不同基因型戊型肝炎病毒重组蛋白的抗原性分析

目的：探讨不同基因型和亚型戊型戊型肝炎病毒（HEV）重组蛋白氨基酸序列的变化对HEV抗原性的影响。筛选出最佳的HEV抗原用于戊型肝炎的免疫诊断。方法：用已知序列的HEV基因工程表达蛋白作为包被抗原,对已知血清标本进行酶联免疫吸附试验测定。结果：6种不同抗原对30份正常献血者血清无抗原性,对17份急性戊型肝炎病人血清和5份实验感染动物血清均呈阳性反应,但血清抗体滴度的高低与所有抗原的基础型有关,尤其是受到该抗原第76位氨基酸变化的影响。结论：多基因型HEV抗原混合物是HEV免疫诊断的最佳抗原。     

潍坊市流行性出血热病毒分离及抗原性分析

为深入开展流行性出血热流行病学和病原学方面的工作，作者应用Ｖｅｒｏ－Ｅ６细胞培养技术，从７份褐家鼠肺中分离到１株流行性出血热病毒，从１１份ＥＨＦ急性期病人血清中人到５株ＥＨＦＶ，从３份急性期病人尿中分离到１株ＥＨＦＶ。     

龙葵总生物碱抗喘作用机制的实验研究

目的 探讨龙葵总生物碱抗喘作用机制。方法 （1）观察龙葵总生物碱对大鼠肥大细胞体外脱颗粒的影响。（2）观察龙葵总生物碱对致每豚鼠离体回肠纵肌血三烯D4（LTD4）受体的阻断作用。结果 龙葵总生物碱5μg/ml以上即可明显抑制大鼠肥大细胞脱颗粒，0.1μg/ml以上即可明显阻断豚鼠回肠纵肌LTD4受体，且具有剂量依赖性。结论 龙葵总生物碱可通过稳定肥大细胞膜，抑制致敏介质组胺及LTD4等的释放及阻断LTD4受体而发挥抗喘作用。     

消毒药、械对HBsAg抗原性破坏研究及抗原性破坏试验的进展

<正> 乙型肝炎病毒(HBV)系一能引起乙型病毒性肝炎的病原体,其传播途径广泛,传染性强,在外环境中稳定,如HBV的血浆即使干燥在不锈钢表面仍可存活1周以上。医院口腔科器材周转快、污染严重,是乙型肝炎、艾滋病等血液传播性疾病的重要传播媒介。据调查,口腔科器械HBsAg的阳性率高达9.4％。因此消毒已成为预防和控制病毒性肝炎传播与流行的重要而又有效的措施。近年来,以HBsAg为指标评价对HBV     

HSV—1包膜糖蛋白G重组蛋白的纯化与抗原性分析

目的：纯化原核表达的HSV－1包膜糖蛋白G重组蛋白并对其抗原性进行分析。方法：应用亲和层析法纯化重组蛋白，Western印迹和ELISA法检测分析其抗原性。结果：Western-Blot检测15份HSV－1 IgM阳性血清，其中12份血清可与重组蛋白发生反应；ELISA法检测535份血清，与商品化同类试剂盒相比符合率为89．7％。结论：该重组蛋白检测HSV－1活动性感染有较高的应用价值。     

急性传染性非典型肺炎病毒M蛋白片段抗原性鉴定及其B细胞表位分析

目的:鉴定原核表达的重组急性传染性非典型肺炎(SARS)病毒M蛋白N端1～43氨基酸(aa)的抗原性,并筛选其B细胞表位。方法:GlutathioneSepharose4B亲合层析柱纯化M融合蛋白,用SARS患者恢复期血清分别通过间接ELISA方法和Westernblot鉴定M蛋白片段的抗原性。为了定位B细胞表位,进一步将M蛋白片段截短为部分重叠的2段表达,分别表达含M蛋白N端1～28aa、16～43aa的融合蛋白,通过Westernblot检测B细胞表位所在位置。结果:获得了纯化的M融合蛋白;间接ELISA和Westernblot结果均证实,M蛋白片段有很强的抗原性;并进一步明确B细胞表位位于M蛋白N端1～15aa片段中。结论:原核表达的SARS病毒M蛋白片段N端1～15aa含有一个很强的B细胞表位,这将有助于SARS诊断试剂的研制,也可为多肽疫苗的研制提供帮助。     

新疆不同宿主来源细粒棘球蚴囊液可溶性蛋白质组分抗原性分析

应用免疫印渍法对新疆羊、人、牛、骆驼源细粒橡球蚴囊液可溶性蛋白质组分的抗原性进行比较分析。十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)显示羊、人、牛、骆驼源细粒棘球蚴囊液各含有多个蛋白质组分,免疫印渍法显示包虫病人血清主要识别囊液中65、56、38、35、30、25、23、16、12和10KD蛋白质抗原成分,以38KD蛋白质抗原组分反应性最强。泡球蚴病人、绦虫病人和一些非寄生虫病患者血清可广泛地与38KD组分发生交叉反应。16、12和10KD蛋白质抗原组分敏感性较弱但特异性较强,仅与泡球蝴病人血清发生交叉反应,是棘球属特异的。     

肺炎链球菌候选蛋白疫苗ClpP的保守性和抗原性

目的:评价酪蛋白裂解酶P(CIpP)作为候选疫苗的保守性和抗原性,分析在不同血清型肺炎链球菌(SPN)中的表达情况.方法:以TIGR4型SPN的ClpP基因序列设计引物,分别以12株不同血清型SPN的基因组DNA为模板,对ClpP基因进行聚合酶链反应(PCR)扩增、胶回收产物与PMD-18克隆载体连接后进行测序,运用生物信息学方法对其核苷酸及推测的氨基酸序列及抗原性进行分析,并利用West-ern Blot方法检测12株不同血清型SPN的ClpP蛋白的表达情况.结果:12株不同血清型SPN的ClpP基因序列和Gen-Bank数据库对已公布的TIGR4型SPN的ClpP基因一致性>99.0%,推测的氨基酸序列一致性>99.5%.Western Blot结果显示anti-ClpP多克隆抗体与12型SPN的菌体蛋白能够起交叉反应.结论:CIpP蛋白在不同型SPN之间同源性高,在不同型SPN菌株中均有表达.ClpP是一个具有前景的SPN候选蛋白疫苗因子.     

天然与破壁松花粉对大鼠生长发育影响的实验研究

目的 :探讨天然与破壁松花粉对幼年大鼠生长发育的影响 ,观察天然松花粉在消化道中的形态变化及破壁率 (% ) .方法 :离乳SD幼鼠 4 0只 ,随机分为两组 (天然松花粉组、破壁松花粉组 ) ,每组 2 0只 ,雌雄各半 .分别在饲料中添加 5 0 %天然和破壁松花粉 ,各组饲料基本等热、等氮及主要营养素相等 ,喂养 4 0d ,观察幼鼠生长发育各项指标 ,显微镜检粪便中花粉形态及计算天然松花粉的破壁率 (% ) .结果 :天然和破壁松花粉对幼鼠体重、增重无显著差异 (P >0 0 5 ) ,天然松花粉组进食量显著高于破壁松花粉组 (P <0 0 5 ) ,食物利用率和蛋白质利用率极显著和显著低于破壁松花粉组 (P <0 0 1,P <0 0 5 ) ,天然松花粉在消化道内破壁率为 6 5 9%～ 6 7 1% ,低于破壁松花粉破壁率 .天然松花粉组肾上腺脏器系数显著高于破壁松花粉组 (雌 :P <0 0 1,雄 :P <0 0 5 ) .结论 :大量摄入未破壁的天然松花粉对幼鼠生长发育有一定影响 ,大量天然松花粉在消化道内破壁率为 6 5 9%～ 6 7 1% ,天然松花粉刺激肾上腺增生原因有待深入研究 .     

松花粉对人胚肺二倍体成纤维细胞p16及p21基因表达的影响

[目的]研究松花粉对衰老细胞(2BS)内细胞周期蛋白激酶抑制剂p16INK4a及p21WAF1基因mRNA表达的影响。[方法]2BS细胞从28代开始培养,随机分成年轻对照组(30代)、衰老模型组(56代)、松花粉中剂量(120mg/dl)组(56代)、松花粉高剂量(240mg/dl)组(56代)。流式细胞术分析细胞周期,检测G1期比例;半定量RT-PCR法测定p16INK4a、p21WAF1mRNA的表达。[结果]衰老模型组细胞出现典型的细胞体积增大,形态不规则;松花粉处理组细胞,体积回缩,形态趋于规则。G1期细胞比例松花粉中剂量组(72.73%±1.76%)和高剂量组(64.15%±0.87%)较衰老模型组(81.33%±3.43%)显著下降(P<0.05)。细胞周期蛋白激酶抑制剂p16INK4amRNA的表达量在松花粉中剂量组(0.3483±0.0078)和高剂量组(0.3222±0.0055)较衰老模型组(0.3974±0.0078)表达灰阶明显下调。p21WAF1mRNA的表达量在松花粉中剂量组(0.7692±0.1749)和高剂量组(0.4451±0.0363)较衰老模型组(1.1767±0.2782)。[结论]松花粉具有改善细胞衰老的作用,其分子机制可能与下调衰老细胞内细胞周期蛋白激酶抑制剂p16INK4a及p21WAF11mRNA的表达从而改善衰老细胞G1期阻滞有关。     

野苋菜花粉变应原组分分析

目的：分析野苋菜花粉变应原提取液的蛋白组分。方法：应用SDS-PSGE及薄层扫描。结果：发现其有四条蛋白条带：64．2KD、占34．3％;34．0KD、占49．1％;20．6KD、占6．0％;13．0KD、占10．4％。结论：野苋菜花粉变应原提取液以34．0KD、64．2KD的蛋白为主。     

卵磷脂花粉对实验性高血脂大鼠的降血脂效应及其机制研究

目的 研究卵磷脂花粉对高血脂模型动物血脂的影响.方法 建立大鼠高脂模型,试验前检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量.根据TC、TG和HDL-C水平及体重随机分成5组:阴性对照组、高脂模型组和1.25、2.50、3.75g/kg 3个剂量组,预防性给予卵磷脂花粉30天,再次检测TC、TG和HDL-C含量.结果 与模型对照组比较,卵磷脂花粉中、高剂量组TC降低,高剂量组TG降低,高剂量组HDL-C升高,差异有显著性.结论 卵磷脂花粉对模型大鼠有良好的降低血清TC、TG的作用,对实验性高血脂的形成具有一定的预防控制效应.     

松花粉对人肺成纤维细胞增殖活性影响的实验研究

目的 :研究松花粉对人肺成纤维细胞增殖的影响 ,探讨中药松花粉可能的作用机理。方法 :松花粉作用于人肺成纤维细胞不同时间后观察细胞生长速度 ,应用台盼蓝对细胞进行染色 ,测定细胞死亡率。松花粉浓度分别为 10 0、2 0 0、40 0、80 0mg·L-1,以未经松花粉处理的细胞为对照。结果 :松花粉作用于人肺成纤维细胞能够明显促进细胞群体倍增水平 ,降低死亡细胞数目 ,且呈剂量依赖关系。结论 :松花粉可通过促进细胞生长而影响细胞增殖。     

VD_3结合蛋白的分离纯化

目的 :纯化VD3 结合蛋白 (DBP)。方法 :利用DBP的相对分子质量及电荷性质 ,分别用阳离子交换剂、阴离子交换剂和凝胶过滤等分离目的蛋白 ,SDS PAGE鉴定纯度 ,并进行活性分析。结果 :分离到相对分子质量为 5 80 0 0的蛋白质 ,SDS PAGE呈单一区带。结论 :成功分离纯化出DBP。     

内毒素对肥大细胞脱颗粒释放组胺和类胰蛋白酶的影响

目的通过体外分离培养大鼠腹腔肥大细胞（RPMC）,进而探讨内毒素（endotoxin,ET）对RPMC脱颗粒释放组胺和类胰蛋白酶的影响。方法将悬浮培养的RPMC分为5组：①无ET处理组;②0.5μg/mlET处理组;③1μg/mlET处理组;④2μg/mlET处理组;⑤4μg/mlET处理组。37℃孵育2h,收集RPMC上清,荧光法测定RPMC培养上清中组胺含量;专性底物α-N-苯甲酰-DL-精氨酸-P-硝基苯胺（BAPNA）测定RPMC培养上清中类胰蛋白酶含量,分析不同浓度ET对RPMC释放组胺和类胰蛋白酶的影响。结果不同浓度ET处理组与无ET处理组相比RPMC脱颗粒现象明显;不同浓度ET处理组刺激RPMC释放组胺和类胰蛋白酶的量均高于无ET处理组（P〈0.05）,与ET剂量依赖性不明显（P〉0.05）,并且给予1μg/mlET处理时组胺和类胰蛋白酶的释放量最高。结论ET体外可刺激RPMC脱颗粒释放组胺和类胰蛋白酶,但与ET剂量依赖性不明显。     

松花粉对雄性衰老大鼠性腺轴分泌功能的影响

目的：探讨松花粉预防用药对雄性衰老大鼠性腺轴分泌功能的影响。方法：选用8周龄雄性SD大鼠60只,体重180～220g,随机分为正常对照组、模型组、松花粉预防中（Pz）、低（Pd）剂量组,每组15只。除正常组外其余各组大鼠均采用D－半乳糖连续腹腔注射建立亚急性衰老大鼠模型,预防组在腹腔注射D－半乳糖的同时灌胃松花粉,用药50d。检测各组血清胰岛素样生长因子－1（IGF－1）、黄体生成素（LH）、促卵泡激素（FSH）、睾酮（T）及下丘脑促性腺激素释放激素（GnRH）的含量。结果：模型组大鼠血清中LH、FSH及下丘脑中GnRH含量明显升高,IGF－1、睾酮含量明显下降,与正常组比较差异有显著性（P〈0．05）;松花粉中、低剂量组均能不同程度降低大鼠血清LH、FSH及下丘脑中GnRH含量,提高IGF－1、睾酮浓度,与模型组比较,差异显著（P〈0．05）。结论：松花粉可以预防雄性衰老大鼠性腺轴分泌功能紊乱,对雄性衰老大鼠性腺轴有较为明显的保护作用。     

敏康片对变应性鼻炎大鼠一般情况及血浆组胺的影响

目的探讨中药敏康片对变应性鼻炎大鼠一般情况和血浆组胺的影响。方法除正常组外,其余大鼠用卵清蛋白造成变应性鼻炎模型,随机分为模型组、西药对照组(酮替芬组)、中药对照组(辛芩冲剂组)、敏康片小剂量组、敏康片大剂量组;用药1周后观察大鼠一般情况及鼻黏膜肥大细胞数、脱颗粒细胞数、血浆组胺的变化。结果造模组有明显的喷嚏、流鼻涕和搔鼻等症状,鼻黏膜肥大细胞数、脱颗粒细胞数、血浆组胺明显升高。各治疗组均明显改善,其中敏康片大剂量组在大鼠的一般情况变化和体征方面与辛芩冲剂组疗效相当,敏康片小剂量组在降低肥大细胞数、脱颗粒细胞数及血浆组胺方面较明显,但与大剂量组和辛芩冲剂组之间没有统计学意义。结论敏康片能够改善变应性鼻炎大鼠的一般症状和体征,其治疗作用可能与减少鼻黏膜肥大细胞数及脱颗粒细胞数,降低血浆组织胺含量有关。