红景天苷对高糖损伤人脐静脉内皮细胞的保护作用研究

目的观察红景天苷对高糖诱导血管内皮细胞损伤的保护作用及其可能机制。方法实验于2017年2月—2017年11月在青海大学高原医学研究中心实验室进行。体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)株贴壁后,以MTS法观察不同浓度葡萄糖对人脐静脉内皮细胞活力的影响,根据糖浓度分组。糖浓度5.5 mmol/L作为正常对照组,糖浓度45 mmol/L作为模型组,以不同红景天苷浓度(1×10~(-5)mol/L、5×10~(-5)mol/L、1×10~(-4)4mol/L、2×10~(-4)4mol/L)作用于模型损伤组,并通过MTS法观察细胞活力,WST-1法测定细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活力,TBA法测定细胞内丙二醛(MDA)含量,观察红景天苷对血管内皮细胞损伤的保护作用。结果与模型损伤组比较,细胞培养24 h、48 h,红景天苷5×10~(-5)mol/L、1×10~(-4)4mol/L、2×10~(-4)4mol/L组细胞活力均明显增加(F=5.111、16.330,P<0.01),细胞内MDA含量均明显下降(F=22.567、28.382,P<0.01),细胞内SOD活力均明显增加(F=23.388、82.244,P<0.01);培养48 h,红景天苷1×10~(-5)mol/L组细胞活力与模型损伤组比较显著增加(P=0.04)。结论红景天苷可以降低高糖损伤的HUVEC的氧化应激水平,从而对高糖损伤的血管内皮细胞提供一定的保护作用。     

辣根过氧化物酶在Au-Gemini纳米复合物修饰玻碳电极上的直接电化学

将辣根过氧化物酶(HRP)固定在Au-Gemini纳米复合物修饰的玻碳(GC)电极表面,制备了HRP修饰电极(HRP/Au-Gemini/GC),研究了HRP在AuGemini纳米复合膜中的直接电化学,考察了其对H2O2的电催化还原作用。研究表明,HRP在AuGemini 纳米复合膜中发生了准可逆的电化学反应,其氧化峰峰电位(Epa)和还原峰峰电位(Epc)分别为-0.236 V和-0.273 V。HRP/Au-Gemini/GC修饰电极对H2O2具有良好的电催化还原响应,其表观米氏常数Km=2.0×10-5 mol/L,H2O2浓度在1.0～7.0 μmol/L范围内与催化电流呈线性关系。该研究为实现氧化还原酶的直接电子传递和生物传感器的构制提供了一种有效途径。     

四苯硼钠和对苯苯酚协同增强化学发光的研究

目的　探讨四苯硼钠 (Sodiumtetraphenylborate ,NaTPB)和对苯苯酚 (Para phenyl phenol ,ppp)的协同增强作用。方法　应用流动注射化学发光分析技术对Luminol H2 O2 HRP增强发光体系中各组分的浓度进行初选及均匀设计优化 ,确定出该发光体系的最佳浓度组合。结果　鲁米诺为 6× 10 -4mol/L ,H2 O2 为 1× 10 -3 mol/L ,NaTPB为 6× 10 -4mol/L ,ppp为 4× 10 -4mol/L时协同增强作用最强 ;该发光体系用于流动注射化学发光测定时 ,检测限可达 8 46× 10 -12 g/mL ,分析灵敏度、重现性比两种增强剂单独使用时都高。结论　在一定条件下 ,增强剂NaTPB和ppp之间有明显的协同增强作用     

中药去黄的生化研究ⅩⅩⅣ.蒽醌衍生物对两种黄素酶的影响

大黄素对黄嘌呤氧化酶有较强的竞争性抑制作用,50%抑制的药物浓度为25.0μg/ml,抑制常数K_i值为1.22×10~(-4)mol/L。核黄素(4×10~(-4)mol/L)、三氯化铁(4×10~(-4)mol/L)、牛血清蛋白(1.0mg/ml)     

蛋白激酶C不同亚型对丙泊酚血管舒张作用的影响

目的探讨丙泊酚的血管舒张作用与蛋白激酶C(PKC)不同亚型间的关系。方法将SD大鼠胸主动脉环随机分为内皮完整组(n=36)和去内皮组(n=36),每组各分6个亚组:①10 nmol/L Go6976+1×10-6mol/L去甲肾上腺素(NA)+丙泊酚处理组(n=6);②10μmol/L Rottlerin+1×10-6mol/L NA+丙泊酚处理组(n=6);③2μmol/L PKCε-Pseudo(假底物)+1×10-6mol/L NA+丙泊酚处理组(n=6);④2μmol/L PKCθ-Pseudo+1×10-6mol/L NA+丙泊酚处理组(n=6);⑤2μmol/L PKCζ-Pseudo+1×10-6mol/L NA+丙泊酚处理组(n=6);⑥1×10-6mol/L NA+丙泊酚处理组(对照组,n=6)。PKCα抑制剂Go6976,PKCδ抑制剂Rottlerin,PKCζ、θ和ε假底物孵育血管环30 min后,加1×10-6mol/L NA收缩血管环达峰值,每15 min加递增浓度的丙泊酚(1×10-6、5×10-6、1×10-5、5×10-5、1×10-4mol/L),观察血管张力的变化。结果内...     

连续顶空气相色谱法测定微生物活性研究

以大肠杆菌(E.coli)为实验菌种,CO_2为测定指标.10~(?)个/ml菌液浓度的萄葡糖肉汤培养液。在顶空分析瓶中38℃培养。每隔1h顶空气相色谱法(HS-GC)测定CO_2,CO_2随时间变化相关曲线:Y=a+bx+cx~2;(r>0.98)。对4次测定曲线方程作统计分析,差异无显著性(P>0.05).CO_2检出限为2mmol/L。重金属对E.coli生长有抑制作用,其影响顺序为As_2O_3>CdCh_2>Fb(Ac))_2,阈浓度分别为3.10×10~(-5)mol/L、1.6×10~(-4)mol/L、1.33×10~(-3)mol/L。     

五味子酚上调SIRT1改善H_2O_2对SH-SY5Y细胞增殖的抑制作用研究

目的:探讨SIRT1/LC3自噬通路在五味子酚(Schisanhenol,Sal)抗H_2O_2诱导的SH-SY5Y细胞增殖活力下降中的作用。方法:加入不同浓度Sal(50、10μmol/L)处理SH-SY5Y细胞4 h后,再加入H_2O_2 100μmol/L处理12 h,采用MTT法检测细胞增殖能力,Western blot检测SIRT1蛋白和自噬蛋白标志物(LC3蛋白、Beclin-1蛋白)的表达水平。结果:H_2O_2组细胞增殖活力较对照组显著下降(P0.001);Sal组不同浓度(50、10μmol/L)干预后的细胞增殖活力均高于H_2O_2组(P=0.001、0.017),且随着Sal浓度增加,细胞增殖活力增强。H_2O_2组SIRT1蛋白含量较对照组明显降低(P0.001),Sal组不同浓度(50、10μmol/L)的SIRT1蛋白含量均明显高于H_2O_2组(P=0.001、0.014)。H_2O_2组Beclin-1和LC3-Ⅱ蛋白表达均高于对照组,比较差异均有统计学意义(P0.001);Sal组(50μmol/L)的Beclin-1的蛋白表达低于H_2O_2组,且不同浓度(50、10μmol/L)LC3-Ⅱ蛋白表达均低于H_2O_2组,比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论:Sal可通过上调SIRT1蛋白表达,拮抗H_2O_2引起的过度自噬,从而起到拮抗H_2O_2对SH-SY5Y细胞增殖的抑制作用。     

一阶导数高速脉冲极谱法用于醋酸泼尼松的定量分析

本文利用一阶导数高速脉冲极谱法定量分析醋酸泼尼松及其制剂。在1.2×10~2mol/LH_2SO_4的乙醇和水(3:2)的底液中,于-1.05 V(vs Ag/AgCl)处出现一良好的峰,在5.0×10~5～2.5×10~(-4)mol/L范围内,药物浓度与峰电流呈线性关系。检测限为2.5×10~(-10)mol/L。本法操作简便、快速、灵敏,结果准确。     

三尖杉酯碱与牛血清白蛋白相互作用的研究

本文于体外进行了天然抗肿瘤药物三尖杉酯碱与牛血清白蛋白相互作用的研究,采用平衡透析法(pH=7.40±0.01,μ=0.2)在恒温25±1℃,振荡频率为110～120次/min,振荡16～18h的条件下,测定了其结合参数。实验结果表明,当三尖杉酯碱浓度为8.5×10~(-4)～1.55×10~(-3)mol/L,牛血清白蛋白浓度固定为4.5×10~(-4)mol/L时,其结合常数为3.51×10~2,结合部位数为0.93即三尖杉酯碱对牛血清白蛋白只有一个结合部位群。经荧光光谱法检测,证明该结合部位群在牛血清白蛋白分子的U部位。     

小鼠腹腔巨噬细胞HDL受体结合特性研究(简讯)

以BA-酶联法研究小鼠腹腔巨噬细胞(Mφ)HDL受体的结合特性。将Mφ培养在96孔塑料板的孔内,加入Biotin共价偶联的HDL_3(不含ApoE),保温3 h后加入Avidin-过氧化物酶复合物后,30min后,形成HDL受体-Biotin-HDL-Avidin-过氧化物酶复合物,加入底物(OPD),便可根据底物颜色的变化情况,于490 nm处比色后,定量研究HDL受体的结合特性。本法简便快速,可检测0.3 ng的结合HDL_3。 研究结果表明,HDL_3与受体结合的Kd=3.1×10~(-8) mol/L,B_(max)=167 ng/mg细胞蛋白。HDL_3中含ApoA-Ⅰ的颗粒与受体结合的Kd=6.99×10~(-8) mol/L,B_(max)=135ng/mg细胞蛋白。HDL_3中含ApoA-Ⅱ的颗粒与HDL受体结合的Kd=1.1×10~(-7)mol/L,B_(max)=50ng/mg细胞蛋白。结果提