CXCR4在急性白血病细胞中的表达及其意义

目的分析急性白血病(AL)小儿骨髓细胞趋化因子受体CXCR4表达及其与髓外浸润的关系。方法采用流式细胞仪对55例AL进行免疫分型;应用流式细胞仪检测55例小儿急性白血病骨髓细胞CXCR4表达;采用统计学方法分析AL患儿骨髓细胞CXCR4表达与髓外浸润的相关性。结果AL患儿骨髓细胞CXCR4在ALL组表达阳性率明显高于NALL组(P<0.01),my B-ALL组CXCR4表达阳性率较B-ALL组阳性率明显降低(P<0.05);ALL、NALL、B-ALL、my B-ALL组血白细胞计数均数比较无显著差异性(F=0.301 P=0.776),骨髓白血病细胞CXCR4表达的阳性率与外周血白血病细胞数呈正相关(r=0.713 P=0.001)。髓外浸润组白血病细胞CXCR4表达的阳性率为(76.34±11.14)%,非髓外浸润组CXCR4表达的阳性率为(42.65±8.62)%,两组比较有显著差异性(t=2.703 P=0.001)。结论AL小儿骨髓细胞CXCR4的表达与白血病细胞的迁移、浸润密切相关。     

急性白血病患儿血浆基质细胞衍生因子-1及其受体CXCR4表达的临床意义

目的探讨儿童急性白血病(AL)血浆基质细胞衍生因子-1(SDF-1)的水平和骨髓细胞表面CXCR4的表达及其临床意义。方法收集50例AL患儿、20例健康儿童和10例非恶性血液病患儿(对照组)。采用ELISA法分别检测AL患儿初诊时、缓解6个月、复发时和对照组儿童外周血浆SDF-1水平。用流式细胞仪检测50例AL患儿初诊时和10例非恶性血液病患儿骨髓细胞表面CXCR4的表达。结果1.AL初诊组和缓解组血浆SDF-1水平明显高于对照组(Pa<0.01),且初诊组高于缓解组(P<0.01);急性淋巴细胞白血病(ALL)组血浆SDF-1水平高于急性髓细胞白血病(AML)组(P<0.01);SDF-1水平在ALL和AML各亚型之间差异无统计学意义;复发的4例患儿,其血浆SDF-1水平在初诊时和复发时均高于缓解时(Pa<0.05);髓外浸润组SDF-1水平与非髓外浸润组比较差异无统计学意义(P>0.05)。2.AL患儿骨髓细胞表面CXCR4的相对荧光强度明显高于对照组(P<0.01);ALL组高于AML组(P<0.01);CXCR4在ALL的L1组与L2组的表达,无统计学差异,但T-ALL组高于B-ALL组(P<0.05...     

P糖蛋白表达在儿童急性白血病中的意义

为探讨儿童急性白血病 (AL)P糖蛋白 (P gp)表达与临床、免疫分型及预后。运用单克隆抗体UIC2 及流式细胞仪 (FCM)间接免疫荧光法对不同时期儿童AL的P gp表达进行检测。结果 :4 5例初治急性淋巴细胞性白血病 (ALL)P gp表达率8 89% ,1 2例复发ALL阳性率为 2 5% ,完全缓解 (CR)组为 0。 32例初治急性非淋巴细胞白血病 (ANLL)P gp表达率为 1 8 75% ,6例复发ANLL 33 3% ,CR组为 0。初治ANLL患儿P gp表达与CD34 、CD7高度相关 ,初治ALL与CD抗原无明显相关性。P gp+ANLL的CR率 2 0 % ,明显低于P gp ANLL( 83 3% ) ,P gp+ALL的CR率 ( 75% )与P gp ALL的CR率 ( 92 86 % )相近 (P >0 0 5) ,但复发率高。结果表明 :P gp高表达是导致儿童AL化疗耐药的重要机制 ,检测P gp是判断预后 ,指导治疗的有用指标。     

多参数流式细胞术检测急性白血病患儿CDl4表达的意义

为了探讨CDl4在小儿白血病中的表达及其在白血病诊断和鉴别诊断中的意义，本文采用CD45／SSC多参数散点图设门多色流式细胞术分析158例小儿急性白血病(AL)患儿白血病细胞的CDl4及其它白血病相关抗原的表达情况。结果：158例中有9例(5.7％)表达CDl4，且均为急性髓系白血病(AML)。CDl4在M4／M5患儿中的阳性率明显高于非M4／M5患儿(P＜0.01)；M4和M5b患儿CDl4的阳性率明显高于M2及M5a(P均＜0．01)；CD11b在M2的阳性率(6／20例，30％)明显低于M5(7／9例，77.8％，P＜0.05)；CDl5在M5a的阳性率明显低于M5b(P＜0．05)、M2(P＜0.01)及M4(P＜0．05)。在AML组中，CDl4的表达与CD11b、CDl5呈正相关(P均＜0．01)。提示CDl4有助于淋巴系白血病、髓系白血病及单核细胞相关性白血病(MLIL)的诊断与鉴别诊断，其对单核细胞相关性白血病免疫分型诊断中的特异性为100％，敏感性为64.3％。CDl4和CDl5有助于M5亚型的区分及M2与M5a、M2与M4的鉴别诊断，CDl4和CDllb则有助于M2与M5的鉴别诊断。     

儿童急性白血病骨髓单个核细胞内细胞因子与其病理变化关系及临床意义

目的 研究儿童急性白血病(AL)骨髓单个核细胞内IL-3、GM-CSF、TNFα和TGFβ1的表达与白血病细胞增殖、分化与病理变化的关系,并观察上述细胞因子在治疗过程中变化的临床意义.方法 抽取43例AL患儿在诱导缓解化疗前、化疗后、缓解及复发时骨髓,提取单个核细胞,用免疫荧光流式细胞术检测其细胞内上述细胞因子的表达,同期还以32例非AL患儿骨髓作对照研究.结果 无论是急性淋巴细胞白血病(ALL)还是急性髓性白血病(AML),化疗前骨髓单个核细胞内IL-3和GM-CSF的表达均高于对照组(P＜0.01),而在TNFα和TGFβ1的表达均低于对照组(P＜0.01).化疗后缓解患儿IL-3和GM-CSF的表达与化疗前比较均有所下降(P＜0.01),与对照组比较差异均无统计学意义(P均＞0.05),TNFα和TGFβ1的表达与化疗前比较均有所上升(P＜0.01),与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).治疗后未缓解和复发患儿IL-3和GM-CSF的表达均高于对照组(P＜0.01),且TNFα和TGFβ1的表达均低于对照组(P＜0.01).结论 AL患儿骨髓单个核细胞内IL-3和GM-CSF的表达较多,TNFα和TGFβ1的表达较少,与骨髓白血病细胞增殖失控、分化障碍所产生的病理变化有关.在治疗儿童AL时,骨髓单个核细胞内IL-3、GM-CSF、TNFα和TGFβ1可作为病情转归的参考指标.     

儿童急性白血病肝功能损害及临床意义

为了研究白血病化疗过程中肝功能损害的病因，测定了５６例急性白血病化疗前后肝功能，提高了药物性肝脏损害及白血病细胞肝脏浸润的诊断方法。５６例患儿中３６例有肝功能受损，其中２９例４３例次发生药物性肝脏损害，白血病肝浸润９例，２例肝浸润时均无骨髓、中枢等复发证据。４例发生病毒性肝炎。对不同类型肝损害进行治疗，各种肝脏损害恢复时间平均为：药物性８．１天，白血病肝浸润７天，病毒性肝炎３０天。结果表明：急淋患     

小儿急性白血病免疫分型及其临床意义

采用流式细胞仪对急性白血病（AL）进行免疫分型已在国内外逐渐展开，但儿童病例较少，本文总结了129例AL患者的免疫分型及其临床意义。     

多色流式细胞术在222例儿童急性白血病免疫分型中的应用

目的　探讨多色流式细胞术在儿童急性白血病 (AL)免疫分型中的应用价值 ,了解儿童AL抗原表达规律和免疫亚型的分布情况。方法　采用CD45/侧散射 (SSC)双参数散点图设门方法进行三色或四色流式细胞术细胞表面及浆内分化抗原的分析。结果　 2 2 2例儿童白血病免疫分型可分为 4类 :未分化型占 0 9% ,急性髓细胞性白血病 (AML)占 35 1% ,急性淋巴细胞白血病 (ALL)占5 5 9% ,混合型急性白血病占 8 1%。 12 4例儿童ALL中 ,B淋巴细胞白血病 (B ALL)占 75 8% ,T淋巴细胞白血病 (T ALL)占 2 4 2 %。AML伴淋巴系抗原表达为 2 4 4 % ,主要表达CD7(12 8% ) ,其次为CD19(6 4 % )和CD2 (5 1% )。B ALL及T ALL伴髓系抗原表达分别为 36 2 %及 30 0 % ,主要表达CD13(18 5 % ) ,其次为CD15(11 3% )、CD11b(6 5 % )和CD3 3 (4 3% )。CD117和CD56主要在AML中表达 ,分别为 73 3%和 38 6 % ,而在ALL中表达率极低 ,仅为 2 0 % (P <0 0 1)。胞浆内抗原CD2 2 、CD3 及髓过氧化物酶 (MPO)分别特异地表达在B ALL、T ALL及AML ,并比胞膜抗原检测更为敏感。结论　应用多色流式细胞术几乎能对所有儿童急性白血病进行准确分型 ,对儿童白血病患者的治疗方案选择及预后判断等均有重要价值。     

儿童急性混合细胞白血病的临床分析

６例儿童急性混合细胞白血病,经细胞形态学（ＦＡＢ法）,细胞化学染色（ＰＯＸ、ＳＢ、ＰＡＳ）及流式细胞仪（ＦＣＭ）检测而确诊。其中４例为原发,２例初诊为急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）,二次复发时确诊为淋一粒混合性白血病。就其儿童急性混合细胞白血病的诊断、治疗体会了讨论。     

SDF-1/CXCR4在急性白血病中的研究进展

基质细胞衍生因子-1(SDF-1)及其受体CXCR4相互作用传导特定信号,在许多生理和病理过程中发挥重要效应.CXCR4在急性白血病中高表达,与疾病的预后、耐药、复发密切相关.采用生物学策略治疗肿瘤,为治疗急性白血病开辟了新途径.     

死亡结构域相关蛋白和E2启动子结合因子在儿童急性白血病中的表达及其临床意义

目的探讨死亡结构域相关蛋白(Daxx)和E2启动子结合因子-1(E2F1)在急性白血病(AL)患儿骨髓细胞中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结(streptavidin peroxidase,SP)法,分别检测40例AL患儿和20例非恶性血液病儿童Daxx和E2F1的表达情况。结果 (1)AL组患儿骨髓细胞Daxx和E2F1阳性表达率分别为40%和57.5%,均显著高于对照组的10%(P<0.05)和20%(P<0.01);Daxx表达水平在急性髓细胞白血病组(58.8%)明显高于急性淋巴细胞白血病组(26.1%,P<0.05);E2F1在两组患儿中的阳性表达率差异无显著性(P>0.05)。(2)Daxx表达阴性者的完全缓解率高于阳性者(P<0.05),但E2F1表达阳性者与阴性者的完全缓解率相比差异无显著性(P>0.05)。(3)AL患儿Daxx与E2F1的表达水平有相关关系(P<0.05)。结论 Daxx和E2F1在儿童急性白血病中高水平表达,在儿童急性白血病的发生发展过程中可能存在某种协同作用,可能与儿童AL的疗效及预后相关。     

不同转移潜能人神经母细胞瘤细胞系趋化因子受体CXCR4的表达及对瘤细胞趋化作用的影响

目的 以自建的人神经母细胞瘤转移瘤(QDDQ-NM1)及原位瘤(QDDQ-NM2)细胞系的细胞为研究对象,探讨CXCR4在不同转移潜能人神经母细胞瘤细胞系细胞中的表达情况及其对瘤细胞趋化作用的影响.方法 采用RT-PCR检测两神经母细胞瘤细胞系细胞CXCR4 mRNA的表达;流式细胞仪直接免疫荧光法检测两细胞系细胞膜表面CXCR4蛋白的表达;通过趋化和趋化抑制实验观察CXCR4特异性配体CXCL12对QDDQ-NM1和QDDQ-NM2细胞系瘤细胞的趋化作用.结果 RT-PCR显示QDDQ-NM1细胞系CXCR4mRNA的相对含量为0.57±0.08,QDDQ-NM2细胞系为0.29±0.05,两者比较差异有统计学意义(P=0.005＜0.05),流式细胞仪直接免疫荧光法检测两细胞系细胞膜表面CXCR4蛋白表达的阳性率分别为(64.59±1.57)%和(36.72±0.57)%,两者的差异有统计学意义(P=0.00＜0.05),CXCR4特异性配体CXCL12可在一定范围内呈浓度依赖性的趋化QDDQ-NM1和QDDQ-NM2细胞系细胞的迁移,以100 ng/ml的效果较为明显,两细胞系迁移到聚碳酸酯膜下的细胞数差异有统计学意义(P＜0.05).CXCR4特异性拮抗剂AMD3100能有效抑制这种趋化作用(P＜0.05).结论 QDDQ-NM1细胞系的细胞功能性高表达趋化因子受体CXCR4,可能与人神经母细胞瘤QDDQ-NM1细胞系细胞的体外高转移潜能有关.

Abstract：

Objective To study the expression of functional chemokine receptor CXCR4 and its effects on the metastatic potential of human neuroblastoma.Methods Two human neuroblastoma cell lines were used in this study,including QDDQ-NM1 with high metastatic potential and QDDQ-NM2 with low metastatic potential.The expression of CXCR4 was explored at mRNA level using RT-PCR,and the protein level by flow cytometry.Chemotaxis assay was also performed to study the migratory response of QDDQ-NM1 and QDDQ-NM2 to CXCR4 ligand CXCL12.Results The mRNA of CXCR4 was higher in QDDQ-NM1 group than that in QDDQ-NM2 group (0.57±0.08 vs 0.29±0.05,P =0.005).The expression of CXCR4 on QDDQ-NM1 group was also higher than that in QDDQ-NM2 group [(64.59 ±1.57) % vs (36.72 ± 0.57) %,P＜0.05] The QDDQ-NM1 cells exhibited stronger migratory response to CXCL12 in a concentration dependent manner (P＜0.05),and the response peaked to CXCL12 at 100 ng/ml.AMD3100,a specific CXCR4 antagonist,could reverse the tumor's migratory response to CXCL12.Conclusions The expression of CXCR4 is associated with the metastatic potential of human neuroblastoma.     

Chemokine IL-8 and chemokine receptor CXCR3 and CXCR4 gene expression in childhood acute lymphoblastic leukemia at first relapse

In this study, we examined the gene expression of interleukin (IL)-8, CXCR3, and CXCR4 in leukemic cells from 100 children with relapsed B-cell progenitors (BCP) acute lymphoblastic leukemia (ALL), using quantitative real-time polymerase chain reaction (RT-PCR). IL-8, CXCR3, and CXCR4 were expressed in almost all bone marrow (BM) samples. The CXCR4 expression significantly correlated with known prognostic factors at relapse: time point and site of relapse. Patients who had a combined BM relapse (n=21) had lower IL-8 and CXCR4 expression than those who had an isolated BM relapse (n=79). The CXCR3 expression was higher in female patients (n=39) than in male patients (n=61). However, this did not reach prognostic relevance in relapsed ALL.     

急性白血病bcl—2蛋白表达的检测及临床意义

目的：检测小儿急性白血病（AL）bcl-2蛋白表达,探讨bcl-2基因在AL发生、诊治中的作用及对临床的指导意义。方法：采用免疫细胞化学法（ICC）测定AL骨髓标本中bcl-2蛋白表达,并分析其与影响白血病预后有关的临床参数的关系。结果：bcl-2表达在AL中显著增高,与年龄、性别、WBC数、肝、脾、淋巴结肿大、FAB分型间无显著相关。结论：抗凋亡基因bcl-2可能与白血病的发生有关,bcl-2蛋白表达的高低有望成类临床判断复发及制定治疗方案的参考指标之一。     

急性白血病肺耐药相关蛋白基因表达及临床意义

已有研究表明 ,肺耐药相关蛋白 (lungresistance relatedprotein,LRP)与白血病多药耐药 (multidrugresistance,MDR)的发生有关。本研究应用逆转录 聚合酶链反应(RT PCR)技术检测 4 3例急性白血病 (AL)患儿LRP基因的表达水平 ,探讨其在儿童白血病的诊断、治疗以及预后中的意义。材料病例组 :为 1999年 9月～ 2 0 0 1年 5月期间 ,我院儿科住院急性白血病 (AL)患儿 4 3例 ,其中急性淋巴细胞白血病(ALL) 2 8例 ,急性髓细胞性白血病 (AML) 15例。男 2 9例 ,女 14例 ;年龄 3～ 14岁 ,平均 8岁。共采集标本 5 2例次 ,其中初发组 2 4例 ,…     

HOXA10基因在儿童急性白血病中的表达及意义

目的探讨急性白血病患儿同源盒(HOX)A10基因的表达及其临床意义。方法选择50例初治急性白血病患儿,其中急性髓系白血病(AML)25例、急性淋巴细胞白血病(ALL)25例,以及13例对照儿童,分离其骨髓单个核细胞,运用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测骨髓单个核细胞HOXA10 mRNA;检测急性白血病患儿外周血白细胞计数(WBC),分析不同类型急性白血病患儿HOXA10基因表达之间的关系。结果对照儿童HOXA10基因的阳性表达率为23.08%,ALL患儿为40%,AML患儿为100%;平均表达灰度比值(ODR)分别为对照儿童0.022±0.001,AML患儿0.373±0.113,ALL患儿0.151±0.006,三组间阳性表达率及表达水平差异均有统计学意义(P<0.01),其中尤以AML患儿最高。HOXA10基因在各型AML中均有表达,其表达水平依次为M1和(或)M2型、M3型、M4和(或)M5型,差异有统计学意义(P<0.01)。WBC≥30×109/L的急性白血病患儿的HOXA10基因阳性表达率显著增高;高危组急性白血病患儿的HOXA10基因的阳性表达率也明显高于中危组和低危组。结论 HOXA10基因的高表达与儿童急性白血病,尤其是与AML明显相关,并且随着AML白血病细胞分化成熟表达逐渐下降;HOXA10基因的阳性表达率与儿童急性白血病危险程度呈正相关,有望成为儿童急性白血病诊断、治疗及判断预后的一个靶点。     

The cytogenetics of childhood leukemia: clinical and biologic implications

Cytogenetic studies have revealed a broad spectrum of abnormalities in the chromosomal make-up of human leukemic cells. These abnormalities are acquired during the process of malignant transformation within the neoplastic clone and reflect the genetic lesions and ablations that have occurred. Because cytogenetic abnormalities are tightly linked to the molecular events that lead to leukemogenesis, it is not surprising that these features correlate with immunophenotypic and morphologic features of the leukemic cells, as well as with the clinical characteristics of children at diagnosis and their responsiveness to therapy. Molecular analysis of the disordered structure or disrupted regulation of genes located at critical chromosomal breakpoints in leukemic cells should continue to provide important insight into normal and aberrant hematopoietic cell function.     

p73mRNA在急性淋巴细胞白血病细胞中的表达及其临床意义

p73基因是p53基因家族的一个新成员，所编码蛋白质结构和功能上都与p53相似。已有研究表明，p73基因在原发性急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia．ALL)存在较高的阴性表达。我们采用逆转录．聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测了p73mRNA在小儿ALL骨髓单个核细胞中的表达及其与影响预后的高危临床特征的相关性。