-1的表达及其临床意义

目的 探讨心脏不停跳与心脏停搏手术对心肌核转录因子κB（NF-κB）转录活性、细胞间黏附分子-1（ICAM-1）表达水平的影响及其临床意义。方法 将40例先天性心脏病患者随机分为两组，每组20例。组Ⅰ：行心脏不停跳心内直视手术；组Ⅱ：行常规体外循环手术（灌注冷晶体心脏停搏液）。两组患者均于心内操作前、后取右心房壁心肌组织检测NF-κB转录活性、ICAM-1表达水平，用透射电子显微镜观察心肌超微结构；分别于术前、主动脉开放或心内操作完成后1、24、48和72h测定两组心肌肌钙蛋白I（cTnI）、肌酸激酶同工酶MB（CK-MB），并对其结果进行比较。结果术后组Ⅰ NF-κB转录活性、ICAM-1表达水平较术前无显著变化，组Ⅱ NF-κB转录活性较术前升高（P〈0．01）；术后NF-κB转录活性组Ⅱ显著高于组Ⅰ（P〈0．01）。术后两组血清cTnI、CK-MB水平较术前均有不同程度升高（P〈0．01），主动脉开放后／心内操作完成后各时点，组Ⅱ均显著高于组Ⅰ（P〈0．01）。透射电子显微镜观察，组Ⅰ术后心肌超微结构无明显变化，组Ⅱ心肌损伤变化显著。结论 心脏不停跳下心内直视手术术后短期内心肌NF-κB转录活性、ICAM-1表达水平无明显变化，减轻了心肌缺血-再灌注损伤及由NF-κB激活而引起的心肌炎性反应，有较好的心肌保护效果。     

激活腺苷2A受体对大鼠小体积移植肝核因子-κB活性和炎性反应的影响

目的 观察激活腺苷2A受体(A2AR)对大鼠小体积移植肝核因子(NF)-κB活性和炎性反应的影响.方法 建立35%～45%大鼠小体积肝移植模型,通过激活/拮抗A2AR,检测NF-κB活性,磷酸化IκpB(pIκB)、p65亚基蛋白表达及其下游炎症因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、巨噬细胞炎性因子(MIP)-2、细胞间黏附分子(ICAM)-1表达水平,组织中髓过氧化物酶(MPO)活性变化.结果与对照组比较,激动组大鼠肝脏组织NF-κB活性及pIκB蛋白表达明显下调,再灌注后1、2、6 h MPO活性(U/g)(6.30±0.09比7.30±0.15、7.30±0.20比8.30±0.20、8.80±1.35比9.60±1.20)及炎性因子TNF-α(pg/mg)(700.0±57.1比967.0±145.0、800.0±57.2比1067.0±145.0、283.0±60.5比350.0±76.5)、MIP-2(pg/mg)(90.0±5.7比105.0±2.1、113.0±8.8比120.0±1.2、120.0±2.9比145.0±8.7)、ICAM-1(pg/mg)(393.0±23.3比500.0±28.9、450.0±28.9比767.0±44.1、380.0±23.1比460.0±28.8)的表达均显著下降(P均<0.05);而拮抗组NF-κB活性及pIκB蛋白显著升高,MPO活性及炎性因子TNF-α、MIP-2、ICAM-1的表达也显著升高(P均<0.05);激动、拮抗A2AR组p65差异均无统计学意义(P>0.05).结论 激活A2AR可明显下调大鼠肝组织NF-κB活性,减轻肝移植炎性损伤.     

核因子-κB--急性肺损伤基因治疗的新焦点

核顺子-κB(NF-κB)是一类能与多种基因启动子部位的κB位点发生特异性结合并促进转录的蛋白质的总称.体内外实验发现,NF-κB活化与TNF-α、IL-6、IL-8、ICAM-1、VCAM-1等细胞因子的基因过度表达有关,后者在急性肺损伤(ALI)的发病中起着重要作用.NF-κB的激活可能是ALI的重要发病机制.因此,通过抑制NF-κB的激活能对ALI起到防治作用.     

NF-κB与肝脏缺血再灌注损伤的研究进展

核因子kappaB（NF-κB）是近年发现的重要的转录因子。研究表明,肝脏缺血再灌注时,NF-κB能够转录调节诸多编码炎症介质的基因。肝脏的缺血再灌注损伤是临床肝移植术后最常见的病理生理过程之一,许多细胞因子参与了这一过程,如TNF-α、IL-1、ICAM-1、INOS等,近来许多研究表明这些细胞因子都受NF-κB的基因调控。目前较为一致的看法是肝缺血再灌注损伤过程中氧自由基等产物激活NF-κB,促使TNF-α、ICAM-1和INOS mRNA表达增强,导致肝缺血再灌注损伤。就NF-κB和肝脏缺血再灌注损伤之间的联系和作用作一综述。     

心脏不停跳手术中心肌NF-кB转录活性、ICAM-1的表达及其临床意义

目的 探讨心脏不停跳与心脏停搏手术对心肌核转录因子κB(NF-кB)转录活性、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达水平的影响及其临床意义.方法 将40例先天性心脏病患者随机分为两组,每组20例.组Ⅰ:行心脏不停跳心内直视手术;组Ⅱ:行常规体外循环手术(灌注冷晶体心脏停搏液).两组患者均于心内操作前、后取右心房壁心肌组织检测NF-кB转录活性、ICAM-1表达水平,用透射电子显微镜观察心肌超微结构;分别于术前、主动脉开放或心内操作完成后1、24、48和72h测定两组心肌肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶MB(CK-MB),并对其结果进行比较.结果 术后组ⅠNF-кB转录活性、ICAM-1表达水平较术前无显著变化,组ⅡNF-кB转录活性较术前升高(P＜0.01);术后NF-кB转录活性组Ⅱ显著高于组Ⅰ(P＜0.01).术后两组血清cTnI、CK-MB水平较术前均有不同程度升高(P＜0.01),主动脉开放后/心内操作完成后各时点,组Ⅱ均显著高于组Ⅰ(P＜0.01).透射电子显微镜观察,组Ⅰ术后心肌超微结构无明显变化,组Ⅱ心肌损伤变化显著.结论 心脏不停跳下心内直视手术术后短期内心肌NF-кB转录活性、ICAM-1表达水平无明显变化,减轻了心肌缺血-再灌注损伤及由NF-кB激活而引起的心肌炎性反应,有较好的心肌保护效果.     

应激性溃疡大鼠胃黏膜中核因子κB信号通路的活化情况

目的观察核因子κB(NF-κB)信号通路在应激性溃疡大鼠胃黏膜中的活化情况。方法采用浸水-束缚应激的方法制作大鼠应激性溃疡模型。应激前(0min)及应激5-360 min过程中设不同时相点处死大鼠,共9组,每组5只。采用凝胶电泳迁移分析(EMSA)法检测大鼠胃黏膜NF-κB与DNA的结合活性,蛋白质印迹(Western blot)法检测胃黏膜核因子抑制蛋白(hoBs)降解水平,RNA印迹杂交(Northern blot)法检测胃黏膜NF-κB下游效应分子肿瘤坏死因子(TNF)α、白细胞介素(IL)1β、细胞因子诱导中性粒细胞化学趋化因子(CINC)1、细胞间黏附分子(ICAM)1和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA的表达水平。结果应激处理15 min内可见大鼠胃黏膜NF-κB迅速呈双相模式活化,其峰值出现于应激45 min和360 min,分别为应激前正常水平的(10．6±1．3)倍和(8．9±1．2)倍(P<0.01);抗体supershift实验结果表明,活化的NF-κB主要为p50／p65异二聚体。NF-κB活化第1相和第2相分别伴有明显的IκBα和IκBβ降解。应激15-30 min时TNF-α、IL-1β、CINC-1和ICAM-1基因转录明显上调,iNOS基因上调发生在应激30-90 min时,应激360 min时这些基因表达仍持续增加。结论NF-κB信号通路活化发生于浸水-束缚应激大鼠应激早期的胃黏膜中,可能在胃黏膜促炎性基因的过度表达中发挥了重要作用。     

心肌缺血-再灌注中核因子-kB活性变化及其对中性粒细胞黏附的影响

目的　研究心肌缺血 -再灌注时中性粒细胞 (PMN)内核因子 - k B(NF- k B)活性变化与 PMN细胞间黏附分子 (ICAM- 1)表达及其 PMN黏附的关系。　方法　新西兰白兔 2 4只 ,随机分为 3组 ,每组 8只。组 1:结扎兔左冠状动脉前降支造成心肌缺血 45分钟后再开放 ;组 2 :心肌缺血同组 1,用吡咯基二硫氨基甲酸酯 (PDTC)于心肌缺血前10分钟静脉注射 (15 mg/ kg) ;对照组 :不作动脉结扎。 3组分别于缺血前、再灌注 30分钟、6 0分钟、90分钟、12 0分钟、2 40分钟和 36 0分钟时用流式细胞仪检测 PMN ICAM- 1的表达 ,凝胶电泳迁移率分析检测 NF- k B的活性 ,测定PMN与脐静脉内皮细胞黏附率 (PMN- EC- 34 0 )。　结果　组 1中 PMN ICAM- 1的表达在心肌再灌注 12 0分钟时开始升高 ,并与 PMN- EC- 34 0黏附率变化有显著的相关性 ;NF- k B活性于心肌再灌注 30分钟后开始增高 ,12 0分钟达高峰 ,之后活性逐渐下降。组 2中 PMN ICAM- 1、NF- k B活化程度和 PMN- EC- 34 0黏附率升高幅度均低于组 1(P=0 .0 41,0 .0 2 9,0 .0 34 )。　结论　心肌缺血 -再灌注时刺激 NF- k B的活化 ,启动 PMN ICAM- 1的表达而参与缺血 -再灌注损伤的发生过程     

N-乙酰-L-半胱氨酸对供者肺的保护作用

目的观察在离体肺再灌注期间应用核转录因子κB(NF-κB)抑制剂N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)对大鼠供者肺的保护作用. 方法 24只SD大鼠按完全随机方法分成实验组和对照组.12只大鼠供者肺用低钾右旋糖酐(LPD)液灌洗后于4℃保存16小时,建立离体肺再灌注模型,实验组在灌注期间应用NAC;对照组应用生理盐水,循环灌注1小时.再灌注期间每隔15分钟测定供者肺氧合后动脉血氧分压(PaO2)、气道峰压(PawP),再灌注后测定肺组织湿干比(W/D),髓过氧化物酶(MPO)活性,分别用免疫组化和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定肺组织NF-κB、细胞间黏附分子1(ICAM-1)的蛋白和信使核糖核酸(mRNA)的表达. 结果再灌注60分钟后实验组PaO2降低和PawP升高程度明显低于对照组(P<0.01或P<0.05);再灌注后,与对照组比较实验组W/D、MPO明显降低(P<0.01);NF-κB、ICAM-1的蛋白和mRNA表达明显减少(P<0.01或P<0.05). 结论再灌注期间应用NAC 能有效地抑制NF-κB和ICAM-1的表达,明显改善肺的呼吸功能.