宽体金线蛭有效成分分子量分布和纯化工艺考察

目的:采用不同方法对宽体金线蛭活性溶液进行不同分子量的含量测定和物质分离,获得最优条件。方法:采用不同分子通透性的透析膜对宽体金线蛭活性溶液进行分子量的含量测定。再分别采用大孔树脂、Q Sepharose FF、SP Sepharose FF对宽体金线蛭活性溶液进行纯化。通过考察不同纯化条件以达到分离有效物质的目的,并结合体外抗凝实验对最佳组分进行活性检测。结果:分别采用500 Da、1000 Da、3000 Da的透析膜对活性溶液进行分子量含量测定,得出500 Da的物质占37.6%;500 Da~1000 Da的物质占到18.5%;1000 Da~3000 Da的物质占28.1%;3000 Da物质占到15.7%。采用大孔树脂DA201-C处理得出50%乙醇洗脱液具有很好的活性。再采用Q Sepharose FF、SP Sepharose FF分别对宽体金线蛭活性溶液进行处理,采用不同洗脱剂进行洗脱然后进行活性验证得出1.0%Na Cl的p H值=8.5的Tris缓冲溶液洗脱组分活性比较强。结论:采用不同方法对宽体金线蛭活性溶液进行研究,获得较纯的活性组分,为后期的继续研究做好基础。     

大血藤总黄酬分离纯化工艺研究

目的:研究大孔吸附树脂分离纯化大血藤总黄酮的工艺条件。方法:以芦丁为对照品,考察大孔吸附树脂对大血藤总黄酮的富集纯化工艺。结果:采用DA201型大孔吸附树脂,上样吸附后,用纯化水和30%乙醇除杂,再用5BV、50%乙醇洗脱,可得到总黄酮含量为69.78%的大血藤提取物。结论:DA201型大孔吸附树脂在确定的工艺条件下,具有工艺简单、稳定、可靠的特点,能得到总黄酮纯度较高的大血藤提取物。     

大血藤总黄酮分离纯化工艺研究

目的:研究大孔吸附树脂分离纯化大血藤总黄酮的工艺条件。方法:以芦丁为对照品,考察大孔吸附树脂对大血藤总黄酮的富集纯化工艺。结果:采用DA201型大孔吸附树脂,上样吸附后,用纯化水和30%乙醇除杂,再用5BV、50%乙醇洗脱,可得到总黄酮含量为69.78%的大血藤提取物。结论:DA201型大孔吸附树脂在确定的工艺条件下,具有工艺简单、稳定、可靠的特点,能得到总黄酮纯度较高的大血藤提取物。     

大孔吸附树脂分离纯化莲心中莲心总碱的研究

目的 开发一种新技术从莲子心中分离纯化莲心总碱.方法对7种不同极性大孔吸附树脂静态吸附进行考察;采用正交实验通过对树脂动态吸附和洗脱进行研究.结果 DA201树脂对莲心总碱的静态吸附性能最佳;得到了分离纯化莲心总生物碱的最优工艺条件为:在吸附实验中,上样液浓度为1.87 mg·ml-1,pH值为10,体积为8 BV,流速为2 ml·min-1.在洗脱实验中,乙醇洗脱剂的浓度为70%,pH值为3,体积为8 BV,流速为2 ml·min-1.结论 DA201大孔吸附树脂对莲心总碱的分离纯化效果良好,树脂使用寿命长,具有较好的工业化前景.     

超滤-纳滤技术纯化、浓缩古汉养生精提取液的工艺研究

目的运用超滤-纳滤联用技术提高古汉养生精口服液的品质,降低生产成本,减少污染。方法以淫羊藿苷截留率为指标,考察不同截留分子量、压力、温度3个因素,通过正交实验优选得到最佳膜浓缩工艺。结果古汉养生精口服液最优纳滤浓缩工艺参数为分子截流量:200 Da、压力:0.8 MPa、温度:25℃。结论超滤-纳滤联用技术用于古汉养生精口服液的纯化与浓缩,有效成分的保留率高。     

猪皮胶原肽的抗氧化活性研究

目的:研究不同分子量猪皮胶原肽的抗氧化特性,筛选出抗氧化活性较强的组分。方法:采用仿生酶解技术酶解新鲜猪皮得到酶解原液,酶解原液经超滤得到M1 k Da、1 k DaM3 k Da、M3 k Da 3个不同分子量肽段,猪皮经水提取得到猪皮水提液,上述5组分分别冻干,得到冻干粉。对不同分子量范围的猪皮胶原肽5组分进行肽含量测定和抗氧化性研究,包括对DPPH·自由基、O2-·自由基及·OH自由基的清除实验。结果:各组分的肽含量分别为酶解原液组分64.62%、1~3 k Da组分62.63%、大于3 k Da组分62.13%、水提液组分60.57%、小于1 k Da组分59.75%。各组分清除DPPH·自由基能力顺序为:小于1 k Da组分1~3k Da组分酶解原液组分水提液组分大于3 k Da组分;各组分清除O2-·自由基能力顺序为:小于1 k Da组分酶解原液组分1~3 k Da组分大于3 k Da组分水提液组分;各组分清除·OH自由基能力顺序为:小于1 k Da组分1~3 k Da组分酶解原液组分大于3 k Da组分水提液组分。结论:不同分子量的猪皮胶原肽组分均有一定的抗氧化活性,其中M1 k Da组分具有较强的自由基清除能力。     

银杏内酯A、B分离纯化研究

目的:研究大孔吸附树脂分离纯化银杏叶提取物的工艺条件。方法:以银杏内酯A(Ginkalide A,GA)和银杏内酯B(Ginkalide B,GB)的含量为指标,考察大孔吸附树脂对有效成分的富集纯化工艺。结果:采用DA201型大孔吸附树脂为纯化树脂,上样吸附6h后,用10柱体积、30%的乙醇洗脱,可得到GA和GB总含量达70%以上的提取物。结论:DA201型大孔吸附树脂在确定的工艺条件下,具有工艺简单、稳定、可靠的特点,能得到纯度较高的GA和GB的提取物。     

桂枝中抗过敏活性成分的研究

目的 跟踪确定中药桂枝中的抗过敏活性成分.方法 桂枝通过70%乙醇溶液提取,不同有机溶剂萃取及大孔树脂HP-20、聚酰胺和Sephadex LH-20对样品进行纯化,以透明质酸酶抑制率为指标对各组分抗过敏活性进行跟踪,确定抗过敏活性最强的组分,通过薄层层析、显色反应和光谱鉴定对抗过敏活性最强的组分定性.结果 桂枝大孔树脂40%乙醇洗脱部分的酶抑制率为62.3%,过聚酰胺40%丙酮洗脱部分酶抑制率达到73%,过凝胶甲醇洗脱后,活性成分酶抑制率最高述93%.结论 桂枝中强过敏组分为缩合类单宁.     

异型南五味子根茎中倍半萜类化学成分及其细胞毒活性

目的:对异型南五味子根茎中的倍半萜类化合物进行分离、结构鉴定和细胞毒活性研究。方法:将药材异型南五味子根茎阴干,粉碎成粗粉,用95%乙醇提取3次,每次1 h。减压回收提取液至无醇味后,将提取液用水分散,过聚酰胺柱色谱,依次用不同体积分数乙醇洗脱,得到水洗脱物,30%乙醇洗脱物,60%乙醇洗脱物和95%乙醇洗脱物。30%乙醇洗脱部位过小孔树脂柱色谱(MIC),不同体积分数乙醇洗脱MCI树脂,得到水洗脱物,30%乙醇洗脱物,50%乙醇洗脱物和95%乙醇洗脱物,50%乙醇洗脱物为富集得到的总倍半萜部位。以甲醇-水为流动相,用中压制备液相色谱对总倍半萜类部位进行分离,用TLC和HPLC对得到的组分进行合并。对于含有倍半萜的组分用高效液相色谱进行分离,分离得到单体化合物。得到的单体化合物用ESI-MS和NMR谱学技术进行结构确定。结果:从异型南五味子根茎中获得8个倍半萜类化合物,结构分别鉴定为1α-hydroxy-9-deoxycacalol(1),balsamiferine B(2),balsamiferine D(3),chaetopenoid A(4),chaetopenoid B(5),asterothamnone A(6),asterothamnone B(7),and 10-dehydroxy-melleoliede B(8)。体外抗肿瘤活性筛选表明,化合物2,6,7对人肝癌细胞(SMMC7721)具有抑制活性,半数抑制浓度分别为10.6,9.5和15.5μmol·L~(-1)。结论:倍半萜化合物1~8为从南五味子属植物中首次获得。     

蟾皮活性组分的分离与体外抗肿瘤活性考察

目的： 分离蟾皮活性组分并考察大孔树脂不同洗脱部位对肺癌细胞A549生长的抑制作用。方法： 采用静态吸附-洗脱试验筛选大孔树脂型号,单因素试验优选蟾皮活性组分的大孔树脂纯化工艺。建立乙醇洗脱液中总生物碱和4种蟾毒二烯内酯类成分的含量测定方法,通过MTT试验测定不同洗脱部位对肺癌细胞A549的抑制率。结果： AB-8型大孔树脂对蟾皮总生物碱和4种二烯内酯类成分均具有较好的吸附分离性能,4个不同乙醇洗脱部位对肺癌细胞A549均表现出抑制作用,30%乙醇和70%乙醇洗脱液的细胞抑制率较高,IC₅₀分别为1.83,2.23 mg·L^-1。结论： 大孔树脂可用于分离纯化蟾皮中活性组分,不同洗脱部位对肺癌细胞A549的抑制率呈现一定的浓度依赖性,30%乙醇和70%乙醇洗脱部位可作为蟾皮抗肿瘤制剂的重点有效组分。