SHH在GES-1和其他胃癌细胞中表达差异性的比较

目的探讨SHH在GES-1、AGS、SGC-7901和BGC-823中的表达差异性。方法采用real time RT-PCR技术和Western blot方法研究SHH在GES-1、AGS、SGC-7901和BGC-823细胞mRNA和蛋白质水平上的表达。结果与GES-1相比较,SHH mRNA和SHH蛋白在AGS、SGC-7901和BGC-823中的表达明显减少,差异均具有显著性（P〈0.01）。结论 SHH信号通路在胃癌的发生中具有重要的作用。     

Notch1 在胃癌组织中的表达及意义

目的比较不同病理特征的胃癌组织及癌旁正常黏膜组织中Notch1蛋白表达的差异,探讨Notch1蛋白在胃癌发生发展中的作用。方法用免疫组织化学方法检测54例胃癌组织标本和相应的54例正常胃黏膜组织中Notch1蛋白的表达。结果 Notch1蛋白在癌旁正常胃黏膜组织中表达较多,在早期胃癌组织和进展期胃癌组织中表达较少。Notch1蛋白在癌旁正常胃黏膜组织、早期胃癌组织和进展期胃癌组织中的阳性表达率分别为75.9%、57.9%和25.7%;进展期胃癌患者胃癌组织中Notch1蛋白阳性表达率低于早期胃癌和癌旁正常组织(P<0.05)。Notch1蛋白在胃癌组织中的表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤部位无明显相关性(P>0.05),但与肿瘤分化程度、病理分期及淋巴结转移有显著相关性(P<0.05)。结论 Notch1蛋白表达降低可能与胃癌的发生发展及浸润和转移有关。     

Notch1在人胃癌组织中的表达及意义

目的 研究Noteh1在人胃癌组织中的表达及意义.方法 采用免疫组化EnVision法测定Notch1在108例胃癌组织及22例癌旁正常胃组织中的表达,分析其表达水平与胃癌的关系.结果 Notch1在胃癌组织和癌旁正常胃组织中均有表达,分别为38.9%(42/108)和72.7%(16/22),二者差异有统计学意义(P<0.01). Noteh1在胃癌组织中的表达与胃癌的分化程度、浸润深度及淋巴结转移有关(P<0.05),与肿瘤大小无关(P>0.05).结论 Notch1的表达下调可能与胃癌的发生发展有关.Notch1在胃癌的发生中可能起抑癌基因的作用.     

AKTIP基因真核表达载体的构建及其在GES-1细胞中的表达

目的:构建人蛋白激酶B相瓦作用蛋白(AKTIP)基因编码区序列(cDNA)的真核表达载体,观察其在GES-1细胞中的表达.方法:从健康人外周血中提取总RNA,应用RT-PCR方法扩增AKTIP cDNA的全长序列后克隆入pcDNA3.1/myc-His(-)A质粒中,经酶切鉴定及DNA测序证实后,应用脂质体将AKTIP基因转染入人胃黏膜细胞株GES-1细胞中,通过Western Blot检测其在GES-1细胞中的表达情况.结果:重组载体经酶切鉴定和测序证实目的基因正确无误,Western Blot结果显示AKTIP基因在GES-1细胞具有良好的表达.结论:成功地构建了pcDNA3.1/myc-His(-)A-AKTIP真核表达载体,并成功地在GES-1细胞中进行了表达,为进一步研究AKTIP的功能和结构奠定了基础.     

Fibulin-1在女性压力性尿失禁患者盆底组织中的表达及意义

目的 探讨压力性尿失禁( SUI)患者阴道前壁中Fibulin-1与SUI发生的关系.方法 采用实时荧光定量-PCR、免疫蛋白印迹方法测定25例压力性尿失禁患者(SUI组)阴道前壁组织中Fibulin-1的蛋白及mRNA表达水平,择同期27例非卵巢功能性肿瘤和宫颈病变患者作为对照(对照组).结果 RT-PCR结果显示Fibulin-1mRNA表达水平△Ct值在SUI组织(0.456 5±0.220 6)明显低于对照组组织(0.246 8±0.5017) (F =0.241,P＜0.001);Fibulin-1 mRNA表达水平△Ct值在SUI绝经前组组织(0.373 2±0.158 2)明显低于绝经前对照组组织(1.157 5±0.1542)(F=0.212,P＜0.001);Fibulin-1 mRNA表达水平△Ct值在SUI绝经后组组织(0.557 3±0.2219)与绝经后对照组组织(0.5326±0.2221)都很微弱,(F=1.099,P＞0.05).结论 SUI患者的盆底支持结构的退行性病变与组织中的Fibulin-I低下有关.     

肝细胞癌中Notch1和Notch2蛋白表达及其意义

目的:探讨原发性肝细胞癌(primary hepatocellular carcinoma,PHCC)中Notch1和Notch2蛋白的表达及临床病理学意义。方法:采取免疫组织化学ENVISION法对78例PHCC组织和对照组10例癌旁组织中Notch1和Notch2蛋白的表达进行检测,并结合临床病理学及随访资料,进行统计分析。结果:在PHCC组织中Notch1阳性表达52例(66.67%),Notch2阳性表达12例(15.38%),而对照组癌旁组织Notch1阳性表达2例(20.00%),Notch2阳性表达8例(80.00%)。Notch1阳性表达率PHCC组织高于对照组癌旁组织(P<0.01),而Notch2在PHCC组织中的阳性表达率低于对照组癌旁组织(P<0.01),两者比较差异均有统计学意义。Notch1的表达与有无肝硬化、肿瘤大小、HBsAg是否阳性、肿瘤分期及转移呈正相关,而Notch2的表达与患者年龄、组织分级以及TNM分期呈正相关。随访9年,死亡53例,存活25例,≥24个月38例,生存时间<24个月40例,平均生存时间34.96个月,2年生存率48.72%。Spearman等级相关性分析显示,随着Notch1阳性表达率提高,PHCC患者术后生存率下降,两者呈负相关,Notch2阳性表达率与PHCC患者的生存时间无相关性。结论:Notch1作为促癌基因,在PHCC的发生发展、浸润和转移起着重要作用,而Notch2在肝细胞癌中表达较低,可能具有抑制肝细胞癌生长的作用。     

胃癌患者胃黏膜组织中Notch1蛋白阳性表达率的影响因素分析

目的:分析胃癌患者胃黏膜组织中Notch1蛋白阳性表达率的影响因素。方法:选取64例胃癌患者作为观察组,选取同期64例萎缩性胃炎患者作为对照组。采集患者的胃黏膜组织进行免疫组化试验。对比两组Notch1蛋白阳性表达率,分析影响胃癌患者Notch1表达阳性率的因素。结果:观察组Notch1蛋白阳性表达率较对照组高,差异有统计学意义(P<0.05);经Logistic回归分析显示,胃癌患者组织分化程度、脉管浸润情况、淋巴结转移及TNM分期均是影响Notch1蛋白阳性表达率的独立因素(P<0.05)。结论:Notch1蛋白在胃癌患者胃黏膜组织中具有较高的阳性表达率,且其与肿瘤分化程度、脉管浸润、淋巴结转移及TNM分期密切相关,在胃癌的早期诊断中具有较高的临床价值。     

Notch1和HIF-1α蛋白在胃癌中的表达及临床意义

目的 探讨Notch1和HIF-1α蛋白在胃癌中的表达与临床病理特征及预后关系。方法 应用组织芯片技术、免疫组化染色，检测Notch1和HIF-1α在135例胃癌及27例正常胃黏膜中的表达。对正常胃黏膜与胃癌Notch1和HIF-1α蛋白阳性表达率的差异以及与临床病理特征的关系，Notch1和HIF-1α蛋白阳性表达的相关性，Notch1和HIF-1α蛋白阳性表达与生存期的关系运用统计学方法进行显著性检验。结果 Notch1和HIF-1α蛋白在胃癌组织中阳性表达率高于正常胃黏膜（P〈0.05）;TNM分期中的Ⅲ-Ⅳ期组和伴有淋巴结转移组的Notch1和HIF-1α阳性表达率高于相应的Ⅰ-Ⅱ期组和无淋巴结转移组（P〈0.05）;Notch1与HIF-1α间存在正相关关系（P〈0.01），并与生存期密切相关，阳性表达组较之阴性表达组平均生存期缩短（P〈0.05）。结论 Notch1和HIF-1α蛋白阳性表达与胃癌侵袭、转移密切相关，对于判断胃癌的预后可能具有重要意义。     

Hes1和Notch1在胃癌细胞和组织中表达的初步研究

目的探讨胃癌细胞株和胃癌组织中Hes1和Notch1表达规律。方法通过免疫组织化学技术,观察BGC-823人胃腺癌细胞株和不同类型胃癌组织中Hes1和Notch1的表达特点。结果在BGC-823胃癌细胞爬片中Hes1的免疫细胞化学染色可见绝大多数细胞阳性,Notch1的染色可见散在少数细胞阳性。胃癌组织免疫组化染色可见癌旁组织中正常幽门腺可见Hes1和Notch1阳性细胞,在增生和肠上皮化生的腺体可见比较多的Hes1和Notch1阳性细胞,管状腺癌中几乎为阴性,在肌层中浸润的癌细胞Hes1和Notch1阳性更加明显。肠化腺体、低分化腺癌和黏液腺癌中Hes1表达明显高于管状腺癌,淋巴管内癌细胞几乎全部Notch1阳性。结论胃癌组织中具有Hes1和Notch1表达的癌细胞,侵袭比较强的胃癌细胞可出现Notch1更加明显的表达。     

Hes1和Notch1在胃癌细胞和组织中表达的初步研究

目的探讨胃癌细胞株和胃癌组织中Hes1和Notch1表达规律。方法通过免疫组织化学技术,观察BGC-823人胃腺癌细胞株和不同类型胃癌组织中Hes1和Notch1的表达特点。结果在BGC-823胃癌细胞爬片中Hes1的免疫细胞化学染色可见绝大多数细胞阳性,Notch1的染色可见散在少数细胞阳性。胃癌组织免疫组化染色可见癌旁组织中正常幽门腺可见Hes1和Notch1阳性细胞,在增生和肠上皮化生的腺体可见比较多的Hes1和Notch1阳性细胞,管状腺癌中几乎为阴性,在肌层中浸润的癌细胞Hes1和Notch1阳性更加明显。肠化腺体、低分化腺癌和黏液腺癌中Hes1表达明显高于管状腺癌,淋巴管内癌细胞几乎全部Notch1阳性。结论胃癌组织中具有Hes1和Notch1表达的癌细胞,侵袭比较强的胃癌细胞可出现Notch1更加明显的表达。     

原癌基因c—met在胃癌细胞株中的表达

目的：观察原癌基因c—met在不同分化的胃癌细胞株中的表达水平。方法：采用实时荧光定量PCR仪和Westernblotting检测高分化胃癌MKN28、中分化胃癌SGC-7901、低分化胃癌MKN45和正常胃细胞GESl中c—met的表达情况。结果：荧光定量PCR显示原癌基因c—met在三个胃癌细胞株中均有高表达，但以中分化的胃癌细胞SGC-7901的表达（0．064606＋0．0025）显著高于低分化的胃癌细胞株MKN45（0．016657±0．0002）和高分化的胃癌细胞株MKN28（0．002419±0．0002）（P〈0．01）；Westernblotting显示c—met在蛋白水平的结果与前-致。结论：四个胃癌细胞株中，原癌基因c—met均有表达，以SGC-7901表达量最高。     

OCT4基因在胃癌细胞系中的表达及其意义

【摘要】 目的 检测八聚体结合蛋白-4（octamer-binding protein-4,OCT4）基因在不同分化程度的胃癌细胞株（MKN-28、SGC-7901、BGC-823）及正常胃黏膜细胞株GES-1中的表达情况,研究OCT4基因表达水平与胃癌细胞分化程度和侵袭力的相关性。方法 RT-PCR确定GES-1、MKN-28、SGC-7901、BGC-823中OCT4基因的表达水平,OCT4 siRNA转染BGC-823细胞,分别通过荧光定量PCR和Western blot检测干扰OCT4基因表达的效果,并利用Transwell小室法研究OCT4在BGC-823细胞侵袭力中的作用。结果 正常人胃黏膜细胞中未检测到OCT4的表达,人胃癌细胞系分化程度越低,OCT4基因表达量越高,低分化人胃癌细胞系BGC-823中OCT4基因表达最高,转染OCT4 siRNA的BGC-823细胞内的OCT4 mRNA和OCT4蛋白表达量明显下降（P＜0．05）。干扰胃癌细胞BG-823中OCT4基因的表达,穿膜细胞数量减少（P＜0．05）,侵袭力下降。结论 OCT4基因表达量与胃癌细胞的分化程度有关,OCT4基因可能在胃癌细胞的分化中起重要作用,影响胃癌细胞的侵袭能力,其表达程度有望成为胃癌患者恶性度预测的参考指标之一。     

3种胃癌细胞株中GSTP1基因表达及其启动子区甲基化状态的研究

目的研究候选基因GSTP1在胃癌细胞株中的表达及其启动子区的甲基化状态,初步探讨胃癌细胞株GSTP1基因表达水平与其启动子区甲基化的相关性。方法采用RT-PCR和Western blot技术分别检测GSTP1在人胃癌细胞株MGC803、BGC823和SGC7901中的mRNA和蛋白表达水平。甲基化特异性PCR(MSP)法检测启动子区域甲基化状态。分别用不同浓度的去甲基化药物5-氮杂胞苷处理GSTP1基因启动子区高甲基化状态细胞后,再检测GSTP1基因蛋白表达水平。结果人胃癌细胞株BGC823和SGC7901中GSTP1 mRNA和蛋白呈阳性表达,MGC803中mRNA和蛋白呈阴性表达;BGC823和SGC7901细胞GSTP1基因启动子区域未发生甲基化,而MGC803细胞启动子区呈高甲基化状态;经5-氮杂胞苷药物干预后,MGC803细胞的GSTP1蛋白表达明显增强。结论胃癌MGC803细胞株中GSTP1基因表达沉默与启动子区高甲基化状态有关。     

XAGE-1基因在胃癌组织中的表达及其临床意义分析

目的探讨XAGE-1四种不同剪接体基因在胃癌组织中的表达水平及与临床特点的关系．方法胃癌患者85例提取胃癌组织及癌旁组织总RNA,RT-PCR检测XAGE-1四种剪接体的表达,并分析其表达与临床特点的关系。结果49．41％（42／85）的胃癌组织阳性表达XAGE-1mRNA,其中41．18％（35／85）癌组织表达XAGE-lb,8．23％（7／85）胃癌组织表达XAGE-ldmRNA．XAGE-1bmRNA的表达与肺癌性别、年龄、组织分型、TNM分期、肿瘤大小、浸润程度及淋巴结转移无相关性（P〉0．05）．结论XAGE-lb基凶在胃癌组织中高表达可以作为肿瘤疫苗的靶位点．     

Survivin基因的表达在胃溃疡及胃癌的研究

目的:研究胃癌(gastric cancer,GC)及胃溃疡(gastric ulcer,GU)组织中生存素(Survivin)的表达规律,探讨胃溃疡在胃癌形成过程中的可能机制,为临床应用以生存素为靶点的胃癌防治措施提供理论依据。方法:采用免疫组织化学染色(SP法)检测不同胃黏膜组织中Survivin的表达。结果:从CSG→CAG→Dys→GC过程中,无论在非溃疡组,还是在溃疡组中,Survivin表达均呈递增趋势。在非溃疡各组中灰度值CSG57.64±4.44、CAG55.05±6.97、Dys48.59±4.16;在溃疡各组中灰度值CSG58.25±5.54、CAG53.95±3.48、Dys48.91±4.63;在胃癌中32.25±4.13。Survivin表达在非溃疡组和溃疡组所对应的胃黏膜比较差异无统计学意义(P>0.05)。而CSG、CAG、Dys、GC之间表达有统计学意义(P<0.05)。胃癌组织中Survivin的表达与年龄、性别、肿瘤大小、临床分期和组织分化程度无关。结论:①Survivin基因表达可作为在胃黏膜由浅表向萎缩、不典型增生和胃癌发展过程中的有用指标。②胃溃疡的癌变实质上是溃疡边缘背景病变萎缩、不典型增生的癌变。     

15-脂氧合酶-1在胃癌细胞AGS中的表达

目的研究15-脂氧合酶-1（15-LOX-1）基因在人胃癌细胞AGS中的表达及其对AGS增殖凋亡的影响。方法通过脂质体介导瞬时转染15-LOX-1基因于培养的AGS中,逆转录PCR法和免疫印迹法检测15-LOX-1mRNA及蛋白表达;四甲基偶氮唑盐法（MTT）、流式细胞术、AnnexinV／PI染色与原位末端标记法（TUNEL）比较转染前后AGS的增殖和凋亡情况。结果胃癌细胞AGS转染后表达有15-LOX-1的mRNA及蛋白。与非转染组及空质粒转染组相比较,转染重组质粒组AGS细胞生长明显受到抑制并且细胞周期停滞在G1期,其凋亡率明显高于非转染组及空质粒转染组。结论15-LOX-1基因能够抑制胃癌细胞AGS的增殖,并促进其凋亡。