SELDI-TOF-MS技术在消化道肿瘤早期诊断中的应用

蛋白质组学技术的发展为发现新的生物标记物提供了机会.表面增强激光解析电离飞行时间质谱(Surface enhanced laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry)就是一种新兴的有发展前途的蛋白质组技术.此文就其在消化道肿瘤早期诊断研究中的应用作一综述.     

SELDI-TOF-MS技术及其在糖尿病研究中的应用

表面加强激光解吸电离-飞行时间-质谱（SELDI-TOF-MS）技术是蛋白质组学的重要检测技术之一，不同性质的芯片能捕获各种不同性质的蛋白质。该技术具有高通量、高灵敏度、自动化等特点，可直接应用于临床，在基础研究和临床应用方面发展迅速。但是，在糖尿病及其并发症的研究中应用不多。本文就其技术原理和目前在糖尿病研究中应用的现状作一介绍。SELDI-TOF-MS技术将为糖尿病及其并发症的研究和防治提供新的平台。     

SELDI-TOF-MS技术在肝癌诊断和介入治疗评价中的价值

目的:建立肝癌血清学诊断模型,探讨评估SELDI-TOF-MS技术在肝癌诊断和介入治疗评价中的价值.方法:用弱阳离子交换芯片(CM10芯片)和表面增强激光解吸电离飞行时间质谱仪(surface-enhanced laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry,SELDI-TOF-MS)技术,测定60例肝癌患者和60例正常对照者的血清蛋白质指纹图谱,应用BiomarkerWizard统计软件比较肝癌组和正常对照组血清蛋白质表达的差异性,采用Biomarker Pattern软件分析数据建立肝癌诊断模型,比较介入治疗前后血清蛋白质指纹图谱的差异性.结果:在质荷比(M/Z)为2000-10000范围内,和正常血清比较,肝癌的差异峰有3个(M/Z为4182Da、5710Da、6992Da;P<0.01),4182Da和5710Da下调,6992Da上调.用这3个差异蛋白峰建立肝癌诊断模型,诊断肝癌的灵敏度为93.3%(28/30),特异度为90.0%(27/30),正确率为91.7%(55/60),约登指数为0.833.差异蛋白峰(M/Z4182Da)在介入术后1mo明显上调(P<0.05).结论:应用SELDI-TOF-MS技术进行肝癌血清蛋白质指纹图谱分析,建立肝癌诊断树模型,对肝癌的诊断有一定的价值;筛选出的差异蛋白峰对肝癌的介入治疗评估有一定的应用价值.     

肝癌细胞信号转导通路研究的最新进展

肝癌具有发病率高、病情隐匿、预后凶险等临床特征。经大量研究证实,某些信号转导通路的激活或抑制与肝癌的发生、发展等有着紧密的联系。现对近年来有关肝癌信号转导通路的文献进行回顾,就此研究进展作一综述。肝癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,占恶性肿瘤死亡率的第二位。具有病情隐     

SELDI-TOF-MS在筛选肝癌高发家系与无癌家系血清蛋白差异中的应用

目的：比较肝癌高发家系患者和无癌家系患者血清蛋白质谱图,探寻两者间的血清蛋白差异。方法用表面增强激光解吸电离-飞行时间质谱技术（ SELDI-TOF-MS）及CM10蛋白芯片对25例肝癌高发家系患者和25例无癌家系患者血清样本进行分析,将获得的血清蛋白质指纹图谱,用计算机软件进行比较分析,建立高发家系患者和无癌家系患者的比较筛选模型。结果肝癌高发家系组与无癌家系组共有15个蛋白质差异有统计学意义。筛选出4个蛋白峰建立诊断模型的灵敏度为96.0％（24/25）,特异度为88.0％（22/25）,准确率为92.0％（46/50）。结论肝癌高发家系患者组和无癌家系患者组的血清存在一定的差异蛋白, SELDI技术在特异性蛋白生物标志分子的筛选等方面具有较好的临床应用前景。     

SELDI-TOF-MS技术在HD患儿血清蛋白质标记物检测中的应用

目的从先天性巨结肠（HD）患儿血清蛋白质中筛选特异的蛋白质标记物,构建诊断HD的血清蛋白质指纹图谱模型。方法采用表面增强激光解吸电离—飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS）技术检测132例份血清标本（来自HD术前患儿64例份,术后40例份,术后复发5例份,对照组23例份）的蛋白质质谱,用支持向量机分析数据。结果筛选出质荷比（m/z）为3221.7、5639.2、6884.2的三个蛋白质标记物,其在HD术前组低表达（分别为2.96&#177;1.17、15.57&#177;8.87、4.09&#177;1.78）,在对照组高表达（分别为4.95&#177;0.99、30.31&#177;6.18、8.31&#177;3.07）,两组相比,P均〈0.01;在HD术后组高表达（分别为3.76&#177;2.15、27.98&#177;7.22、9.06&#177;2.14）,与术前组相比,P均〈0.01,与对照组相比,P均〉0.05;5例术后复发者三种蛋白质标记物表达强度（分别为3.18&#177;0.951、3.86&#177;10.69、3.95&#177;1.83）,与术前组相比,P均〉0.05。结论采用SELDI-TOF-MS结合支持向量机构建的血清蛋白质指纹图谱模型可用于HD的诊断及判断其是否完全根治。     

蛋白芯片联合SELDI-TOF-MS在卵巢癌诊断中的应用

目的用蛋白芯片联合表面增强激光解析离子化/飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS）分析卵巢癌与对照血清中的差异表达蛋白来筛选与卵巢癌早期诊断和预后相关的肿瘤标志物。方法采用联合SELDI-TOF-MS及WXC2蛋白质芯片,对21例卵巢癌患者（实验组）及24例健康妇女（对照组）血清标本进行检测。结果在相对分子质量0~50 000 Da范围内,检测出69个差异蛋白峰。卵巢癌差异表达明显（P〈0.01）的蛋白峰8个,其中高表达的波峰3个,质荷比分别为5 927.6,8 719.3和11 729.8 Da,低表达的波峰5个,质荷比分别为4 073.8,4 158.4,4 186.7,4 290.2和8 162.5 Da。其中11 729.8 Da蛋白峰已经鉴定为血清淀粉样蛋白A1（SAA1）。结论SELDI-TOF-MS联合蛋白质芯片能够直接检测出卵巢癌患者血清中相对特异的蛋白峰,对于卵巢癌的诊断具有一定的临床意义。     

SELDI-TOF MS技术在胰腺癌早期诊断中的应用

胰腺癌是目前预后最差的恶性肿瘤,早期诊断被认为是改善胰腺癌预后的重要出路之一.表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI- TOF MS)技术,是近年来发展起来一种新的高通量蛋白质组学研究方法,本文就SELDI-TOF MS技术相关的原理、特点,在胰腺癌早期诊断中的应用新进展和未来的发展趋势作一综述.     

细胞信号转导与功能蛋白质组学在肝纤维化发生机制研究中的新动向

目前研究已证实,在肝纤维化发生机制中,涉及到细胞-细胞间、间质-细胞间的复杂激活调节网络,而HSC细胞内信号转导在其中起关键作用.现已发现的信号转导通路包括转化生长因子-β1(transforming growth factor, TGF-β1)[1]、血小板源性生长因子(platelet-derived growth factor, PDGF)[2,3]以及整合素(Integrin)[4]等相关信号转导通路,其中以PDGF和TGF-β信号转导通路研究较为深入.     

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱在临床微生物检验的应用进展

<正>基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF)是一种新型的质谱技术,具有灵敏度高,样品用量少,分析速度快的特点。目前,MALDI-TOF已开始应用于多项微生物的检测,为临床疾病的诊疗提供有效的指导。1 MALDI-TOF鉴定微生物的特点及优势MALDI-TOF系统由基质辅助激光解吸电离离子源(MALDI)、飞行时间质量分析器(TOF)和检测器组成,属于一种软电离技术,适用于混合物及生物大分子的测定〔1〕。其原理是利用激光照射待测物与基质形成的共结晶薄膜,通过基质吸收能量并将能量转移至待测物分子,使分子解离成离子,利用离子在     

细胞信号转导在结直肠锯齿状通路中的作用

锯齿状通路是有别于经典“腺瘤-癌”通路的特殊结直肠癌发生通路,一经提出便引起广泛关注。目前其分子机制研究主要集中于丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）通路及 Wnt 信号通路异常、CpG 岛甲基化表型（CIMP）以及微卫星不稳定（MSI）等方面。此文就锯齿状通路相关信号转导的研究进展作一综述。     

两种蛋白芯片筛选血清蛋白标志物的对比分析

目的 从CM10、IMAC3-Cu这两种芯片中选择适合应用于血清蛋白质指纹图谱研究的芯片种类.方法 选择慢性乙型肝炎患者、肝硬化患者和健康人血清各13例,采用CM10、IMAC3-Cu两种蛋白芯片,经SELDI-TOF-MS技术对样本进行检测比较.结果 在2000-50000Da范围内,CM10和IMAC3-Cu芯片在各实验组捕获的有效蛋白峰数的差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 CM10能得到更多慢性乙型肝炎患者、肝硬化患者和健康人的有意义的蛋白峰值,能更好的应用于血清蛋白组学的实验研究.     

SELDI质谱技术在胰腺癌诊断中的应用进展

胰腺癌是一种高度恶性肿瘤,目前其发病率在国内外均呈上升趋势,而且病死率极高,严重威胁人类健康[1].研究表明,早期发现、早期诊断是有效治疗胰腺癌,提高手术后生存率以及改善预后的关键[2,3].肿瘤发生早期,其蛋白质表达上会出现细微但重要的组合改变[4].     

LCM、IMB联合MALDI-TOF-MS技术在恶性卵巢上皮瘤相关标志物分离检测中的应用

目的排除混杂细胞的干扰,获取人卵巢上皮瘤细胞,分离、检测特异相关标志物。方法采用激光捕获显微切割（LCM）技术获取无间质混杂的人正常、良性、恶性卵巢上皮瘤细胞,分别提取细胞总蛋白,用免疫磁珠（IMB）技术和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）技术分离检测黑色素瘤激活因子CXCL1及IL-8（1~77 aa）、IL-8（6~77 aa）和IL-8（9~77 aa）。结果利用LCM获取的卵巢上皮细胞数量级达106~107。IMB可将CXCL1及不同亚型IL-8从卵巢正常、良性和恶性上皮瘤细胞的蛋白裂解液中分离并用于MALDI-TOF-MS检测。结论 LCM、IMB联合MALDI-TOF-MS技术可以准确有效地获取卵巢上皮癌细胞的特异标志物。     

应用SELDI-TOF-MS技术建立肝癌筛选血清蛋白质指纹图谱模型

目的:建立肝癌筛选血清蛋白质指纹图谱模型．方法:用表面加强激光解析电离飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS)及WCX2蛋白芯片获得新发肝癌、肝硬化患者和正常人血清的蛋白质指纹图谱,用计算机软件进行比较分析,建立肝癌的筛选模型．结果:肝癌患者与健康对照组血清蛋白质指纹图谱之间有5个标志蛋白(4477,8943,5181, 8617,13 761 Da)在肝癌患者血清中高表达,肝癌患者与肝硬化患者血清蛋白质指纹图谱之间2个标志蛋白(4477,13 761 Da)在肝癌患者血清中高表达,1个标志蛋白(4097 Da)在肝癌患者血清中低表达．SELDI-TOF-MS技术的特异性(60／60,100％);敏感度(18／20,90％)．分析系统筛选出4477,8943,13 761,4097 Da标志蛋白建立的肝癌诊断模型．结论:建立的血清蛋白质指纹图谱模型能够区分肝癌与非肝癌患者,SELDI-TOF-MS在肝癌的诊断及肿瘤特异性蛋白质生物标志分子的筛选等方面具有一定价值．     

应用SELDI-TOF-MS技术建立SLE患者血清蛋白质指纹图谱筛选模型

目的筛选系统性红斑狼疮（SLE）血清蛋白质指纹图谱模型,并探讨其意义。方法用表面加强激光解析电离飞行时间质谱（SEIDI-TOF-MS）技术获得SLE、类风湿关节炎患者（RA组）、健康人群（对照组）血清中的蛋白质谱,用计算机软件比较分析,建立SLE血清蛋白质指纹图谱筛选模型,并验证该模型诊断SLE的灵敏度和特异性。结果SLE组与非SLE组共有11种蛋白质表达有显著性差异;以其中4个蛋白质生物标志物（5 739 Da、10 832 Da、4 650 Da、15 797 Da）组建的筛选模型,经双盲法验证其灵敏度为84.4%,特异性为90.3%。结论应用SEIDI-TOF-MS技术建立的血清蛋白质指纹图谱模型在SLE的早期诊断中具有一定价值。     

SELDI-TOF-MS技术在结直肠腺瘤血清蛋白质指纹图谱筛查模型建立中的应用

目的应用表面增强激光解吸/离子化飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS）技术建立结直肠腺瘤（CRA）患者血清蛋白质指纹图谱筛查模型。方法随机选取CRA 42例、结直肠良性疾病（CBD）36例及正常人（HC）44例的血清标本组成建模组,应用SELDI-TOF-MS检测其蛋白质指纹谱,采用Biomarker Wizard及Biomarker Patterns软件分析建模组中各类人群血清中的差异蛋白后,建立CRA筛查最优分类树模型;另随机抽取血清标本70例（CRA及CBD各20例、HC 30例）组成测试组,盲法验证该模型对CRA的筛查效能。结果成功建立了结直肠腺瘤筛查分类树模型。测试模式下,该模型的诊断准确率87.70%、灵敏度71.43%、总特异度96.25%、阳性预测值90.91%。盲法验证该模型诊断准确率88.57%,灵敏度60.0%,总特异度100.0%,阳性预测值100.0%。结论应用SELDI-TOF-MS技术成功建立了CRA筛查模型,该模型敏感性与特异性较高。     

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱在幽门螺杆菌检测中的应用

目的 建立并评价基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)对幽门螺杆菌(Hp)的鉴定能力及Hp耐药性菌株对检测结果的影响.方法 MALDI-TOF MS自建库中的Hp来源于样本库中经传统方法鉴定和药物敏感试验并已进行全基因测序确认的菌株,随机取其中对药物全敏感的Hp菌株10株,用MALDI-TOF M...     

SELDI技术应用于肿瘤疗效监测的初步研究

目的应用表面增强的激光解吸电离飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS）技术对卵巢癌及喉癌患者治疗前后血清进行疗效相关标志分子的筛选,评价此技术在肿瘤疗效监测方面的可行性。方法应用SELDI-TOF-MS技术分别对20例卵巢癌患者化疗前后及51例喉癌患者手术前后血清蛋白质指纹图谱进行分析,用Biomarker WizaM软件对结果进行统计学分析。结果卵巢癌患者化疗后血清中质荷比（m／z）4475的蛋白峰（14／20）较化疗前表达增高;喉癌患者术前血清高表达m／z13741蛋白峰,术后21例患者该蛋白表达降低,其中11例（11／21）术后m／z13741、m／z5192和m／z15100的蛋白峰表达均较术前显著下降（P〈0．01）。结论SELDI-TOF-MS技术能灵敏的检测肿瘤患者手术及化疗前后血清中的差异蛋白峰。该技术的微创、灵敏、微量等特点将可能在肿瘤疗效监测及肿瘤的个体化治疗研究中具有较好的应用前景。     

WCX磁珠联合MALDI-TOF-MS技术在结直肠癌诊断中的应用

目的:比较结直肠癌与正常人血清蛋白质谱的变化,筛选特异性蛋白标志物,建立结直肠癌诊断分类树模型.方法:收集血清样本133例(其中结直肠癌67例,正常人66例),随机分为建模组和验证组.运用弱阳离子纳米磁珠(magnetic bead-weak cation exchange,MB-WCX)联合基质辅助激光解吸离子飞行质谱(matrix-assistedlaser desorption/ionization time-of-flight massspectrometry,MALDI-TOF-MS),建立结直肠癌与正常人血清蛋白质谱.用Flex Analysis2.4软件收集数据,应用ClinproTools2.2软件对建模组34例结直肠癌和33例正常人血清差异蛋白质谱进行定量分析,应用Genetic Algorithm算法建立结直肠癌诊断模型,应用所获取的诊断模型对验证组样本(33例结直肠癌和33例正常人)进行分类诊断,以评价诊断模型的诊断价值.结果:通过比较分析结直肠癌与正常人血清蛋白质谱,发现共有33个差异蛋白峰(P<0.05),其中在结直肠癌中表达上调25个,表达下调8个.利用其中5个差异峰(Mr分别为759,3316,4645,4248,2645Dr)建立诊断模型,获得了94.12%(32/34)敏感性和96.97%(32/33)的特异性,经独立样本双盲验证,其灵敏度为93.94%(31/33),特异度为96.97%(32/33).结论:基于磁珠分离和MALDI-TOF-MS技术能直接检测出结直肠癌患者血清差异表达蛋白,建立的诊断模型具有较高的敏感性和特异性,对提高结直肠癌的诊断具有一定的临床意义.