助孕3号方对肾虚黄体抑制流产大鼠细胞因子的干预作用

目的:建立肾虚黄体抑制流产大鼠模型,从细胞因子角度探讨模型大鼠流产机理,观察中药的干预作用,并进一步探讨其作用机制.方法:以羟基脲加米非司酮建立肾虚黄体抑制流产大鼠模型,观察比较正常妊娠组、助孕3号方组、黄体酮组、模型组大鼠孕第11天血清IL(白细胞介素)-2、IL-10、P(孕激素)及N0(一氧化氮)含量,计算胚胎吸收率.结果:除正常妊娠组外,其余各组大鼠使用羟基脲后均有不同程度的毛松、毛干枯、倦卧、活动力下降、纳食减少、大便稀烂、体重减轻等肾虚症状.助孕3号方组体重减轻程度较模型组轻微,差异有显著性意义(P＜0.05),而黄体酮组体重减轻程度与模型组比较,差异无显著性意义(P＞0.05).与模型组比较,正常妊娠组、助孕3号方组大鼠血清IL-2水平、IL-2/IL-10比值明显降低(P＜0.05).与模型组比较,助孕3号方组、黄体酮组及正常妊娠组血清P含量均明显升高(P＜0.05),血清NO含量均明显降低(P＜0.05).与模型组比较,助孕3号方组、黄体酮组、正常妊娠组大鼠胚胎吸收率均明显下降(P＜0.05),而助孕3号方组、黄体酮组、正常妊娠组间胚胎吸收率比较,差异均无显著性意义(P＞0.05).结论:助孕3号方能够通过抑制Th(T细胞辅助)1型细胞因子表达,抑制NO,促进P分泌,多环节共同调节Th1/Th2型细胞因子间的平衡,发挥其保胎作用.     

助孕3号方对肾虚黄体抑制流产大鼠母胎界面Th1／Th2细胞因子的影响研究

目的研究助孕3号方对大鼠母胎界面Th1／Th2型细胞因子的影响。方法将SD大鼠随机分为5组，每组8只。多力玛组以1．5mg／（kg·d）剂量灌胃给药，模型组与空白对照组灌服等容积生理盐水，助孕3号方中、低剂量组分别以7．08，3．54g／（kg·d）剂量灌胃给药。检测各组大鼠蜕膜组织Th1型（IL2、IFN-γ）／Th2型（IL-4、IL-10）细胞因子mRNA的表达差异。结果助孕3号方具有纠正肾虚流产大鼠母胎界面中Th1／Th2平衡偏移的作用。结论助孕3号方可降低母体免疫排斥，增强母胎免疫保护，最终降低肾虚黄体抑制模型大鼠的流产率，使得妊娠得以正常发展。     

助孕3号方对肾虚黄体抑制流产大鼠母胎界面Th1/Th2细胞因子的影响研究

目的研究助孕3号方对大鼠母胎界面Th1/Th2型细胞因子的影响。方法将SD大鼠随机分为5组,每组8只。多力玛组以1.5 mg/(kg.d)剂量灌胃给药,模型组与空白对照组灌服等容积生理盐水,助孕3号方中、低剂量组分别以7.08,3.54 g/(kg.d)剂量灌胃给药。检测各组大鼠蜕膜组织Th1型(IL-2、IFN-γ)/Th2型(IL-4、IL-10)细胞因子mRNA的表达差异。结果助孕3号方具有纠正肾虚流产大鼠母胎界面中Th1/Th2平衡偏移的作用。结论助孕3号方可降低母体免疫排斥,增强母胎免疫保护,最终降低肾虚黄体抑制模型大鼠的流产率,使得妊娠得以正常发展。     

补肾中药对肾虚黄体抑制流产大鼠的实验研究

探讨助孕3号方拆方补肾组方及其补肾君药菟丝子对妊娠大鼠肾虚黄体抑制病证结合模型的治疗作用.结果提示:本模型成功地模拟了临床患者肾虚自然流产的各种基本病理变化;助孕3号方拆方补肾组方及君药菟丝子均具有补肾助孕,改善肾虚症状,提高孕激素水平,上调蜕膜孕激素受体的基因表达进而增加孕激素受体的含量,降低流产率等作用;补肾组方更可增强黄体功能,促进胚胎发育,作用较菟丝子显著.     

寿胎丸对肾虚-黄体抑制大鼠流产模型黄体功能的影响

目的:探讨应用寿胎丸对肾虚黄体-抑制(病证结合模型)大鼠流产模型黄体功能的影响。方法:应用羟基脲和米非司酮(RU486)稳定复制SD大鼠肾虚-黄体(病证结合)大鼠流产模型;采用寿胎丸对其进行干预,肉眼观察子宫病变,记录胚胎数,计算流产率;化学发光法检测血清雌二醇(E2)、孕酮(P)的水平。应用实时荧光定量(qRT-PCR)分析大鼠流产模型孕激素受体(PR mRNA)在蜕膜表达的影响。结果:寿胎丸能显著降低大鼠的流产率、增加胚胎数;提高血清E2及P内分泌水平,上调PR mRNA表达,增强黄体功能。结论:寿胎丸对肾虚黄体-抑制(病证结合模型)大鼠流产模型黄体功能功能具有良好的改善作用,可通过提高激素水平,上调PR mRNA表达,增强黄体功能,维持妊娠,起到补肾安胎的作用。     

助孕3号方防治大鼠自然流产的机理研究

目的：研究助孕3号方防治肾虚、脾虚型大鼠自然流产的机理。方法：(1)以羟基脲与米非司酮(RU486)建立肾虚加黄体抑制模型,利血平与RU486建立脾虚加黄体抑制模型。(2)观察助孕3号方对病证结合模型大鼠孕酮(P)分泌、蜕膜孕激素受体(PR)和雌激素受体(ER)的影响;酶联免疫法检测血清卵泡刺激素、雌二醇和P,免疫组化法检测蜕膜PR,光镜观察子宫、卵巢的形态学改变。(3)助孕3号方对大鼠离体与在体子宫兴奋性的影响,采用水提液与含药血清进行离体子宫兴奋试验。结果：(1)助孕3号方能提高肾虚加黄体抑制与脾虚加黄体抑制模型大鼠蜕膜PR阳性率,与单纯黄体抑制模型组比较差异均有显著性(P<0．05)。(2)助孕3号方水提液和含药血清均能降低离体子宫肌条收缩的强度(P<0．05),在体子宫兴奋试验提示助孕3号组子宫收缩强度显著下降(P<0．05)。结论：补肾和补肾健脾中药保胎的主要作用环节是提高靶细胞PR以及对子宫平滑肌的舒缓作用。     

补肾健脾方干预对肾虚－黄体抑制流产模型大鼠内分泌－免疫的影响

目的：研究补肾健脾方干预对肾虚-黄体抑制流产模型大鼠内分泌-免疫的影响。方法：SPF级SD大鼠随机分为3组,每组15只。A组为补肾健脾方干预组,用羟基脲加米非司酮加补肾健脾方水提液灌服;B组为肾虚-黄体抑制流产模型组,用羟基脲加米非司酮灌服;C组灌服生理盐水。酶联免疫法检测大鼠血清孕酮（P）和子宫蜕膜组织的细胞因子白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-10（IL-10）、转化生长因子-β1（TGF—β1）的浓度。结果：A组、B组流产率均显著高于C组（P〈0．01）;A组流产率显著低于B组（P〈0．05）。A组第12天P显著高于B组（P〈0．01）,A组显著低于c组（P〈0．05）：B组显著低于C组（P〈0．01）。A、B组的IL-2显著高于c组（P〈0．05,P〈0．01）,B组的IL-10显著低于C组（P〈0．01）．A组的IL-10显著高于B组（P〈0．01）。Thl／Th2细胞因子浓度B组显著高于A、C组（P〈0．01）;Thl／Th3细胞因子B组显著高于A、C组（P〈0．01）,A组和C组比较有差异（P〈0．05）。结论：补肾健脾方通过提升血清孕激素分泌,促进母胎界面妊娠保护性Th2、Th3型细胞因子的分泌．调节免疫失衡．诱导免疫耐爱．从而发挥抗流产效应．     

助孕合剂治疗黄体功能不全性不孕流产的临床及实验研究

目的：观察助孕合剂对肾虚偏阳,夹有肝郁型的黄体功能不全性不孕、流产的疗效,并探讨其作用机制。方法：应用助孕合剂治疗202例黄体功能不全性不孕症患者,并以安宫黄体酮作对照,观察助孕合剂对模型大鼠血清PRL、P、E2水平和子宫及卵巢的影响。结果：助孕合剂对肾虚肝郁所出现的各种症状有显著改善作用,并对子宫内膜分泌反应不良亦有显著改善作用,BBT明显改善,与治疗前比E2、P均有显著升高,同时能显著使高PRL下降。202例不孕症患者受孕率为38．6％,好转率为55．90％,总有效率达94．51％。实验研究表明,助孕合剂具有降低泌乳素的作用,可明显升高大鼠血清雌二醇,与模型组比较差异显著,并能降低大鼠子宫的脏器系数,即子宫、卵巢、重量明显增加。结论：助孕合剂是治疗肾虚偏阳,夹有肝郁型的黄体功能不全性、流产不孕的有效方药。     

补肾助孕方对肾虚薄型子宫内膜大鼠内膜容受性的影响及机制研究

目的：观察补肾助孕方对肾虚薄型大鼠子宫内膜容受性的影响,探讨中药的作用机制。方法：雌性SD大鼠30只,随机分为对照组10只,造模组20只,通过羟基脲灌胃建立肾虚合并着床障碍型子宫内膜大鼠模型。随后将20只造模组大鼠随机分为模型组和补肾助孕方组,每组10只。对照组、模型组均灌服蒸馏水10 mL/kg;补肾助孕方组灌服中药0.3 mg/kg,均1次/d,持续3个动情周期(15 d)。在第3个动情期后处死大鼠,酶联免疫吸附法检测动脉血中雌二醇、孕酮的水平。取子宫标本,光镜下观察子宫内膜形态,测量子宫内膜厚度、子宫间质厚度、子宫腺体数、子宫血管数。免疫组化法检测各组内膜组织中整合素β3和白血病抑制因子的表达。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠动脉血雌二醇、孕酮的水平减少;子宫内膜腺体稀少,上皮变薄,间质致密,血管少;子宫内膜厚度、子宫间质厚度、子宫腺体数、子宫血管数均减少;整合素β3和白血病抑制因子的表达减少。补肾助孕方组较之模型组,有明显的改善。结论：补肾助孕方可改善肾虚合并着床障碍型状态大鼠子宫内膜的容受性,可能与提高血中激素水平,增加内膜中整合素aβ3和白血病抑制因子的表达有关。     

活血助孕方对输卵管炎性不孕大鼠sICAM-1表达的研究

目的：探讨中药活血助孕方对慢性炎性不孕大鼠可溶性细胞粘附因子（sICAM-1）的影响及其疗效机理,并比较高剂量组、中剂量组、低剂量组三种剂量的疗效。方法：以Wista雌性大鼠为受试对象,用混合菌接种法复制输卵管炎性阻塞性不孕模型,80只大鼠随机分为正常对照组、模型组、活血助孕方低剂量组、中剂量组、高剂量组,治疗后用免疫组化法检测sICAM-1的表达。结果：活血助孕方高、中、低剂量组能不同程度恢复模型大鼠抑制sICAM-1表达。活血助孕方高剂量组有效率明显高于活血助孕方中剂量组和低剂量组。结论：用混合菌接种法可以复制大鼠输卵管炎性阻塞性不孕模型;活血助孕方能改善输卵管炎性大鼠输卵管结构及功能,活血助孕方能够抑制sICAM-1表达,从而发挥其抗炎症作用。     

扶正活血方对脑出血大鼠TGF-β1、VEGF蛋白表达的影响

目的：观察实验性脑出血大鼠脑组织中转化生长因子-β1（TGF-β1）和血管内皮生长因子（VEGF）表达及扶正活血方的干预,研究扶正活血方治疗脑出血的可能机制。方法：随机将75只健康成年清洁级雌性Wistar大鼠分为3组,各25只,分别为正常组、模型组、扶正活血方治疗组,Ⅷ型胶原酶立体定位后注入苍白球诱导大鼠脑出血模型,分为出血后12小时、1天、2天、7天、14天共5个时相,制作常规切片,免疫组化SP法检测TGF-β1蛋白和VEGF蛋白表达。结果：模型组及治疗组同时期TGF-β1、VEGF蛋白阳性表达显著高于正常组（P〈0．01）;治疗组同时期TGF-β1、VEGF蛋白表达高于模型组（P〈0．01）;治疗组在出血后2天TGF-β1、VEGF蛋白表达达高峰,与1天、7天两两比较呈显著差异（P〈0．05）。结论：扶正活血方能上调脑出血大鼠脑组织TGF-β1和VEGF蛋白表达,尤其在出血后2天最高,以促进脑出血损伤的修复,可用于脑出血辅助性治疗。     

肾虚黄体-抑制大鼠流产模型补肾安胎药效的初步评价

探讨应用寿胎丸对肾虚黄体一抑制（病证结合模型）大鼠流产模型补肾安胎药效的影响。方法：应用羟基脲和米非司酮（RU486）稳定复制SD大鼠肾虚一黄体（病证结合）大鼠流产模型;采用寿胎丸对其进行干预,肉眼观察子宫病变,记录胚胎数,计算流产率;化学发光法检测血清雌二醇（E2）、孕酮（P）的水平。结果：寿胎丸能够明显降低大鼠的流产率、增加胚胎数;提高血清E2及P水平。结论：寿胎丸对肾虚黄体一抑制（病证结合模型）大鼠流产模型具有良好的改善作用,可通过提高激素水平,增强黄体功能,维持妊娠,起到补肾安胎的作用。     

“补肾助孕方”治疗黄体功能不全30例临床研究

目的:观察补肾助孕方治疗肾虚肝郁型黄体功能不全(LPD)的临床疗效。方法:将60例患者随机分为治疗组与对照组:治疗组口服补肾助孕方,对照组口服地屈孕酮。治疗3个月经周期后观察疗效。结果:治疗组治愈率60%,显著优于对照组的36.67%;且治疗组能明显改善患者BBT高温相图形,提高血清孕酮水平,降低高泌乳素水平。结论:补肾助孕方治疗黄体功能不全有较好的临床疗效。     

肾炎3号方对肾小球系膜细胞TGF-β1及其mRNA表达的影响

目的 :观察肾炎 3号方对肾小球系膜细胞TGF β1及其mRNA表达的影响。方法 :应用血清药理学方法制备含药血清 ,作用于正常胎牛血清培养和脂多糖刺激下的系膜细胞 ,利用ELISA和RT -PCR方法 ,观察肾炎 3号方对肾小球系膜细胞TGF β1及其mRNA表达的影响。结果 :肾炎 3号方能显著抑制系膜细胞TGF β1的分泌及其mRNA的表达。结论 :肾炎 3号方抑制TGF β1及其基因表达可能是其治疗系膜增生性肾炎防止肾小球硬化的机制之一。     

抗纤灵方对阿霉素肾纤维化大鼠TGF-β信号通路的影响

目的:观察抗纤灵方对阿霉素肾纤维化大鼠TGF-β信号通路的影响,探索其作用机制。方法:48只雄性SD大鼠,随机分为假手术组、模型组、抗纤灵方组、科素亚组;采用右肾摘除加重复注射阿霉素建立肾纤维化模型。治疗8周后处死,检测24 h尿蛋白定量观察肾功能;苏木素-伊红(HE)染色观察肾组织病理改变;Real Time-PCR检测肾组织TGF-β_1、Smad3 mRNA表达水平。结果:模型组大鼠24 h尿蛋白定量、肾小球硬化指数及TGF-β_1、Smad3 mRNA表达水平明显高于假手术组(P0.05);抗纤灵方组及科素亚组大鼠24 h尿蛋白定量、肾小球硬化指数及肾组织TGF-β_1、Smad3 mRNA表达水平明显低于模型组(P0.05或P0.01);抗纤灵方组各指标与科素亚组比较,差异均无统计学意义(P0.05)。结论:抗纤灵方可能通过抑制TGF-β_1/Smad3信号通路抑制阿霉素大鼠肾纤维化的进程。     

助孕汤治疗黄体功能不全性不孕、流产的临床观察

助孕汤为我国著名中医妇科专家夏桂成教授的经验方,具有滋肾助阳、疏肝解郁之功效。我们临床用于治疗因黄体功能不全而致的不孕和流产患者,取得了较好的疗效,现总结如下。1　临床资料1 .1　一般资料2 0 2例均为本院妇科不孕症专科门诊患者,其中年龄最大者43岁,最小者2 3岁;病程     

寿胎丸对肾虚-黄体抑制流产模型大鼠雌激素水平的影响

目的 探讨寿胎丸对肾虚-黄体抑制流产模型(病证结合模型)大鼠雌激素水平的影响.方法应用羟基脲和米非司酮制备SD大鼠肾虚-黄体抑制流产模型.给模型大鼠寿胎丸进行干预,肉眼观察子宫病变,记录胚胎数,计算流产率;化学发光法检测血清雌二醇(E2)、孕酮(P)的水平.结果寿胎丸能明显降低大鼠的流产率,增加胚胎数,提高血清E2和P水平.结论寿胎丸对肾虚-黄体抑制流产模型大鼠具有良好的保胎作用,其通过提高雌激素水平、增强黄体功能,维持妊娠,发挥补肾安胎的作用.     

补肾活血方对肾虚血瘀型不明原因复发性流产未孕患者分泌晚期血清中VEGF、TGF-β1的影响

【目的】探讨补肾活血方对肾虚血瘀型不明原因复发性流产（URSA）未孕患者分泌晚期血清中转化生长因子β1（TGF-β1）与血管内皮生长因子（VEGF）的影响。【方法】 收集80例未孕的肾虚血瘀型URSA患者,随机分为试验组和对照组,每组各40例;同时收集40例正常未孕妇女作为正常组。对照组给予阿司匹林肠溶片口服治疗,试验组给予补肾活血方口服治疗,疗程为4周。采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定试验组与对照组患者治疗前后分泌晚期外周血中泌乳素（PRL）及胰岛素样生长因子结合蛋白1（IGFBP-1）、VEGF及TGF-β1水平,并与正常组比较。【结果】（1）治疗期间,试验组剔除2例,脱落3例;对照组剔除8例,脱落12例。最终试验组35例、对照组20例纳入研究。（2）治疗前,试验组与对照组的URSA未孕患者外周血中VEGF、TGF-β1水平及蜕膜化标志因子PRL、IGFBP-1水平均明显低于正常组（P＜0.01）,治疗4周后,上述各项指标水平均较治疗前明显升高（P＜0.05或P＜0.01）,且试验组的升高作用均明显优于对照组（P＜0.05或P＜0.01）。（3）相关性分析结果显示：VEGF、TGF-β1与PRL、IGFBP-1均呈正相关,差异均有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）。【结论】 分泌晚期血清中VEGF、TGF-β1水平与URSA的发生有关,VEGF、TGF-β1含量过低可能影响子宫内膜蜕膜化过程,从而导致流产发生。补肾活血方可提高肾虚血瘀型URSA患者VEGF、TGF-β1水平,从而促进蜕膜化标志物PRL、IGFBP-1的表达,保证蜕膜化过程的正常进行,以维持正常妊娠,且效果优于西药阿司匹林。     

补肾活血方对卵巢早衰小鼠颗粒细胞TGF-β1、TGF-βRII、Smad2/3表达的影响

目的探索补肾活血方(紫石英、补骨脂、菟丝子等)对免疫性卵巢早衰(POF)小鼠卵泡壁颗粒细胞转化生长因子(TGF)-β1、TGF-βRII、Smad2/3蛋白表达的影响。方法 Balb/c雌性小鼠皮下多点注射小鼠透明带3建立免疫性POF模型,POF小鼠分成模型组,阳性组(戊酸雌二醇)和补肾活血方低、中、高剂量组。干预30 d后,卵巢组织作苏木精-伊红(HE)染色,免疫组化法与蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测卵泡壁颗粒细胞和卵巢组织TGF-β1、TGF-βRII、Smad2/3的蛋白表达。结果与模型组相比,补肾活血方各剂量组、阳性组卵巢成熟卵泡数目明显增多,闭锁卵泡数目减少。卵泡壁颗粒细胞和卵巢组织TGF-β1、TGF-βRII、Smad2/3蛋白表达在补肾活血方各剂量组、阳性组中明显高于在模型组中(P0.05)。结论补肾活血方能通过上调颗粒细胞TGF-β1、TGF-βRII、Smad2/3的蛋白表达改善卵巢功能。     

补肾助孕方对黄体功能不全模型大鼠卵巢内质网应激的调节

目的 探讨补肾助孕方对米非司酮诱导的黄体功能不全（LPD）模型大鼠卵巢内质网应激（ERS）的调控机制。方法 使用随机数表法将50只SD大鼠分为空白组，模型组，地屈孕酮（0.02 g·kg^-1）组，补肾助孕方低（0.08 g·kg^-1）、高剂量（0.24 g·kg^-1）组。使用蛋白免疫印迹法（Western blot）及实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测各组大鼠卵巢免疫球蛋白重链结合蛋白（BIP），蛋白激酶R样内质网激酶（PERK），肌醇必需酶-1（IRE-1），活性转录因子6（ATF6），C/EBP同源蛋白（CHOP）蛋白和mRNA表达水平，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测各组大鼠血清孕酮（P）和雌二醇（E₂）水平。结果 与空白组比较，模型组BIP，PERK，CHOP蛋白表达显著升高（P<0.01），PERK及CHOP mRNA表达明显下降（P<0.05）；而IRE-1，ATF6蛋白表达，IRE-1，BIP，ATF6 mRNA表达，血清E₂，P水平差异无统计学意义。与模型组比较，地屈孕酮组CHOP蛋白表达显著降低（P<0.01），而PERK，IRE-1，BIP，ATF6蛋白表达，PERK，IRE-1，BIP，ATF6，CHOP mRNA表达及血清E₂，P水平差异无统计学意义；补肾助孕方低剂量组CHOP蛋白表达显著降低（P<0.01），CHOP mRNA表达水平明显升高（P<0.05），而PERK，IRE-1，BIP，ATF6蛋白和mRNA表达及血清E₂，P水平差异无统计学意义；补肾助孕方高剂量组PERK，BIP，CHOP蛋白表达显著降低（P<0.01），CHOP mRNA表达水平显著升高（P<0.01），而IRE-1和ATF6蛋白表达，PERK，IRE1，BIP，ATF6 mRNA表达及血清E₂，P水平差异无统计学意义。结论 补肾助孕方可以改善黄体功能不全，其机制可能与缓解内质网应激作用有关。