miR?320a在黑色素瘤中的表达与临床研究

［摘要］ 目的 分析miR?320a在黑色素瘤组织中的表达情况及其与患者临床指标的关系。方法 利用TCGA数据库筛选与黑色素瘤患者预后相关的miRNA,然后进行QPCR验证,筛选差异表达miRNA,再通过卡方分析、ROC曲线分析miRNA与黑色素瘤临床指标、预后的关系。结果miR?320a在黑色素瘤组织中特异性低表达,且高表达的miR?320a患者具有较低的TNM分期以及较好的预后,ROC曲线表明miR?320a在判断黑色素瘤患者预后时具有一定的诊断效能。结论miR?320a在黑色素瘤组织中低表达,且低表达miR?320a患者临床指征和预后更好。     

PCOS患者血清miR-320a、miR-145表达水平及其与雌孕激素的关系探讨

目的 探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者血清微小RNA-320a(miR-320a)、miR-145表达水平及其与雌、孕激素的关系。方法 采用前瞻性研究,选取2019年5月至2021年7月于本院就诊的92例PCOS患者作为PCOS组,另招募同期健康体检的90例育龄期女性作为对照组。采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)法检测并比较两组患者血清miR-320a和miR-145表达水平,采用电化学发光法检测并比较两组患者血清E₂和孕酮水平;采用Pearson相关性分析探讨PCOS患者血清miR-320a、miR-145表达水平与雌孕激素的关系。结果 电化学发光检测结果显示,PCOS组血清E₂和孕酮水平显著低于对照组(P<0.05);Real-time PCR检测结果显示,PCOS组血清miR-320a和miR-145表达水平均显著低于对照组(P<0.05);Pearson相关性分析结果显示,PCOS组血清miR-320a和miR-145表达水平与E₂和孕酮水平均呈显著正相关(P<0.05)。结...     

miR-155和miR-30a在胃癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨胃癌组织和癌旁组织miR-155和miR-30a的表达差异及其临床意义.方法 收集手术切除的胃癌标本52例,采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应( RT-qPCR)检测癌及癌旁组织标本miR-155和miR-30a的表达水平,分析其与临床病理的关系.结果 miR-155在胃癌组织中表达量(0.84 ±2.27)显著高于其在配对癌旁组织中的表达值(0.28 ±0.56,P＜0.05);miR-155高表达与淋巴结转移有关(P＜0.05).miR-30a在胃癌组织中表达量(3.16±8.11)显著低于其在配对癌旁组织中的表达值(15.87±35.58,P＜0.05).miR-30a的低表达与肿瘤侵犯层次、淋巴结转移有关(P＜0.05).结论 miR-155和miR-30a与胃癌发生发展密切相关,可能成为胃癌的潜在诊断及治疗靶点.     

miR-34a在骨肉瘤患者血清中的表达及在诊断和预后中的价值

目的 研究miR-34a在骨肉瘤(osteosarcoma,OS)患者血清中的表达及其临床价值.方法 对湖北省汉川市人民医院2008年1月至2014年1月收治的OS患者以及同期健康体检者各54例进行前瞻性分析.OS患者男性23例,女性31例;年龄10～30岁,平均年龄(15.6±2.3)岁.同期健康体检者男性25例,女...     

术前血清miR-20a、miR-17在结直肠癌预后评估中的价值

目的探讨结直肠癌患者术前血清miR-20a、miR-17水平在术后不良临床结局评估中的价值。 方法选择2013年8月至2016年2月华中科技大学同济医学院附属协和医院就诊的结直肠癌患者73例作为病例组,收集患者术前以及术后1周、1个月、3个月时的血清标本,另收集81名同期体检健康对照组的血清标本,采用实时荧光定量PCR法检测两组血清miR-20a、miR-17表达水平。根据表达平均数分为高表达组与低表达组,采用Kaplan-Meier法对两组进行生存分析;Cox比例风险回归模型筛选不良预后的影响因素,受试者工作特征（ROC）曲线分析血清miR-20a、miR-17水平对结直肠癌不良预后的诊断效能。 结果病例组患者术后血清miR-20a、miR-17水平呈下降趋势（P<0.05）,且各检测点水平均高于对照组（P<0.05）。分化程度（HR=1.462,95% CI：1.096~1.951）、TNM分期（HR=1.642,95% CI：1.339~2.014）、术前血清miR-20a（HR=1.575,95% CI：2.035~3.652）、miR-17水平（HR=2.491,95% CI：2.131~2.914）是影响结直肠癌患者不良预后的独立危险因素（均P<0.001）。术前血清miR-20a、miR-17高表达者的3年总生存率更低（22.0% vs 78.3%,21.3% vs 73.1%,P<0.05）;两者联合检测预测结直肠癌患者预后不良的曲线下面积为0.955,敏感度为97.6%,特异度为91.2%。 结论结肠癌患者术前血清miR-20a、miR-17高表达与患者不良预后有关,术前检测有助于改善不良预后高风险患者的临床结局。     

miR-146a在胰腺癌组织中的表达及临床意义

[摘要] 目的 分析20例胰腺癌及胰腺良性病变组织中miR-146a的表达差异,评价miR-146a在胰腺癌中表达的临床意义及其价值。方法 收集笔者医院14例胰腺癌患者手术标本的癌组织,6例胰腺良性病变组织作为对照。采用Agilent 人microRNA寡核苷酸基因芯片(V12.0)在基因组范围内检测20例组织标本的miR-146a表达,并分析其与胰腺癌临床病理参数的关系。结果 胰腺癌组织中miR-146a的表达显著高于胰腺良性病变组织,差异有统计学意义(P =0.003), miR-146a在胰腺癌组织中的表达与患者年龄、性别、吸烟、临床分期、局部淋巴结转移,远处转移、CA199浓度、肿瘤分化程度、肿瘤分期,神经束膜侵犯、脉管侵犯均无相关性(P >0.05)。结论 miR-146a在胰腺癌的发生、发展过程可能发挥重要作用并可能成为胰腺癌新的肿瘤标记物或预后因子。     

食管鳞癌组织中miR-148a的表达及其临床意义

目的检测食管鳞癌组织中miR-148a的表达水平,探讨miR-148a表达与患者临床病理指标及预后的相关性。 方法收集2009年1至12月在山东大学齐鲁医院胸外科行食管癌切除加系统性淋巴结清扫的75例食管鳞癌患者的肿瘤组织标本,采用实时荧光定量PCR法检测miR-148a的表达。应用SPSS 18.0软件建立数据库并进行统计分析。χ²检验分析miR-148a表达与患者临床病理指标之间的关系;Kaplan-Meier法绘制患者的生存曲线,Log-rank检验比较患者的生存差别,Cox回归多因素分析判定独立的预后因素。 结果有32例患者肿瘤组织中miR-148a为低表达,miR-148a的低表达率为42.7%(32/75),与肿瘤浸润深度(χ²＝8.149,P＝0.017)、淋巴结转移(χ²＝4.151,P＝0.042)及病理分期(χ²＝6.474,P＝0.039)显著相关。患者术后3年的总生存率为70.7%。单因素生存分析结果显示,miR-148a低表达患者的术后3年总生存率显著低于miR-148a高表达患者(53.1%和83.7%,χ²＝9.136,P＝0.003)。Cox多因素回归分析结果显示,肿瘤浸润深度(95%CI为1.015～2.799,P＝0.044)及淋巴结转移(95%CI为1.285～4.796,P＝0.007)分别是判定患者术后3年总生存率的独立预后因素。 结论miR-148a在食管鳞癌组织中存在异常低表达,并与肿瘤进展及患者的不良预后密切相关;miR-148a可作为预测食管鳞癌进展和判定患者不良预后的参考指标。     

miR-34a与乳腺癌复发及预后的相关性研究

目的 探讨miR-34a在乳腺癌复发及预后中的作用.方法 88例乳腺癌患者均施行改良根治术,并有完整的随访资料.采用实时定量PCR(real-time qPCR)对原发肿瘤蜡块提取的microRNA进行miR-34a表达水平的测定,配对t检验比较癌组织和正常组织中miR-34a的水平差异,Mann Whitney-U非参数检验比较miR-34a表达水平和乳腺癌临床病理参数的关系,预后分析采用Kaplan-Meier生存分析和Log-rank计算,多因素统计分析采用Cox回归.结果 相比癌旁正常组织,在癌组织中miR-34a表达明显下调(P＜0.001),在组织学高分级的乳腺癌中miR-34a表达水平明显低于中低分级的乳腺癌(P=0.024);在随访中复发的乳腺癌患者中,miR-34a表达水平明显低于无复发的乳腺癌(P =0.008).miR-34a表达水平与肿瘤大小、淋巴结转移、激素受体ER/PR表达、HER2状态、脉管瘤栓、组织学类型、肿瘤病理分期及月经状态等未见明显关联(P＞0.05).以中位值2-△Ct =0.117为截断值,Kaplan-Meier生存分析表明,miR-34a高表达患者其乳腺癌无复发生存率(P =0.026)及总生存率(P=0.019)均高于miR-34a低表达患者.结论 miR-34a可促进组织分化,其表达下调增加肿瘤复发,可做为乳腺癌侵袭潜能的预测指标.     

miR-21在骨肉瘤中的表达及其临床意义

[目的]探讨miR-21在骨肉瘤中的表达并分析其与临床病理之间的联系。[方法]本文通过实时定量PCR方法检测42例骨肉瘤组织(包括12例来自同一患者的原发骨肉瘤组织和转移肿瘤组织)和来自同一患者的邻近正常骨组织中miR-21的表达并评估miR-21的临床相关性。[结果]miR-21在所有的组织中都有表达,且在肿瘤组织中比在正常组织中有明显的高表达(P=0.013),此外,miR-21在转移的肿瘤组织中比在同一样本中的原发肿瘤组织中高表达(P=0.002),另外,miR-21高表达的患者有着显著更差预后(P=0.016)。[结论]miR-21高表达潜在的导致转移,其可以作为骨肉瘤患者预后的一个指标。     

miR-34a在膀胱癌中下调MTA2表达的研究

目的 研究微小核糖核酸34a（microRNA-34a,miR-34a）在膀胱癌中的表达及临床意义,确定转移相关基因2（metastasis-associated gene2,MTA2）是否为miR-34a调控的下游靶基因,探讨膀胱癌中miR-34a与MTA2的相互作用机制。方法 选取48对膀胱癌根治术后癌组织及癌旁组织,标本来源于2011年5月至2012年5月我科收治的膀胱癌患者。Real-time PCR检测miR-34a和MTA2在组织中RNA的表达情况;荧光素酶实验鉴定MTA2是否为miR-34a下游靶基因;膀胱癌细胞株T24及UMUC3中转入miR-34a后,琼脂糖凝胶电泳、免疫印迹实验检测MTA2的RNA及蛋白表达。结果 Real-time PCR检测表明,膀胱癌组织中miR-34a呈低表达,并且与肿瘤分期有关（P〈0.01）;MTA2在癌组织中表达明显上调。MiRanda、Mirwalk、Targetscan软件预测miR-34a与MTA2的mRNA有结合位点,荧光素酶实验结果表明MTA2可能是miR-34a的潜在靶基因。转染miR-34a后,分别检测MTA2的蛋白和mRNA表达情况,发现MTA2蛋白受到抑制,mRNA表达不受影响。结论 miR-34a在膀胱癌中可能通过作用于其潜在靶基因MTA2而发挥抑癌基因作用。     

miR-34a调节骨稳态在骨质疏松中的应用前景

miR-34a是一个非编码蛋白的单链小分子RNA,在转录水平上通过碱基配对3’-端非翻译区域抑制靶基因表达,多用于肿瘤学的研究中,可通过下调原癌基因的表达抑制肿瘤细胞生长,近年发现其参与骨代谢过程中骨稳态的调节。Tgif2通过与 DNA结合或与TGFβ激活的Smads相互作用抑制TGFP基因表达而抑制成骨细胞的增殖,且Tgif2与RNAKL通路形成一个正反馈循环,RNAKL通路诱导的转录因子增加Tgif2活性,Tgif2又反过来促进RNAKL通路中转导因子的活性,从而促进破骨细胞的生长分化,miR-34a主要通过下调Tgif2基因的表达,促进成骨细胞增殖,且miR-34a下调Tgif2表达时,也间接抑制了 OPG/RANK/RANKL通路的转导,抑制破骨细胞增殖、分化。同时MiR-34a是肿瘤抑制基因P53最常见的转录靶点,P53不仅在转录水平对miR-34a进行调节,而且影响miR-34a前体形成和成熟。P53、miR-34a及Tgif2三者相互作用,直接影响成骨破骨细胞的增殖与分化,且与多个经典信号通路均有交叉,如OPG/RANK/RANKL通路、Wnt/hatenin经典信号通路,参与经典通路中相关因子的调节,间接影响骨稳态。因此,研究miR-34a如何调节成骨破骨分化及协调细胞内其他调节通路共同维持骨稳态将会成为防治骨质疏松症的重要研究方向。     

结直肠癌患者血清miR-21、 miR-196a标志物的表达水平及临床意义

目的:分析结直肠癌患者血清miR-21、miR-196a标志物的表达水平及意义。方法:选择我院2021年1月至2022年5月诊治的结直肠癌患者60例作为观察对象,将其纳入病例组;另选同期疑似结直肠癌,但查体健康者60名作为对照组。检测2组血清miR-21和miR-196a水平,问卷调查结直肠癌患者临床病理特征。结果:病例组患者血清miR-21和miR-196a表达水平均高于对照组(P<0.05)。在年龄、性别、肿瘤大小、部位方面,血清miR-21、miR-196a表达水平比较差异均无统计学意义(P>0.05);在浸润深度、TNM分期、分化程度、神经浸润、淋巴结转移方面,血清miR-21、miR-196a表达水平比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:结直肠癌血清患者miR-21、miR-196a水平升高与肿瘤浸润深度、TNM分期、分化程度、神经浸润、淋巴结转移有关。     

miR-92a表达与药物联合治疗糖尿病肾病大量尿蛋白的疗效及预后关系探究

目的:探究miR-92a表达与前列地尔联合血管紧张素转化酶抑制剂(angiotensin-converting enzyme inhibi-tors,ACEI)或血管紧张素受体抗结剂(angiotensin receptor anticaking agent,ARB)治疗糖尿病大量蛋白尿疗效及预后的关系.方法:收集20...     

术后认知功能障碍小鼠miR-146a表达的变化

目的观察术后认知功能障碍(postoperative cognitive dysfunction,POCD)小鼠术后血清、海马及前额叶皮质中miR-146a表达的变化。方法雄性C57BL/6小鼠50只,12~14周龄,体重25~30g,采用随机数字表法将其分为两组:对照组(C组)和麻醉手术组(AS组),每组25只。AS组在2.1%异氟醚吸入麻醉下行胫骨骨折开放复位内固定术,C组不行麻醉和手术处理。于术前24h及术后6、12、24、48h每组分别取3只小鼠进行摘眼球取血,处死后取海马和前额叶皮质,采用RT-PCR法测小鼠血清、海马和前额叶皮质中miR-146a表达量。于术后第1、3、7天每组各取10只小鼠,进行场景恐惧记忆实验和声音提示恐惧记忆实验,记录僵直时间百分比。结果与C组比较,AS组场景恐惧记忆实验中僵直时间百分比明显降低(P0.05),声音提示恐惧记忆实验中两组僵直时间百分比差异无统计学意义。在血清中,与C组比较,术后6、12、24、48h AS组miR-146a表达量明显升高(P0.05);与术后12h比较,术后6、24、48hAS组miR-146a表达量明显降低(P0.05)。在海马中,与C组比较,术后6、12、24、48h AS组miR-146a表达量明显升高(P0.05);与术后12h比较,术后6、48h AS组miR-146a表达量明显降低(P0.05)。在前额叶皮质中,与C组比较,AS组术后24、48h miR-146a表达量明显升高(P0.05);与术后24h比较,术后48h AS组miR-146a表达量明显升高(P0.05)。结论 POCD小鼠血清、海马及前额叶皮质中miR-146a表达升高,miR-146a表达量的变化可能与POCD的发病机制相关。     

结肠癌组织miR-192和miR-23a水平的变化及其临床意义

目的:探究结肠癌组织中微小RNA(miR)-192和miR-23a水平变化及其临床意义。方法:收集2009年3月—2012年10月我院手术切除并经病理学检查确诊的结肠癌标本71例及肠息肉标本45例,采用原位杂交法检测结肠癌组织及肠息肉组织中miR-192和miR-23a水平,分析结肠癌组织中miR-192和miR-23a水平与临床病理特征的关系。选用结肠癌SW620细胞系作为研究对象,分为对照组、miR-192组及miR-23a组,其中对照组不作处理,miR-192组及miR-23a组细胞分别进行miR-192及miR-23a转染,采用Transwell实验检测3组结肠癌细胞的侵袭能力。结果:结肠癌组织中miR-192水平明显低于肠息肉组织(P<0.05),miR-23a水平明显高于肠息肉组织(P<0.05);miR-192及miR-23a水平与结肠癌浸润深度、淋巴结转移情况及Dukes分期有关(P<0.05);结肠癌组织中miR-192表达水平与miR-23a表达水平呈负相关(r=-0.805,P<0.05)。miR-192组结肠癌细胞相同时间内穿过小室数明显低于对照组及miR-23a组,miR-23a组结肠癌细胞相同时间内穿过小室数明显高于对照组(P<0.05)。结论:结肠癌组织中miR-192水平下降,miR-23a水平上调;miR-192和miR-23a表达水平与浸润深度、淋巴结转移情况及Dukes分期有关;结肠癌组织中miR-192和miR-23a水平呈负相关;miR-192抑制结肠癌细胞侵袭能力,miR-23a能增强结肠癌细胞侵袭能力。     

miR-195及miR-21-3p在老年重症急性胰腺炎中的表达及相关性

选取新疆医科大学第一附属医院2020年2月—2022年3月收治的老年重症急性胰腺炎患者102例作为研究对象,按照不同疾病严重程度分为轻度组（n=45）及重度组（n=57）,同时选择健康受试者50例作为对照组,全部人员均接受了荧光定量法检测,对3组人员的miR-195及miR-21-3p表达水平进行测量;对比轻度组与重度组急性生理与慢性健康评估（APACHEⅡ）评分、RANSON系统评分;采用Spearman相关性探讨APACHEⅡ及RANSON分别与微小RNA-195 (miR-195)及微小RNA-21-3p(miR-21-3p)表达水平相关性;将老年重症急性胰腺炎患者按照不同预后分为死亡组（n=21）及生存组（n=36）,采用ROC曲线分析miR-195及miR-21-3p对老年重症急性胰腺炎的预测价值。结果显示,轻度组与重度组的miR-195及miR-21-3p表达水平均明显高于对照组,重度组的miR-195及miR-21-3表达水平均明显高于轻度组,差异有统计学意义（P<0.05）。重度组与轻度组相比,APACHEⅡ评分及RANSON评分均较高,差异有统计学意义（P<...     

lncRNAs靶向miR-34a在骨关节炎软骨破坏中的研究进展

骨关节炎病程中软骨细胞凋亡及细胞外基质降解引起关节软骨稳态失衡而形成的关节软骨破坏,是造成骨关节炎患者功能丧失甚至残疾的主要原因,但关节软骨破坏的具体分子机制尚未阐明。随着高通量测序技术的普及与完善,有研究者发现miR-34a在骨关节炎软骨破坏病程中发挥重要作用,其能够通过调控SIRT1/P53信号通路、PI3K/AKT信号通路、JNK信号通路等加快骨关节炎软骨破坏进程。近年来,lncRNAs与miR-34a相互作用的分子机制成为骨关节炎研究领域的热点之一,但在骨关节炎患者的基因表达谱中存在多种lncRNAs表达,不同lncRNAs与miR-34a在骨关节炎中的相互关系有待深入研究。探讨lncRNAs靶向miR-34a调控骨关节炎软骨破坏的相关分子机制,为进一步探索lncRNAs和miR-34a在骨关节炎治疗及诊断中的意义提供理论依据。     

miR-301a在结肠直肠癌组织中的表达及其对结肠癌细胞侵袭、迁移能力的影响

目的:分析结肠直肠癌组织miR-301a的表达及其与结肠直肠癌病人临床病理特征的关系。探讨下调miR-301a表达对结肠癌细胞增殖、侵袭、迁移能力以及PTEN蛋白表达的影响。方法:应用实时定量PCR方法检测48对结肠直肠癌组织和癌旁组织以及5种结肠癌细胞株中miR-301a的表达。应用瞬时转染方法将miR-301a抑制剂转入结肠癌细胞株HCT116后,用细胞增殖实验(CCK-8法)、transwell侵袭实验检测细胞的增殖和侵袭力;采用transwell迁移实验和划痕实验检测细胞迁移能力;并用Western印迹技术检测下调miR-301a后其靶蛋白PTEN表达的变化。结果:PCR结果显示,miR-301a在有淋巴结转移的结肠直肠癌组织中表达较其对应的癌旁组织和无淋巴结转移的癌组织为高(P<0.05);5种结肠癌细胞中均有不同程度表达;transwell侵袭、迁移实验显示,miR-301a抑制剂转染后HCT116细胞侵袭、迁移能力明显降低(P<0.05);增殖实验显示,下调miR-301a对结肠癌细胞抑制作用明显(P<0.05)。划痕实验表明,miR-301a抑制剂转染组细胞迁移能力明显受到抑制。Western印迹法显示,miR-301a抑制剂转染组细胞PTEN蛋白表达增加。结论:miR-301a在有淋巴结转移的结肠直肠癌组织中表达较高;下调miR-301a的表达抑制HCT116细胞的增殖、侵袭和迁移能力,且PTEN蛋白表达增加。miR-301a对结肠癌细胞生物学功能的影响可能是通过PTEN信号通路实现的。     

miR-143和miR-145在胃癌中的表达及功能研究

目的：探讨miR-143和miR-145在胃癌组织中的表达情况,观察其生物学功能。方法通过高通量芯片检测比较11对胃癌原发灶及其配对肝转移灶的miRNA表达谱,采用Real-time PCR方法观察miR-145和miR-143在55例胃癌组织中的表达情况。同时使用Transwell方法观察其对细胞转移能力的影响。结果 miR-143和miR-145在胃癌组织中的表达明显低于癌旁正常组织（miR-143：0．028±0．005比0．052±0．014,P＝0．058;miR-145：0．922±0．135比1．772±0．285,P＝0．007）,在转移灶中的表达明显低于原发灶（miR-143：0．059±0．025比0．182±0．045,P＝0．021;miR-145：0．164±0．076比0．594±0．283,P＝0．042）,相关性分析显示,miR-143和miR-145表达具有显著相关性（r＝0．400, P＝0．000）。体外实验显示,两者可协同抑制胃癌细胞系转移。结论 miR-145和miR-143可能参与胃癌转移进程,并且两者可能发挥协同作用。     

黑色素瘤抗原基因在肝癌细胞系中的表达

目的：研究黑色素瘤抗原（MAGE）基因在肝癌（HCC）细胞系中的表达，为应用MAGE抗原肽作为疫苗治疗肝癌的体外实验筛选靶细胞。方法：分别用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫组织化学方法对MAGE-1和MAGE-3mRNA及MAGE-1蛋白在8种HCC细胞系中的表达进行检测，用微量淋巴细胞毒法测定HCC细胞系的主要组织相容性复合物（MHC)I类分子的表达。结果：6种HCC细胞系MAGE-1基因mRNA阳性表达，2种MAGE-3阳性；有5种细胞系MAGE-1基因蛋白阳性。BEL7405HLA-A24阳性，HLE和HpG2HLA-A2阳性。结论：MAGE基因在HCC细胞系中有较高的表达率，HLE和BEL7405可作为阳性靶细胞，其他细胞系可作为相应的对照细胞，应用于用MAGE抗原肽疫苗治疗HCC的体外实验研究中。