中国人非小细胞肺癌EGFR和K-RAS基因突变情况的研究

目的研究中国人非小细胞肺癌表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因和K-RAS基因突变情况。方法通过PCR扩增和基因测序的方法检测了101例中国人非小细胞肺癌(non-small cell lung cancers,NSCLCs)EGFR第18、19和21外显子及K-RAS密码子12、13的突变情况,并观察分析了其突变与肺癌临床特征及吉非替尼(gefitinib,商品名:易瑞沙/Iressa)药物治疗肺癌的疗效间的关系。结果共检测到26例EGFR突变(25.7%),3例K-RAS突变(2.9%),并发现腺癌患者、非吸烟患者和女性患者EGFR突变率较高(分别为44.2%、65.7%和48.3%)。10例服用吉非替尼有效的患者9例伴有EGFR突变。结论中国人肺癌的EGFR突变率高于西方人,吉非替尼疗效与EGFR突变有关。     

重庆地区924例非小细胞肺癌EGFR基因突变分析

目的探讨重庆地区非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者EGFR基因突变及与临床病理特征的关系。方法收集2012～2015年陆军军医大学/第三军医大学第一附属医院就诊的NSCLC患者924例,采用ADx-ARMS法分析患者的EGFR基因突变类型,统计突变发生率及其与临床特征的关系。结果重庆地区NSCLC患者EGFR基因突变率为38.85%(359/924),其中女性患者突变率明显高于男性患者(63.84%vs 25.74%),腺癌患者突变率显著高于鳞状细胞癌等其他类型患者(48.90%vs 7.91%),无吸烟史患者突变率显著高于有吸烟史患者(60.98%vs 21.21%),不饮酒患者突变率高于饮酒患者(50.00%vs 29.54%)。19-del和L858R两种突变类型分别占总突变的48.19%及40.11%。结论重庆地区NSCLC患者的EGFR基因突变率与患者性别、病理分型、有无吸烟史、是否饮酒、原发肿瘤大小、区域淋巴结转移及是否发生远处转移相关。     

非小细胞肺癌EGFR基因突变与扩增及蛋白表达的相关性分析

目的：观察非小细胞肺癌（ non-sma11 ce111ung cancer,NSCLC）发生、发展中表皮生长因子受体（ epiderma1 growth factor re-ceptor,EGFR）基因突变及扩增与蛋白表达的相关性;探讨EGFR基因突变及扩增与NSCLC临床病理特征的关系。方法应用实时荧光定量PCR（ quantitative rea1-time po1ymerase chain reaction,qRT-PCR）、荧光原位杂交（ f1uorescent in situ hybridization, FISH）及免疫组化（immunohistochemistry,IHC）技术同时对NSCLC石蜡包埋组织中EGFR基因（18~21号外显子）突变、扩增及蛋白表达进行检测。结果 qRT-PCR技术检测NSCLC组织中EGFR基因（18~21号外显子）的突变率为58.18%（32/55）,其中19号外显子缺失和21号外显子L858R点突变占87.50%（28/32）;EGFR基因突变与患者性别、吸烟史、组织病理分型有关（P<0.01）,与患者年龄、淋巴结转移及TNM分期无关（P>0.05）;EGFR基因扩增率为23.64%（13/55）,EGFR蛋白阳性率为70.91%（39/55）;EGFR基因突变与基因扩增具有一定相关性（ P<0.05）,EGFR这两种基因状态与其蛋白表达无相关性（P>0.05）。结论 NSCLC EGFR基因突变在女性、无吸烟史及腺癌中表达较高,是酪氨酸激酶抑制剂（tyrosine kinase inhibi-tors,TKI）筛查主要对象;EGFR基因突变与基因扩增具有一定相关性,但基因突变与扩增的先后顺序尚不清楚,需增加病例数进一步探讨;EGFR基因突变和扩增与蛋白表达不一致,原因有待进一步分析。     

吸烟与非小细胞肺癌EGFR基因突变状态的关系

目的探讨吸烟与非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)中表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)基因突变状态的关系。方法采用ARMS法对628例NSCLC组织中EGFR基因第18、19、20和21号外显子进行突变检测,分析EGFR基因突变状态与患者性别、年龄、吸烟及临床分期的相关性,并复习相关文献。结果在NSCLC中,EGFR突变率与患者年龄、临床分期无相关性,与患者性别、吸烟状态相关。EGFR基因突变在腺癌、鳞癌、腺鳞癌及其他类型肺癌中的突变率分别为47.8%、12.5%、54.5%和0;吸烟NSCLC患者中,EGFR突变率(27.4%,77/281)低于非吸烟患者(56.8%,197/347);但吸烟NSCLC患者EGFR基因突变中的少见突变(23.3%,18/77)高于非吸烟患者(9.6%,19/197),非吸烟患者双突变中主要以Exon19 Del合并Exon20 T790M为主,吸烟患者中,可见多种多突变类型。结论 EGFR基因在腺癌、腺鳞癌及非吸烟患者中突变率较高;吸烟是NSCLC中EGFR突变率及少见突变的重要影响因素。     

非小细胞肺癌中EGFR突变与临床病理特征的关系

目的 观察非小细胞肺癌(non-small cell lung cancers,NSCLC)患者肿瘤组织中表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)19号和21号外显子突变情况,探讨其与临床病理特征的关系.方法 应用显微切割技术及扩增阻滞突变系统检测108例石蜡包埋NSCLC组织中EGFR基因第19号和21号外显子突变情况.结果 108例NSCLC患者中,EGFR基因突变率为36.1%(39例),其中19号外显子突变率为13.0%(14例),21号外显子突变率为23.1%(25例);EGFR基因突变的患者多为不吸烟、肿瘤直径较小(<3 cm)、腺癌、无远处转移及临床分期较早(P<0.05),与患者性别、病理分级及淋巴结转移无显著相关性(P>0.05);所有鳞癌标本中均无EGFR基因突变;EGFR突变的患者应用吉非替尼靶向治疗后原发肿瘤和脑转移灶明显缩小.结论 EGFR基因19号和21号外显子突变作为有效的NSCLC靶向治疗的临床筛选指标,很可能参与NSCLC的发生、发展,与相关的临床病理指标结合可为NSCLC的靶向治疗提供更可靠的依据.     

肺腺癌胸水158例EGFR基因突变分析

正表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因突变状态对于晚期肺腺癌患者接受酪氨酸激酶抑制剂(TKI)治疗的疗效预测意义已得到证实[1]。目前,Sanger测序法和扩增阻滞突变系统(amplification refractory mutation system,ARMS)是检测EGFR基因突变的主要方法[2]。     

非小细胞肺癌EGFR基因和蛋白检测的比较分析

目的比较荧光原位杂交(fluorescence in-situ hybridization,FISH)技术和免疫组化法对非小细胞肺癌(non-small celllung cancer,NSCLC)石蜡样本EGFR基因检测的结果,探讨EGFR基因表达状态与临床病理的关系。方法收集手术切除的NSCLC标本50例,应用免疫组化EliVision法检测EGFR蛋白表达,FISH检测EGFR基因扩增水平,比较两种方法的检测结果。分析EGFR扩增情况与病理组织学分型、分级及淋巴结转移情况的相关性。结果 50例NSCLC中免疫组化检测EGFR阳性20例(40%),FISH检测阳性11例(22%),免疫组化检测强阳性的病例仅75%经FISH检出EGFR基因扩增,弥漫阳性的病例仅21.4%经FISH检出EGFR基因扩增,免疫组化与FISH检测结果一致性较低,而免疫组化检测EGFR阴性者有4例FISH检测显示EGFR扩增。EGFR扩增与NSCLC的病理组织学分型、分级及淋巴结转移均无明显相关性。结论 FISH检测EGFR基因扩增与免疫组化检测EGFR表达结果不相一致,其与临床病理之间的关系有待于进一步研究。     

荧光原位杂交技术检测非小细胞肺癌EGFR基因扩增

目的探讨荧光原位杂交(FISH)技术检测非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)表皮生长因子受体(epider-mal growth factor receptor,EGFR)基因扩增的临床应用价值。方法采用FISH技术检测57例人NSCLC石蜡组织标本中EG-FR基因扩增水平。对于EGFR基因扩增阳性的患者采用酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitors,TKIs)药物进行治疗,其余患者采用传统化疗进行治疗。结果 57例NSCLC患者中有18例EGFR基因扩增阳性(31.58%),其中12例为高多体性扩增(66.67%),5例为成簇扩增(27.78%),以肺腺癌为主(72.22%)。TKIs靶向药物治疗有效率(RR)、中位生存时间(MST)和1年生存率分别为61.11%1、3.5个月和55.56%,对照组分别为35.89%、7.6个月和33.33%,差异均有显著性(P<0.05),前者的疾病控制率(DCR)高于后者,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论使用FISH技术检测NSCLC患者EG-FR基因扩增水平可以为临床采用TKIs药物治疗提...     

非小细胞肺癌组织SOX4基因突变分析

目的研究不同病理类型和病理分期的非小细胞肺癌组织中SOX4基因序列突变情况,探讨SOX4基因在肺癌发生过程中的作用。方法PCR扩增肺癌及癌旁组织SOX4基因HMG-box,并对经单链构象多态性分析有差异的20例病例进行测序。DNA及氨基酸序列比较利用Clustal和DNAStar软件。结果90例肺癌组织标本中,有18例发生碱基突变。其中,鳞癌有7例,腺癌5例,腺鳞癌混合型6例,对照的癌旁组织中未检测出突变。临床Ⅱ、Ⅲ期的突变率明显高于Ⅰ期。结论SOX4基因突变与肺癌肿瘤的病理类型无关,但与其病理分期有很大关系,提示SOX4基因突变可能与肺癌的发展和转移有某种关系,为探索SOX基因突变与人类肿瘤发生之间的关系提供了分子依据。     

非小细胞肺癌组织表皮生长因子受体基因第19外显子突变研究

目的 研究非小细胞肺癌的表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因第19外显子突变情况.方法 提取72例手术切除肺癌基冈组DNA,用巢式PCR扩增EGFR基因第19外显子并测序,分析EGFR基因第19外显子突变及其与I临床特征的相关性.结果 检测到13例肿瘤组织存在EGFR基因第19外显子多核苷酸的缺失突变,共有4种突变类型,突变率为18.1%,所检测的突变均为杂合型;EGFR基因第19外显子突变与肺腺癌、女性患者与不吸烟者相关.结论 EGFR基因第19外显子存在多核苷酸的框架缺失突变,以女性、腺癌和不吸烟患者为主.     

EGFR靶向药物治疗非小细胞肺癌的研究进展

在世界范围内,肺癌是死亡率最高的恶性肿瘤,其中以非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)为主.近年来,随着人表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)突变体的发现,以吉非替尼(gefitinib)和厄洛替尼(erlotinib)为代表的EGFR酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKIs)对于携带有EGFR敏感突变的NSCLC具有良好的疗效.然而,耐药问题的出现增加了临床治疗的难度,针对非小细胞肺癌的EGFR靶向治疗,目前仍有很多问题亟待解决.本文现就EGFR靶向治疗的现状与发展进行综述.     

非小细胞肺癌表皮生长因子受体基因突变检测及其临床意义

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)表皮生长因子受体(EGFR)基因突变检测技术及其临床意义。方法采用聚合酶链反应(PCR)扩增DNA直接测序法检测192例NSCLC的EGFR基因第18 ～21号外显子突变情况,并结合临床病理指标分析其意义。结果192例非小细胞肺癌中64例存在EGFR酪氨酸激酶结合域的基因突变(33.3％),其中第19号外显子缺失突变率为60.9％( 39/64),第21号外显子替代突变率为39.1％ (25/64),第18和20号外显子未发现突变。在伴有细支气管肺泡癌分化特征的肺腺癌中EGFR基因突变率为58.5％( 24/41),显著高于普通腺癌(37.9％,33/87)、鳞癌(7.5％,4/53)、大细胞癌(1/5)和腺鳞癌(2/6),P＜0.05;女性(51.9％,40/77)显著高于男性(20.9％,24/115),P＜0.01;不吸烟者(50.0％,57/114)显著高于吸烟者(9.0％,7/78),P＜0.01。结论PCR扩增DNA直接测序法检测NSCLC的EGFR基因突变技术稳定、可靠,为临床开展NSCLC靶向治疗提供了依据。     

非小细胞肺癌胸水细胞块c-M ET基因扩增检测分析

目的：探讨非小细胞肺癌胸水细胞块在间充质上皮转化因子受体(c-mesenchymal-epithelial transition,c-MET)基因扩增检测中的临床价值。方法：采用RT-PCR法检测215例非小细胞肺癌细胞块和404例非小细胞肺癌组织块中c-MET基因扩增,并检测细胞块同时送检组织块的患者74例的一致性。结果：细胞块c-MET基因扩增31例,扩增率14.42%(31/215);组织块c-MET基因扩增35例,扩增率8.66%(35/404);74例有组织块对照的细胞块c-MET结果一致性有68例,一致率达91.89%(68/74),其中细胞块c-MET基因扩增率12.16%(9/74),组织块扩增率17.57%(13/74)。结论：非小细胞肺癌胸水细胞块c-MET的扩增率略高于组织块;有恶性胸水的非小细胞肺癌患者原发灶组织发生c-MET扩增的概率较高。     

非小细胞肺癌患者胸水淋巴细胞中5种细胞因子的检测

细胞介导的免疫应答是抗瘤免疫的主要效应途径。而免疫的反应类型则取决于免疫系统受抗原刺激后产生的不同细胞因子的调节作用,ＩＬ2、ＩＦＮγ、ＩＬ10、ＩＬ4、ＴＧＦβ1是影响免疫应答类型的关键。我们采用原位杂交技术在单个细胞水平检测了非小细胞肺癌(ｎｏｎｓｍａｌｌｃｅｌｌｌｕｎｇｃａｎｃｅｒ,ＮＳＣＬＣ)癌性胸水细胞中上述5种细胞因子ｍＲＮＡ表达,并以结核性胸膜炎患者胸水细胞为对照,比较其差异并进行半定量分析,初步探讨肿瘤局部免疫微环境对抗肿瘤免疫应答的影响,揭示肿瘤逃逸机体免疫的机制。材料与方法组织来源:取经病…     

肿瘤异质性:EGFR突变型非小细胞肺癌患者的时空演变

大多数含有表皮生长因子受体(EGFR)基因突变的非小细胞肺癌患者对EGFR酪氨酸激酶抑制剂(TKI)的治疗显示出显著疗效.然而,所有患者最终都会因原发性或获得性耐药而出现疾病进展.最近几年,虽然有一些研究已经确认了几种在EGFR TKI药物治疗过程中出现的原发性或获得性耐药的机制,并由此而产生出新的潜在的治疗靶点,但是仍有30%的EGFR TKI获得性耐药的原因不明.因此在这篇综述中,我们将详细阐述现已确认的非小细胞肺癌患者的EGFR TKIs耐药机制和克服EGFR TKI耐药的潜在治疗策略.同时我们还突出强调了再活检的重要性,再活检不仅要在出现获得性EGFR-TKI耐药时,也要在开始EGFR TKI治疗时,以便发现其余未知的获得性耐药机制以及对EGFR-TKI药物疗效异质性的分子基础.     

非小细胞肺癌胸水细胞块ROS1融合基因检测分析

目的：探讨非小细胞肺癌胸水细胞块在ROS1(c-ros oncogene 1,receptor tyrosine kinase)融合基因突变检测中的临床价值。方法：采用ARMS-PCR法检测215例非小细胞肺癌胸水细胞块和404例非小细胞肺癌组织块中ROS1基因融合的四种类型,并检测细胞块同时送检组织块的患者74例的一致性。结果：细胞块ROS1融合基因阳性7例,阳性率3.26%(7/215);组织块ROS1融合基因阳性8例,阳性率1.98%(8/404);74例有组织块对照的细胞块ROS1融合基因结果一致性有71例,一致率达95.95%(71/74),其中细胞块ROS1融合基因的阳性率2.70%(2/74),组织块阳性率6.76%(5/74)。结论：非小细胞肺癌胸水细胞块ROS1融合基因的阳性率略高于组织块;有恶性胸水的非小细胞肺癌患者原发灶组织发生ROS1融合基因阳性的概率较高。     

上皮生长因子受体与非小细胞肺癌肿瘤免疫及转移的相关关系

目的与方法 采用链霉菌抗生物素蛋白－过氧化物酶连结法（ＬＳＡＢ）免疫组化和图象定量分析技术检测５０例非小细胞型肺癌（其中伴有淋巴结转移者３２例,不伴转移者１８例）上皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）的表达,结果：ＥＧＦＲ表达与肿瘤间质淋巴细胞浸润（ＴＩＬ）呈负相关（Ｐ〈０．０１）,ＥＧＦＲ高表达时,ＴＩＬ浸润少,肺癌的转移率高（８３％）ＥＧＦＲ的表达与肺癌的组织类型明显相关（＿Ｐ〈０．０５）,但与肺癌的分     

非小细胞肺癌患者外周血和胸水脱落细胞检测T790M突变的比较

目的比较非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)患者外周血和胸水脱落细胞T790M突变检出率的差异。方法收集52例NSCLC患者的胸水和外周血标本,检测两者的T790M突变,并对检测结果进行分析。结果外周血标本和胸水脱落细胞T790M突变的阳性率分别为30.8%、46.2%。外周血检测T790M突变阳性的16例胸水脱落细胞检测结果均阳性,外周血检测阴性的28例胸水脱落细胞检测结果22例阴性,6例阳性。外周血检测初步判为临界阳性的8例中胸水脱落细胞检测结果4例阴性,2例阳性,2例弱阳性。结论胸水脱落细胞比外周血标本检出率高,有胸水标本的患者建议优先选择胸水检测T790M突变。     

非小细胞肺癌胸水细胞块ALK融合基因检测分析

目的：探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)胸水细胞块在间变性淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase,ALK)融合基因检测中的临床价值。方法：采用突变扩增系统PCR(ARMS-PCR)法检测215例NSCLC细胞块和404例NSCLC组织块中ALK基因的三类融合类型,并检测细胞块同时送检组织块的患者74例的一致性。结果：细胞块ALK基因融合阳性26例,阳性率12.09%(26/215);组织块ALK基因融合阳性25例,阳性率6.19%(25/404);74例有组织块对照的细胞块ALK融合基因结果一致性有67例,一致率达90.54%(67/74),其中细胞块ALK融合基因的阳性率14.86%(11/74),组织块阳性率18.92%(14/74)。结论：NSCLC胸水细胞块ALK融合基因的阳性率略高于组织块;有恶性胸水的NSCLC患者原发灶组织发生ALK融合基因阳性的概率较高。