高压电子显微镜在细胞三维立体结构观察中的应用

①目的 探讨高压电子显微镜观察厚切片标本的技术。②方法 采用锌-碘-锇酸染色方法及AcPase(酸性磷酸酶)细胞化学技术，制作高压电子显微镜观察的厚切片标本。③结果 高压电镜下显示，锌-碘-锇酸染色方法制备的标本胃底腺壁细胞的微管泡系统呈无数纤维状结构；AcPase结合三维电子显微镜观察显示，线性线粒体在胞质中常呈分支状并互相吻合成网。④结论 通过高压电子显微镜观察厚切片标本可以观察到细胞器的三维空间结构。     

三维立体标本库在病理实验考试中的应用

三维立体标本具有图片展示所不能比拟的优势,更直观,更全面,更生动。三维立体标本库和显微数码互动系统的联合应用,可以推动病理实验教学和实验考试的革新。新的考试模式比传统考试更具有科学性、客观性、高效性、公正性,将成为更受学生欢迎的考试方式。     

胶原纤维与OSAHS的相关性研究

目的：探讨阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征发病过程中胶原纤维的形态学改变以及Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维面积和总的胶原纤维面积与OSAHS患者各项临床指标的相关性。方法：回顾性分析成年男性8例非鼾症和14例鼾症组的一般情况,比较组织标本形态学染色,并测量Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维面积和总的胶原纤维的面积。结果：通过实验我们发现OSAHS患者的软腭和悬雍垂结缔组织中的胶原纤维排列不规则,而且胶原纤维的面积和Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维面积的增多,胶原纤维面积和Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维面积与平均血氧饱和度、AHI、呼吸暂停指数存在相关性。结论：胶原纤维改变可能与OSAHS患者口咽弹性的降低相关。     

睫状体冷冻术的动物实验研究

使用Syncron Optikon二氧化碳冷冻器对26只家兔行睫状体冷冻术。26只白色成年家兔根据不同的时间分为3组,并对冷冻后不同时期的睫状体组织进行了肉眼、光镜、电镜及酶组织化学实验分析。结果表明,睫状体冷冻可引起睫状上皮细胞的形态和代谢改变,减少房水形成使眼压下降,认为兔眼睫状体冷冻时间以60s为宜,90s也可使用,但30s不能产生不可逆改变。     

聚乳酸在骨折愈合中对胶原纤维影响的实验研究

对聚乳酸及金属内固定物对骨折愈合过程中原纤维的产生、发展及钲 化的研究结果显示，在骨折愈合的早期，聚乳酸组成纤维细胞增金属内固定组丰富，胶原纤维较细排列乱；中期仍在见纤维细胞，部分胶原纤维短，排列乱；晚期半数胶原纤维钙化，半数为成骨区。     

立体三维适形放射治疗肝癌65例分析

目的:探讨应用立体三维适形放射治疗肝癌的近期疗效和副反应.方法:肝癌65例设置靶区81个,其中原发性肝癌43例,转移性肝癌22例,采用三维适形放疗技术(3D-CRT)治疗,每个病灶靶区设野5～7个,每日照射1次,每次治疗剂量2.3～2.8 Gy,90%等剂量曲线包绕靶区,同时应用保肝药及免疫增强剂.结果:治疗后1～4 mo内根据CT或MRI及B超复查肿瘤退缩情况,确定为完全缓解率(CR)18个病灶靶区18/81(22.2%),部分缓解率(PR)52个52/81(64.1%),无变化(NC)7个7/81(8.6%),加重(PD)4个4/81(4.9%),总有效率为(CR PR)达86.3%.结论:立体三维适形放射治疗肝癌安全,副作用小且近期疗效确切的治疗方法,能使大多数患者尤其老年患者所耐受.     

CT引导简易三维脑立体定向术

高血压脑出血微创治疗已在全国推广应用,并收到了很好的治疗效果,微创治疗的关键之一是如何能穿刺到血肿,并将穿刺针送到血肿中心,便于血肿尽快清除,特别对脑深部血肿,或血肿量不太大的情况下[1].如无CT引导,按传统的方法操作,确有一定难度.我院自1995年以来,通过多年临床实践,采用CT引导简易三维脑立体定向术,成功地为150例高血压脑出血,50例外伤性颅内血肿,10例脑脓肿,16例脑内囊肿进行了定向穿刺,成功率100%.下面以左基底节脑出血为例,将其定向术具体操作介绍如下.     

立体结构教学刍议

为了让医学生牢固掌握立体结构的基本知识，对它的重要性认识明确，并予高度注意，本就如何有效地在有机化学中实施立体结构教学，对相关的知识基础和教学原则做了探讨，结合作的实践，提出了相应的教学建议。     

胶原原纤维的特殊形态

我们在成年母鸡的小脑幕和内颅骨膜中发现一种特殊形态的胶原原纤维,电镜下其特点是:(1)胶原原纤维有分枝吻合,很像心肌纤维的分枝吻合形式;(2)这些分枝的胶原原纤维同时具有40～44nm 短周期的横纹结构,称为短周期胶原原纤维。还讨论了这些特殊胶原原纤维存在的可能性和意义。     

肺炎合剂对肺纤维化大鼠组织形态和胶原纤维的影响

目的观察肺炎合剂对肺纤维化大鼠病理学组织形态、胶原纤维的影响。方法将动物分成假手术组、模型组、氢化可地松组和肺炎合剂低、中、高剂量组6组,采用博莱霉素A5造模,于第7天和第28天行常规病理形态观察和苦味酸天狼猩红-偏光法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维变化。结果肺炎合剂能抑制博莱霉素A5造成的肺泡炎、肺纤维化的病变程度,抑制Ⅰ型胶原的增加,对抗Ⅲ/Ⅰ型胶原比例下降。结论肺炎合剂通过抑制肺泡炎的发展、抑制胶原纤维的沉积,特别是维持胶原沉积与降解动态平衡而抑制纤维化的发展。     

一氧化氮合酶和鸟苷酸环化酶在人眼睫状体和小梁网中的表达

目的：研究神经元型一氧化氮合酶（neuronal nitric oxide synthase , nNOS）,诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase , iNOS）,内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase , eNOS）及鸟苷酸环化酶（guanylyl cyclase , GC）在正常人眼睫状体小梁网和Schlemm’s管上的表达及其分布。 方法：收集12例角膜移植后残余的眼球组织（排除其它眼部异常）,10例眼球组织常规石蜡包埋切片,2例眼球取睫状体组织行Western blot分析。切片脱色素后以免疫组织化学EnVision/HRP二步法检测nNOS﹑iNOS﹑eNOS及GC在睫状体上皮细胞中的表达,以磷酸缓冲液代替上述各种一抗作为阴性对照。睫状体组织提取蛋白质后Western blot法检测nNOS﹑iNOS﹑eNOS及GC的表达。 结果：三种一氧化氮合酶及GC在睫状体上皮细胞、睫状肌、小梁网以及Schlemm’s管内皮细胞中均有表达。在睫状体上皮细胞中,nNOS主要表达在色素上皮和非色素上皮细胞胞浆的交界处。Western blot法证实nNOS﹑iNOS﹑eNOS及GC蛋白在睫状体中的表达。 结论：正常人眼睫状突上皮细胞、小梁网和Schlemm’s管内皮细胞中,三种NOS及GC均有表达,提示一氧化氮/环鸟苷酸（NO/cGMP）信号通路可能参与人眼房水生成和排出过程。     

人眼睫状肌细胞的培养与鉴定

为了提供从细胞水平研究葡萄膜、巩膜途径房水引流的实验材料 ,分离死亡后 8～ 2 0h眼库角膜取材后的人眼睫状肌组织 ,用D MEM进行培养 ,用光镜、电镜、免疫荧光法分别进行鉴定。发现 :光镜、电镜下培养的细胞具有典型的睫状肌形态和结构 ,Smoothmuscleα actin染色呈强阳性 ,Desmin染色呈弱阳性。提示 :选择死亡后 8～ 2 0h的睫状肌组织用D MEM可以成功地培养出睫状肌细胞     

ATP对人鼻腔纤毛摆动频率的影响

目的观察不同浓度三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)对体外培养人鼻腔纤毛运动的影响。方法采用组织块培养法,应用高速数字化显微成像系统观察1μmol/L、10μmol/L和100μmol/L ATP对人鼻腔纤毛摆动频率(ciliary beatfrequency,CBF)的影响。结果Hanks平衡盐溶液(Hanks balanced salts solution,HBSS)对CBF无明显影响。②1μmol/LATP使CBF由(9.2±1.8)Hz升至(10.3±2.0)Hz(n=10)(P<0.05)。10μmol/L ATP使CBF由(9.5±1.7)Hz升至(11.5±2.0)Hz(n=10)(P<0.05)。③100μmol/LATP使CBF由(8.7±1.1)Hz升至(11.5±1.4)Hz(n=10)(P<0.05)。结论ATP可刺激体外培养人鼻腔纤毛摆动频率升高,在1~100μmol/L范围内,ATP对CBF的刺激呈浓度依赖性。     

原发性急性闭角型青光眼并发睫状体脱离的超声生物显微镜观察

目的：探讨超声生物显微镜（UBM）在原发性急性闭角型青光眼并发睫状体脱离诊断中的临床意义。方法：选取2008年8月-2012年12月本院眼科诊断为急性闭角型青光眼（急性发作期）患者138例共169只眼作为研究对象,积极降低患者眼压,并对UBM检查发现的睫状体脱离患者进行分析和总结。结果：169只眼（急性发作期）中有43只眼并发睫状体脱离（25.44%）;发生睫状体脱离者与未发生者在年龄、性别上差异无统计学意义（P〉0.05）,且两者比较,角膜厚度、前房深度、巩膜与睫状体夹角差异均无统计学意义（P〉0.05）,睫状体厚度、小梁与睫状体距离差异有统计学意义（P〈0.05）;睫状体脱离患者前房角镜检查示房角均未完全关闭,至少有2个时钟点未关闭。结论：UBM可以对睫状体脱离作出客观准确的判断,指导急性闭角型青光眼术前的治疗并随访观察,具有较高的诊断价值。     

曲伏前列腺素对培养人眼睫状肌细胞基质金属蛋白酶-2表达的影响

【目的】研究曲伏前列腺素作用下,基质金属蛋白酶-2（MMP-2）在人睫状肌细胞的表达。【方法】在人睫状肌细胞无牛血清培养基中加入1μmol/L曲伏前列腺素（travoprost）,根据曲伏前列腺素孵育时间的不同,分为4个时间组,即0 h组（对照组）、6 h、12 h、24 h组。Real-time PCR和ELISA法分别检测上述各时间组人睫状肌细胞MMP-2在基因和蛋白水平的表达,每种方法分别重复做3次。Zymography技术分别检测4组细胞MMP-2的活性,重复4次。【结果】设定对照组mRNA相对表达量为1做作标准,6 h、12 h、24 h组MMP-2 mRNA相对表达量为0.58±0.04、1.20±0.05、1.95±0.11,MMP-2 mRNA表达呈逐渐升高趋势（P=0.000）;ELISA检测MMP-2的A值分别为0.0503±0.0021、0.0627±0.0017、0.0673±0.0025、0.0783±0.0039,MMP-2的表达随travoprost作用时间延长逐渐升高（P=0.000）。Zymography技术检测MMP-2校正光密度值分别为10±5,52±7,104±21,237±40;MMP-2活性随travoprost作用时间延长而逐渐增强（P=0.000）。【结论】曲伏前列腺素作用于人睫状肌细胞后,MMP-2表达随药物作用时间延长逐渐增加,活性逐渐增强。     

子宫肌层金属异物取出新方法的临床应用

目的探讨三维立体坐标器和特制异物钳在子宫肌层内细小金属异物（断裂节育环、断裂缝针）取出术中的应用价值,来寻找取出子宫肌层内细小金属异物安全有效的新方法。方法先采用三维立体坐标器行子宫肌层内金属异物精确定位后,再用带磁性的配套特制异物钳（均获国家发明专利）钳取88例子宫肌层内金属异物。结果88例子宫肌层内金属异物,其中25例为断裂残留于子宫肌层内金属IUD,63例嵌顿于子宫肌层内的断裂缝针,全部一次取出,平均手术时间为10．3min,无子宫大量出血、子宫穿孔等手术并发症发生。结论三维立体坐标器和特制异物钳应用于子宫肌层内细小金属异物取出术,是又一种定位精确,取出成功率高,手术时间短,并发症少,无严重并发症的微创手术。     

曲伏前列腺素对培养人眼睫状肌细胞基质金属蛋白酶-2表达的影响

 【目的】研究曲伏前列腺素作用下,基质金属蛋白酶-2（MMP-2）在人睫状肌细胞的表达。【方法】在人睫状肌细胞无牛血清培养基中加入1μmol/L曲伏前列腺素（travoprost）,根据曲伏前列腺素孵育时间的不同,分为4个时间组,即0 h组（对照组）、6 h、12 h、24 h组。Real-time PCR和ELISA法分别检测上述各时间组人睫状肌细胞MMP-2在基因和蛋白水平的表达,每种方法分别重复做3次。Zymography技术分别检测4组细胞MMP-2的活性,重复4次。【结果】设定对照组mRNA相对表达量为1做作标准,6 h、12 h、24 h组MMP-2 mRNA相对表达量为0.58±0.04、1.20±0.05、1.95±0.11,MMP-2 mRNA表达呈逐渐升高趋势（P=0.000）;ELISA检测MMP-2的A值分别为0.0503±0.0021、0.0627±0.0017、0.0673±0.0025、0.0783±0.0039,MMP-2的表达随travoprost作用时间延长逐渐升高（P=0.000）。Zymography技术检测MMP-2校正光密度值分别为10±5,52±7,104±21,237±40;MMP-2活性随travoprost作用时间延长而逐渐增强（P=0.000）。【结论】曲伏前列腺素作用于人睫状肌细胞后,MMP-2表达随药物作用时间延长逐渐增加,活性逐渐增强。