靶向阻断转化生长因子-β信号通路对肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞的影响

目的细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)是体内杀伤肿瘤的最终效应细胞,但其免疫功能会被肿瘤分泌的转化生长因子β(transforming growth factorβ,TGF-β)所抑制,文中观察靶向阻断TGF-β信号通路对肿瘤特异性CTL的影响。方法利用包涵修饰过的TGF-βⅡ型受体(transforming growth factorβreceptor typeⅡ,TβRⅡ)质粒的逆转录病毒载体,转染经DC激活的小鼠肾癌Renca细胞敏感的CTL(tumor pulsed CTL,TP-CTL),获得对TGF-β不敏感而肿瘤特异性的CTL(TβRⅡDN-CTL),Western blot检测Smad-2的磷酸化情况,观察TGF-β对CTL体外增殖抑制情况,将TβRⅡDN-CTL与未阻断TGF-β信号通路TP-CTL分别与相关及无关肿瘤细胞共同孵育,应用51Cr释放实验测定其细胞毒作用,将已成瘤的动物模型分为TP-CTL组和TβRⅡDN-CTL组分别尾静脉过继性注射TP-CTL及TβRⅡDN-CTL,ELISA法检测小鼠体内IL-2和IFN-γ水平。结果 TβRⅡDN-CTL组对TGF-β增殖抑制率明显低于TP-CTL组(65.96%vs 2.08%,P<0.01);在效靶比为100∶1时,TβRⅡDN-CTL组较TP-CTL组显著提高免疫小鼠CTL的特异性杀伤作用[(50.40±4.48)%vs(17.70±1.42)%,P<0.01],而动物模型血浆中TβRⅡDN-CTL组较TP-CTL组的IL-2、IFN-γ水平也显著升高(P<0.01)。结论阻断肿瘤敏感的CTL的TGF-β信号通路可以克服肿瘤的免疫抑制作用,提高CTL对肿瘤的杀伤效率。     

舌癌患者CIK细胞的体外培养及其免疫活性

目的研究舌癌患者外周血CIK细胞的增殖能力、细胞表型和细胞毒作用,寻求对舌癌过继免疫治疗的新途径。方法提取20例舌癌患者和20例健康人外周血单核细胞用IFN-γ、抗CD3mAb、IL-2和IL-1β共同培养诱导CIK细胞,流式细胞仪检测细胞表型特征,用MTT法检测细胞对Tca8113的杀伤活性;同时培养舌癌患者LAK细胞、CD3AK细胞和舌癌患者CIK细胞在增殖和杀瘤活性上作比较。结果舌癌患者20ml外周血经过一个周期培养平均获得的CIK细胞数低于健康对照组(P<0.05),但舌癌患者CIK细胞经过周期培养也较培养前的数量明显增高,于12~21d达高峰。舌癌患者CIK细胞与LAK相比,增殖倍数和杀伤活性均明显提高(P<0.05);舌癌患者CIK增殖倍数与CD3AK相比,早期差异无显著性,但后期增殖倍数及杀伤活性有显著提高(P<0.05)。结论舌癌患者CIK细胞体外增殖倍数和杀瘤活性明显优于LAK和CD3AK细胞,低于正常人CIK的增殖能力,而舌癌患者CIK细胞杀伤活性与正常人来源CIK细胞差异无显著性(P>0.05),有望作为自体过继免疫治疗舌癌的一种新方法。     

正常人和肿瘤患者CIK细胞的体外增殖能力及抗肿瘤作用的对比分析

目的:探讨正常人和肿瘤患者CIK细胞体外增殖能力及抗肿瘤作用的差异。方法:分离正常人和肿瘤患者的外周血单个核细胞(PBMC),加入细胞因子(CK),体外诱导CIK细胞,用细胞计数板法观察CIK细胞增殖能力及随时间变化的趋势,用MTT法检测其对不同肿瘤细胞株的杀伤活性。结果:与正常人CIK细胞相比,肿瘤患者CIK细胞的增殖速度较慢,其最大增殖倍数低(P<0.01);CIK细胞的增殖速度与年龄有关,即低年龄段的CIK细胞增殖能力强;正常人的CIK细胞对乳腺癌细胞株(MDA-MB-231)、肺巨细胞癌细胞株(BE-1)和前列腺癌细胞株(PC-3)的杀伤活性明显高于肿瘤患者的CIK细胞(P<0.01);不同年龄段肿瘤患者的CIK细胞对肿瘤细胞的杀伤率差异有统计学意义(P<0.05)。结论:CIK细胞的体外增殖力及对肿瘤细胞的杀伤活性与年龄有关,正常人CIK细胞的体外增殖力及对肿瘤细胞的杀伤活性高于肿瘤患者的CIK细胞。     

体外抗体功能修饰抑制性KIR对人NK细胞的影响

目的:检测抗体封闭抑制性受体KIR2DL1和KIR2DL2/2DL3对人NK细胞功能的影响.方法:应用Rosettesep人NK分选试剂盒分选外周血NK细胞,观察抗体封闭KIR2DL1和KIR2 DL2/2DL3受体后,NK细胞对不同白血病细胞(人肿瘤细胞株NB4、Raji和K-562)及同种异体的成熟树突状细胞(DC)的杀伤活性;检测混合淋巴细胞反应中NK细胞对T淋巴细胞增殖的影响;检测细胞因子TGF-β1的表达水平.结果:任何一个抗体封闭KIR后,NK细胞杀伤NB4细胞活性均增强,并与抗体浓度呈现量效关系(P＜0.05),2个抗体联用能增强NK细胞的杀伤活性;对Raji细胞的杀伤活性则改变较小;NK细胞对K-562细胞具有很强的杀伤活性,但经抗体封闭后,这种活性并没有提高.经抗体封闭KIR后,NK细胞对成熟DC的杀伤活性明显增强,并与抗体浓度呈现量效关系(2.20%±1.10% vs 37.59%±5.06%),各组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).经抗体封闭后的NK细胞在混合淋巴细胞反应中能明显提高对T细胞的增殖抑制(77.85%±8.31% vs 43.05%±5.95%,P＜0.05),上清液中细胞因子TGF-β1的含量增加.结论:以抗体修饰抑制性KIR受体有助于提高NK细胞杀伤肿瘤及同种异体成熟DC的能力,活化的NK细胞通过分泌TGF-β1,抑制T细胞的增殖、活化.     

后腹腔镜与开放性肾癌根治性手术围手术期细胞因子变化及临床疗效比较

目的后腹腔镜肾癌根治术已成为肾癌手术治疗的常规方法,但如何客观评价其微创手术效果,目前报道不一。观察后腹腔镜肾癌根治术和开放性肾癌根治术围手术期患者血清细胞因子水平的变化及临床意义,比较2种手术方式对机体细胞因子水平的影响。方法行后腹腔镜肾癌根治术67例,开放性肾癌根治术65例,对其术前24 h及术后3、24、48 h的白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-10、肿瘤坏死因子(TNF)-α进行检测,并分析两者间差异是否有显著性意义,并对其手术时间、术中出血量、术后住院天数进行比较,近远期并发症进行观察。结果开放性肾癌根治手术组患者术后3、24 h血清IL-1β、IL-6水平较术前明显升高,差异有显著性意义(P<0.05),术后48 h开始恢复正常,血清IL-10、TNF-α水平手术前后变化不明显,而腹腔镜肾癌根治手术组手术前后各指标均无明显变化(P>0.05),IL-1β,IL-10水平的变化跟开放手术相比,差异有显著性意义(P<0.05)。2组在手术时间上无明显差异,但后腹腔镜肾癌根治手术组在住院天数、失血量、切口感染发生率等方面均优于开放手术组。结论开放性肾癌根治手术可造成患者血清中细胞因子IL-1β、IL-6水平升高,而后腹腔镜肾癌根治手术围手术期血清中细胞因子变化不明显,与开放手术相比,后腹腔镜肾癌根治手术对细胞因子水平影响小,术后恢复快。     

糖尿病合并肺结核患者单核细胞趋化蛋白-1、转化生长因子-β_1与T淋巴细胞的检测

目的观察糖尿病合并肺结核患者外周血单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、转化生长因子-β_1(TGF-β_1)和T淋巴细胞亚群的变化及其在糖尿病合并肺结核发生发展中的作用。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组外周血MCP-1、TGF-β_1的水平,用单克隆抗体碱性磷酸酶标记法(APAAP)检测外周血CD_3~+、CD_4~+和CD_8~+T淋巴细胞数量。结果肺结核、糖尿病及糖尿病合并肺结核患者外周血MCP-1和TGF-β_1含量均明显高于健康对照组(P<0.01),糖尿病合并肺结核患者MCP-1和TGF-β_1含量明显高于肺结核和糖尿病患者(P均<0.01)。肺结核、糖尿病及糖尿病合并肺结核组患者与正常对照组相比较,外周血CD_3~+、CD_4~+ T细胞降低,而CD_8~+T细胞增高(P<0.05,P<0.01),且糖尿病合并肺结核患者与肺结核、糖尿病患者比较,CD_3~+、CD_4~+ T细胞降低,CD_8~+细胞升高(P<0.05,P<0.01)。结论糖尿病合并肺结核患者存在细胞免疫功能失调,MCP-1、TGF-β_1和T淋巴细胞在糖尿病合并肺结核的发病机制中起着重要的作用。     

慢性心力衰竭患者血清转化生长因子-β_1和结缔组织生长因子水平与心功能关系

目的观察慢性心力衰竭(CHF)患者血清转化生长因子-β1(TGF-β1)和结缔组织生长因子(CTGF)的变化及与心功能相关性。方法收集105例CHF患者为CHF组,以68例健康查体者为健康对照组。检测血清TGF-β_1、CTGF水平及左心室射血分数(LVEF)、左心室质量指数(LVMI)变化,进行相关分析。结果 CHF患者血清TGF-β_1、CTGF均显著高于健康对照组(P均<0.01);TGF-β_1、CTGF升高与心力衰竭严重程度相平行;TGF-β_1、CTGF均与LVEF呈负相关(r=-0.638,P<0.01;r=-0.743,P<0.01),与LVMI(r=0.630,P<0.01;r=0.748,P<0.01)、心功能分级(r=0.647,P<0.01;r=0.753,P<0.01)呈正相关。结论血清TGF-β_1、CTGF共同参与了CHF的病理生理过程;血清CTGF水平可作为诊断及判断心力衰竭严重程度的生物学指标。     

橙皮素对转化生长因子-β_1诱导心肌成纤维细胞增殖的影响

目的探讨橙皮素(HES)对转化生长因子-β_1(TGF-β_1)诱导心肌成纤维细胞增殖的影响,并探讨其可能的机制。方法取SD大鼠30只,取其心肌组织进行成纤维细胞的培养。而后采用TGF-β_1(10 ng/ml)刺激成纤维细胞,采用4种不同浓度梯度的HES(25μmol/L、50μmol/L、75μmol/L、100μmol/L)干预成纤维细胞24 h,以台盼蓝染色检测其对细胞活性的影响;荧光酶标仪检测法用于检测细胞内活性氧(ROS)的水平;活细胞计数试剂盒(CCK-8)用以检测成纤维细胞的增殖情况。结果台盼蓝染色结果提示,HES对成纤维细胞的细胞活性无显著影响,各组活性值分别为空白对照组:100%,HES 25μmol/L组:95%,HES 50μmol/L组:94%,HES 75μmol/L组:93%,HES100μmol/L组:93%。酶标仪检测结果表明,与空白对照组相比,TGF-β_1可增加成纤维细胞内ROS的水平(P<0.01),当HES与TGF-β_1同时作用时,ROS水平随着HES浓度的增加逐渐降低,均存在统计学意义(P<0.05);TGF-β_1可刺激成纤维细胞增殖(P<0.01),当HES(100μmol/L)或N-乙酰半胱氨酸(NAC)(1 mmol/L)与TGF-β_1同时作用时,可明显抑制成纤维细胞增殖(P<0.01)。结论 HES可通过抑制TGF-β_1诱导的氧化应激进而抑制心肌成纤维细胞增殖,提示其对于预防心肌纤维化可能具有潜在效果。     

膀胱癌患者一氧化氮对外周血树突状细胞的影响

目的: 观察外源性一氧化氮(nitric oxide, NO)对膀胱癌患者外周血树突状细胞(dendritic cell, DC)的影响. 方法: 膀胱癌患者外周血中分离出单个核细胞,用粒/巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-4(IL-4)、肿瘤坏死因子(TNF)-α和肿瘤相关抗原(tumor associated antigen, TAA)培养DC细胞. 外源性NO干预后DC刺激自体淋巴细胞的增殖和细胞毒性T细胞(CTL)对膀胱癌T-24的杀伤效应,用MTT法检测. 结果: 外源性NO可明显抑制DC刺激的自体淋巴细胞增殖,在NO浓度分别为50, 100, 200和400 nmol/L时淋巴细胞增殖率分别为(67±3)%,(40±6)%,(24±2)%和(18±3)%(与对照相比P<0.01);显著下调DC诱导CTL杀伤T-24的细胞毒作用,用相同的NO浓度梯度干预,杀伤率分别为(45±4)%,(38±3)%,(32±3)%和(22±1)%(与对照相比P<0.01). 未受干预的DC能显著引起淋巴细胞的增殖,增殖率为(74±6)%;无NO干预DC诱导的CTL能特异性杀伤膀胱癌T-24,杀伤率为(54±3)%. 结论: 外源性一氧化氮能引起膀胱癌患者DC递呈抗原能力的下降,下调由DC刺激的淋巴细胞增殖及DC诱导的CTL杀瘤效应.     

肾癌患者围术期血清TGF-β_1、TNF-α及IL-2水平变化研究

目的探讨肾癌患者血清TGF-β_1、TNF-α及IL-2水平的变化规律。方法选取2006年9月～2010年1月于笔者所在医院进行手术治疗的36例肾癌患者为研究对象,分别于术前、术后即刻及术后24 h的血清TGF-β_1、TNF-α及IL-2水平进行检测,后将结果加以研究及比较。结果经研究比较发现,术前血清IL-2水平明显高于术后即刻,P0.05,而术后24 h血清IL-2水平较术后即刻有所升高,P0.05,有显著性差异。血清TGF-β_1、TNF-α呈下降趋势,术前明显高于术后即刻及术后24 h,P0.05或P0.01。结论肾癌患者围术期血清TGF-β_1、TNF-α及IL-2水平变化较大,可进一步研究探讨,以为其治疗提供依据。     

青蒿琥酯对宫颈癌HeLa细胞免疫抑制作用的影响

目的研究青蒿琥酯(ART)对宫颈癌He La细胞免疫抑制作用的影响。方法将He La细胞分为对照组和ART组,对照组不经药物作用,ART组以ART作用,同时同条件培养48 h,离心后分别收集上清液;细胞以磷酸盐缓冲液洗涤,调整浓度后再次以达尔伯克改良伊格尔培养基(DMEM)培养48 h,离心后收集上清液;再次调整细胞浓度,继续以DMEM培养48 h后收集上清液。酶联免疫吸附测定法检测上清液中转化生长因子β1(TGF-β1)、白细胞介素-10(IL-10)水平,紫外分光光度法检测前列腺素E2(PGE2)水平,噻唑蓝法检测对照组及ART组He La细胞培养上清液对植物血凝素(PHA)诱导的外周血单个核细胞(PBMC)增殖及细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的细胞毒作用的影响,以流式细胞术分析He La上清液对外周血淋巴细胞亚群表型的影响,比较2组免疫抑制因子水平及免疫细胞活性的变化。结果与同批次对照上清液比较,ART上清液、ART上清液1、ART上清液2中TGF-β1、IL-10水平及PGE2的吸光度值均显著降低(P<0.05)。与ART上清液比较,ART上清液1中TGF-β1水平、PGE2的吸光度值显著降低(P<0.05);与ART上清液1比较,ART上清液2中IL-10水平及PGE2的吸光度值显著增高(P<0.05)。对照上清液的增殖抑制率显著高于ART上清液(P<0.05);ART上清液1的增殖抑制率与对照上清液1比较、ART上清液2的增殖抑制率与对照上清液2比较差异均无统计学意义(P>0.05)。与正常杀伤对照组比较,对照上清液可显著抑制CTL的杀伤活性(P<0.05);与对照上清液比较,ART上清液杀伤活性明显增高(P<0.05);ART上清液1杀伤活性与对照上清液1比较、ART上清液2杀伤活性与对照上清液2比较差异均无统计学意义(P>0.05)。ART上清液与对照上清液比较、ART上清液1与对照上清液1比较,CD3+、CD4+、CD25+、CD4+CD25-各细胞百分率均显著升高(P<0.05),CD4+CD25+细胞百分率显著降低(P<0.05);与对照上清液2比较,ART上清液2的CD3+、CD4+、CD25+、CD4+CD25-、CD4+CD25+细胞百分率差异无统计学意义(P>0.05)。结论 ART可下调He La细胞分泌免疫抑制分子,减少对PHA诱导的PBMC增殖及CTL细胞毒作用的抑制,可在一定程度上逆转He La细胞的肿瘤免疫抑制,通过调节机体免疫起到抗肿瘤作用。     

肾癌相关抗原G250致敏的树突状细胞瘤苗体外诱导特异性抗肾癌免疫

目的 探讨肾癌相关抗原G250致敏的树突状细胞(DC)瘤苗体外诱导自体T淋巴细胞特异性抗肾癌免疫效应.方法 自健康人外周血中提取单核细胞,用重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和白细胞介素-4刺激活化、经肾癌相关抗原G250致敏(同时设未致敏的DC为对照),用流式细胞仪检测DC细胞和T细胞表面分子的表达,MTT检测肾癌相关抗原G250致敏的DC刺激自体T淋巴细胞增殖效应,以及诱导的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对不同靶细胞(肾癌细胞株786-0、肺癌细胞株A549)的杀伤活性.结果 两组细胞均高表达CD40、CD80、CD83、CD86、HLA-DR,较低表达CD1a,两组无明显差异(P＞0.05).经G250蛋白致敏的DC激发自体T细胞增殖的能力明显强于未致敏组的DC,由其激活的CTL对786-0的杀伤率明显高于对照组(P＜0.05),而两组对A549细胞均无明显杀伤活性.结论 肾癌相关抗原G250致敏的DC瘤苗体外可有效的诱导特异性抗肾癌效应.     

转化生长因子β1对子宫内膜癌细胞系Ishikawa体外增殖、细胞周期、凋亡的影响

目的 探讨转化生长因子β1(TGF-β1)对子宫内膜癌细胞系Ishikawa体外增殖、细胞周期及凋亡的影响.方法 用MTT法检测细胞增殖水平,通过流式细胞术观察细胞周期和凋亡的变化.结果 TGF-β1以时间依赖方式明显抑制Ishikawa细胞的生长(P<0.05),各浓度间差异显著,随浓度增高抑制更加显著(P<0.05).TGF-β1促进Ishikawa细胞凋亡,细胞凋亡百分比随时间及浓度的增加而增长;TGF-β1阻滞细胞停滞于G1期,S期的比例显著降低.结论 TGF-β1能抑制人子宫内膜癌Ishikawa 细胞的增殖,促进细胞凋亡,阻滞细胞周期.     

蟾蜍灵对大鼠肾小球系膜细胞增殖和细胞外基质分泌的影响

目的:探讨蟾蜍灵(bufalin)对脂多糖(LPS)诱导的大鼠肾小球系膜细胞(GMC)增殖及细胞外基质(ECM)分泌的影响.方法:体外培养大鼠肾小球系膜细胞,分为对照组、LPS刺激组(LPS5mg/L)和蟾蜍灵干预组(LPS5mg/L和蟾蜍灵1×10-8mol/L),应用台盼蓝拒染法检测蟾蜍灵对GMC的细胞毒性作用,通过MTT、流式细胞技术检测GMC增殖变化,RT-PCR检测转化生长因子-β1(TGF-β1)的mRNA的表达,ELISA法检测GMC培养上清中纤维连接蛋白(FN)及TGF-β1的表达.结果:MTT结果显示蟾蜍灵浓度在1×10-8mol/L及以上时呈剂量依赖性抑制GMC增殖(P<0.01).细胞周期分析显示蟾蜍灵组S期细胞比例较脂多糖组降低(P<0.01).蟾蜍灵干预组与脂多糖组相比TGF-β1的mRNA相对表达量减少(P<0.05),FN,TGF-β1蛋白分泌量减少(P<0.01).结论:蟾蜍灵对LPS作用后肾小球系膜细胞增殖及细胞外基质分泌具有抑制作用.     

人参皂苷Rg1、甲壳胺和转化生长因子β1对人牙周膜细胞增殖和分化功能的作用

目的:探讨人参皂苷Rg1、甲壳胺(Chi)和转化生长因子β1(TGF-β1)对原代培养的人牙周膜细胞增殖和分化功能的影响. 方法:用原代培养的人牙周膜细胞,采用噻唑蓝(MTT)比色法、酶动力学方法、放射免疫法和流式细胞仪检测人参皂苷Rg1(0.01 μmol/L)、不同浓度Chi(0.05 g/L、 0.1 g/L、 0.2 g/L)、不同浓度TGF-β1(0.5 μg/L、 1 μg/L、 2 μg/L)和单纯DMEM培养液(对照组)对人牙周膜细胞增殖、碱性磷酸酶(ALP)活性、骨钙素分泌和细胞凋亡的影响. 结果:①与对照组比较除TGF-β1 (0.5 μg/L、2 μg/L)组和Chi(0.2 g/L)组第7天外,TGF-β1、Chi各浓度组及人参皂苷Rg1组在3、5、7天均能明显增强牙周膜细胞的增殖能力(P<0.05).②TGF-β1、Chi各浓度组及人参皂苷Rg1组细胞裂解液中ALP活性均明显高于对照组(P< 0.05).③ 7天时,除Chi(0.2 g/L)组外,其他各组骨钙素分泌均明显强于对照组(P<0.05);21天时,人参皂苷Rg1(0.01 μmol/L)组明显高于其他各组(P < 0.05).④TGF-β1 (1 μg/L)组、Chi (0.1 g/L)组和人参皂苷Rg1(0.01 μmol/L)组细胞凋亡百分率与对照组比较均明显降低(P< 0.01). 结论:与TGF-β1一样,Chi及人参皂苷Rg1有促进牙周膜细胞增殖的作用,能增强人牙周膜细胞ALP活性,增加牙周膜细胞骨钙素的分泌,有降低牙周膜细胞凋亡率的作用.     

慢性乙型肝炎患者血清IL -13、IL -18、TGF -β和MMP -1水平测定的临床意义

目的 探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者血清细胞因子及相关指标的变化及其临床意义.方法 78例乙型肝炎患者分别设置为轻度(50例)和重度(28例)两组;分别测定患者血清白细胞介素13(IL-13)、白细胞介素18(IL-18)、转化生长因子-β1(TGF-β1)和金属基质蛋白酶-1(MMP-1)含量.检测方法:血清TGF-β1采用放射免疫分析法检测;IL-13、IL-18和MMP-1含量测定采用酶联免疫吸附试验测定.结果 本文结果显示,CHB患者轻度组和重度组血清IL-13水平均非常显著地高于对照组(P<0.01).IL-18水平轻度组明显高于对照组(P<0.05),重度组水平升高则更为显著(P<0.01).TGF-β1含量轻度组略高于对照组,统计差异无显著性(P>0.05);重度组含量明显高于对照组(P<0.05).MMP-1水平同TGF-β1的变化基本一致.结CHB患者血清细胞因子活性的变化,对于肝损伤程度及预后的评估具有一定临床意义.     

AMI患者血清TGF-β1的变化规律及可能的临床意义

[目的]探讨急性心肌梗死(AMI)患者外周血转化生长因子β1(TGF-β1)血清浓度变化规律及可能的临床意义.[方法]30例诊断为AMI患者(A组)于入院1 h、6 h、7 d、14 d取外周血;30例同期住院的稳定型心绞痛病人(B组),均与A组相对应的时间取外周血标本.双夹心抗体酶联免疫吸附试验(EL ISA)定量测定血浆TGF-β1,并同时测定外周血磷酸肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸肌酸激酶同工酶(CK-MB)含量.[结果]A组血清TGF-β1水平明显高于B组(P<0.01);血清TGF-β1高峰水平与CK、LDH、CK-MB高峰水平呈正相关(P<0.05).[结论]AMI患者血清TGF-β1水平增高可能是应急导致内皮细胞保护性分泌的结果;通过观察AMI患者血清TGF-β1水平评估患者的病情严重性有一定的临床实用意义.     

凋亡大肠癌CT26细胞对小鼠血清免疫因子水平以及免疫细胞增殖、活性的影响

目的 探讨凋亡大肠癌CT26细胞对小鼠血清免疫因子水平以及免疫细胞增殖、活性的影响.方法 取对数生长期大肠癌CT26细胞制备凋亡、坏死肿瘤细胞.取Balb/c小鼠20只,分离T淋巴细胞亚群及自然杀伤(NK)细胞、获取巨噬细胞,并制备细胞毒性T淋巴细胞(CTL).将小鼠CTL、NK细胞、巨噬细胞分别经相应肿瘤细胞处理后,均分为凋亡肿瘤细胞组、坏死肿瘤细胞组、肿瘤细胞对照组,应用51 Cr释放实验测定各组CTL、NK细胞、巨噬细胞的活性,细胞计数(CCK-8)法检测各组CTL、NK细胞和巨噬细胞的增殖情况.另选取Balb/c小鼠分为凋亡肿瘤细胞组、坏死肿瘤细胞组、肿瘤细胞对照组各10只,分别将凋亡、坏死、对数生长期CT26细胞按通过皮下及静脉输注小鼠,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组小鼠血清可溶性Fas(sFas)、γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)4、IL-10、IL-12、转化生长因子-β(TGF-β)的表达水平.结果 与坏死肿瘤细胞组及肿瘤细胞对照组比较,凋亡肿瘤细胞组中不同效靶比的CTL、NK细胞及巨噬细胞活性均降低(P＜0.05).CCK-8法检测结果显示,凋亡肿瘤细胞组的CTL、NK细胞及巨噬细胞的A450值均低于坏死肿瘤细胞组、肿瘤细胞对照组(P＜0.05).ELISA检测显示凋亡肿瘤细胞组sFas相对表达量低于坏死肿瘤细胞组和肿瘤细胞对照组(P＜0.05).凋亡肿瘤细胞组IL-4表达水平高于肿瘤细胞对照组(P＜0.05),IL-10、TGF-β表达水平则高于其他两组(P＜0.05),IL-12表达水平低于其他两组(P＜0.05).结论 凋亡大肠癌CT26细胞能够抑制小鼠特异性CTL、NK细胞、巨噬细胞增殖及其活性,影响大肠癌小鼠正常免疫功能.     

IL-12与IL-18在体外培养系统中诱导肿瘤特异性CTL杀伤活性的比较

目的：分别应用重组人白细胞介素12（rhIL-12）及重组人白细胞介素18（rhIL-18）在体外培养系统(CCs)中诱导肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL),比较IL-18与IL-12诱导的肿瘤特异性CTL的杀伤活性，探索IL-18的抗肿瘤作用机制。方法：采用Stem Sep^TM免疫磁性细胞分离法分离人外周血NK细胞、T细胞及DCs细胞，流式细胞仪分析细胞表型，¹²⁵I-UdR标记的细胞毒实验检测杀伤活性。结果：在CCs中、在肿瘤抗原存在的条件下，rhIL-18和rhIL-12均能诱导产生针对U251、MCF7特异性CTL，其作用能力与rhIL-18和rhIL-12的浓度呈剂量依赖关系，但rhIL-18诱导肿瘤特异性CTL的作用明显高于rhIL-12（P<0.01）；rhIL-18和rhIL-12在诱导肿瘤特异性CTL过程中具有协同作用，两者联合应用诱导肿瘤特异性CTL的能力明显高于单独应用rhIL-18和rhIL-12（P<0.01）。结论：rhIL-18和rhIL-12在CCs中均能够诱导并促进CTL介导的肿瘤特异性杀伤效应，rhIL-18诱导的肿瘤特异性CTL的能力明显高于rhIL-12，两者在诱导肿瘤特异性CTL过程中具有协同作用。     

非小细胞肺癌患者外周血中调节性T细胞的表达

目的探讨外周血CD4+CD25high调节性T细胞及其表面膜型TGF-β1的表达与非小细胞肺癌的关系。方法招募非小细胞肺癌患者41人,正常对照42人。采用流式细胞技术分析外周血中CD4+CD25high调节性T细胞数量及膜型TGF-β1的表达。ELISA法测定血清TGF-β1浓度。结果非小细胞肺癌患者外周血CD4+CD25high调节性T细胞数量较正常人明显增多(4.52%±1.61%比2.95%±1.19%,P<0.001),接受化疗后,该群细胞数量明显减少(5.23%±1.41%比3.20%±1.14%,P<0.001),CD4+CD25high调节性T细胞数量与肺癌临床分期及血清TGF-β1浓度呈正相关(r=0.789、0.832,P均<0.001)。肺癌患者外周血CD4+CD25high调节性T细胞表面表达的膜型TGF-β1也较正常人多(18.81%±8.78%比13.78%±4.94%,P=0.002),与临床分期也呈正相关(r=0.705,P<0.001)。结论CD4+CD25high调节性T细胞与非小细胞肺癌关系密切,CD4+CD25high调节性T细胞的数量及其表面的膜型TGF-β1是反应肿瘤...