SCID—hu人鼠嵌合模型在生物医学研究中的应用

将人的造血干细胞移植到重症联合免疫缺陷（Ｓｅｖｅｒｅ－ｃｏｍｂｉｎｃｅｄＩｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｔＤｉｓｅａｓｅ，ＳＣＩＤ）小鼠体内，构建成ＳＣＩＤ－ｈｕ人鼠嵌合小鼠模型，该ＳＣＩＤ－ｈｕ小鼠模型的构建为在体内研究脸造血，免疫系统的病理机能及人造血干细胞基因治疗提供了有力的工具。     

重建SCID小鼠免疫功能对肝癌抗原的体液免疫应答

为在ＳＣＩＤ小鼠体内获得人免疫Ｂ淋巴细胞，将１２～１４周龄的胎儿肝细胞（１～２）×１０１０／Ｌ腹腔注射于ＳＣＩＤ小鼠，然后再分次接种肝癌细胞。用ＥＬＩＳＡ法于第４，５，６周连续检测ＳＣＩＤ－ｈｕ小鼠血清人ＩｇＧ；用免疫组化ＡＢＣ法检测各种组织中的人淋巴细胞。各实验小鼠均检测到人ＩｇＧ的存在，最高为３９１μｇ／Ｌ，且随时间的延长呈上升趋势。在ＳＣＩＤ－ｈｕ小鼠肝、脾及腹腔接种瘤组织的周边，可见人ＣＤ３＋和ＣＤ２０＋的淋巴细胞。上述结果表明，用人胎肝细胞移植可在ＳＣＩＤ小鼠体内获得人淋巴细胞，并对人肝癌细胞抗原产生免疫应答，分泌一定水平的抗人肝癌的抗体。提示：用人胎肝细胞在ＳＣＩＤ小鼠体内可建立人免疫系统的部分功能。     

人类造血干细胞:具有不同增殖和自我更新能力的异质性群体

利用骨髓、外周血或脐带血来源的造血干细胞作过继免疫治疗 (ＡＩＴ)是一种行之有效的临床治疗手段。ＡＩＴ成功的关键有赖于大量的输注细胞 ,而大量细胞的获得与造血干细胞 (ＨｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃＳｔｅｍＣｅｌｌｓ,ＨＳＣｓ)密切相关。加拿大多伦多大学肿瘤 血液基因治疗小组的科学家古恩奇利用基因示踪法对输注的造血干细胞作了研究。ＨＳＣｓ经逆转录病毒转染后 ,移植到非肥胖型糖尿病性严重联合免疫缺陷小鼠 (ＮＯＤ ＳＣＩＤ)上 ,此种细胞称为ＳＣＩＤ细胞系重建细胞 (ＳＲＣｓ) ,分别在 3、6、12周取其骨髓 ,提取其ＤＮＡ ,…     

两种人化SCID小鼠的建立及其免疫应答性

将人外周血淋巴细胞（ＰＢＬ）和腹腔淋巴结淋巴细胞（ＰＬＮＬ）移植入严重联合免疫缺陷疾病（ＳｅｖｅｒｅＣｏｍｂｉｎｅｄＩｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｔＤｉｓｅａｓｅ，ＳＣＩＤ）小鼠腹腔，建立人化ＳＣＩＤ小鼠（即ＳＣＩＤ－ｈＰＢＬ，ＳＣＩＤ－ｈＰＬＮＬ）。两个月后，两种人化小鼠体内淋巴器官都可以检测到人Ｔ、Ｂ淋巴细胞分布；小鼠血清人源性ＩｇＧ和抗ＥＢ病毒壳抗原ＩｇＧ抗体水平（ＩｇＧ／ＶＣＡ）比较显示，用Ｂ９５８死细胞作为ＶＣＡ来源所诱导的实验组１０只小鼠，ＩｇＧ／ＶＣＡ阳性率为７０％（７／１０），对照组为１７％（２／１２）。１４只ＳＣＩＤ－ｈＰＬＮＬ小鼠血清内人ＩｇＧ／ＶＣＡ的几何平均滴度（ＧＭＴ）和血清ＩｇＧ浓度在１∶１０８和９６．２±５６．４μｇ／Ｌ；在另８只ＳＣＩＤ－ｈＰＢＬ中为１∶７．９和１３．８４±６．０μｇ／Ｌ。实验提示，ＳＣＩＤ－ｈＰＬＮＬ小鼠较ＳＣＩＤ－ｈＰＢＬ小鼠更适合于人源性特异ＩｇＧ的诱导。     

分枝杆菌多糖对小鼠骨髓造血祖细胞GMCFU的影响

对分枝杆菌多糖（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉａｌｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ，ＭＰＳ）促进小鼠骨髓造血祖细胞形成ＧＭＣＦＵ的量效关系进行了实验研究。结果表明，给予不同剂量的ＭＰＳ使ＧＭＣＦＵ提高的水平在一定剂量范围内（０．６～１．０ｍｇ／ｋｇ）随剂量增加而升高，剂量大于１．２ｍｇ／ｋｇ时不再继续升高。共进行３批试验，重复性好（Ｐ＞０．０５）。说明ＭＰＳ的升白作用具有一定的量效关系     

造血干细胞与β-地贫的基因治疗

造血干细胞 (ｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃｓｔｅｍｃｅｌｌｓ ,ＨＳＣｓ)是外周血中所有细胞成分的唯一来源。ＨＳＣｓ在体内的含量稀少 ,约占骨髓有核细胞总数的 0 .5 % ;主要存在于造血组织中 ,也有少量循环于外周血[1] 。实验证明 ,哺乳动物每天所需的大量成熟血细胞就是由其体内少量的ＨＳＣｓ产生的。ＨＳＣｓ是一种多能造血细胞 ,能分化出红系细胞、血小板、粒系细胞、单核血细胞和淋巴系细胞。ＨＳＣｓ可自我更新而不发生分化 ,并通过产生各系祖细胞来形成各种成熟的血细胞[2 -5] 。ＨＳＣｓ的特性可应用于移植方面 ,即把少量ＨＳＣ…     

肿瘤坏死因子 α抑制小鼠Lin Sca 1~ c kit~ 造血干细胞生长的观察

本研究旨在探讨小鼠肿瘤坏死因子（ｍＴＮＦα）对小鼠早期造血祖细胞生长的影响，并利用人ＴＮＦα（ｈＴＮＦα）选择性地结合到小鼠ＴＮＦ受体Ｉ（ＴＮＦＲＩ）这一特征，分析ＴＮＦＲＩ和ＴＮＦＲⅡ在介导ＴＮＦα调控造血祖细胞体外增殖中的作用。材料与方法１．小鼠骨髓细胞悬液的制备：取６８周龄雌性ＢＡＬＢ／ｃ小鼠骨髓，按常规法制备〔１〕。２．流式细胞仪分离Ｌｉｎ－Ｓｃａ１＋ｃｋｉｔ＋细胞：按文献报道进行〔１〕。大鼠抗小鼠ｃｋｉｔ抗体（ＡＣＫ２）由Ｓｕｄａ博士（日本）赠送，ＦＩＴＣ标记的…     

SCID小鼠体内人体肿瘤移植及其人体免疫功能重建

目的观察高转移性人肺巨细胞癌系（ＰＧ）及转染了白细胞介素６基因的ＰＧ细胞（ＰＧＴＳ７）在ＳＣＩＤ小鼠及免疫重建ＳＣＩＤ小鼠体内的生长及转移行为,阐明ＰＧＴＳ７自分泌的白细胞介素６增强人体免疫的抗肿瘤作用。方法皮下移植人体肿瘤,部分受体鼠同时经腹腔注射人体外周血淋巴细胞。观察成瘤潜伏期、成瘤率、生长速度、体积、肺及淋巴结转移率和小鼠血清中人体免疫球蛋白（ＨＩｇ）的含量。结果全部动物见肿瘤生长,但ＰＧＴＳ７在免疫重建鼠体内成瘤潜伏期延长,肿瘤体积小、淋巴结转移率低,而血清中ＨＩｇ含量高。结论（１）ＳＣＩＤ小鼠亦为研究ＰＧ及ＰＧＴＳ７生长及转移的良好动物。（２）ＰＧＴＳ７自分泌白细胞介素６能刺激小鼠体内人淋巴细胞增殖、活化,增加ＨＩｇ的产生,降低肿瘤生长及淋巴结转移。     

rhGM—CSF与病毒性疾病治疗研究进展

粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（ｇｒａｎｕｌｏｃｙｔｅｍａｃｒｏｐｈａｇｅｃｏｌｏｎｇｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇｆａｃｔｏｒ，ｒｈＧＭＣＳＦ）是最早被纯化的造血生长因子。它可显著地协调多种细胞因子的功能，调动机体整个免疫系统的功能，增强免疫原性，提高抗体滴度和抑制多种肿瘤细胞，从而受到医学生物界的关注。本文主要阐述了ｒｈＧＭＣＳＦ与病毒性疾病治疗方面的一些新进展。     

用SCID小鼠可提供高产量的抗人HLA单抗

用ＳＣＩＤ小鼠可提供高产量的抗人ＨＬＡ单抗［英］／ＰｉｓｔｉｌｌｏＭｐ…／／ＨｕｍａｎＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ。－１９９２，２５（１）。－２５６～２５９ＳＣＩＤ（严重联合免疫缺陷症）小鼠缺乏功能性Ｔ，Ｂ淋巴细胞，但仍有ＮＫ细胞功能。最近，ＳＣＩＤ小鼠已用...     

不同载体对癌胚抗原DNA疫苗诱导小鼠产生抗-CEA水平的影响

目的　将癌胚抗原（ＣＥＡ） 基因克隆入载体ｐｃＤＮＡ３ 及ＶＲ１０１２ 中,比较两套重组质粒在体内表达并诱导小鼠产生抗ＣＥＡ 的差别。方法　通过基因工程技术构建两套ＣＥＡ 真核表达载体ｐｃＤＮＡ３ＣＥＡ 及ＶＲ１０１２ＣＥＡ,将重组质粒肌注ＢＡＬＢ／ｃ 小鼠,运用ＥＬＩＳＡ 法检测不同时间肌肉组织表达ＣＥＡ 水平及血清中抗ＣＥＡ 的产生。结果　ｐｃＤＮＡ３ＣＥＡ 在肌肉内呈低表达ＣＥＡ,最高时为０－１８ｎｇ／ ｍｇ 肌肉（ 胫前肌） ,而ＶＲ１０１２ＣＥＡ 表达量为０－９３ｎｇ／ ｍｇ 肌肉,但两重组质粒诱导小鼠产生的抗ＣＥＡ 的水平相差不大,均大于１ ２００ 。结论　ＤＮＡ 疫苗诱导的免疫反应不仅取决于其在体内的表达抗原量,质粒结构中的免疫激活序列（ＩＳＳ） 对免疫反应也起重要的调节作用。     

病毒介导造血干细胞基因转移

造血干细胞（Ｈａｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃｓｔｅｍｃｅｌ，ＨＳＣ）是体细胞基因治疗尝试的主要靶细胞之一。造血干细胞基因转移具极大的疾病治疗潜能，可应用于治疗造血细胞及非造血系统的遗传性和获得性疾病。由于造血系统的组织形式十分严密，在造血干细胞群体内以长期重建细胞（Ｌｏｎｇ－ｔｅｒｍｒｅｐｏｐｕｌａｔｉｎｇｃｅｌ，ＬＴＲＣ）为靶细胞而进行的基因转移，能保证其被基因修饰的成熟终末细胞的连续补充，且其被转移的基因能长期有效表达     

小鼠造血干细胞因子的cDNA克隆化及在大肠杆菌表达

造血干细胞因子（ＳＣＦ）是一种多功能造血生长因子，与其它造血生长因子协同作用，刺激不同分化阶段的造血细胞增殖和分化。本文采用ＲＴ－ＰＣＲ技术从新生ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠胸腺组织克隆了ＳＣＦ膜外功能区ｃＤＮＡ，进而在大肠杆菌表达出具有生物学活性的重组蛋白。     

乙型肝炎病毒pre S基因真核表达质粒诱导小鼠特异性抗体反应的研究

本文构建了含有ＨＢｓＡｇ ｐｒｅ Ｓ区基因的真核表达载体ｐＣＭＶ４ｐｒｅ Ｓ, 经大量提取质粒并纯化后, 肌肉注射Ｂａｌｂ／ｃ 小鼠, 共免疫３ 次, 间隔两周, 结果有３／７ 的小鼠血清抗ｐｒｅ Ｓ２ 抗体呈阳性。     

G-CSF、GM-CSF的临床应用现状

粒细胞集落刺激因子（Ｇｒａｎｕｌｏｃｙｔｅ ｃｏｌｏｎｙ－ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ ｆａｃｔｏｒ, Ｇ－ＣＳＦ）、粒巨噬细胞集落刺激因子（ Ｇｒａｎｕｌｏｃｙｔｅ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ｃｏｌｏｎｙ－ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ ｆａｃｔｏｒ,ＧＭ－ＣＳＦ）分别是促粒系、粒－单系造血祖细胞增殖、分化及成熟,并增强其成熟细胞功能的特异造血调控生长因子。重组ＤＮＡ技术的发展,使得利用基因工程方法大量生产细胞因子成为可能。目前,Ｇ－ＣＳＦ、ＧＭ－ＣＳＦ基因重组产品已广泛应用于临床。在血液病的治疗,造血干细胞移植及恶…     

抑制性底物杂交(SSH)技术研究BXSB小鼠的差异表达基因

目的：利用抑制性底物杂交技术（Ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｓｕｂｔｒａｃｔｉｖｅ ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ，ＳＳＨ），以ＢＸＳＢ狼疮小鼠为模型，研究系统性红斑狼（ＳＬＥ）发病相关基因。方法：分离ＢＸＳＢ和Ｃ５７－ＢＬ－６小鼠骨髓细胞，ｍＲＮＡ，反转录构建ｃＤＮＡ文库，利用技术研究ＢＸＳＢ小鼠差异表达基因。结果：获得了１２个阳性克隆，其中有３个克隆编码ＴＣＲ、ＭＨＣⅡ类分子及逆转录病毒基因表达产物，均     

应用S基因转染的Sp2/0细胞作为靶细胞研究HBV基因疫苗的细胞免疫应答

构建编码ＨＢｓＡｇ 蛋白的重组真核表达质粒ｐＣＲ３－１Ｓ作为ＨＢＶ 基因疫苗, 免疫接种Ｂａ１ｂ／ｃ 小鼠。以重组质粒ｐＣＲ３－１Ｓ转染的Ｓｐ２／０ 细胞作为靶细胞, 采用５１Ｃｒ ４ｈ 释放法, 体外检测免疫小鼠的淋巴细胞杀伤功能。结果显示, 与空载体对照组相比较, ＨＢＶ基因疫苗可诱导Ｂａｌｂ／ｃ 小鼠产生ＨＢＶ 特异性细胞毒性Ｔ 细胞应答（ Ｐ＞ ０－０５） , 提示以Ｓｐ２／０ 基因转染的细胞作为靶细胞, 检测免疫Ｂａｌｂ／ｃ 小鼠淋巴细胞的杀伤功能是可靠的。     

体内IL－12对血管生成的抑制作用

体内ＩＬ－１２对血管生成的抑制作用［英］／ＥｍｉｌｅＥＶｏｅｓｔ…Ｃａｎｃｅｒｉｎｓｔｉｔｕｔｅ．－１９９５８７．－８已知ＩＬ－１２在一些鼠类肿瘤模型中具有抗肿瘤生成和抗转移作用，但ＵＩＬ－１２在体外没有直接的抗瘤细胞作用，而且在ＳＣＩＤ，免疫缺陷的...     

JAK 3STAT和免疫系统的关系

细胞因子在造血细胞的生长和分化、免疫调节及宿主防御机制中发挥着重要作用。多数细胞因子是通过与一类受体亚家族相互作用而发挥其广泛生物学作用。随着对细胞因子受体结构的认识不断加深和ＪＡＫＳＴＡＴ信号通路的发现,分子免疫学家们愈来愈意识到ＪＡＫＳＴＡＴ在细胞因子信号传递中的主导作用。ＪＡＫ３ 突变导致的重症联合免疫缺陷（ＳＣＩＤ） 以及各种ＪＡＫｓ 或ＳＴＡＴｓ分子缺陷小鼠模型证明,ＪＡＫＳＴＡＴ对免疫系统的发育和功能有重要的影响。     

人重组粒细胞集落刺激因子突变体的构建、表达和其体内外生物学活性研究

目的为提高人重组粒细胞集落刺激因子（ｈｕｍａｎｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｇｒａｎｕｌｏｃｙｔｅｃｏｌｏｎｙ－ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇｆａｃｔｏｒ,ｒｈＧ－ＣＳＦ）的稳定性和活性,对ｒｈＧ－ＣＳＦ进行改造和体内、外活性研究。方法利用定向点突变技术,将人重组粒细胞集落刺激因子第１７位游离的半胱氨酸编码序列突变为丙氨酸序列,ＤＮＡ序列分析证明后,在大肠杆菌中表达突变蛋白。利用Ｇ－ＣＳＦ依赖细胞株ＮＦＳ－６０,对在不同温度及在人血浆中保存的Ｇ－ＣＳＦ蛋白（Ｇ－ＣＳＦ－Ａｌａ１７）和野生型的Ｇ－ＣＳＦ进行活性测定。腹腔注射后小鼠外周血白细胞计数检测其体内生物学活性。结果ＤＮＡ序列分析表明１７位半胱氨酸突变为丙氨酸,并在大肠杆菌中表达成功Ｇ－ＣＳＦ－Ａｌａ１７。纯化的突变蛋白对ＮＦＳ－６０细胞具有刺激活性;与野生型Ｇ－ＣＳＦ相比,在各种温度储存的突变蛋白保留更高的活性,与人血浆孵育５０小时后突变蛋白仍保持活性;小鼠一次性体内注射突变蛋白后外周血白细胞数明显高于野生型Ｇ－ＣＳＦ。结论Ｇ－ＣＳＦ突变体（Ｇ－ＣＳＦ－Ａｌａ１７）较野生型的Ｇ－ＣＳＦ具有更高的体外稳定性和体内造血刺激活性。