介绍一种快速冷冻切片方法

快速冷冻切片有利于临床医师在术中获取病理诊断,以便决定进一步的治疗方案。我们在实践中摸索出一种快速、简便、高质量的－２５℃直接骤冷冻切片法,现介绍如下。１　材料与方法１－１　材料　日本产樱花牌恒冷切片机,我院术中冷冻切片标本１５２例。１－２　方法　将取材后的新鲜组织直接放在组织托上,底部、周围及表面都不加ＯＣＴ等包埋剂（穿刺活检、胃镜等微小组织,可预先在组织托上加少许ＯＣＴ等包埋剂,冷冻,再加上微小组织）,迅速置于冷冻台上,于－２５℃恒温下骤冻１～２ｍｉｎ后切片,厚度３～５μｍ,将切片直接贴附于…     

不同组织冷冻切片的体会

随着医疗技术的发展,各临床科室对术中冷冻的要求也随之提高,除常规的明确病变性质外,保乳手术切缘、宫颈癌前病变锥切手术、甲状腺清扫淋巴结、手术断端等,都需要通过冷冻切片的快速诊断确定手术范围及治疗方案.这就要求我们技术人员在较短的时间内根据不同组织制出高质量的切片.由于组织不同对冷冻的时间、温度、切片厚度、染色等要求也不同,我们通过多年的经验,总结出一些提高冷冻切片质量、缩短冷冻制片时间的可行方法,现报告如下.     

冷冻切片的几点技巧

1 肪肪及富含脂肪的组织切片 脂肪及富含脂肪的软组织、畸胎瘤头结节组织等,因水分含量少,不易冻硬,难以切片。将此类标本的组织块夹固于一自制的金属网架内（或在不锈钢组织脱水盒内垫一层脱脂棉,防止组织卷曲）置入液氮罐内的液氮（-196℃）内速冻20～40s,用镊子取出后包埋固定于组织托盘上,在组织四周涂少许OCT将其冻结、切片,染色。     

骨及钙化组织术中冷冻切片的制片方法

骨及钙化组织，一般先经有机酸或无机酸稀溶液浸渍脱钙，再用流水洗涤24h，除去组织内的酸，然后才能按石蜡切片常规脱水、浸蜡、切片、HE染色。此种方法除酸时间长，而且染色效果并不十分理想，在不同程度上延误了患者的诊断与治疗，而骨及钙化组织由于组织硬，一般临床不用于冷冻切片快速诊断，但快速诊断对骨科手术方式选择的意     

一种减少冷冻切片组织内冰晶的处理方法

在常规冷冻组织切片中常有大量冰晶存在 ,特别在脑组织冷冻切片中更多见。由于冰晶的产生 ,使组织细胞形态发生了明显改变 ,严重影响临床病理诊断。为此 ,采用组织保护液 -微波 (ｔｉｓｓｕｅｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎｓｏｌｕｔｉｏｎ ＭＷ ,ＴＰＳ ＭＷ )法对组织进行前期处理 ,然后再冷冻制片 ,结果组织切片中冰晶明显减少。现将此法介绍如下。1　材料与方法1 .1　标本来源　术中脑组织活检标本 1 0例 ,将同一组织标本分成 2块。实验组采用ＴＰＳ ＭＷ法处理 ,另一组采用常规冷冻制片法。1 .2　组织保护液的配方　聚乙烯醇 1 2 4 2 ｇ,聚乙…     

用已固定组织制作冷冻切片体会

经福尔马林固定的组织不能直接做冷冻切片 ,为此作者经过反复试验 ,探索出一种利用液氮快速冷冻制作冷冻切片的方法 ,取得了满意的效果 ,现介绍如下。1　材料和方法　　经常规福尔马林固定 1～ 2天的外检和动物标本 (骨和含钙组织除外 ) ;低温恒冷切片机、ＯＣＴ包埋剂、包埋托、涂有防脱片胶的载玻片、液氮一罐。将福尔马林固定的组织常规取材 ,用滤纸吸干周围水分 ,置包埋托上加ＯＣＴ包埋剂 ,入液氮 3～ 5ｍｉｎ后取出 ,置于冷冻切片机冷冻台上片刻 ,修切组织 ,切片 ,吹干 ,不需固定 ,直接ＨＥ染色。2　体会　　组织从液氮中取出不宜立即…     

比较三种不同固定液对淋巴结冷冻切片染色质量的影响

<正>淋巴结活检的主要作用是对恶性肿瘤淋巴转移进行分级,明确肿瘤转移的具体范围,减少不必要的手术及术后并发症^[1]。术中冷冻切片能在较短时间内获得淋巴结的病理诊断结果,对手术治疗方式和手术范围具有较高的指导作用,因此越来越受到临床医师的青睐。淋巴结组织由于其细胞丰富,质地较脆,外围常有脂肪包绕,在日常冷冻切片工作中较难获取高质量切片。     

如何提高冷冻切片的技术水平

冷冻切片是一种组织不经过脱水、透明处理,不需石蜡包埋的制片方法[1-3].冷冻切片分为直接冷冻切片法和明胶冷冻切片法[4].前者根据组织的制冷方法不同有半导体制冷切片法、甲醇制冷切片法、二氧化碳制冷切片法和低温恒冷箱冷冻切片法.目前,比较常用的方法是低温恒冷箱冷冻切片法.     

改良固定法对冷冻组织石蜡切片的影响效果观察

正冷冻切片技术已广泛应用于术中病理诊断,高质量的冷冻切片技术对确保术中病理诊断的可靠性至关重要~([1-2])。目前,国内外对于术中冷冻制片的研究较多,有关冷冻后组织处理的研究较少。冷冻后组织行常规制片常常会出现形态学失真性改变,这是临床病理工作中普遍性难题~([3])。作者发现冷冻后的组织经常规10%中性福尔马林固定24 h左右或更长时间后制片,易发生组织收缩过度,细胞间或组织间     

不同包埋剂对冷冻切片质量的影响

冷冻切片是保证术中病理诊断和进行科学研究的重要手段,切片质量的好坏直接影响快速诊断的效果及科研的可靠性[1,2].影响冷冻切片质量因素较多,冷冻包埋剂是重要影响因素之一.     

冷冻切片组织冷冻过度的处理方式

<正>冷冻切片是采用低温冷冻的方法使组织在较短时间变硬切成薄片,其原理是利用物理降温,使组织达到一定的硬度进行切片的方法。冷冻切片需注重温度与切片的关系,温度的变化可影响组织软硬程度,温度升高组织变软,温度降低组织变硬。然而我们在冷冻切片过程中很难精确控制组织冷冻温度,易冷冻过度,切片时组织裂开,甚至变成粉末状,尤其在间质纤维成分较少组织中更为明显,为病理报告的漏、误诊埋下隐患。本文通过对冷冻过度组织采用手捂复温、室温复温和调节样本头温度3种复温方式,旨在找出对冷冻过度组织细胞形态结构影响最小的复温方式。     

介绍一种冷冻切片快速免疫组化染色法

对淋巴瘤、癌、恶性黑色素瘤及慢性炎症的冷冻切片 ,仅靠形态学诊断有时非常困难 ,免疫组化能有所帮助。但常规的免疫组化染色需时较长 ,因此对手术中冷冻切片的诊断是不适用的 ,我们应用Ｅｎｈａｎｃｅｄｐｏｌｙｍｅｒｏｎｅ ｓｔｅｐｓｔａｉｎｉｎｇ (Ｅ ＰＯＳ)法进行冷冻切片快速免疫组化染色 ,全部过程可在 13ｍｉｎ内完成 ,对确定或排除肿瘤有明确的辅助诊断作用 ,并能发现周围哨卡淋巴结内的微小转移灶 ,这对淋巴结冷冻切片的诊断尤为重要 ,可指导手术医师确定手术范围。1　材料与方法1.1　材料　手术切除 10ｍｉｎ内的新鲜标本 ,…     

提高卵巢肿瘤冷冻切片质量的体会

在短时间内制作卵巢肿瘤冷冻切片易出现切片不完整、过厚、有刀痕、镜下观察发现冰晶、细胞肿胀变形等现象,常导致诊断困难甚至误诊.为此,我们选择不同性质的卵巢肿瘤进行冷冻制片,探讨最佳的冷冻时间与温度.     

介绍一种脂肪组织的冷冻制片方法

在临床病理工作中,病理制片是病理诊断中的重要环节之一,制片质量的好坏,直接影响病理诊断的准确率和及时性,还关系到医院的总体医疗质量和诊疗水平[1]。做一张优质的病理切片,除了需要相应的仪器设备及操作者的经验外,病理组织的质量是根本保证。脂肪组织由于其特有的质地,制片较其它组织困难,这个难题一直困扰着病理技术人员[2]。     

冷冻切片的快速黑色素染色法

在恶性黑色素瘤的冷冻切片中 ,仅靠形态学诊断非常困难 ,Ｍａｓｓｏｎ Ｆｏｎｔａｎａ染色有一定帮助 ,对冷冻切片上黑色素形成不明显 ,黑色素颗粒细小、散在或棕色颗粒难与含铁血黄素相鉴别时尤为有用〔1〕,但常规的Ｍａｓｓｏｎ Ｆｏｎｔａｎａ染色需要时间长 (12ｈ)不能用于快速冷冻切片的诊断。我院采用一种快速黑色素染色法 ,全部过程仅需 11ｍｉｎ ,取得了满意效果。1　材料与方法1.1　氨银液的配制　取 5 %硝酸银水溶液 40ｍｌ,逐滴加入浓氨水至产生棕黑色沉淀 ,再继续缓慢地逐滴加入浓氨水 ,边加边震荡 ,当沉淀几乎接近溶解 ,仅有少…     

介绍一种冷冻切片快速染色方法

制作优质的冷冻切片,以缩短染色时间、提高染色细胞的核浆清晰度最为重要。我们试将苏木精。伊红按比例配成混合液使整个染色过程在1min内完成,且不必经过盐酸乙醇分化,染色鲜艳而稳定,现介绍如下。1材料和方法1．1染液配制（1）冷冻固定液：85％乙醇85ml,4％甲醛10ml,冰醋酸5ml。（2）苏木精伊红混合染色液：沉淀酸化伊红Y乙醇应用液1份,哈雷苏木精液3份混合供染色用。1．2切片制作取手术新鲜组织置恒冷式切片机载物台上,－20℃冷冻后6μm切片,玻片附贴切片后即刻用冷冻固定液固定10S,水稍洗,滴加苏木精伊红混合染色液至液体覆…     

乳腺肿瘤冷冻切片诊断中快速EliVision技术的价值

目的探讨快速免疫组化技术（immunohistochemistry,IHC）在乳腺肿瘤术中冷冻病理诊断中的应用价值。方法采用EliVision快速IHC技术检测乳腺肿瘤冷冻切片中常用抗体（SMA、CK5／6、p63、c—erbB一2、CD34、CD117、ER、PR）的表达情况,以相应病例冷冻切片的EliVision常规IHC法以及冰余组织EliVision常规免疫组化法作对照。结果EliVision快速IHC免疫组化法在30min内完成检测,7种抗体显示明确而定位可靠的阳性表达结果（c—erbB-2仅在常规IHC中表达）,阳性率及阳性强度高于相应病例冷冻切片的EliVision常规IHC法、接近于冰余组织EliVision常规IHC法。结论EliVision快速IHC技术可以作为乳腺肿瘤术中冷冻切片病理诊断中有价值的辅助手段。     

恒冷切片箱对固定后组织的冷冻切片技术

恒冷切片箱是冷冻切片机中最先进 ,最精密的一种。它用途广泛 ,日前常用于组织化学特别是酶组织化学、免疫组织化学、临床病理切片快速诊断、以及一些组织学教学标本的制作。以往一般都是用新鲜组织直接行冷冻切片 ,虽简易方便 ,速度快 ,但新鲜组织经冷冻 ,组织细胞内常形成冰晶 ,造成一定程度的损伤 ,影响结构的完整性 (图 1) ,尤其在免疫组织化学研究中 ,很容易使组织结构不清 ,抗原定位不精确 ,影响了观察和结果[1、2 ] ,笔者经过多年摸索和实践 ,采用组织先固定后行冷冻切片 ,并将固定组织经鸡蛋白甘油浸渍处理 ,克服了组织细胞冰晶的形…     

介绍一种FAAPT冷冻切片快速固定液

手术中冷冻切片的病理诊断是根据冷冻切片组织学形态来进行 ,以确定病变组织的良恶性为目的〔1〕。制作冷冻切片包括制片、固定、染色三个环节 ,在冷冻切片中固定液的选择是不可忽视的一个因素。我们在工作中经反复试验在众多固定液中选择ＦＡＡ液 (福尔马林 -醋酸 -乙醇 ) ,经改良配成一种适合于冷冻切片的ＦＡＡＰＴ(福尔马林 -醋酸 -乙醇 -苦味酸 -ＴｒｉｔｏｎＸ - 10 0 )快速固定液。该液具有固定速度快、渗透力强、ＨＥ染色鲜艳、组织结构清晰等优点。1　材料与方法1 1　ＦＡＡＰＴ固定液的配制　福尔马林 15ｍｌ,醋酸 3ｍｌ,95 %乙醇…