丁苯酞抑制原代大鼠海马神经元氧糖剥夺/复氧诱导的凋亡

目的:观察丁苯酞对氧糖剥夺/复氧(oxygen glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)诱导的SD大鼠原代培养海马神经元损伤的保护作用。方法:原代培养新生24 h内SD乳鼠海马神经元,建立氧糖剥夺30 min/复氧8 h海马神经元损伤模型。实验分为正常对照组、OGD/R模型组、丁苯酞低、中、高剂量组(0.1,1,10μmol·L-1)。采用Hoechest33258染色测定细胞凋亡,免疫细胞化学检测各组细胞中Bcl-2蛋白的表达情况。结果:与OGD/R模型组比较,各丁苯酞给药物组神经元凋亡率均不同程度降低(P<0.01),且随药物浓度升高而降低;Bcl-2蛋白表达不同程度地增高(P<0.01),且随药物浓度升高而升高。结论:丁苯酞能抑制OGD/R诱导的海马神经元细胞凋亡,其可能通过增加神经元内Bcl-2凋亡抑制蛋白的表达而抑制凋亡,进而保护神经元。     

天麻活性成分减轻大鼠神经元氧糖剥夺/复糖复氧损伤的作用机制

目的 研究天麻活性成分3,4-二羟基苯甲醛（3,4-DD）对大鼠脑微血管内皮细胞（BMECs）-大鼠肾上腺嗜铬细胞PC12共培养体系氧糖剥夺/复糖复氧（OGD/R）损伤的改善作用机制。方法 采用Transwell小室共培养BMECs与PC12细胞，然后分为对照组、模型组、丁苯酞组（阳性对照组，0.1 mmol/L）、3,4-DD组（0.1μmol/L），除对照组外，其余各组共培养体系均复制OGD/R损伤模型。同时，共培养体系以相应药物或培养基干预BMECs 24 h，然后检测体系跨膜电阻（TEER）以及PC12细胞中乳酸脱氢酶（LDH）活性、脑源性神经营养因子（BDNF）水平以及TrkB、Plc-γ、Map-2、GAP-43 mRNA表达水平。结果 与对照组比较，模型组共培养体系TEER以及PC12细胞中LDH活性、BDNF水平均显著降低（P<0.01）,PC12细胞中TrkB、Plc-γ、Map-2、GAP-43 mRNA表达水平均显著升高（P<0.01）；与模型组比较，3,4-DD组、丁苯酞组共培养体系TEER以及PC12细胞中LDH活性、BDNF水平和TrkB、Plc...     

白藜芦醇对原代培养大鼠脑皮质神经元氧糖缺失损伤的保护

目的 观察白藜芦醇(Res)对原代培养大鼠脑皮质神经元氧糖缺失损伤的保护作用.方法 将新生大鼠脑皮质神经元原代培养至第10天,以低糖结合物理性缺氧诱导缺氧缺糖(OGD)模型,并于造模 2 h后复氧复糖(RP),尼莫地平(Nim 1.0 μmol · L-1)为阳性对照,观察Res对OGD和OGD/RP的噻唑蓝(MTT)液比色吸光度和乳酸脱氢酶(LDH)释放百分率的影响,在光镜和电镜下观察神经元的形态变化.结果 Res的增加对神经元OGD 1、2、4 h和OGD 2 h/RP 3、12、24 hMTT液的吸光度有显著性差异,可减少其LDH的释放,减轻神经元形态的损伤.结论 Res对原代培养大鼠脑皮质神经元氧糖缺失损伤具有保护作用.     

脑源性神经营养因子对烧伤大鼠血清引起基底神经元损伤的保护作用

目的 观察脑源性神经营养因子(BDNF)对于烧伤大鼠血清造成基底神经元损伤的保护作用.方法 取出生后1 d乳鼠前脑基底神经元培养,随机分为正常对照组、损伤组(烧伤大鼠血清损伤组)、BDNF保护组.测定烧伤大鼠基底神经元NO和LDH含量;给予原代培养基底神经元不同浓度BDNF 24 h后,加入不同浓度烧伤大鼠血清,测定细胞存活率和培养液中NO含量.结果 大鼠烧伤后基底组织NO和LDH含量明升高,烧伤大鼠血清可引起培养的基底神经元存活率下降,培养液中NO含量升高;BDNF能降低基底组织中NO和LDH的含量,提高培养的基底神经元的存活率,减少培养液中NO含量,其作用呈剂量依赖性,BDNF对神经元存话率的影响与NO含量呈显著负相关.结论 BDNF对烧伤大鼠血清引起的基底神经元损伤有保护作用,其作用机制可能是通过抑制NO的神经毒性.     

灯盏花素对大鼠脑微血管内皮细胞OGD损伤的保护作用及机制研究

<正>灯盏花素(breviscapine,Bre)是从短亭飞蓬中提取的黄酮类化合物,具有保护缺血性脑血管疾病、调节血管内皮功能、减轻炎性反应等作用[1]。本实验通过分离培养大鼠脑微血管内皮细胞(BMECs),建立氧糖剥夺(OGD)BMECs模型,研究Bre对BMECs损伤是否具有保护作用,并探讨其可能的机制。相关研究尚未见报道。1材料与方法     

青藤碱对大鼠海马神经元缺血损伤的保护作用

目的观察青藤碱(sinomenine,SN)对氧糖剥夺(oxygen glucose deprivation,OGD)诱导海马神经元缺血损伤的保护作用并探讨其机制。方法原代培养海马神经元OGD 2h后复灌24 h(OGD-R),MTT法和LDH试剂盒分别检测各组细胞存活率和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放量;Hoechst染色检测细胞凋亡;Westren blot检测凋亡相关蛋白表达;荧光钙离子成像系统检测[Ca2+]i,全细胞膜片钳技术记录酸敏感离子通道(acid-sensing ion channels,ASICs)电流。结果不同浓度SN均能抑制OGD-R诱导的海马神经元存活率降低和LDH释放增多;SN能明显抑制OGD-R诱导的神经元凋亡、Bcl-2/Bax比值的下降、caspase-3表达的增加以及胞内钙浓度升高,SN还能抑制海马神经元ASIC1a电流,也能抑制OGD诱导的ASICs电流增加。结论 SN对OGD诱导海马神经元损伤有保护作用,其机制可能与抑制ASICs通道减轻钙超载相关。     

N-硬脂酰酪氨酸对缺氧缺糖诱导神经元凋亡的影响

目的 探讨N-硬脂酰酪氨酸(NsTyr)对缺氧缺糖(OGD)诱导大鼠皮层神经元损伤的影响及作用机制.方法 采用MTT法及Hoechst 33342染色检测NsTyr对OGD诱导神经元损伤及凋亡的影响:通过免疫印迹法探讨NsTyr抗OGD诱导神经元凋亡的分子机制,并使用丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路的特异性阻断剂SB203580、SP600125和U0126考察其抗凋亡的信号转导通路.结果 NsTyr对OGD造成的皮层神经元损伤有剂量相关的保护作用,促进细胞存活,减少细胞凋亡;NsTyr通过上调Bcl-2表达、下调Bax表达,保持Bcl-2/Bax的平衡,实现抗OGD损伤的作用,该作用通过ERK和p38信号通路介导.结论 NsTyr可通过ERK和p38信号通路调节凋亡基因的表达,抑制OGD引起的神经元凋亡.     

基于核因子NF-E2相关因子/血红素氧合酶-1信号通路研究丁苯酞对糖尿病脑小血管病大鼠的作用机制

目的:通过核因子NF-E2相关因子(Nrf2)/血红素氧合酶-1(HO-1)信号通路研究丁苯酞治疗糖尿病脑小血管病大鼠的作用机制。方法:将建模成功的糖尿病脑小血管病大鼠随机分为丁苯酞治疗组和模型组，行水迷宫实验，取材后石蜡切片染色、脱水封片，显微镜观察大鼠大脑皮质的组织学结构及该区域神经元细胞的组织病理学改变；应用Western blot法检测脑组织Nrf2/HO-1信号通路中Nrf2和HO-1蛋白表达。结果:水迷宫实验d 1～d 4,与模型组相比，丁苯酞治疗组大鼠定位航行实验逃避潜伏期逐渐缩短。脑组织镜下观察，与模型组相比，丁苯酞治疗组大鼠脑组织细胞排列规则、细胞核饱满圆润、固缩现象减少。Western blot法检测发现，与模型组相比，丁苯酞治疗组大鼠脑组织中Nrf2和HO-1蛋白表达增高。结论:丁苯酞治疗组大鼠脑组织中Nrf2和HO-1增加，表明丁苯酞可能通过上调抗氧化应激蛋白的表达发挥脑保护作用。     

可乐定对原代培养大鼠皮质神经元氧糖剥夺损伤的保护作用

目的：研究可乐定对原代培养大鼠皮质神经元氧糖剥夺( OGD)损伤的保护作用。方法取培养8 d的皮质神经元,分为正常对照组、模型对照组、可乐定(1.0,3.0,10.0μmol·L-1)预处理组。神经元氧糖剥脱损伤模型通过化学性缺氧、孵育液缺糖的方法建立。神经元损伤程度采用噻唑蓝( MTT)染色法和检测乳酸脱氢酶( LDH)的释放量来进行评价,观察预给予可乐定(1.0,3.0,10.0μmol·L-1)对神经元损伤的保护作用。结果显微镜下,正常对照组细胞密集,胞体饱满,边缘光滑,有较强折光性;神经元存活率(100.00±32.12)％,LDH释放比率(100.00±37.51)％。模型对照组细胞核固缩,细胞膜不完整,折光性差,MTT染色吸光度值明显降低,神经元存活率(53.61±7.62)％,LDH释放量显著增加,释放率为(166.07±9.65)％。可乐定(1.0,3.0,10μmol·L-1)预处理可明显逆转ODG损伤所致细胞形态的改变,剂量依耐性升高MTT染色吸光度值,神经元存活率分别为(67.53±10.54)％,(71.50±9.79)％和(87.48±5.29)％,同时可明显降低LDH的释放量,释放率分别为(136.45±25.72)％,(130.92±24.94)％和(121.63±32.68)％。结论可乐定对原代培养大鼠皮质神经元ODG损伤具有良好的保护作用。     

银杏二萜内酯葡胺注射液对缺糖缺氧损伤的SH-SY5Y细胞保护作用

目的探讨银杏二萜内酯葡胺注射液(YXETNZ)对缺糖缺氧(oxygen-glucose deprivation,OGD)损伤的人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)的保护作用及可能的机制。方法 SHSY5Y细胞OGD损伤4 h后,与药物一起复氧1 h,然后测定细胞存活率(CCK-8法)、caspase-3/7酶活力、细胞质中核小体含量;蛋白质免疫印迹检测细胞中p-Akt、p-PKA、p-Bad蛋白量的变化。结果 OGD明显提高SH-SY5Y细胞caspase-3/7酶活力和细胞质中核小体含量,明显降低细胞的存活率。YXETNZ能明显提高OGD损伤的SH-SY5Y细胞的存活率,抑制caspase-3/7酶活性,减少细胞核核小体的释放量,上调p-Akt、p-PKA和p-Bad激酶蛋白量,提高Akt和PKA活性,保护神经细胞。结论 YXETNZ对OGD损伤的SHSY5Y细胞具有明显的保护作用,其保护机制可能与细胞内PI3K/Akt/Bad/caspase-3/7、c AMP/PKA/Bad/caspase-3/7细胞通路的激活有关。