食管癌组织中人乳头瘤病毒的检测

用人乳头瘤病毒保守基因的通信引物和１６、１８型特异性引物，通过聚合酶链反应，检测２０例正常新鲜活检食管粘膜，４０例新鲜食管癌组织昨５１例石蜡包埋的食管癌组织标本的ＨＰＶＤＮＡ，在２０例正常人食管粘膜组织中ＨＰＶＤＮＡ检出率９．１％，癌组织中为３６．２％，磷癌和腺癌分别为３４．７％、４７．１％，鳞癌以１６型感染为主，腺癌以１８型为主，但肿瘤分化程度与ＨＰＶ感染无关，结果提示：ＨＰＶ感染与食砭 癌的发     

食管癌组织中人乳头瘤病毒的检测

用人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）保守基因的通用引物和１６、１８型特异性引物，通过聚合酶链反应（ＰＣＲ），检测２０例正常新鲜活检食管粘膜，４０例新鲜食管癌组织和５１例石蜡包埋的食管癌组织标本的ＨＰＶＤＮＡ，在２０例正常人食管粘膜组织中ＨＰＶＤＮＡ检出率９．１％，癌组织中为３６．２％，鳞癌和腺癌分别为３４．７％、４７．１％，鳞癌以１６型感染为主，腺癌以１８型为主。但肿瘤分化程度与ＨＰＶ感染无关。结果提示：ＨＰＶ感染与食管癌的发生有一定关系，不同型别的ＨＰＶ与不同组织的亲和性有差别。     

食管癌组织中人乳头瘤病毒的PCR检测

应用ＰＣＲ对汕头地区６０例食管癌石蜡包埋标本进行人乳砂瘤病毒ＤＮＡ序列检测。结果：ＨＰＶ－ＤＮＡ总检出率为６３．３％，ＨＰＶ－６、１１、１６、１８型的检出率分别为３０．０％，４０．０％，３０．０％和１０．０％，其中多重感染占阳性例数的６０．５％。初步结果表明，汕头地区食管癌组织中有较高的ＨＰＶ感染率，此与食管癌的发生可能有密切关系。     

聚合酶链反应检测卵巢癌中人乳头瘤病毒DNA的研究

用聚合酶链反应检测了１５例卵巢癌新鲜标本，结果发现人乳头瘤病毒ＤＮＡ阴性，该结果可能与下列因素有关：①与卵巢的解剖、生理特性有关，卵巢不象子宫颈及子宫内膜直接受到ＨＰＶ的侵犯，上生殖道感染ＨＰＶ的机会较下生殖道少；②与人乳头瘤病毒的增殖条件有关，ＨＰＶ主要侵犯复层拄状上皮与鳞状上皮交界处，病毒仅在一定分化程度的上皮角蛋白细胞内增殖，卵巢上皮为单层立方上皮，是否不适宜ＨＰＶ的增殖，尚需做更深入的研究。     

内蒙古地区食管癌组织中人乳头瘤病毒的检测

目的:了解内蒙古地区HPV感染与食管癌的关系,探讨HPV在食管癌病因学中的作用.方法:应用通用引物PCR法检测食管癌标本中HPV DNA.结果:在来自内蒙古地区41例食管癌标本中,HPV DNA检出率为零.结论:内蒙古地区食管癌发生可能与HPV感染无关.     

内蒙古妇女宫颈癌组织中人乳头瘤病毒的PCR检测

目的了解我国宫颈癌高发区妇女宫颈癌组织中人乳头瘤病毒感染状况,探讨HPV感染与宫颈癌的关系.方法以PCR和多重PCR法检测76例宫颈癌组织中HPV感染及型别分布状况.结果HPV阳性率为80.0%.HPV感染率在不同临床分期及不同病理分级宫颈癌组织间无显著性差异(P＞0.05).宫颈鳞癌中HPV 16阳性率为63.4%,HPV 18阳性率为5.6%,在宫颈腺癌中HPV 18的阳性率高于鳞癌,差异有显著性(P＜0.05).结论HPV感染是宫颈癌的主要致病因素,HPV 16和宫颈鳞癌密切相关,HPV18和宫颈腺癌密切相关,HPV感染对宫颈癌的进展及组织分化无影响.     

100例食管癌中的人乳头瘤病毒感染检测

目的　检测食管鳞癌中的人乳头瘤病毒 (HPV)感染 ,探索HPV与食管癌大体生长方式的关系。方法　应用通用引物PCR法和多重PCR法检测 10 0例食管癌组织标本中的HPV感染。结果　共检测出HPV阳性 2 6例 (2 6 / 10 0 ) ,按照食管癌的病理大体分型 ,其中溃疡型食管癌中HPV阳性 5例 (5 / 2 5 )、蕈伞型中阳性 3例 (3/ 2 5 )、缩窄型中阳性 12例 (12 / 2 5 )、髓质型中阳性 6例 (6 / 2 5 )。对 2 6例HPV阳性标本中的 2 0例进行了多重PCR检测 ,发现HPV6 / 11型 6例、HPV16型 11例、HPV18型 3例。结论　我国食管癌中存在HPV感染 ,存在HPV感染的食管癌可能并不是在HPV引起的湿疣样病变基础上发展而来。     

应用聚合酶链反应检测宫颈分泌物人乳头瘤病毒

聚合酶链反应(PCR)检测人乳头瘤病毒(HPV),研究比较多。本实验主要检测宫颈分泌物人乳头瘤病毒6、11、16、18、33型,因其各型所致疾病互有交叉,故挑选一段针对HPV,各型共同的DNA序列,用PCR技术检出该核酸片段。在宫颈炎、阴道炎、尖锐湿疣病人中阳性率达31.25％(20/64)。说明人乳头瘤病毒对已婚育妇女普遍易感。检测HPV对宫颈炎、阴道炎、尖锐湿疣等妇科疾病的诊断治疗及宫颈癌的防治具有重要意义。     

实时荧光聚合酶链反应检测宫颈人乳头瘤病毒在宫颈癌筛查中的应用

人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染已被证明是宫颈癌的直接病因[1],Woodman等[2]研究发现其归因危险性达到90%以上.有研究证明,高危型HPV检测筛查宫颈病变的敏感性为90%～95%[3-9],因此,宫颈HPV检测已成为宫颈癌筛查及治疗后随访的重要内容.本研究评估了实时荧光聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)方法用于筛查宫颈病变的临床应用价值,以期为今后的临床应用提供参考.     

应用聚合酶链反应方法检测宫颈癌患者的人乳头瘤病毒

目的探讨人乳头瘤病毒（human papillomavirus,HPV）在宫颈癌的发生中的作用。方法采用聚合酶链反应（PCR）-核酸内切酶分型检测宫颈癌活检组织中HPV-DNA,对来源于子宫颈癌患者的石蜡包埋组织标本进行四种常见生殖道人乳头瘤病毒（HPV）（HPV6、11、16、18）的检测和分型。结果在宫颈癌活检组织中HPV-16,18型39.1%,与正常妇女宫颈组织阳性率均为2.2%比较,差异均具有统计学意义。尖锐湿疣主要是HPV-Ⅰ（6,11型）感染,阳性率为69.2%,HPV-Ⅱ仅占4.2%。结论宫颈癌主要与HPV16及18型感染有关。     

PCR和原位杂交技术检测新疆哈萨克族食管癌中HPV感染情况

目的:检测人乳头状瘤病毒(HPV)在新疆哈萨克族食管癌及癌旁组织中的感染情况.方法:分别采用PCR法和原位杂交法检测60例食管鳞癌组织及相应癌旁正常鳞状上皮组织中HPV感染情况.结果:PCR和原位杂交检测食管癌组织中的HPV阳性率为51.7%和45% ;正常食管癌癌旁组织中 HPV阳性率为25%和15%.统计学结果显示食管癌组与癌旁正常鳞状上皮组中HPV感染,差异有统计学意义P<0.05.结论:新疆哈萨克族食管癌组织中存在HPV感染,HPV感染可能是其发病的危险因素之一.     

人乳头瘤病毒感染基因亚型分析

目的 分析HPV各基因亚型感染情况,探讨HPV亚型感染与宫颈病变的关系.方法 应用美国Digene公司杂交捕获法(Hybrid Capture Ⅱ,HC Ⅱ)对我院宫颈疾病专科门诊病例进行高危型HPV筛查,从中随机抽取213例阳性标本应用PCR结合反向寡核苷酸探针斑点杂交技术(reverse dot blot,RDB)进行HPV基因亚型分析.结果 213例HC Ⅱ法检测为高危型HPV阳性的标本中被PCR/RDB法检测出具体HPV高危型别的有195例.共检测出17种HPV型别(包括高危型13种和低危型4种).具体HPV亚型检出率分别是16型(32.3%)、52型(23.1%)、58型(18.0%)、31型(11.8%)、68型(10.3%)、33型(9.7%)、53型(8.2%)、18型(8.2%)、66型(6.2%)、CP8 304型(4.6%)、6型(3.6%)、59型(3.1%)、4 5型(2.1%)、39型(2.1%)、11型(2.1%)、56型(1.5%)、51型(1.0%).单一HPV亚型感染及2种、3种和4种HPV亚型混合感染检出率分别为59.5%、30.8%、8.6%和1.1%.结论 高危型HPV感染检出率最高的HPV亚型为HPV16型(32.3%),其次为HPV52型(23.1%),检出率最低的两种亚型分别是HPV56型(1.5%)和HPV51型(1.0%).HPV58型这种世界范围内少见的一种高危型HPV在中国高危型HPV感染的患者中检出率(18.0%)却并不低.单一高危型HPV亚型感染是引起宫颈病变的主要原因,而多种HPV亚型混合感染在宫颈病变中的作用也不可忽视.     

聚合酶链反应和原位杂交检测成人肾炎肾组织HBV DNA

目的 探讨乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染与成人肾小球肾炎（肾炎）之间的联系,及研究ＨＢＶ对肾脏的致病作用。方法 应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和原位杂交（ＩＳＨ）技术检测３９例血清ＨＢＶ标志物阳性的成人肾有活检组织ＨＢＶ ＤＮＡ的存在状态。结果 用ＰＣＲ法测定肾活检组织抽提物ＨＢＶ ＤＮＡ１７／３９例阳性（４３．６％）,其中５例ＰＣＲ阳性者再且地高辛素标记的ＨＢＶ ＤＮＡ探针原位杂交,测定肾活检石腊包埋切     

上消化道癌组织中人乳头瘤病毒16及E6 mRNA检测的临床意义

目的　探讨人乳头瘤病毒 (HPV)感染与上消化道癌的关系。方法　采用原位杂交(ISH)技术检测了食管癌、贲门癌、胃体癌、胃窦癌及正常胃黏膜组织中HPV16E6mRNA的表达水平。结果　食管癌、贲门癌、胃体癌、胃窦癌及正常胃黏膜组织中HPV16E6mRNA的检出率分别为 :70 %(2 8/ 4 0 ) ,6 7 6 % (5 0 / 74 ) ,4 7 5 % (19/ 4 0 ) ,35 5 % (2 2 / 6 2 )和 2 0 % (10 / 5 0 )。贲门癌与食管癌的检出率之间的差异无显著意义 (P =0 95 5 )。胃癌 (胃体癌 +胃窦癌 )的检出率明显低于贲门癌和食管癌 (均P<0 0 1)。正常人群胃黏膜中HPV16E6mRNA检出率明显低于食管癌 (P <0 0 1)、贲门癌 (P <0 0 1)、胃癌 (胃体癌 +胃窦癌 ) (P <0 0 5 )。贲门癌HPV16E6mRNA检出率与分期呈负相关 (P <0 0 5 ) ,与患者性别、年龄、肿瘤的大小、浸润深度、组织分化程度、脉管癌栓、淋巴结转移及患者的预后无显著相关性 (P >0 0 5 )。结论　HPV不仅在鳞状上皮中增生繁殖 ,在腺上皮中也能活跃地生存。HPV16感染与上消化道肿瘤 ,尤其是食管癌和贲门癌的发生可能相关。     

Detection of Human Papillomavirus DNA in Oral Cancer Tissue Using Polymerase Chain Reaction

ＤｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆＨｕｍａｎＰａｐｉｌｏｍａｖｉｒｕｓＤＮＡｉｎＯｒａｌＣａｎｃｅｒＴｉｓｕｅＵｓｉｎｇＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎＴａｏＺｈｅｎｊｉａｎｇ（陶震江）ＷａｎｇＬｉｎｚｈｏｎｇ（万林忠）ＹｅＹｕｘｉａ（叶玉霞）Ｘｉ...     

原位PCR检测肾组织内的乙型肝炎病毒

采用原位ＰＣＲ技术检测了肾小球肾炎患者活体组织。证实乙型肝炎病毒＜ＨＢＶ＞相关性肾脏中ＨＢＶ的存在。从分子病理学水平为探讨ＨＢＶ相关性肾炎发病机理提供了新的依据。     

孕期人乳头状瘤病毒亚临床感染与母婴垂直

目的 :探讨不同孕期人乳头状瘤病毒 ( HPV)亚临床感染及母婴垂直传播情况。方法 :采用 PCR技术检测 3 0例孕早期、 4 2例孕中期、 3 2例孕晚期妇女的宫颈分泌物、母血、绒毛或胎盘、羊水、脐血及新生儿咽部抽吸物标本 HPV- 6、 11、 16、 18型 DNA。结果 :早孕期 :5例宫颈分泌物 HPV阳性 ( 5 /3 0 ) ,7例母血 HPV阳性 ( 7/3 0 ) ,3例绒毛 HPV阳性 ( 3 /3 0 ) ;中孕期 :12例宫颈分泌物 HPV阳性 ( 12 /4 2 ) ,11例母血 HPV阳性 ( 11/4 2 ) ,9例胎盘 HPV阳性 ( 9/4 2 ) ;另 2 2例羊水标本中 ,仅 1例 HPV阳性 ( 1/2 2 ) ;晚孕期 :2 3例宫颈分泌物 HPV阳性( 2 3 /3 2 )、 18例母血 HPV阳性 ( 18/3 2 ) ,12例胎盘 HPV阳性 ( 12 /3 2 ) ;另 3 1例羊水标本中 ,4例 HPV阳性 ( 4 /3 1) ,3 1例脐血标本中 ,12例 HPV阳性 ( 12 /3 1)。分析羊水、脐血与母血 HPV感染的相对危险度高于宫颈分泌物 ,而产时新生儿咽部抽吸物与宫颈分泌物 HPV感染的相对危险度高于母血。结论 :在整个孕期中 ,孕晚期的HPV亚临床感染明显。孕期 HPV亚临床感染的母婴传播不但可经产道直接接触传播 ,还可经羊水、胎盘发生宫内传播 ,其宫内传播率的高低主要与母血 HPV感染相关。新生儿脐血的 HPV感染主要与母血感染相关 ,而产时新生儿咽部的 HPV     

原位PCR方法检测国人艾滋病肾组织HIV DNA

目的：探讨HIV与艾滋病肾脏的关系。方法：应用原位PCR方法检测9例国人艾滋病尸体解剖肾组织标本。结果：9例标本HIV均阳性，棕黄色阳性物位于肾小管上皮细胞胞核和胞浆。结论：肾脏可被HIV直接感染。     

Comparison of polymerase chain reaction and catalyzed signal amplification in situ hybridization methods for human papillomavirus detection in paraffin-embedded cervical preneoplastic and neoplastic lesions

BACKGROUND: Two molecular methods for HPV genotyping in formalin-fixed, paraffin-embedded tissue were evaluated: in house polymerase chain reaction assay (PCR) with consensus and type-specific primers and a novel procedure of in situ hybridization-a catalyzed signal amplification system (CSA-ISH, Genpoint, DAKO, Glostrup, Denmark). The number of HPV positive cases and detected viral types were compared in cervical biopsies and cone specimens according to histopathological diagnosis. Primer efficiency in detecting various types of HPV by PCR method was evaluated. METHODS: DNA samples (101) were used as a template to amplify with three pairs of consensus (MY09/11, GP5+/6 +, CPI/IIG) and four type-specific HPV primers (HPV-6/11, 18, 16 and 33). The according histological tissue sections were analyzed with CSA-ISH method, using commercial HPV biotinylated probes HPV-6/11, 16/18 and 31/33/51. RESULTS: The degree of concordance for PCR and CSA-ISH was 64.4%. In 63 of 101 samples (62.4%), HPV was detected by PCR, while only 35 (34.7%) were positive using CSA-ISH. CSA-ISH found lower percentages for all HPV types, except HPV-6/11. A lower percentage of positive results in all high-grade lesions was detected by CSA-ISH. Multiple infections were detected by PCR in only one sample and in three samples by CSA-ISH. Detection with My09/11 primers followed by Gp5+/6+ primers, in nested reaction, gave the highest number of positive results: 58 of 63 (92%). None of the samples diagnosed as condylomata planum or CIN I was positive for HPV-6/11 (low risk type), which was detected exclusively in condylomata acuminatum group. CONCLUSIONS: A significantly higher number of positive samples was detected with PCR than with CSA-ISH method. CSA-ISH method should be improved, especially in detecting HPV in high-grade lesions. CSA-ISH may be more accurate in detection of multiple infections. GP5+/6+ in nested reaction after MY09/11 detected the highest number of positive results. Samples diagnosed as benign lesions positive on HPV-X must be monitored as possible candidates for progression. CIN I lesions, which were HPV negative, probably will not progress. This finding may be important in planning therapy and avoiding unnecessary treatment.     

荧光定量PCR检测HBV DNA与HBV血清标志物的对比监测和分析

目的：探讨荧光定量PCR法检测乙型肝炎病毒(HBV)DNA与HBV血清免疫学标志物(HBVM)的相互关系。方法：801例血清标本采用ELISA方法对其免疫学标志物进行检测，并用实时荧光定量-聚合酶链反应(FQ-PCR)技术检测血清HBV DNA。结果：HBV DNA的总检出率为67.0％，在模式HBsAg( )，HBeAg( )，HBcAb( )中，HBV DNA的含量明显高于HBsAg( )，HBeAb( )，HBcAb( )及HBsAg( )，HBcAb( )模式。在HBsAg(-)模式中HBV DNA亦有检出。结论：HBVM能提供乙肝感染的间接证据，而荧光定量PCR法检测HBV DNA准确灵敏，能真实反映HBV感染、复制及病程变化，在乙型肝炎的诊断治疗中具有重要的临床指导价值。