实验感染乙型肝炎病毒的树鼩血清HBsAg及抗-HBs的表现类型

57只实验树鼩接种HBV后,用分子杂交技术、电镜及肝组织免疫酶标方法检测,有39只证实已获感染.这39只动物血清HBsAg及抗-HBs(PHA)表现有6种形式,与人感染HBV后的表现形式相似.表明树鼩是可用于HBV实验感染研究的较好的动物.     

乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒感染树鼩的体内外模型研究进展

全球肝癌的53%和25%分别与乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)和丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)感染有关[1],HBV和HCV的慢性感染已成为世界范围的重要公共健康问题.然而,直至目前,HBV和HCV感染的机制尚未得以阐明,预防HCV感染的疫苗尚未研制成功,而缺乏合适的体内外感染HBV、HCV实验模型是阻碍相关研究进展的主要瓶颈.     

供乙肝疫苗质检用的新动物模型——乙肝疫苗预防树鼩感染HBV的研究

接种乙肝疫苗的10只树鼩,9只血清出现抗-HBs。注射含HBV的人血清后,其中只有1只血清出现短暂的HBsAg,保护率为88.88％;其血清抗-HBc始终阴性。未接种乙肝疫苗的10只对照树鼩注射HBV人血清后,5只血清HBsAg阳性;8只抗-HBc阳性。接种疫苗组HBV感染率显著低于对照组(p<0.01)。实验前所有树鼩血清HBsAg、抗-HBs及抗-HBc均阴性。实验结果表明:1)乙肝疫苗能阻断树鼩感染HBV,进一步确证树鼩能感染HBV,是用于研究HBV的有用的动物模型;2)树鼩可能代替黑猩猩进行乙肝疫苗安全性和免疫保护效果鉴定之用。     

树鼩感染丁型肝炎病毒的实验研究

作者以树为对象、建立丁型肝炎病毒（ＨＤＶ）／乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）实验感染动物模型，为丁型肝炎发病机理和药物筛选提供研究基础。对人工饲养的２０只健康成年树　接种ＨＢＶＤＮＡ阳性血清后ＨＢｓＡｇ的转阳率为７５％（１５只）；分别以同时感染（１３只）和重叠感染（９只）两种方式接种ＨＢＶＤＮＡ和ＨＤＶＲＮＡ阳性血清后，各有８只和６只树　的血清乙肝表面抗原（ＨＢｓＡｇ）、丁肝抗原（ＨＤＡｇ）和丁肝抗体（抗ＨＤ）相继转阳，部分血清或肝内检出ＨＤＶＲＮＡ，以ＨＤＶ／ＨＢＶ阳性树　血清在树　间进行传代感染，可见第二代４只中３只、第三代５只中４只树　的血清ＨＢｓＡｇ、ＨＤＡｇ和抗ＨＤＶ相继转阳，２只第三代感染树　血清中检出ＨＤＶＲＮＡ，肝内检出ＨＢｓＡｇ和ＨＤＡｇ阳性；连续观察１６～１９个月，经重叠感染成功的４只树　血清ＨＢｓＡｇ持续阳性，２只ＨＤＡｇ和抗ＨＤ交替出现，１只抗ＨＤ持续阳性，提示可发展成慢性ＨＤＶ感染；感染ＨＤＶ的树　血清ＡＴＬ升高，肝组织有类似肝炎样病理变化，与ＨＤＶ在黑猩猩体内感染结果类似，提示树　可作为ＨＤＶ感染的动物模型。     

树鼩丙型肝炎动物模型研究进展

丙型肝炎病毒(HCV)感染是全球关注的公共健康问题之一。只有建立稳定可靠的HCV感染模型,才能更好地研究HCV感染慢性化和致癌的机制,从而推动丙型肝炎疫苗的研制和抗丙型肝炎药物的筛选。HCV宿主范围特别狭窄,只有人和黑猩猩对其易患。目前有一些体内和体外的实验结果初步显示,树鼩是目前继黑猩猩之后唯一能感染HCV的动物。该文对HCV感染树鼩动物模型的研究进展予以行综述。     

乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒感染树朐的体内外模型研究进展

全球肝癌的53％和25％分别与乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）和丙型肝炎病毒（hepatitis C virus,HCV）感染有关^[1],HBV和HCV的慢性感染已成为世界范围的重要公共健康问题。然而,直至目前,HBV和HCV感染的机制尚未得以阐明,预防HCV感染的疫苗尚未研制成功,而缺乏合适的体内外感染HBV、HCV实验模型是阻碍相关研究进展的主要瓶颈。     

乙型肝炎病毒与宫内感染

乙型肝炎病毒(HBV)是引起乙型肝炎的病原体,其感染率为7．63％。HBV可通过唾液、血液、乳汁、母婴胎盘等途径传播。本文综述HBV宫内感染的诊断、传播途径、影响因素、转归和预防。     

树鼠句血清ALT改变与感染乙肝病毒量的关系

为研究树血清ＡＬＴ改变与感染乙肝病毒量的关系，将５０只树随机分成５组。将美国ＮＩＨ提供的ＨＢＶ含量为１０８ＣＩＤ／ｍｌ的标准感染血清稀释成１０－６～１０－１０共５个稀释度，分别接种于各组动物。实验观察１６周。５种稀释度的感染血清引起５组树血清ＡＬＴ升高的潜伏期和持续时间依次为：１５ｄ和２５ｄ、１３ｄ和２６ｄ、１５ｄ和２１ｄ、２３ｄ和９ｄ、２８ｄ和８ｄ。其感染率依次为８０．０％、８８．９％、６６．７％、５５．６％及４２．９％。表明树肝细胞受损程度与攻击的ＨＢＶ量有密切关系，对人ＨＢＶ易感，是验证治疗乙肝药物效果的较好的动物模型。     

树Qu对丙型肝炎病毒的易感性研究

目的：探讨树Ｑｕ对丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）的易感性。方法：对来自云南的树Ｑｕ接种含ＨＣＶ的病人血清,然后用ＰＣＲ方法检测树Ｑｕ血清的ＨＶＣ ＲＮＡ,用反向被动血凝法测定抗－ＨＣＶ抗体,用原位ＰＣＲ方法检测树Ｑｕ肝细胞内的ＨＶＣ ＲＮＡ。结果：３４．８％的树Ｑｕ（８／２３）在接种ＨＣＶ后,血清中检出ＨＣＶ ＲＮＡ,对４例抗ＨＣＶ阳性和谷丙转氨酶升高的树Ｑｕ的肝组织进行原位ＰＣＲ检测,结果在１例肝细胞中     

人乙型肝炎病毒红面猴实验感染模型初报

选用无自然感染人乙型肝炎病毒(HBV)的红面猴(Macaca speciosa)4只,其中2只经实验感染人HBV后,作了血清学检测:SGPT(改良赖氏法)、HBV标志物“两对半”(RPHA法、FLISA法、SPRIA法)、HBV-DNA(斑点分子杂交法)、乙肝病毒粒子(电镜观察)。并取肝组织活检,进行光、电镜动态病理学观察,以及组织化学、免疫组化和原位杂交等法检测肝细胞内的HBsAg、HBcAg和HBV-DNA。2只猴血清均检出SGPT、HBsAg、抗-HBc、抗HBs、HBV-DNA和Dane粒子阳性,其中HBsAg阳性持续时间为52和53周。2只猴肝组织均出现由急性肝炎发展为慢迁肝的病变,与乙肝病人的病变相同,在肝细胞内检出HBV标志物。接种后28周的阳性血清传代给对照组中的1只健康红面猴,可惜该猴死于中毒痢,观察期仅8天,7天内血清HBV标记物及SGPT均呈阳性。     

酒精中毒和HBV易感性关系的研究

为证实酒精中毒树Ｑｕ比非中毒树Ｑｕ对ＨＢＶ感染是否具有更高的易感性，我们应用酒精性免疫抑制的树Ｑｕ模型，观察了酒精性免疫抑制与没有免疫抑制的非酒精中毒树Ｑｕ对ＨＢＶ的易感性，结果表明，酒精中毒的树Ｑｕ在发生免疫功能明显受损的同时对ＨＢＶ易感性显著增高。     

动态研究HBV和AFB1诱发树鼠句肝细胞癌过程中一些基因的表达

目的：探讨人乙肝病毒(HBV)和黄曲霉毒素B,(AFB1)致肝细胞癌(HCC)及协同致HCC作用的机制。方法：将树鼩分为4组：A组：感染HBV加摄入AFB,;B组：只感染HBV;C组：只摄入AFB1;D组：作空白对照。然后定期行肝活检,用免疫组化、分子生物学等技术动态观察一些癌基因(蛋白)和抑癌基因的表达。结果：①A组谷胱苷肽转移酶(GGT)阳性灶个数及面积明显多于、大于B、C组;②A组P21蛋白检出率明显高于B和C组,A组6只P21蛋白阳性的树鼩到120周时全部发生了HCC;③实验后期,A组HBxAg检出率及HBVDNA整合率明显高于B组;④在诱癌过程中,IGF-Ⅱ表达率呈波动形,带癌肝的表达率显著高于无癌肝;⑤105周时,A、B、C组P53蛋白表达率显著高于D组;在A,C组检出P53异常带;⑥第45及105周时,A组c-fos表达率分别为23．1％和20％;C组为38．5％和15．4％,B,D两组均未检出;⑦H-c-myc基因：直到120周,无癌肝组织均未见异常;在肝癌组织中,A组有4例扩增,c组无异常;@CDK4基因：只有A组在第75周有1例扩增,该树鼩在第106周时发生了HCC。在HCC中,A组有25％出现CDK。扩增,C组未见异常。结论：再次证实HBV和AFB。有协同致HCC作用;AFB、有利于HBxAg的表达和HBVDNA的整合;CDK4、Kiras和P53基因的变异参与了HCC的发生和演进;P21和c-fos蛋白的过表达与P^53蛋白的失活,促进了HCC的发生和演进;CDK4和c-myc基因的改变与HBV的感染有一定的关联。     

用原位杂交对HBV和AFB_1与树鼩肝癌发生关系的研究

用生物素标记的HBV DNA探针对经83～158周实验的55只树鼩肝组织的福尔马林固定、石蜡包埋的切片进行原位杂交研究。有45只树鼩接种过HHBV,在肝细胞检出HBV DNA的有30只,另15只肝内HBV DNA阴性。这55只树鼩,有41只摄入了AFB_1,其中肝HBV DNA阳性的A组22只有10只发生PLC;19只HBV DNA阴性的B组,只发现2例PLC。两组差别显著(P<0.05)。未接触过AFB_1的14只树鼩中,肝内HBVDNA阳性的8只(C组),有1例出现PLC;而HBV DNA阴性的6只(D组)无PLC发生。结果表明:HHBV和AFB_1在PLC发生中起协同作用,支持了HHBV感染与PLC存在病因学关系的观点。     

树对丙型肝炎病毒的易感性研究

目的:探讨树对丙型肝炎病毒( HCV)的易感性.方法:对来自云南的树接种含HCV的病人血清,然后用PCR方法检测树血清的HCV RNA,用反向被动血凝法测定抗-HCV抗体,用原位PCR方法检测树肝细胞内的HCV RNA.结果:34.8%的树(8/23)在接种HCV后,血清中检出HCV RNA,对4 例抗HCV阳性和谷丙转氨酶升高的树的肝组织进行原位PCR检测,结果在1例肝细胞中检出H CV RNA.此外,30.4%的树(7/23)在接种后出现抗-HCV抗体.部分阳性树均有不同程度的谷丙转氨酶异常升高及肝组织病理性炎症反应.对照组动物(2只)从未出现HCV RNA及抗 -HCV抗体,但其中一只树曾有一过性转氨酶升高.结论:树可以感染HCV.     

树鼩部分信号转导通路的相关cDNA芯片的建立

目的：建立树鼩部分信号转导通路的相关cDNA芯片,从而进一步探讨肝细胞癌（HCC）发生的分子机制。方法：在基因库中找出人的信号转导通路相关基因mRNA序列,选取其中与大、小鼠高度同源的片段,设计出相关的引物序列,然后用树鼩正常肝组织的cDNA为模板经PCR扩增出树鼩相应基因的cDNA片段,将这些cDNA片段作为树鼩的特异性探针,进而建立起树鼩部分信号转导通路的相关cDNA芯片。结果：得到涉及信号转导通路相关基因的探针共有152个基因。结论：利用该芯片研究树鼩HCC发生过程中信号转导通路中的作用将有重要的实用价值,从而完善树鼩肝癌动物模型的研究。     

聚合酶链反应在检测乙肝病毒感染中的应用

应用PCR技术对医院临床实验室检测的265例乙肝患者血清的ELISA五项结果所用血清作了复检、结果发现：ELISA五项指标全阴40例，单纯HBsAb阳性40例，单纯HBcAg阳性40例，HBsAg两项阳性40例，HBsAg、HBeAb和HBcAb三项阳性40例，HBsAg、HBeAg和HBcAb三面阳性40例，HBsAg和HBeAg均阳性15例及单纯HBsAg阳性10例，而PCR检测HBV－DNA的阳性例数分别为2，3，7，16，11，38，15和3例，ELISA法和PCR法检测的目的物本不同同，其临床意义，学者对ELISA法已有不少报道，PCR法检出HBV－DNA证明血清中有乙肝病毒存在，对PCR检测结果，结合ELISA检测结果作了讨论。