3TSR对胰腺癌的抑制作用及机制探讨

目的研究血管形成抑制剂3TSR在体内外对胰腺癌的抑制作用,并初步探讨其机制。方法分别在体外培养条件下比较对照组、3TSR、键择(Gem)和3TSR Gem组对胰腺癌MIAPaCa-2细胞增殖及凋亡的影响,以及对裸鼠原位移植瘤肿瘤体积、细胞增殖指数及凋亡的影响。结果体外培养时3TSR对胰腺癌细胞无增殖抑制及诱导凋亡的作用,而Gem对胰腺癌细胞具有明显的抑制增殖及诱导凋亡的作用,但3TSR与Gem在体外无协同作用。体内实验时3TSR组、Gem组和3TSR Gem组肿瘤体积较对照组分别缩小70.1%,79.3%和84.9%;3TSR组、Gem组和3TSR Gem组胰腺癌细胞增殖指数分别为(19.7±3.1)%,(8.1±1.9)%和(13.2±4.2)%,其中3TSR组增殖指数与对照组比较差异无统计学意义,而Gem组和3TSR Gem组细胞增殖指数明显小于对照组和3TSR组(P<0.05);3TSR组、Gem组和3TSR Gem组胰腺癌细胞凋亡率分别为(5.0±2.2)%,(21.1±4.2)%和(22.8±4.2)%,其中3TSR组胰腺癌细胞凋亡率与对照组比较差异无统计学意义(P<0.05),而Gem组和3TSR Gem组细胞凋亡率显著大于对照组和3TSR组(P<0.05);3TSR组及3TSR Gem组血管内皮细胞凋亡率又高于对照组和Gem组(P<0.05)。结论3TSR体内外对胰腺癌细胞无直接增殖抑制及诱导凋亡作用,但能显著减少肿瘤体积,其机制可能与诱导内皮细胞凋亡有关;3TSR与化疗药物Gem合用未明显提高胰腺癌的治疗效果。     

血管形成抑制剂3TSR对胰腺癌的治疗作用

目的探讨应用血管形成抑制剂3TSR治疗胰腺癌的疗效。方法在体外培养条件下观察3TSR(1μmol/L)、键择(Gem,1μmol/L)和3TSR+Gem(1μmol/L 3TSR,1μmol/L Gem)对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响。24只免疫缺陷雌鼠胰腺原位接种胰腺癌细胞后,随机分为4组,分别腹腔注射生理盐水(0．2 ml),3TSR(3mg/kg体重)、Gem(150mg/kg体重)和3TSR+Gem(3mg/kg体重3TSR,150mg/kg体重Gem),连续3周后,观察肿瘤体积、肿瘤坏死面积、肿瘤微血管。结果体外培养时3TSR对胰腺癌细胞无增殖抑制及诱导凋亡的作用,3TSR+Gem在体外无协同作用。体内实验时3TSR组、Gem组和3TSR+Gem组肿瘤体积较对照组明显降低；3TSR治疗组肿瘤坏死面积百分比为(53．46±3．23)%,较对照组扩大94．5%；Gem组肿瘤坏死面积百分比明显减小,为(6．75±1．60)%,但3TSR+Gem组肿瘤坏死面积百分比较单纯Gem治疗组明显增加；3个处理组肿瘤平均微血管数分别为31．8±10．9、47．0±17．0、36．9±8．3；微血管面积分别为(289．3±128．7)、(408．7±185．3)、(278．4±150．3)μm~2；微血管密度(3．4±0．9)%、(6．0±1．7)%、(3．7±1．3)%,均显著低于对照组(P＜0．05)。结论3TSR能抑制肿瘤新生血管形成,具有显著减少肿瘤体积、肿瘤血管和增加肿瘤细胞坏死的作用,但与化疗药物Gem合用没有明显提高胰腺癌的治疗效果。     

3TSR抑制裸鼠胰腺癌血管生成及其与VEGF表达的关系

目的 研究血管形成抑制荆3TSR对胰腺癌血管形成的影响,并探讨其与血管内皮生长因子(vasularendothelial growth factor,VEGF)表达的关系.方法 建立裸鼠原位胰腺癌模型,进行随机干预实验,实验分为对照组、3TSR1组(每天腹腔注射3TSR 1 mg/kg),3TSR2组(每天腹腔注射3TSR 2 mg/kg),3TSR3组(每天腹腔注射3TSR 3 mg/kg),每组7只.干预3周后,检测瘤体体积、肿瘤微血管指标,用ELISA法测定外周血VEGF含量,RT-PCR法测定肿瘤组织VEGF mRNA的表达.结果 治疗组平均肿瘤体积均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),其中3TSR2组和3TSR3两组均低于3TSR1组,差异有统计学意义(P<0.05).治疗组平均微血管教、平均微血管面积及平均微血管密度均低于对照组,其中3TSR2和3TSR3两组其平均微血管面积和平均微血管密度低于3TSR1组,差异有统计学意义(P<0.05).VEGF外周血舍量对照组为(85±21)pg/ml,3TSR1组为(36±13)pg/ml,3TSR2组为(30±9)pg/ml,3TSR3组为(28±7)pg/ml.治疗组VEGF含量均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).RT-PCR提示治疗组的VEGF mRNA含量低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),其中3TSR2和3TSR3两组均低于3TSR1组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 3TSR能显著减小肿瘤体积,抑制微血管生长.其机制可能与抑制 VEGF表达有关.本研究为3TSR的临床前期应用提供了一定实验基础.     

联合应用肿瘤标志物对胰腺癌诊断和随访的临床评价

目的: 综合评价CA242、CA199和CEA对胰腺癌联合检测的诊断及其随访的价值. 方法: 对50例胰腺癌病人进行血清学肿瘤标记物检测,并利用其对12例可切除胰腺癌病人进行随访. 结果: 3种肿瘤标记物中敏感性和特异性以CA199最好,分别为82.0%和80.0%,联合检测这三种肿瘤标记物可提高其敏感性,敏感性可达90.0%.胰腺癌切除术后病人肿瘤标记物降至正常水平,随访中其再次升高表明有肿瘤复发或转移的可能. 结论: 联合检测肿瘤标记物有助于胰腺癌早期诊断,并可用于评价治疗效果以及监测肿瘤有无复发或转移.     

血管生成抑制剂SU5416对大鼠胰腺癌生长和转移的抑制作用

目的研究血管生成抑制剂SU5 4 16对大鼠胰腺癌生长和转移的抑制作用。方法采用二甲基苯丙葱直接置入大鼠胰腺 ,建立临床类似胰腺癌的大鼠模型。将 6 0只胰腺癌SD大鼠随机分为 4组 ,分别自腹腔注射生理盐水 (对照组 )、5氟脲嘧啶 (5 Fu组 )、SU5 4 16制剂 (SU5 4 16组 )和5 Fu SU5 4 16联合用药 (联合组 ) ,隔日 1次。连续 13周后处死大鼠 ,剖腹测量原位肿瘤瘤重、抑瘤率、肿瘤微血管密度、胰腺癌细胞凋亡指数 ,同时观察腹膜、肝脏及毗邻脏器转移和腹水情况。结果对照组、5 Fu组、SU5 4 16组和 5 Fu SU5 4 16联合组诱发肿瘤瘤重分别为 (1 15± 0 2 1)g、(0 6 8±0 4 2 ) g、(0 31± 0 11)g、(0 19± 0 0 6 ) g ;抑瘤率分别为 0、4 8%、80 %、85 % ;肿瘤微血管密度分别为12 3± 3 2、11 4± 3 8、2 1± 1 5、1 8± 1 1;凋亡指数分别为 (2 6± 1 9) %、(5 7± 3 1) %、(13 2±4 3) %、(2 1 1± 7 2 ) % ;腹膜转移率分别为 83%、4 6 %、2 5 %、0 ;肝转移率分别为 6 7%、2 7%、17%、0。实验组与对照组比较差异具有显著意义 (P <0 0 5 )。结论SU5 4 16因能抑制依赖于血管表皮生长因子刺激的血管表皮细胞增殖而抑制胰腺癌的生长和转移 ,化疗药物联合应用具有协同作用。     

区域化疗对结肠癌肝转移的治疗

目的 探讨不同化疗方法对结肠癌并肝转移及局部复发的影响. 方法 Duke D期结肠癌患者50例,术后分成4组,以肝转移灶切除+区域化疗(n=18)、肝转移灶切除+全身化疗(n=20)、肝转移灶未切除+全身化疗(n=10)及肝转移灶切除术+口服化疗药(n=2)4种方法进行治疗. 结果 18例区域化疗患者随访8年,仍有5名患者存活,1年生存率为94%,3年生存率为55%,5年生存率为27.8%.区域化疗组对治疗结肠癌并肝转移致死亡率明显低于全身化疗及口服化疗药组. 结论 结肠癌术中、术后以FMC方案定期区域化疗,对减少原发灶和肝转移的复发同时提高生存率将起到积极作用.     

右旋柠烯乳剂对人胰腺癌裸鼠原位移植瘤生长和转移的抑制作用

目的　研究右旋柠烯乳剂 (D limonene)对人胰腺癌生长和转移的抑制作用并探讨其作用机制。方法　采用人胰腺癌完整组织块建立人胰腺癌裸鼠原位移植瘤模型。移植后第 5天开始分别用生理盐水灌胃 (剂量为每天 0 .3ml/只 ,对照组 )、5 氟尿嘧啶腹腔注射 (剂量为每天 3 0mg/kg ,5 FU组 )、D limonene灌胃 (剂量为每天 15ml/kg ,D limonene组 )、D limonene灌胃 5 FU腹腔注射 (剂量同前 ,联用组 ) ,共用 7周。移植后第 8周处死动物 ,测量原位肿瘤瘤重并计算抑瘤率 ,检测胰腺癌细胞凋亡指数 (AI) ,免疫组织化学检测肿瘤组织微血管密度 (MVD)与血管内皮生长因子 (VEGF) ,并观察荷瘤鼠腹膜、肝、其他脏器肿瘤转移及腹水情况。结果　对照组、5 FU组、D limonene组、联用组的原位肿瘤瘤重分别为 2 .73± 0 .2 3、2 .5 5± 0 .2 8、1.49± 0 .0 9、1.48± 0 .2 1;抑瘤率分别为 0、7%、45 %、46% ;AI分别为 (3 .49± 0 .3 3 ) %、(7.13± 1.17) %、(2 0 .5 0± 2 .3 9) %、(19.97± 3 .44 ) % ;MVD分别为 2 2 .3 0± 2 .76、19.88± 3 .75、8.5 1± 5 .47、9.12± 5 .71;VEGF分别为 48.3 5± 6.12、47.44± 5 .2 7、3 3 .68± 8.65、3 4.2 6± 7.2 4;腹膜转移率分别为 10 0 .0 %、62 .5 %、3 0 .0 %、2 2 .2 %     

3TSR对裸鼠胰腺癌肝转移抑制作用的实验研究

胰腺癌是常见的消化系统肿瘤,由于胰腺位于腹膜后,位置深,80%以上的胰腺癌患者在确诊时已经存在广泛的局部侵犯及淋巴、血行转移,其中半数以上为肝转移[1-2].因此,迫切需要可应用于临床的能抑制胰腺癌生长并阻断其转移的药物以改善患者的预后.近年来,随着血管生成抑制剂研究的深入,抗血管生成治疗为肿瘤治疗开辟了一条新的途径.3TSR(three hrombospondin-1 type 1 repeats)是最早发现的抗新生血管形成和抑制肿瘤生长药物TSP-1(Thrombspondin-1)的功能结构域,具有与TSP-1相似的抗新生血管形成作用而其他作用少,我们初步研究表明3TSR具有明显的抗肿瘤作用[34].本研究利用TSP-1的抗新生血管形成的结构功能域3TSR,探讨其单用或合用健择(gemza)对裸鼠胰腺癌肝转移的影响,为临床应用提供依据.     

SU5416对结肠癌生长和转移抑制作用的实验研究

目的研究血管生成抑制因子SU5416对结肠癌生长和转移的抑制作用.方法采用人结肠腺癌细胞株SW1116完整组织块裸鼠原位种植,建立类似于临床的结肠癌转移裸鼠模型.分别自腹腔注射生理盐水(对照组)、氟尿嘧啶(5Fu组)、SU5416制剂(SU5416组)、5Fu与SU5416联合应用(联用组),共用7周.种植后第8周处死动物,测量原位肿瘤瘤重、抑瘤率、肿瘤微血管密度(MVD)、结肠癌细胞凋亡指数(AI),观察肿瘤细胞腹膜、肝、其他脏器转移及腹水情况.结果对照组、5Fu组、SU5416组、联用组的原位肿瘤瘤重分别为(138±0.42)g、(0.71±0.26)g、(0.25±0.13)g、(0.16±0.09)g;抑瘤率分别为0、48.6%、81.9%、88.4%;MVD分别为134±4.9、11.7±4.2、2.6±1.4、0.94±0.5;AI分别为(3.59±2.46)%、(6.81±5.97)%、(12.83±4.56)%、(20.18±8.91)%;腹膜转移率分别为90.9%、46.5%、25.0%、0;肝转移率分别为72.7%、33.3%、16.7%、0.5Fu组、SU5416组、联用组分别与对照组相比,组间结肠癌生长和转移的抑制作用差异有显著性意义(P<0.05).结肠癌的生长和腹膜、肝转移受到明显抑制(P<0.05).结论SU5416通过抗肿瘤血管生成,诱导结肠癌细胞凋亡,对体内结肠癌生长和转移具有强烈的抑制作用,且与传统化疗药物联用可起协同作用.     

硫酸昆布多糖在仓鼠胰腺癌肝转移模型中抑制作用的研究

目的观察硫酸昆布多糖(laminarinsulfate,LS)对仓鼠胰腺癌肝转移模型的抑制效果,阐明其抑制肿瘤机制。方法建立仓鼠胰腺癌肝转移模型,利用三种不同剂量LS对实验各组进行干预,应用昆布多糖、生理盐水作为对照组;对各组转移肿瘤重量、转移部位数、微血管密度(microvesseldensity,MVD)、抑瘤率进行比较。结果实验组三组肝转移癌平均称重(g)为3164±0577、315±0911、2905±1043;肿瘤转移部位数(个)为143±076、1438±0727、1368±0684;微血管密度(/hpf)分别为26143±447、21186±6327、18474±4903。对照组肝转移癌平均称重为昆布多糖组4867±0868,生理盐水组5147±094;肿瘤转移部位数昆布多糖组2167±1030;生理盐水组为189±099;微血管密度分别为昆布多糖组37583±7077,生理盐水组3429±7087。实验组抑瘤率分别为35%、353%、403%。经统计学分析表明实验组和对照组在肿瘤重量、肿瘤转移部位数、微血管密度等指标方面均存在显著差异(P<001)。抑瘤效果也随硫酸昆布多糖剂量增大渐增加。结论硫酸昆布多糖对肿瘤生长、转移、血管生成有明显抑制作用。     

细胞毒药物(Gemcitabine)治疗人胰腺癌裸鼠胰腺原位移植癌的实验研究

目的 探讨细胞毒药物（Gemcitabine)对胰腺癌裸鼠原位移植模型（SOI）生长，转移的抑制作用。方法　SOI模型分为Ⅰ组（Gemcitabine 100mg/kg),Ⅱ组（Gemcitabine50mg/kg)和对照组。Gemcitabine于术后第2，3，6，9天给药，ip，术后第10周处死裸鼠；并对肿瘤组织的增殖指数（PI），凋亡指数（AI）以及PI/AI进行分析。结果 （1）Ⅰ组能显著抑制胰腺癌生长，Ⅱ组则无显著的肿瘤抑制作用，但两者对胰腺癌转移和预后均无显著疗效；（2）Ⅰ组可显著降低肿瘤增殖指数（PI），增大凋亡指数（AI），PI/AI显著降低。结论 Gemcitabine单用能有效抑制胰腺癌生长，但对肿瘤转移无显著抑制作用。     

Establishment and characterization of human pancreatic carcinoma lines with a high metastatic potential in the liver of nude mice

To investigate of human pancreatic cancer metastasis to the liver, a pancreatic carcinoma line, HPC-3, was injected into the spleens of nude mice. The cells from a few liver metastatic foci of the mice injected with HPC-3 were expanded in vitro and subsequently injected into the spleens of nude mice. By repeating these procedures, we were able to obtain a cell line, designated HPC-3H4. The mice were observed to have liver metastasis in 6 of 6 (100%) cases injected with HPC-3H4, whereas the rate was 0% at 3 weeks after the intrasplenic injection of HPC-3. The tumorigenicity of HPC-3H4 was more rapid than that of HPC-3. The motile activity of HPC-3H4 was also stronger than that of HPC-3, and the adhesion to the extracellular matrix of HPC-3H4 was stronger than that of HPC-3. We also analyzed the cell surface expression of the metastasis-related adhesion molecules. As a result, no substantial changes were observed in the expression level of adhesion molecules. These results suggest that HPC-3H4 is useful for studies aimed at the prevention of liver metastasis.     

绿脓杆菌制剂抑制肝细胞肝癌生长转移的实验研究

目的 观察绿脓杆菌制剂对裸鼠肝癌生长和转移的抑制作用.方法 将具有肺转移潜能的人MHCC97L肝癌组织块种植于BALB/c nu/nu雄性裸鼠肝脏,建立转移性人肝癌裸鼠原位模型.荷瘤裸鼠随机分为对照组、绿脓杆菌制剂腹腔注射组及皮下注射组.各组均于种植后第3天开始用药,于种植后第6周末处死动物,HE染色观察肿瘤组织坏死情况,荧光Tunel法检测肿瘤组织细胞凋亡情况,测量肿瘤体积,计算抑瘤率、肺转移灶数目及肺转移率.结果 对照组、绿脓杆菌制剂皮下注射组和腹腔注射组肿瘤体积分别为(3.12±0.85)cm~3、(1.90±0.87)cm~3(P>0.05)和(0.79±0.36)cm~3(P<0.05),肺转移率分别为66.7%、66.7%(P>0.05)和0(P<0.01),平均肺转移灶数目分别为2.40±1.85,1.2±0.75(P<0.05)和0(P<0.01),凋亡指数分别为(1.4±0.37)%、(4.1±1.7)%(P<0.05)和(10.3±0.40)%(P<0.01).与对照组比较,绿脓杆菌制剂皮下注射组和腹腔注射组的抑瘤率分别为39.1%和74.7%,腹腔注射组肿瘤组织坏死明显.结论 绿脓杆菌制剂腹腔注射可明显促进肝癌组织坏死及凋亡并抑制其生长和转移.     

组织特异性胞嘧啶脱氨酶和5-氟胞嘧啶热化疗对裸鼠结肠癌肝脏转移的影响

目的 探讨组织特异性胞嘧啶脱氨酶/5-氟胞嘧啶(CD/5-FC)系统热化疗对裸鼠结肠癌肝脏转移的影响.方法 将45只裸鼠按随机数字表法分为3组:对照组、非热疗组、热疗组,每组15只.门静脉注射法建立结肠癌肝脏转移动物模型,3组分别给予不同的治疗方法.采用χ2检验和单因素方差分析3组肝脏肿瘤转移率、转移数目;观察各组病理学变化、肿瘤细胞凋亡指数;荧光定量RT-PCR和Westernblot检测肿瘤组织中CD基因的表达情况.结果 对照组、非热疗组、热疗组肝脏平均转移癌结节数目和转移率分别为(4.6±1.3)、(2.2±1.0)、(0.5±0.8)个和100.0%、60.0%、13.3%,3组比较差异有统计学意义(F=25.898,χ2=5.208,19.548,5.168,P<0.05);肿瘤细胞凋亡指数平均为4.6%、9.9%和17.4%.热疗组可见大量细胞空泡变性、坏死、溶解现象,有较多的凋亡小体形成.3组均可以检测到CD基因的表达.结论 组织特异性CD/5-FC系统热化疗对转CD基因结肠癌LoVo细胞裸鼠肝脏转移有明显的抑制作用.     

体内连续筛选法建立人结肠癌肝转移阶梯细胞模型

目的：通过在裸鼠体内进行SW1116结肠癌细胞株原位种植肝转移连续筛选,建立人结肠癌肝转移阶梯细胞模型系统,为研究结肠癌转移的分子机制提供实验模型。方法：将SW1116细胞株在裸鼠皮下连续5次传代后,取皮下种植瘤在裸鼠结肠进行原位种植,继而取肝脏转移灶进行下一代裸鼠结肠原位种植,经3次结肠原位种植肝转移筛选,建立大肠癌肝转移阶梯细胞模型。用免疫组化法验证种植瘤及转移灶的组织来源,并行同期体内外侵袭实验,检测经体内连续筛选出的癌细胞侵袭转移能力变化。结果：经5代皮下连续传代及3代结肠至肝的体内转移筛选,成功建立了第三代结肠癌肝转移筛选细胞系（CRCLM3）。裸鼠种植瘤及转移灶均表达人癌胚抗原,而同期体内外侵袭试验结果显示,经体内筛选得到的结肠癌细胞株转移能力逐渐加强。结论：经体内连续肝转移筛选所建立的结肠癌细胞系侵袭转移能力增强,而CRCLM3细胞系是研究结肠癌肝转移机制的理想细胞模型。     

汉防己甲素和吉西他滨协同使用对化疗耐药胰腺癌细胞的凋亡诱导作用

目的：研究汉防己甲素对胰腺癌化疗耐药产生与凋亡的影响。方法：分对照组（只加培养基）、吉西他滨组（Gemcitabine组）和汉防己甲素联合吉西他滨组（Tet/Gem组）,后2组采用不同浓度汉防己甲素和吉西他滨作用于人胰腺癌敏感株BxPC-3和吉西他滨耐药株BxPC-3/Gem细胞,通过MTT法检测抗肿瘤药物的细胞毒作用,碘化丙啶（PI）染色检测细胞凋亡。结果：BxPC-3/Gem耐药胰腺癌细胞株耐药指数（RF）为4.70,汉防己甲素作用耐药胰腺癌细胞后其RF降至1.69,证明汉防己甲素可逆转BxPC-3/Gem耐药胰腺癌细胞对吉西他滨的耐药。化疗耐药胰腺癌细胞凋亡在12h、18h、24h,Tet/GEM组与GEM组、对照组比较,差异有非常显著性意义（P〈0.01）。结论：汉防己甲素可以逆转BxPC-3/Gem耐药胰腺癌细胞对吉西他滨的耐药,协同吉西他滨促进对化疗耐药胰腺癌细胞凋亡作用。     

肺鳞癌、腺癌纵隔淋巴结转移的特点

目的 研究原发肺鳞癌及腺癌纵隔淋巴结转移特点,探讨临床意义.方法 对353例原发肺癌施行同侧纵隔淋巴结廓清术,病理检测淋巴结转移频度.结果 清除淋巴结2380组,平均每例6.74组.N2 淋巴结转移率16.2%.T1、T2、T3间淋巴结转移率差异有统计学意义(P<0.01).N2转移率在鳞癌、腺癌分别为30.1%、44.1%.64.2% 鳞癌N2转移为某一组淋巴结,腺癌3组以上转移者46.2%.上叶肺癌跨区域N2转移占15.1%,下叶(包括中叶)肺癌跨区域转移占53.1%.跳跃式转移占N2转移的53.7%.结论 肺鳞癌及腺癌纵隔淋巴结转移具有多发性、跳跃性及跨区域性特点.     

前药热化疗对裸鼠结肠癌肝转移的作用

目的 观察胞嘧啶脱氨酶/5-氟胞嘧啶(CD/5-FC)系统热化疗对裸鼠结肠癌肝转移的作用.方法 45只裸鼠随机分为3组,分别给予不同的治疗方法,观察各组肝转移率、肝转移瘤数目、病理学变化、肿瘤细胞凋亡指数,检测肿瘤组织中CD基因的表达情况.结果 对照组、5-FC治疗组、5-FC热疗组平均肝脏转移瘤数和肝脏转移率分别为4.6000±1.2649、2.2000±0.9189、0.5000±0.8498;100%、40%、20%;肿瘤细胞凋亡指数平均为4.59%、9.87%和17.40%,5-FC热疗组可见较多的凋亡小体形成.结论 CD/5-FC系统热化疗对裸鼠转CD基因LoVo细胞结肠癌肝转移有明显的抑制作用.     

合用阿伐斯汀增强索拉非尼对肝癌生长转移的抑制作用

目的 观察合用阿伐斯汀(avastin)与索拉非尼(sorafenib)对人肝癌裸鼠模型的抑制效果.方法 采用人肝癌裸鼠原位模型LCI-D20,分为对照组、serafenib单用组(30mg/kg灌胃,1 d1次)、sorafenib与avastin合用组、avastin单用组(5 mg/kg腹腔注射,1周2次),治疗4周后观察肿瘤体积、肺转移、血浆血管内皮生长因子(VEGF),定量比较肿瘤微血管密度(MVD)和肿瘤血管内皮细胞凋亡指数,观察各组荷瘤鼠生存期.结果 对照组、sorafenib治疗组、mrafemb与avastin合用组、avastin治疗组肿瘤体积分别为(5.70±0.17)、(1.10±0.18)、(0.60±0.12)和(2.10±0.28)mm~3;肺转移灶数目分别为(191±23)、(98±18)、(31±19)和(98±20)个;血浆VEGF分别为(1689±612)、(3762±1195)、(1844±746)和(420±161)ng/L;中位生存期分别为70、87、112、80 d.4组肿瘤微血管密度分别为(3.77±0.44)%、(1.28±0.15)%、(0.56±0.08)%、(1.32±0.18)%;肿瘤血管内皮细胞凋亡指数分别为(12.6±1.8)%、(32.6±8.7)%、(54.3±11.9)%、(26.8±6.5)%;与sorafenib治疗组比较,avastin与sorafenib合用明显抑制血浆VEGF(P<0.05)、降低肿瘤体积(P<0.05)、抑制肺转移灶数目(P<0.01),延长荷瘤鼠生存期(P<0.05),降低肿瘤微血管密度(P<0.05)和促进肿瘤血管内皮细胞凋亡(P<0.05).结论 sorafenib在肝癌裸鼠模型中上调血浆VEGF导致耐药,avastin下调VEGF,通过促进肿瘤血管内皮细胞凋亡和降低肿瘤微血管密度,进一步增强sorafenib对肝癌生长和转移的抑制作用,并延长荷瘤鼠生存期.     

人原发性小肠恶性黑色素瘤裸小鼠原位移植肝转移模型的建立

目的为探讨小肠恶性黑色素瘤的发病机制和实验治疗提供理想的动物模型。方法将原发性小肠恶性黑色素瘤患者术中原发灶和肝转移灶新鲜瘤组织块分别植入裸小鼠的小肠黏膜层，观察原位移植成瘤率，移植瘤的侵袭和肝转移率。进行形态学[光镜、电镜和免疫组织化学（免疫组化）]染色体核型和流式细胞分析。结果人小肠恶性黑色素瘤原发灶和肝转移灶新鲜瘤组织均获移植成功。建成一株人原发性小肠（原发灶）恶性黑色素瘤裸鼠原位移植模型（HSIM-0501）和一株人原发性小肠（肝转移灶）恶性黑色素瘤裸鼠原位移植肝转移模型（HSIM-0502）。移植瘤组织病理学为高度恶性黑色素瘤；免疫组化显示S-100蛋白；黑色素瘤单克隆抗体45阳性；电镜下瘤细胞质内可见大量黑色素颗粒及黑色素复合体。染色体众数55～59条；流式细胞DNA指数值1．49-1．61；均为异倍体。HSIM-0501和HSIM-0502分别传至25代和27代；共移植裸鼠317只；肿瘤移植成瘤率和液氮冻存复苏成活率均为100％。HSIM-0501肝转移率为46．2％，淋巴结转移率为36．7％；HSIM-0502肝转移率和淋巴结转移率均为100％。移植瘤在裸鼠小肠内自主侵袭生长，发生血液转移、淋巴结转移和腹腔内种植性转移。结论HSIM-0501和HSIM-0502是首次成功建立的人原发性小肠恶性黑色素裸鼠原位移植肝转移模型，可用于小肠恶性黑色素瘤的发病机制、侵袭和转移及抗转移实验治疗的研究。