荣筋片影响SAMP6鼠成骨-成脂分化PPAR-γ水平的实验研究

目的:观察荣筋片对SAMP6鼠血清中PPAR-γ水平及骨组织中PPAR-γ蛋白表达的影响,以期为荣筋片对抗骨质疏松症的作用机制研究提供新的思路。方法:选取6月龄SAMP6鼠30只,按体质量随机分为荣筋片组、空白对照组,每组各15只,选取同月龄SAMR1鼠15只设为SAMR1对照组。荣筋片组给予3ml药液灌胃,空白对照组给予等剂量0. 9%氯化钠注射液灌胃,均每天1次,连续12周。摘眼球采血,ELISA法检测血清PPAR-γ的含量;取股骨骨髓制作涂片,免疫组化法测定骨组织中PPAR-γ蛋白的表达。结果:血清PPAR-γ含量空白对照组明显高于SAMRl对照组,差异有统计学意义(P0. 05);荣筋片组和空白对照组组间差异无统计学意义(P 0. 05)。与空白对照组相比,SAMRl对照组、荣筋片组骨组织PPAR-γ蛋白表达水平明显下调,荣筋片组低于SAMRl对照组,差异均有统计学意义(P 0. 01)。结论:荣筋片能够降低SAMP6鼠血清PPAR-γ含量,下调骨组织PPAR-γ蛋白表达水平,可能能改善自发性骨质疏松动物骨髓基质干细胞成骨-成脂分化PPAR-γ水平的异常。     

荣筋片对SAMP6鼠血清及骨髓组织中脂联素的影响

观察荣筋片对SAMP6鼠血清中ADP水平及骨髓组织中ADP蛋白表达水平的影响,探讨荣筋片治疗骨质疏松症的作用机制。方法:选取6月龄SAMP6鼠30只,按体重随机分为荣筋片组、空白对照组。同源对照组选取同月龄SAMR1鼠15只。荣筋片组给予3ml药液灌胃,空白对照组给予3ml生理盐水灌胃,均每天1次,连续12周后,摘眼球采血,ELISA法检测血清ADP的含量;取股骨骨髓制作涂片,免疫组化测定骨髓组织中ADP的蛋白表达。结果:各组血清ADP的含量比较,空白对照组、荣筋片组ADP血清含量明显高于SAMRl对照组(P﹤0.01),差异有统计学意义;荣筋片组低于空白对照组(P﹤0.05),差异有统计学意义。各组骨髓组织ADP蛋白水平表达比较,与空白对照相比,SAMRl对照组、荣筋片组骨髓组织ADP蛋白表达水平明显下调(P﹤0.01),差异有统计学意义;与SAMRl对照组相比,荣筋片组骨髓组织ADP蛋白表达水平明显下调(P﹤0.01),差异有统计学意义。结论:荣筋片能够降低SAMP6鼠ADP血清含量及下调骨组织蛋白表达水平,可能会改善自发性骨质疏松动物骨髓基质干细胞成骨-成脂分化ADP水平的异常。     

荣筋片影响SAMP6鼠血清成骨-成脂分化调控因子的实验研究

[目的]以SAMP6及SAMR1鼠为研究对象,观察荣筋片对骨形态发生蛋白(BMP-2)、过氧化酶活化增生受体-γ(PPAR-γ)和脂联素(ADP)血清含量的影响,探讨荣筋片防治骨质疏松症的作用机制。[方法]选取6月龄SAMP6鼠36只,雌雄各半,随机分为SAMP6空白对照组、荣筋片组、仙灵骨葆组。另取11只同月龄性SAMR1鼠,作为同源对,将荣筋片配制成溶液。空白对照组给予0.5 mL生理盐水灌胃,每日1次,连续12周后。摘眼球采血,ELISA法检测血清BMP-2、PPAR-γ和ADP的含量。[结果]空白对照组BMP-2血清含量明显低于SAMRl对照组、仙灵骨葆和荣筋片组(P0.01,P0.05),差异有显著性。SAMRl对照组相比BMP-2血清含量高于仙灵骨葆组和荣筋片组(P0.01,P0.05)。而荣筋片组高于仙灵骨葆组(P0.05)。空白对照组PPAR-γ血清含量明显高于SAMRl对照组(P0.01)。仙灵骨葆组、荣筋片组和空白对照组组间没有统计学差异(P0.05)。ADP血清含量空白对照组明显高于SAMRl对照组(P0.01)。仙灵骨葆组和荣筋片组明显低于空白对照组(P0.01),相比SAMRl对照组明显升高(P0.01)。[结论]荣筋片与仙灵骨葆能增加SAMP6鼠血清促成骨分化因子BMP-2含量,降低SAMP6鼠血清促成脂分化因子PPAR-γ、ADP含量。两种中药可能改善自发性骨质疏松动物骨髓基质干细胞成骨-成脂分化的异常。     

荣筋片对SAMP6鼠瘦素血清含量及骨组织蛋白表达的影响

目的观察荣筋片对SAMP6鼠血清中瘦素水平及骨组织中瘦素蛋白表达水平的影响,为荣筋片对抗骨质疏松症的机制研究提供新的思路。方法选取6月龄SAMP6鼠30只,按体重随机分为荣筋片组、空白对照组。同源对照组选取同月龄SAMR1鼠15只。荣筋片组给予3 mL药液灌胃,空白对照组给予3 mL生理盐水灌胃,均每天1次,连续12周后,摘眼球采血,ELISA法检测血清瘦素的含量;取股骨骨髓制作涂片,免疫组化测定骨组织中瘦素蛋白的表达。结果荣筋片组血清瘦素含量为(0.3238±0.1421)ng/mL及骨组织瘦素蛋白表达为(0.21±0.13)ng/mL,SAMRl对照组血清瘦素含量为(0.351 9±0.225 7)ng/mL及骨组织瘦素蛋白表达为(0.26±0.11)ng/mL,空白对照组血清瘦素含量为(0.173 7±0.036 9)ng/mL及骨组织瘦素蛋白表达为(0.17±0.08)ng/mL。前两组明显高于空白对照组(P 0.05),有显著性差异;前两组组间没有明显性差异(P 0.05)。结论荣筋片通过抑制MSCs向脂肪细胞分化、促进MSCs向成骨细胞分化及诱导脂肪细胞转化为成骨细胞,能够提高血清瘦素含量和骨组织蛋白表达水平。     

“补肾活血”针刺法对老年性痴呆模型SAMP8小鼠学习记忆能力和脑组织AChE活性的影响

目的观察“补肾活血”针刺法对老年痴呆模型SAMP8小鼠学习记忆能力和脑组织AChE活性的影响。方法选取8月龄SAMP8小鼠20只,随机分为针刺组10只,SAMP8空白对照组10只,另选取10只8月龄的SAMR1小鼠为SAMR1对照组。疗程结束后评定疗效,测各组小鼠的学习记忆能力及脑组织中AchE含量。结果与SAMR1组比较,SAMP8空白对照组小鼠在隐蔽平台试验中表现出明显的学习记忆障碍,逃避潜伏期显著延长（P〈0．05）,针刺组逃避潜伏期较SAMP8空白对照组显著缩短（P〈0．05）;探索试验巾针刺组原平台象限的停留时间和穿越原平台次数明显多于SAMP8空白对照组（P〈0．05）,与SAMR1对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）;针刺组针刺后脑组织AChE活性较SAMP8空白对照组显著性降低（P〈0．05）,与SAMR1对照组比较差异无统计学差异（P〉0．05）。结论“补肾活血”针刺法能有效提高AD小鼠学习记忆能力,这种作用可能是通过抑制脑组织AChE活性实现的。     

骨碎补总黄酮对悬尾实验性骨质疏松模型大鼠骨密度及BMP-2mRNA的影响

目的:探讨骨碎补总黄酮对悬尾实验性骨质疏松模型大鼠骨密度(BMD)及骨形成蛋白(BMP-2mRNA的影响。方法:将48只6个月龄SD大鼠随机分为中药组、西药组、阴性对照组和空白对照组,每组12只。中药组予悬尾、骨碎补总黄酮灌胃(6.75 mg/mL);西药组予悬尾、阿仑膦酸钠灌胃(0.09 mg/mL);阴性对照组予悬尾、饮用水灌胃(1 mL/100g);空白对照组自由活动,持续灌胃28 d。采用双能X线检测大鼠的BMD,采用RT-PCR法检测骨组织BMP-2 mRNA表达情况。结果:中药组、西药组、阴性对照组大鼠骨密度及BMP-2 mRNA表达均低于空白对照组,差异均有统计学意义(P0.05);中药组和西药组大鼠骨密度及BMP-2 mRNA表达高于阴性对照组,差异均有统计学意义(P0.05);中药组与西药组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:骨碎补总黄酮能上调悬尾实验性骨质疏松模型大鼠BMP-2m RNA的表达,提高大鼠骨密度。     

针刺对SAMP8小鼠海马GLUT3、MCT2、MCT4表达的影响

目的:观察针刺对SAMP8小鼠学习记忆能力和海马组织能量底物转运蛋白GLUT3、MCT2、MCT4表达的影响,探讨针刺促进学习记忆能力的能量底物转运机制。方法:13只SAMP8小鼠随机分为模型组和针刺组,7只同月龄SAMR1小鼠作为对照。针刺组选择"百会"穴、"涌泉"穴进行针刺,1次/天,5次1疗程,共治疗8个疗程。采用Morris水迷宫对学习记忆能力进行评价,Western Blot检测小鼠海马组织GLUT3、MCT2、MCT4蛋白表达水平。结果:与对照组相比,模型组小鼠逃避潜伏期显著延长(P0. 01),穿越平台次数减少(P0. 05);与模型组相比,针刺组小鼠第1~2天逃避潜伏期改变无统计学差异(P0. 05),第3、4、5天逃避潜伏期缩短(P0. 05),穿越平台次数增加(P0. 05)。与对照组相比,模型组小鼠海马组织GLUT3、MCT2蛋白表达显著下降(P0. 01),MCT4蛋白表达下降(P0. 05);与模型组相比,针刺组小鼠海马组织GLUT3、MCT2蛋白表达显著升高(P0. 01),MCT4蛋白表达变化不具有统计学意义(P0. 05)。结论:针刺可以提升SAMP8小鼠学习记忆能力,对海马组织能量底物转运蛋白GLUT3、MCT2具有提高作用。     

“益气调血、挟本培元”针法对SAMPIO鼠痴呆状况和大脑总胆固醇的影响

目的观察快速老化痴呆鼠SAMP10痴呆状况与大脑总胆固醇异常的相关性，并探讨“益气调血、挟本培元”针法改善痴呆的机制。方法设立正常老化鼠SAMR1对照组，SAMP10对照组、针刺组及非穴组，通过Morris水迷宫测试各组小鼠学习记忆功能，Folch法和比色法测量大脑总胆固醇的含量。结果与SAMR1对照组相比，SAMP10对照组小鼠出现明显的学习记忆障碍，其大脑总胆固醇含量明显增加，差异有统计学意义（P〈0．05）；而针刺组可降低大脑总胆固醇含量，改善其学习记忆能力与SAMP10对照组比较差异亦有统计学意义（P〈0．05）。结论调节大脑胆固醇的稳态可能是“益气调血、扶本培元”针法改善SAMP10鼠痴呆状况的机制之一。     

芍药舒筋片对大鼠膝骨关节炎软骨病理及COMP水平的影响

目的评价芍药舒筋片对膝骨关节炎大鼠关节软骨病理及COMP的影响。方法将50只大鼠随机分为假手术组,模型组,芍药舒筋片高、中、低剂量组。除假手术组外,其余组别大鼠采用经典前交叉韧带切断ACLT手术造模。造模成功后,各组采取相应的措施干预4周,检测COMP水平,并观察关节软骨病理变化情况。结果与假手术组比较,模型组Mankin病理评分及血清COMP含量差异均有统计学意义（P〈0．05）。与模型组比较,芍药舒筋片高、中、低剂量组Mankin病理评分差异有统计学意义（P〈0．05）,芍药舒筋片高剂量组血清COMP含量差异有统计学意义（P〈0．05）。结论芍药舒筋片对大鼠膝骨关节软骨有保护作用,可一定程度延缓手术形成的膝骨关节炎关节软骨退变。     

柴胡三参胶囊对p38MAPK通路介导BMSCs向心肌细胞分化的干预研究

目的研究柴胡三参胶囊含药血清干预骨髓间充质干细胞在p38MAPK通路向心肌细胞分化的作用,探讨其抗心律失常机制与p38MAPK信号转导通路的相关性。方法根据不同处理因素将骨髓间充质干细胞分为4组:空白对照组、BMP-2诱导剂组、柴胡三参含药血清+BMP-2诱导剂组、柴胡三参含药血清组,分别加入空白血清、BMP-2、柴胡三参含药血清+BMP-2及柴胡三参含药血清,用WB法检测各组内p38MAPK m RNA表达水平,RT-PCR法检测干预后各组中MEF2C、CTn T蛋白表达。结果 WB法结果显示:与其他各组对照,柴胡三参+BMP-2组p38MAPK m RNA表达均上调(P0.01);以最佳浓度即20%的含药血清给予柴胡三参+BMP-2组、柴胡三参组干预后,空白组、BMP-2组、柴胡三参组p38MAPK m RNA表达较柴胡三参+BMP-2组均见下调(P0.05或P0.01),而空白组表达与其他组比较均无统计学意义。RT-PCR结果显示:诱导后BMP-2组、BMP-2+柴胡三参组、柴胡三参组MEF2C及CTn T表达水平均高于空白血清组,差异有统计学意义(P0.01);BMP-2+柴胡三参组表达水平高于BMP-2组、柴胡三参组(P0.05);BMP-2组与柴胡三参组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论柴胡三参胶囊含药血清在一定条件下能促进骨髓间充质干细胞的增殖,对P38MAPK通路介导骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化具有一定的促进作用。