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1.
目的 探讨保温小室在组织芯片免疫组化中避免"边缘效应"的作用.方法 采用常规免疫组化SP两步法,实验分为两组,一组采用保温小室,另一组采用免疫组化PAP笔,同时改良抗体滴加方法.结果 40例肺癌组织芯片采用保温小室,32例肝癌组织芯片、各40例胃癌及鼻咽癌组织芯片使用免疫组化PAP笔,分别计算边缘组织和中央组织平均光密度值.经统计发现不论是采用保温小室或免疫组化PAP笔,4种组织切片边缘与中央部位平均光密度值相比,差异无统计学意义.结论 采用保温小室较免疫组化PAP笔更为简单易行,在组织芯片免疫组化染色时避免"边缘效应"方面保温小室可取代免疫组化PAP笔.  相似文献   

2.
文题释义:明胶:是胶原蛋白的水解产物,具有优异的生物降解性、细胞相容性和无免疫原性。在30-40 ℃时,明胶由固态转化为溶液,明胶溶液与戊二醛共价交联后形成水凝胶中的水可作为致孔剂,增加支架材料的孔隙率,改变支架材料中孔结构的大小。骨形态发生蛋白:是一组能够诱导和促进骨形成的细胞因子,属于转化生长因子超家族成员,是骨组织工程中最重要的骨诱导生长因子,分为同源二聚体和异源二聚体,其中骨形态发生蛋白2、骨形态发生蛋白7、骨形态发生蛋白2/7的研究最为广泛,骨形态发生蛋白2/7的成骨效果优于骨形态发生蛋白2和骨形态发生蛋白7。背景:课题组前期研究发现10%锶-透钙磷石的成骨能力高于透钙磷石和5%锶-透钙磷石,但也发现掺锶透钙磷石的孔结构不够理想,前期成骨效果不佳。 目的:在10%锶-透钙磷石中加入明胶和重组人骨形态发生蛋白2/7(recombinant Human bone morphogenetic proteins 2/7,rhBMP2/7),观察其修复家兔下颌骨缺损的成骨效果。方法:分别制备明胶-10%锶-透钙磷石与含0.04,1 g/L rhBMP2/7的明胶-10%锶-透钙磷石材料。在45只家兔双侧下颌骨制作骨缺损模型,分5组干预:空白对照组不植入任何材料,其余4组分别植入10%锶-透钙磷石(对照组)、明胶-10%锶-透钙磷石(明胶组)、0.04 g/L rhBMP2/7-明胶-10%锶-透钙磷石(0.04 g/L rhBMP2/7组)、1 g/L rhBMP2/7-明胶-10%锶-透钙磷石(1 g/L rhBMP2/7组)。术后4,8,12周取骨缺损标本,分别进行锥形束CT与免疫组化观察。实验经华北理工大学实验动物伦理委员会审议批准。结果与结论:①锥形束CT:术后8周时,1 g/L rhBMP2/7组骨修复基本完成,新生骨组织与周围组织几乎融合;0.04 g/L rhBMP2/7组和胶原组缺损区大部分修复,新骨修复边缘不平整;对照组部分修复。术后12周时,明胶组、0.04,1 g/L rhBMP2/7组完成缺损区骨修复;②免疫组化观察:术后4,8周时,1 g/L rhBMP2/7组Ⅰ型胶原表达高于其他4组(P < 0.05),0.04 g/L rhBMP2/7组、胶原组高于对照组(P < 0.05);术后12周时,植入材料4组间Ⅰ型胶原表达比较差异无显著性意义(P > 0.05);③结果表明:在10%锶-透钙磷石中加入明胶和1 g/L的重组人骨形态发生蛋白2/7可促进骨缺损的修复。ORCID: 0000-0001-8461-8403(李雪微) 中国组织工程研究杂志出版内容重点:生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程  相似文献   

3.
雌激素类似物(ZR)具有雌激素样作用,通过建立大鼠卵巢切除术(OVX)模型,初步探讨了雌激素(E)、ZR对脑组织一氧化氮合酶(NOS)表达的影响。实验用雌性Wistar大鼠(3月龄,体重240±10g);行卵巢切除术(OVX);假手术组只暴露卵巢而不切除;大鼠在OVX术后两周开始给药(5周,3d一次;im,200μg/只)。动物分组如下:1假手术组 橄榄油;2OVX 橄榄油;3OVX E;4OVX ZR。给药结束后,心脏灌流固定,取脑冰冻切片40μm,进行NADPN-diaphorase(NADPH-d)反应及nNOS免疫组化,进行图像分析。结果表明:NADPH-d酶组化及nNOS免疫组化标记的神经元在嗅皮…  相似文献   

4.
研究在裸鼠耳朵创伤模型中局部应用鱼肝油软膏对创面上皮化速度和新生血管化速度的影响(实验);研究在相同模型中局部应用不同浓度的VitA的效果(实验)。实验:42只裸鼠分成3组,在双侧鼠耳上制造标准的全层真皮创面,第一组(n=10):25%鱼肝油软膏局部应用于一侧耳朵,另一侧耳朵用软膏基质(凡士林)作对照;第二组(n=10):一侧耳朵应用25%鱼肝油软膏,另一侧用生理盐水作对照;第三组(n=22):一侧耳朵应用凡士林,另一侧耳朵用生理盐水作对照。实验:12只裸鼠随机分组,模型制作过程同实验,一侧耳朵应用不同剂量(250~3000Iu/g的VitA治疗,另一侧用凡士林…  相似文献   

5.
背景:在临床治疗过程中,修复体连同黏结材料一同脱落及产生微小渗孔等情况常有发生,因此,探究黏结剂不同使用方式对全酸蚀树脂水门汀与牙本质间黏结性能的影响具有重要的临床意义。 目的:对比黏结剂不同使用方式对全酸蚀树脂水门汀与牙本质间黏结性能的影响。 方法:获取无龋人新鲜拔除的第二磨牙90颗,随机均分为3组,均于常温水冲洗下打磨消除牙冠部位牙釉质,露出牙本质以制备标准黏结面,分别进行不使用黏结剂处理(对照组)、使用经过光照的全酸蚀树脂水门汀处理(实验2组)、使用未经过光照的全酸蚀树脂水门汀处理(实验1组),检测处理后即刻、处理后再经老化处理的微拉伸黏结强度。 结果与结论:处理后即刻,对照组、实验1组、实验2组的微拉伸黏结强度分别为(8.089±3.431),(11.671±2.561),(8.821±2.513) MPa,组间两两比较差异均有显著性意义(P < 0.05);处理后再经老化处理,对照组、实验1组、实验2组的微拉伸黏结强度分别为(1.069±0.421),(7.621±2.061),(4.821±1.513) MPa,组间两两比较差异均有显著性意义(P < 0.05)。表明全酸蚀树脂水门汀与牙本质的结合在黏结剂不同方法的使用中,无论长期还是短期均是使用不光照处理的黏结剂效果最佳。 中国组织工程研究杂志出版内容重点:生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程  相似文献   

6.
雌激素(E)替代疗法(ERT)在AD防治过程中取得良好的效果,其机制可能对海马皮层等有影响作用。采用卵巢切除术(OVX)动物模型,观察E及其拟似物(ZR)对海马Synaptophysin(Syn)及Parvalbumin(PV)、Calbindin-D28K(CaBP)的影响。实验用雌性Wistar大鼠(3月龄,体重240±10g),行OVX,假手术组只暴露卵巢而不切除,大鼠在OVX术后两周开始给药(给药5周,3d一次,im,200μg/只)。动物分组如下:1假手术组 橄榄油;2OVX 橄榄油;3OVX E;4OVX ZR。给药结束后,心脏灌流固定,取脑冰冻切片(20μm或40μm),进行Syn、PV、CaBP免疫组化和图像分析。…  相似文献   

7.
目的通过对猪肝去细胞化材料进行肝素末端结合修饰,改善其作为肝脏组织工程支架材料的抗凝血性能。方法实验用巴马香猪3只,猪龄3~4个月,体质量15 kg。取猪肝脏,采用1%十二烷基磺酸钠+1%曲拉通X-100门静脉灌注获得去细胞化支架材料。对支架材料进行末端连接(EPA)肝素化修饰,之后,检测了它们的肝素化效果及抗凝血性能。结果去细胞化材料经肝素化修饰后结合上了肝素。材料中肝素总含量为(16.00±0.01)μg/mg,并逐渐释放。材料抗凝血性能指标与未经处理的去细胞化材料相比有明显改善,凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)均超过检测仪器最大值;复钙时间延长达(350.3±29.1)s,具有良好的抗凝性能;溶血实验表明,修饰材料符合生物材料的溶血性要求,血液相容性好。结论在体外研究中,EPA肝素化修饰的去细胞化材料获得良好的抗凝血性能。  相似文献   

8.
背景:因巨噬细胞在机体炎症反应中有着举足轻重的作用,所以检测生物材料对巨噬细胞行为的影响,可评估材料的免疫原性。 目的:分析脱细胞基质材料对巨噬细胞的激活作用。 方法:获取BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞,分5组培养:对照组为单纯细胞培养组;实验1组为脱细胞基质膜材料与巨噬细胞直接接触培养,实验2组为新鲜心包膜材料与巨噬细胞直接接触培养,实验3组为脱细胞基质膜材料与巨噬细胞间接接触培养,实验4组为新鲜心包膜材料与巨噬细胞间接接触培养。培养48 h后,MTT法检测各组A值,判定毒性分级;培养24 h后,检测细胞培养上清中一氧化氮及细胞因子的分泌。 结果与结论:实验1-4组毒性分别为2级、4级、0级及2级。实验1组、实验2组一氧化氮水平高于对照组(P < 0.05),并且实验2组高于实验1组(P < 0.05)。5组间白细胞介素2、白细胞介素4、干扰素γ、白细胞介素17A和白细胞介素10水平比较差异无显著性意义;实验2组白细胞介素6水平高于对照组(P < 0.05);实验1组、实验2组、实验4组肿瘤坏死因子水平高于对照组(P < 0.05),并且实验2组高于实验1组(P < 0.05)、实验1组高于实验4组(P < 0.05)。说明脱细胞基质材料可在直接接触时激活巨噬细胞。 中国组织工程研究杂志出版内容重点:生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程  相似文献   

9.
符蓉  曹斌 《解剖学研究》2022,44(1):7-11
目的 探讨关于黄精对大鼠肝脏纤维化的干预效果及对肝脏的保护作用.方法 研究对象来源选取Wistar大鼠,对实验动物血样及组织进行分析;样本总数45只;分为正常对照组、肝纤维化模型组以及黄精治疗干预组,每组15只.测定大鼠肝外周血TG F-β水平,使用ELISA法完成;使用免疫组化法对肝组织标本中的TGF-β1、Smad...  相似文献   

10.
目的:探究右美托咪定(DEX)调控沉默信息调节因子1(Sirt1)/叉头框蛋白O1(FOXO1)介导的自噬通路对抑郁症大鼠认知功能的影响。方法:将50只SD大鼠随机分为对照组、模型组、低剂量(2.5μg/kg)DEX(DEX-L)组、高剂量(10μg/kg)DEX(DEX-H)组及DEX-H+EX-527组(10μg/kg DEX+50μg/kg SIRT1抑制剂EX527),每组10只;通过连续56 d对大鼠进行慢性不可预知温和刺激构建抑郁症模型,DEX-L组、DEX-H组及DEX-H+EX-527组大鼠于第29天起进行腹腔注射相应药物,对照组及模型组腹腔注射等体积生理盐水,每天1次,共28 d;采用糖水偏好实验、强迫游泳实验、旷场实验及Morris水迷宫实验评估大鼠抑郁行为和认知功能;苏木精-伊红(HE)染色和尼氏(Nissl)染色观察海马神经元损伤情况;Western blot检测海马组织中Sirt1/FOXO1通路相关蛋白、LC3和beclin-1表达情况;免疫组化法检测Sirt1/FOXO1通路相关蛋白表达情况。结果:相较于对照组,模型组大鼠糖水偏爱度、水平运动得分、垂直运动...  相似文献   

11.
聚乙交酯丙交酯体内外生物降解性能的相关研究   总被引:10,自引:0,他引:10  
通过对聚乙交酯丙交酯 (PGL A)进行体内和体外生物降解性的实验研究 ,探讨两种降解过程之间的关联性。体外实验是将 PGL A材料 (1cm× 1cm)分别浸泡在人工唾液和 PBS溶液中 ,体内 (动物 )试验是将材料直接植入 Wistar大白鼠的皮下组织 ,浸泡后或植入后 1~ 10周 ,每周计算材料的质量损耗率 ,每 2周进行分子量测定。实验结果显示 :PGL A材料在人工唾液中的降解要快于在 PBS液中的降解 ;材料质量损耗的发生慢于分子量的变化 ;体外的降解周期大约为 9~ 10周 ,体内降解周期为 8周左右 ,体内组的降解速率是体外组的 1.33倍。结论为PGL A体外降解主要是化学降解过程 ,通过酯键的水解来进行。体内降解过程中 ,应力环境和生物因素都会对材料的降解动力学产生影响 ,使降解过程明显加快 ,但体内和外降解都符合脂肪族聚酯降解的动力学模型 ,PGL A的体内外生物降解性之间存在一定的相关性。  相似文献   

12.
背景:异种骨材料在临床上的使用受到限制,主要是其较强的免疫原性,但目前对于异种骨材料的免疫原性的评价多是以临床观察,或是用组织病理观察来间接测定的,没有量化的指标,也没有行业的“金标准”。 目的:在人外周血淋巴细胞与骨材料共培养情况下,观察淋巴细胞体外活化和增殖水平的改变,为下一步的特异性免疫原性实验做准备。 方法:以羟基磷灰石2 g/mL为阴性对照,以植物血凝素为阳性对照,CCK-8法检测0.5,1,2 g/mL实验皮质骨粉(经过脱脂、脱细胞、多方位除抗原等处理)、1 g/mL消毒皮质骨骨粉等骨材料对人淋巴细胞增殖的影响;流式细胞仪检测CD69标记后的骨材料对淋巴细胞体外活化的影响。 结果与结论:0.5,1,2 g/mL实验皮质骨粉组淋巴细胞增殖水平与羟基磷灰石组相比差异无显著性意义(P > 0.05),而消毒骨材料组、植物血凝素阳性对照组淋巴细胞增殖水平较羟基磷灰石组明显升高(P < 0.05,0.01)。羟基磷灰石组的淋巴细胞CD69表达率很低,表明T细胞处于静息状态;0.5,1,2 g/mL实验皮质骨粉组淋巴细胞CD69表达率与羟基磷灰石组相比差异无显著性意义(P > 0.05);而与消毒骨共培养的淋巴细胞其CD69表达明显上调;植物血凝素阳性对照组淋巴细胞CD69表达最为明显。提示经过处理的实验骨粉未出现对淋巴细胞刺激的免疫原性作用。  相似文献   

13.
目的:探讨舒芬太尼联合右美托咪啶自控镇痛在股骨骨折老年患者术后的镇痛效果,及其对谵妄的影响。方法:将256例行股骨手术的老年患者随机分为3组。对照组(86例)术后行舒芬太尼2μg/kg静脉自控镇痛(PCIA),实验1组(85例)术后行舒芬太尼2μg/kg联合右美托咪定2.5μg/kg PCIA,实验2组(85例)行舒芬太尼1.5μg/kg联合右美托咪定2.5μg/kg PCIA。观察并比较各组患者镇痛效果及谵妄的发生情况。结果:术后2h、8h、12h,实验1组、实验2组VAS评分显著低于对照组(实验1组t=10.03,7.74,4.84;实验2组t=11.98,8.44,5.47;P均0.05),而该时点实验1组、实验2组VAS评分比较均无统计学意义;与对照组比较,实验1组、实验2组术后舒芬太尼用量显著减少(t=15.99,26.77;P均0.05),有效按压次数、Ramsay镇静评分显著升高(t=5.21,7.61,24.77,26.08;P均0.05),而实验2组舒芬太尼用量较实验1组明显降低(t=10.75,P0.05);实验1组、实验2组术后3d内谵妄的总发生率显著低于对照组(χ2=5.52,4.40;P0.05);实验2组不良反应的发生率为10.6%,显著低于对照组24.4%、实验1组22.4%(χ2=5.65,4.27;P0.05)。结论:右美托咪啶联合舒芬太尼可增强老年股骨骨折患者术后PCIA的镇痛效果,减少药量与不良反应,降低术后谵妄的发生。  相似文献   

14.
临床病理在外检中遇到疑难病例时,迫切要求有更多的客观标准来解决诊断分歧。因此,免疫组化在鉴别诊断中的应用受到普遍关注。我科建立了免疫酶标实验室应用商品化抗体,通过对22例疑难病例免疫酶标组化的鉴别诊断探讨其临床应用的特点和可行性。  相似文献   

15.
目的:探讨阿芬太尼能否减轻丙泊酚对海马神经元发生的抑制作用。方法:体外实验:原代培养小鼠海马神经干细胞。分组如下:(1)空白对照组;(2)10μmol/L阿芬太尼处理组;(3)200μmol/L丙泊酚处理组;(4)丙泊酚-阿芬太尼联合处理组。在无血清增殖培养基中培养2 d后,行Ki67染色,观察神经干细胞的增殖情况;在含2%胎牛血清的分化培养基中培养4 d后,行Tuj-1染色,观察神经干细胞的分化情况。体内试验:小鼠分组如下:(1)空白对照组;(2)10μg/kg阿芬太尼处理组;(3)5 mg/kg丙泊酚处理组;(4)丙泊酚-阿芬太尼联合处理组处理组。药物处理7 d后,行5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)和Doublecortin(DCX)染色,观察海马神经元的发生情况。结果:体外实验:200μmol/L丙泊酚可显著抑制海马神经干细胞的增殖和向神经元方向的分化。10μmol/L阿芬太尼单独处理对对海马神经干细胞的增殖和分化无显著影响;但10μmol/L阿芬太尼+200μmol/L丙泊酚联合处理可显著减轻丙泊酚单独使用对海马神经干细胞增殖及向神经元方向分化的抑制作用。体内实验:5 mg/kg丙泊酚可显著抑制海马的神经元发生;10μg/kg阿芬太尼单独使用对海马神经元发生无显著影响;10μg/kg阿芬太尼+5 mg/kg丙泊酚联合处理可显著减轻丙泊酚单独使用对海马神经元发生的抑制作用。结论:阿芬太尼可减轻丙泊酚对海马神经元发生的抑制作用。  相似文献   

16.
正在日常免疫组化染色中防止组织切片在染色过程中脱落,是免疫组化的重要环节~([1])。因此,操作前必须将载玻片用3-氨丙基三乙氧基硅烷(3-Aminopropyitriethoxyssicane,APES)进行预处理。本科室利用全自动染色机制作涂胶载玻片,效果良好,现介绍如下。1材料与方法1.1材料(1)载玻片规格:25.4 mm×76.2 mm×(1~  相似文献   

17.
目的 评价荟生源两种组方的安全性,评估其临床使用安全性,为功能性食品开发和临床安全用药提供实验依据。方法 将26只SPF级昆明小鼠采用随机数目表法随机分为3组,其中实验组1、实验组2各10只,空白组6只,雌雄各半。实验组1以荟生源0.96 g+生理盐水0.17 ml(按配方1最大溶解度进行配置,有效量接近于成人每日服用量200倍)灌胃、实验组2以荟生源0.4 g+生理盐水0.63 ml(按配方2最大溶解度进行配置,有效量接近于于成人每日标准服用量200倍),两组实际灌胃量均为0.8 ml;空白组以生理盐水0.8 ml灌胃,灌胃后连续观察7 d。比较3组一般情况、死亡情况、大体解剖及镜下特点。结果 3组小鼠体重、饮水量、活动度均正常,差异无统计学意义(P>0.05);实验过程中各组均无小鼠死亡,大体解剖肉眼观察小鼠各脏器均无变性、充血、水肿、坏死等异常现象;镜下对照组小鼠肝脏、肾脏细胞形态、结构、大小均正常,无坏死、无病理性改变。实验组1小鼠肝细胞形态、结构、大小均正常,肝小叶组织结构正常;实验组2中出现1例肝细胞胞浆疏松化。各组所有动物肾组织结构肾小管结构正常,皮质与髓质分界线清楚,无淋巴细胞浸润。结论 荟生源两种组方对小鼠无急性毒性作用,具有较好的安全性。  相似文献   

18.
背景:现代研究表明骨碎补具有推迟细胞退行性变、降低骨关节病发病率的作用。目的:比较不同剂量骨碎补冻干粉诱导兔骨髓间充质干细胞增殖、分化的效果,并筛选出最佳剂量。方法:利用密度梯度离心法结合贴壁筛选法分离培养兔骨髓间充质干细胞,分为空白组、转化生长因子β1阳性对照组、骨碎补高、中、低剂量组(分别含骨碎补0.4 mg,0.1 mg,5μg),取第3代骨髓间充质干细胞,根据实验分组加入不同培养液进行培养,1周后MTT比色法检测活细胞数目,免疫组化法测定Ⅱ型胶原表达。结果与结论:MTT比色结果显示转化生长因子β1和骨碎补冻干粉均能促进骨髓间充质干细胞增殖,转化生长因子β1阳性对照组骨碎补低剂量组骨碎补中剂量组骨碎补高剂量组空白组。细胞免疫组化检测Ⅱ型胶原结果显示转化生长因子β1和骨碎补冻干粉均可以诱导兔骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化,诱导后的细胞明显表达Ⅱ型胶原,转化生长因子β1阳性对照组骨碎补低剂量组骨碎补中剂量组骨碎补高剂量组空白组。结果表明骨碎补能促进兔骨髓间充质干细胞增殖和分化,尤以5μg剂量效果最佳。  相似文献   

19.
 目的: 探讨连翘苷对Lewis肺癌组织中血管内皮生长因子(VEGF)和血管生成抑制因子内皮抑制素(endostatin)蛋白表达的影响。方法: 免疫组化染色检测临床收集的正常肺部组织、癌旁组织和肺癌组织样本中VEGF和endostatin的蛋白表达。设空白对照组10只,同时于40只小鼠右肢腋窝皮下接种Lewis瘤细胞,随机分为模型组、连翘苷低剂量组、连翘苷中剂量组和连翘苷高剂量组,每组10只。模型组每天1次灌胃等体积无菌水;连翘苷低、中剂量组每天灌胃5、10 g/kg连翘苷1次;高剂量组每天灌胃10 g/kg连翘苷2次。给药20 d后取肺部组织进行HE染色和免疫组化染色检测肿瘤组织形态学与肺部组织中VEGF和endostatin的蛋白表达。 结果: 临床样本中,与正常组织和癌旁组织相比,肺癌组织中的VEGF呈高表达,endostatin呈低表达。连翘苷随剂量增加可显著减少Lewis肺癌小鼠肿瘤体积和瘤组织密度;给予不同剂量连翘苷后,VEGF在肺癌组织中表达显著低于模型对照组,而endostatin表达则明显高于模型对照组。结论: 连翘苷通过下调VEGF的表达、上调endostatin的表达而发挥抑制肺部肿瘤发展的作用。  相似文献   

20.
转染缺氧诱导因子-1α对肺癌细胞A549生长的影响   总被引:6,自引:0,他引:6       下载免费PDF全文
目的:研究缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)对人肺癌细胞株A549体内、外生长的影响,并探讨其可能机制。方法:将HIF-1α转染人肺癌细胞A549中,观察A549细胞生长。建立人肺癌裸鼠模型,随机将其分为两组:对照组(A组,10只),HIF-1α转染细胞组(B组,10只)。1月后,切除瘤灶、称瘤重、计算促瘤率。标本用免疫组化测定增殖细胞核抗原(PCNA),同时用Westernblot检测HIF-1α、凋亡抑制蛋白survivin和bcl-2的表达。结果:HIF-1α转染A549细胞后,细胞生长速率加快。转染HIF-1α的裸鼠肿瘤生长较对照组快,A组、B组的瘤重分别为(2.51±0.33)g,(3.44±0.40)g,促瘤率为37%。免疫组化和Westernblot提示:B组的PCNA表达比A组高,B组HIF-1α、survivin、bcl-2的蛋白水平明显高于A组。结论:转染HIF-1α体内、外均可促进肺癌A549细胞的生长,其机制可能与其能促进细胞恶性增殖和抑制凋亡有关。  相似文献   

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