胆管癌组织中自发性细胞凋亡和bcl-2/bax表达的状况及意义

目的：研究胆管癌组织中自发性细胞凋亡和bcl-2/bax基因表达的状况及意义。方法：TUNEL法原位检测凋亡细胞，免疫组化检测bcl-2和bax蛋白表达。结果：40例胆管癌标本自发性细胞凋亡指数（AI）的中位值为7．89％，高／中分化和无淋巴结转移胆管癌AI分别高于低分化和淋巴结转移者（P＜0．01），胆管癌组织bcl-2和bax蛋白表达率分别为７２．５％（２９／４０）和５７．５％（２３／４０），与癌旁正常胆管壁组织比较差异显著（Ｐ＜０．０１），高／中分化胆管癌bcl-2蛋白表达率高于低分化胆管癌（P＜0．01），bcl-2表达阳性胆管癌AI低于阴性，bax阳性高于阴性（P＜0．01），结论：胆管癌细胞仍保胃凋亡机制，bcl-2凋亡途径参与了胆管癌的发生，发展过程，AI和bcl-2蛋白表达可作为判断胆管癌恶性程度的指标。     

口腔癌凋亡相关基因bcl-2、bax表达的初步研究

目的 探讨凋亡相关基因bcl－2及bax基因在口腔癌的表达情况。方法 60例口腔癌的组织切片标本。bcl－2单隆抗体,bax多克隆抗体,SP免疫组织化学染法,结果 60例,bcl-2阳性率为68．33％;bax阳性36．67％。颈淋巴结转移组的阳性率为38．71％,低分化组为17．86％,高中分化组与低化组差异有显著性高分化组的bax阳性率为60％,中分化组为41．67％,低分化组为17．86％,高中分化组与低分化组差异有显著性（P＜0．05）。结论 bcl-2和bax在分化较好的早期肿瘤细胞中表达较多,随着分化程度的降低,bcl-2及bax表达率也降低。     

SNP对体外培养的海马神经元bcl-2和bax基因表达的影响

目的：探讨NO供体硝普钠（Sodium Nitroprusside，SNP）诱导体外培养的海马神经元凋亡与Bcl-2、Bax表达变化的关系。方法：终浓度分别为0、25、50、100、200、400 цmol/L的SNP处理海马神经元24h，或用终浓度为50цmol/L的SNP分别处理海马神经元0、6、12、18、24h，用RT-PCR检测 Bcl-2、bax mRNA表达变化，Western blox检测Bcl-2、Bax蛋白表达的变化。结果：随着SNP剂量的增加，bcl-2mRNA、Bcl-2蛋白表达逐渐减少，而bax mRNA蛋白表达逐渐增加；随着时间的处长，bcl-2mRNA、Bcl-2蛋白表达逐渐减少，而bax Mrna、Bax蛋白表达去逐渐增加。结论：SNP可时间、剂量依赖性地降低bcl-2mRNA、Bcl-2蛋白的表达，时间、剂量依赖性地增加baxmRNA、Bax蛋白的表达。SNP诱导海马神经元凋亡的机制，可能是与降低Bcl-2/Bax的比值有关。     

兔脑出血灶周围脑组织细胞凋亡及bcl-2和bax的检测

目的 :探讨兔脑出血灶周围脑组织中bcl 2、bax蛋白表达和细胞凋亡的关系。方法 :家兔 40只 ,分为A、B、C、D 4组。B、C、D 3组采用兔自体血二次注射法制作脑出血模型 ,分别于模型制作完成后 12h ,2 4h ,72h断头处死 ,运用TUNEL法、免疫组化SP技术 ,检测出血灶周围脑组织中细胞凋亡及bcl 2、bax蛋白表达。结果 :出血灶周围脑组织中细胞凋亡、bcl 2和bax蛋白表达在各组间差异有显著性 (P <0 .0 5 )。bcl 2蛋白表达与凋亡阳性细胞数呈负相关 (r=- 0 .781,P <0 .0 5 ) ,bax蛋白表达与其呈正相关 (r=0 .72 3,P <0 .0 5 )。结论 :出血灶周围脑组织中存在细胞凋亡 ,细胞凋亡的变化在一定程度上反映了周围脑组织的损伤程度。bcl 2和bax蛋白对凋亡具有调控作用。     

切断面神经干后大鼠面神经元bcl-2、bax基因表达变化及意义

目的 观察面神经干切断后面神经元ｂｃｌ－２、ｂａｘ基因表达与面神经元调亡的关系。方法 采用大鼠面神经干切断模型,应用免疫组织化学方法观察面神经干切断后面神经元内ｂｃｌ－２、ｂａｘ基因表达变化和对面神经元凋亡的影响。结果 面神经干切断后可以导ｂｃｌ－２、ｂａｘ基因表达的明显变化及面神经元的凋亡。结论 ｂｃｌ－２、ｂａｘ基因参与了面神经干切断诱导的面神经元凋亡过程的调控。     

胃粘膜组织中bcl-2、bax蛋白表达与胃癌的关系

目的：探讨bcl-2、bax表达在胃癌多基因、多阶段发展过程中可能的作用机制。方法：采用免疫组化法对79例临床标本（慢性浅表性胃炎30例、萎缩性胃炎14例、胃炎伴异型增生20例、胃癌15）进行了bcl-2、bax蛋白表达的检测。结果：在慢性浅表性胃炎组中无bcl-2表达,异型增生组阳性表达率5％,胃癌组为20％,阳性表达率呈逐渐增加趋势;bax蛋白阳性表达率在慢性浅表性胃炎组为83．3％,萎缩性胃炎组为64．3％,异型增生组为60％,胃癌组为46．7％,阳性表达率呈逐渐减少趋势。结论：本研究结果提示在胃癌的多阶段发展过程中可能存在促凋亡基因bax的表达逐渐受抑及抑凋亡基因的表达逐渐增加,即存在凋亡受抑。     

miR-378a对高糖介导胰岛β细胞损伤的影响

目的:研究miR-378a对高糖介导胰岛β细胞损伤的影响.方法:体外培养大鼠胰岛β细胞INS-1,采用高糖刺激INS-1细胞,实验分为Con组、HG组、HG+anti-miR-NC组和HG+anti-miR-378a组.实时荧光定量PCR(qPCR)分析各组INS-1细胞中miR-378a的表达情况;噻唑蓝比色法(MT...     

兔脑出血灶周围脑组织细胞凋亡及bcl—2和bax的检测

目的：探讨兔脑出血灶周围脑组织中bcl-2、bax蛋白表达和细胞凋亡的关系。方法：家兔40只,分为A、B、C、D4组。B、C、D3组采用兔自体血二次注射法制作脑出血模型,分别于模型制作完成后12h,24h,72h断头处死,运用TUNEL法、免疫组化SP技术,检测出血灶周围脑组织中细胞凋亡及bcl-2、bax蛋白表达。结果：出血灶周围脑组织中细胞凋亡、bcl-2和bax蛋白表达在各组间差异有显著性（P＜0．05）。bcl-2蛋白表达与凋亡阳性细胞数呈负相关(r=－0．781,P＜0．05）,bax蛋白表达与其呈正相关（r＝0．723,P＜0．05）。结论：出血灶周围脑组织中存在细胞凋亡,细胞凋亡的变化在一定程度上反映了周围脑组织的损伤程度。bcl-2和bax蛋白对凋亡具有调控作用。     

bax加强表达对Raji细胞程序性死亡效应

研究ｂａｘ过量表达对Ｂｕｒｋｉｔｔ淋巴瘤细胞株细胞程序性死亡的效应及其机理。方法；亚克隆构建可以过量表达ｂａｘ ａ的真核表达载体，通过脂 转染法导入Ｒａｊｉ细胞株中。ＰＣＲ及免疫荧光定量鉴定ｂａｘ ａ在Ｒａｊｉ细胞株中的表达；流式细胞仪检测凋亡率。     

厄贝沙坦对高糖诱导胰岛NIT-1细胞Caspase-3 mRNA表达及凋亡的影响

目的：观察厄贝沙坦对高糖诱导胰岛 NIT-1细胞Caspase-3 mRNA 表达及凋亡的影响。方法将对数生长期胰岛NIT-1细胞分为空白对照组（A组）,高糖组（25 mmol／L）（B组）,高糖加厄贝沙坦（0．1 mmol／L）组（C组）,厄贝沙坦（0．1 mmol／L）培养24 h后加高糖培养组（D组）,各组细胞分别培养48 h。通过Hochest 33342荧光染色观察各组细胞形态,反转录聚合酶链反应（ RT-PCR）技术检测各组细胞Caspase-3 mRNA的表达。结果 Hochset 33342荧光染色结果：A组细胞呈均匀弥漫性蓝光着色,B组细胞呈不均匀强蓝光着色,可见细胞核浓缩和细胞碎片,C组和D组大部分细胞着色与A组细胞一致,少数呈不均匀强荧光蓝色减少。 RT-PCR结果：B组Caspase-3 mRNA表达量高于A、C、D组（P＜0．05）,A、C 、D组间比较,差异无统计学意义（P＞0．05）。结论高糖可诱导胰岛 NIT-1细胞凋亡;厄贝沙坦可降低Caspase-3 mRNA表达量,减少细胞凋亡,在体外,对高糖诱导胰岛NIT-1细胞可能具有一定的保护作用。     

丹酚酸B对STZ联合高脂饲养ApoE-/-小鼠主动脉Bcl-2 Bax蛋白表达的影响

目的：观察丹酚酸B对STZ联合高脂饲养ApoE-/-小鼠主动脉Bcl-2和Bax蛋白表达的影响。方法：8周龄ApoE-/-小鼠,除空白对照组外,STZ联合高脂饲养12周后,随机分为4组：①模型组;②洛伐他汀组;③丹酚酸B高剂量组;④丹酚酸B中剂量组。药物连续灌胃8周后,采用免疫组化方法检测各组大鼠主动脉Bcl-2和Bax蛋白表达量以及二者比值。结果：与空白对照组比较,模型组Bcl-2和Bax蛋白表达量明显增加,以后者更为显著,二者比值失调;丹酚酸B高剂量组Bcl-2蛋白表达量增加,同时Bax蛋白表达降低,二者比值恢复。结论：丹酚酸B能上调Bcl-2蛋白表达以及下调Bax蛋白表达,并恢复二者比值,可能是丹酚酸B防治糖尿病动脉粥样硬化的作用机制之一。     

Bcl-2和Bax的比值与乳腺癌生物学行为的关系

目的 探讨bcl-2和bax基因在乳腺癌中的表达及比值与乳腺癌生物学行为的相关性。方法 应用SP免疫组化染色方法，检测40例乳腺癌组织中bcl-2、bax的表达情况。结果 无淋巴结转移组中bcl-2高表达和bax低表达（bcl-2／bax≥1）与淋巴结转移组中bcl-2高表达和bax低表达（bcl-2／bax≥1）差异有显著性（P〈0．05），10a以上存活组中bcl-2高表达和bax低表达（bcl-2／bax≥1）与10年以下存活组中bcl-2高表达和bax低表达（bcl-2／bax≥1）差异有显著性（P〈0．05）。结论 bcl和bax比值与乳腺癌淋巴结转移、预后关系更为密切，bcl-2高表达或bax低表达的乳腺癌患者淋巴结转移较低，预后较好。     

Bcl-2和bax蛋白在人脑胶质瘤中的表达及其与恶性程度的关系

目的:探讨bc l-2和bax蛋白在人脑胶质瘤中的表达及其与恶性程度的关系。方法:对本院神经外科住院手术切除的脑胶质瘤组织标本60例用免疫组化法检测bc l-2和bax蛋白的表达,用TUNEL法检测细胞凋亡。结果:Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤间bc l-2、bax蛋白表达阳性细胞率分别为(50.55±1.63)%、(35.14±0.87)%、(15.42±1.56)%和(15.08±0.99)%、(28.15±1.58)%、(39.58±1.66)%(均P<0.05)和凋亡细胞百分率(4.58±1.05)%、(10.26±1.66)%、(19.78±1.45)%(P<0.05),差异有显著性。胶质瘤的分级与bc l-2蛋白阳性细胞率呈负相关(r=-0.8991,P<0.05),与bax蛋白表达和凋亡细胞百分率呈正相关(r=0.8856,0.9047,P<0.05)。结论:bc l-2、bax蛋白表达阳性细胞率和凋亡细胞百分率与胶质瘤的恶性程度有关。     

电磁辐射对Raji细胞损伤效应及其Bax和Bcl-2蛋白表达的影响

目的 比对性研究电磁脉冲(electromagnetic pulse,EMP)、S波段高功率微波(S-band high power microwave,S-HPM)和X波段高功率微波(X-band high power microwave,X-HPM)三种不同波段电磁辐射,对Raji细胞的损伤效应和对其Pax和Bcl...     

Melatonin通过影响Bc1-2/Bax比率抑制再灌注后大鼠肝细胞凋亡

目的 探讨再灌注损伤对大鼠肝细胞凋亡的影响,Mel对大鼠肝再灌注细胞凋亡的影响作用及其机制.方法 150只健康雄性Wistar大鼠(质量190～210 g,6～7周龄),随机分为褪黑素处理组(Mel)、酒精溶媒对照组(Alc)和生理盐水对照组(NS).建立肝缺血再灌注损伤模型,缺血均为60 min,之后每组分别按再灌注后0.5、1、6、12及24 h采集标本.M组(20 mg/kg)于缺血前30 min腹腔注射melatonin;A组采取与Mel组相同浓度的酒精液,N组则注射同比例的生理盐水.测定血清天门冬酸氨基转移酶(AST)进行测定;对肝组织进行Bcl-2及Bax免疫组化染色;并在此基础上进行透射电镜观察肝细胞核及细胞器.结果 Mel组在再灌注后的6及12 h时点AST均显著低于Alc及NS对照组(aP＜0.05),且Alc组与NS组相比差异无显著性.Mel组在再灌注后各时点的Bcl-2染色的阳性细胞率显著高于Alc及NS对照组(aP＜0.05),且各时点内Alc组与NS组相比差异无显著性.Mel组在再灌注后1,6,12及24h时点的Bax染色的阳性细胞率显著低于Alc及NS对照组(cP＜0.05),且各时点内Alc组与NS组相比差异无显著性.Mel组再灌注后6,12及24 h的Bcl-2/Bax值显著高于Alc组和NS组(aP＜0.05),且上述每时点内的Alcohol组与N.S.组相比差异无显著性.电镜观察结果在Alcohol组及N.S对照组发现了普遍的肝细胞凋亡现象,相同时点Mel组则未发现肝细胞凋亡的发生.结论 外源性Mel可以抑制再灌注后血清天门冬酸氨基转移酶(AST),增强肝细胞Bcl-2蛋白的表达,抑制Bcl-2蛋白的表达,通过提升Bcl-2/Bax值来抑制再灌注后肝细胞凋亡的发生.     

软脂酸对胰岛细胞凋亡作用的观察

目的通过观察软脂酸对体外培养的原代胰岛细胞的凋亡作用，探讨游离脂肪酸在糖尿病发病中的作用。方法体外培养Wistar大鼠胰岛细胞，用不同浓度软脂酸(分别为0，0．125，0．25，0．5mmol／L)共同孵育48h，用Tunel法计算胰岛细胞凋亡率。AO／EB染色观察细胞形态变化。结果0．125，0．25，0．5mmol／L的软脂酸均有抑制高糖刺激下胰岛细胞的胰岛素分泌，促进胰岛细胞凋亡的作用。结论软脂酸可抑制胰岛细胞的分泌功能，促进胰岛细胞凋亡，其凋亡程度与软脂酸的浓度有关。     

丹蛭降糖胶囊对2型糖尿病患者B细胞功能的影响

目的:观察纯中药制剂丹蛭降糖胶囊对2型糖尿病患者B细胞功能的影响,探讨中医药在治疗2型糖尿病及延缓其进程中的作用。方法:62例2型糖尿病患者随机分成两组,治疗组32例服用丹蛭降糖胶囊,对照组30例服用马来酸罗格列酮,疗程为2个月,以胰岛素敏感指数及Ho-ma模型公式评估各组B细胞功能。结果:两组中医证候积分及B细胞功能均有改善,且治疗组明显优于对照组(P<0.05,P<0.01)。结论:丹蛭降糖胶囊具有降低血糖,改善高胰岛素血症,提高2型糖尿病患者胰岛素敏感性,改善胰岛素抵抗的作用。     

莱菔硫烷对人肝癌HepG-2细胞Bcl-2与Bax基因转录及蛋白表达的影响

目的：研究莱菔硫烷（Sulforaphane,SFN）在体外对HepG-2细胞Bcl-2、Bax基因转录和蛋白表达的影响,探讨SFN诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡的机制。方法：不同浓度SFN处理体外培养的HepG-2细胞株48 h,采用SRB法测定SFN对HepG-2细胞增殖的影响;激光共聚焦显微镜观察凋亡细胞形态;流式细胞仪检测SFN作用后的细胞凋亡率;Western blot法和RT-PCR法检测SFN在蛋白和mRNA水平上对Bcl-2和Bax表达的影响。结果：SFN对HepG-2细胞的GI50为9.40μmol/L,TGI为26.68μmol/L;10、20、40μmol/L的SFN作用于HepG-2细胞48 h后,激光共聚焦显微镜下呈现典型的凋亡细胞形态,细胞凋亡率分别为（27.42±0.43）%、（46.53±0.35）%和（58.92±0.48）%（P〈0.01）;细胞内Bcl-2蛋白和mRNA表达水平均显著降低（P〈0.01）,而20、40μmol/L的SFN作用后细胞内Bax蛋白和mRNA的表达水平均显著升高（P〈0.01）,Bcl-2/Bax和Bcl-2 mRNA/Bax mRNA均随SFN剂量的增加显著降低（P〈0.01）,且变化趋势均呈一定的剂量依赖关系。结论：SFN能抑制HepG-2细胞的增殖,诱导HepG-2细胞凋亡,可在翻译和转录水平下调Bcl-2、上调Bax的表达,这可能是SFN诱导HepG-2细胞凋亡的主要机制之一。     

D-半乳糖胺致急性肝损伤后大鼠胰岛细胞的免疫组织化学研究

实验组大鼠腹腔1次注入D-半乳糖胺(600mg/kg)致成急性肝损伤;给予对照组大鼠等量生理盐水。于给药后1、2、3、5、7、10d,禁食12h后分批取胰尾,制石蜡切片。用免疫组织化学PAP法分别显示含胰岛素的B细胞,含高糖素的A细胞和含生长抑素的D细胞。对这些细胞的免疫反应性作半定量观察和分析,以判断肝损伤后胰岛细胞内分泌活动的变化。结果表明,给药后1～5d肝损伤严重,但肝再生也很活跃。此时B细胞胰岛素免疫反应物减少;A细胞高糖素免疫反应物含量明显下降,尤以2、3d最显著;但D细胞的生长抑素免疫反应性则增强。给药后7d肝损伤已基本恢复,3种胰岛细胞的免疫反应性与对照组近似。本研究结果提示,胰岛B细胞和A细胞分泌活动的变化,与肝损伤和肝再生过程密切相关。D细胞的变化可能反映它们对A细胞和B细胞内分泌活动有调控作用。