基于多指标成分定量评价复方鱼腥草胶囊

目的:基于多指标成分定量评价分析复方鱼腥草胶囊,为复方鱼腥草胶囊的质量控制提供参考。方法:首先制备复方鱼腥草胶囊供试品溶液及槲皮苷、表告依春、绿原酸、连翘苷、黄芩苷对照品溶液,色谱条件采用CAPCELL-PAK-MG-C_(18)色谱柱(5μm,规格:4. 6 mm×250 mm),柱温以35℃为宜,进样量为10μL,流速为1. 0 m L/min进行高效液相色谱(HPLC)检测,以流动相A(乙腈)和流动相B(水+0. 01%磷酸)为条件进行梯度洗脱,优化高效液相(HPLC)的方法学严谨性,进行线性回归、精密度、重复性、稳定性、专属性试验和加样回收率试验,多指标成分定量分析样品中槲皮苷、表告依春、绿原酸、连翘苷和黄芩苷的含量。结果:1)采用HPLC色谱法对复方鱼腥草胶囊中鱼腥草、板蓝根、金银花、连翘、黄芩等进行专属性试验,结果显示复方鱼腥草胶囊中鱼腥草、板蓝根、金银花、连翘、黄芩专属性良好。2)线性范围考察结果显示槲皮苷对照品、连翘苷对照品、绿原酸对照品在4～201μg/m L范围内、表告依春对照品、黄芩苷对照品在12～601μg/m L范围内的线性关系均良好。3)精密度试验结果显示槲皮苷、连翘苷、绿原酸、表告依春对照品、黄芩苷峰面积相对标准偏差(RSD)分别是0. 45%、0. 52%、0. 66%、0. 59%、0. 31%,结果表明此色谱条件下的HPLC仪器精密度良好。4)稳定性试验结果显示复方鱼腥草胶囊供试品溶液相对峰面积RSD是1. 33%,表明24 h内复方鱼腥草胶囊供试品溶液基本稳定。5)重复性试验结果显示复方鱼腥草胶囊供试品溶液相对峰面积RSD为0. 92%,表明该HPLC方法的重复性良好。6)结果显示槲皮苷、表告依春、绿原酸、连翘苷和黄芩苷的平均回收率分别为99. 10%、99. 26%、99. 07%、98. 05%、98. 82%、98. 32%,RSD为1. 81%、1. 49%、0. 94%、1. 58%、1. 01%,表明回收率较好。7)基于多指标成分定量测定结果显示不同厂家不同批次的复方鱼腥草胶囊中有效成分槲皮苷、表告依春、绿原酸、连翘苷和黄芩苷的含量存在较大差异。结论:基于多指标成分定量测定结果显示不同厂家不同批次的复方鱼腥草胶囊中有效成分槲皮苷、表告依春、绿原酸、连翘苷和黄芩苷的含量存在较大差异。     

复方鱼腥草胶囊中连翘苷和黄芩苷的高效液相色谱法含量检测

目的:评价采用高效液相指纹图谱分析复方鱼腥草胶囊中连翘苷和黄芩苷的含量。方法:首先制备复方鱼腥草胶囊供试品溶液及连翘苷、黄芩苷对照品溶液,通过文献检索和预实验优化高效液相色谱法(HPLC)指纹图谱的条件,色谱条件为采用ACQUITY-BEHP-henyl-C_(18)保护柱(5μm),以室内温度为柱温,进样量为20μL以乙腈为流动相A,以水+0. 02%磷酸为流动相B,流速1. 0 mL/min:检测波长为327 nm;进行线性回归、精密度、重复性、稳定性、专属性试验和加样回收率试验,考察HPLC方法学的严谨性,检测样品中连翘苷和黄芩苷的含量。结果:复方鱼腥草胶囊中连翘和黄芩专属性良好。连翘苷回归方程Y=98 009X-86 650,r=0. 999 2(n=5),连翘苷对照品在3. 23～103. 02μg/mL范围内线性关系良好;黄芩苷回归方程Y=212 284 X+108 806,r=0. 999 8(n=5),黄芩苷对照品在2. 74～87. 89μg/mL范围内线性关系良好。薄层色谱法鉴别连翘苷和黄芩苷经365 nm的紫外灯观察发现连翘苷和黄芩苷在阴性对照品位置上相互之间不存在干扰现象。样品1连翘苷含量0.51 mg,RSD为1.72%,黄芩苷含量14. 6 mg,RSD为4. 95%;而样品2连翘苷0. 50mg,RSD为1. 69%,黄芩苷含量14.3 mg,RSD为4. 92%; 2组复方鱼腥草胶囊样品中连翘苷和黄芩苷的含量差异无统计学意义(P 0. 05)。结论:复方鱼腥草胶样品质量可控性、稳定性和专属性均较好。     

HPLC法测定前列舒通片中大车前苷的含量

目的:建立高效液相色谱法(HPLC)测定前列舒通片中大车前苷的含量。方法:采用HPLC法,色谱柱为ZORBAX Eclipse Plus C_(18)色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),以乙腈-0.1%甲酸溶液(17∶83)为流动相,检测波长330nm,柱温25℃,流速1.0mL/min。结果:对照品溶液中和供试品溶液中大车前苷与各杂质峰分离良好;大车前苷在0.06～2.015μg之间呈良好线性关系(r=0.9998),大车前苷平均加样回收率为98.9%(n=6),RSD=0.37%。结论:经方法学验证,本法可用于前列舒通片的质量控制。     

HPLC法测定玉屏风颗粒中黄芪甲苷及甘露醇的含量

目的:采用高效液相-蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)玉屏风散颗粒中黄芪甲苷和甘露醇的含量,为玉屏风散的质量控制提供实验基础。方法:采用色谱柱出自Waters公司,型号为XBridge-Amide,规格:4. 6 mm×150 mm,色谱柱填料颗粒直径3. 5μm;流动相:乙腈(A)-水溶液(B,其中含少量甲醇),流速1 mL/min;梯度洗脱流程见表1;柱温30℃;蒸发光检测器:以氮气为载气,流速202. 7 kPa,漂移管温度110℃,撞击器为"on"。常规对高效液相色谱仪进行方法学的严谨考察,包括专属性试验、精密度试验、稳定性试验、重复性试验、线性回归试验和加样回收试验。在高效液相色谱仪方法学严谨的前提下,对玉屏风散颗粒进行样品分析研究,并测定其中黄芪甲苷和甘露醇的含量。结果:1)专属性试验结果显示:阴性对照品溶液1在与甘露醇对照品溶液和玉屏分散供试品溶液色谱图相同时间处未见相同色谱峰;阴性对照品2在与黄芪甲苷对照品溶液和供试品溶液色谱图相同时间处未见相同色谱峰。提示甘露醇和黄芪甲苷均具有良好的专属性。2)线性回归结果显示:黄芪甲苷的线性范围为1. 1～5. 1 mg,其回归方程为:Y=0. 732X-4. 136(r=0. 999 7);同黄芪甲苷线性回归方法得,甘露醇在1. 967～19. 674μg范围内具有良好的线性关系,得到甘露醇回归方程为Y=1. 587X+4. 983(r=0. 999 6)。3)精密度试验结果显示,黄芪甲苷RSD=0. 58%,甘露醇RSD=0. 36%表明高效液相仪器精密度良好。4)本研究稳定性结果显示黄芩甲苷峰面积的RSD=0. 84%,甘露醇峰面积的RSD=0. 70%,符合色谱峰相对峰面积的RSD 3%则说明稳定性良好,提示玉屏风散供试品溶液24 h内稳定性良好。5)本研究结果显示色谱峰相对峰面积RSD平均值1. 76%,各色谱峰相对峰面积的RSD 3%表示重复性良好,提示玉屏风散供试品溶液的重复性良好。6)结果显示黄芪甲苷对照品溶液、甘露醇对照品溶液平均回收率分别为100. 608%、103. 487%,RSD分别为0. 93%、0. 47%,提示高相液相检测方法所测加样回收率结果可靠。7) 3个不同批次的玉屏风散中黄芪甲苷成分和甘露醇成分的含量未见明显差异,黄芪甲苷和甘露醇含量平均值分别为0. 961 mg/g和0. 099 mg/g。结论:高效液相-蒸发光散射检测方法操作简便准确,重复性和稳定性均良好,可作为测定玉屏风散颗粒中黄芪甲苷和甘露醇含量的测定方法。     

高效液相色谱法测定知柏地黄丸中马钱苷及菝葜皂苷元的含量

目的:通过高效液相色谱法测定知柏地黄丸中有效成分马钱苷及菝葜皂苷元的含量。方法:选取高效液相色谱法对知柏地黄丸中成分的含量进行测定。色谱条件采用C18色谱柱(型号为Eclipse XDB),该色谱柱的长度为250 mm,色谱柱内经为4. 6 mm,色谱柱填料颗粒直径为5μm。进样量为20μL,流动相采用乙腈(A相)和0. 1%磷酸水溶液(B相)的二元体系进行梯度洗脱。高效液相色谱法(HPLC)严谨性考察,包括线性关系、精密度、重复性、稳定性和加样回收试验考察,结果:阴性对照品溶液1在与马钱苷对照品溶液和供试品溶液色谱图相同时间处未见相同色谱峰;阴性对照品2在与菝葜皂苷元对照品溶液和供试品溶液色谱图相同时间处未见相同色谱峰。线性考察结果显示回归方程、相关系数和线性范围分别是:马钱苷在0. 040 54～4. 054μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,其回归方程为Y=611. 16X+5 664. 1(r=0. 999 7);菝葜皂苷元进样量在0. 440 01～4. 353μg范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系,回归方程Y=1. 639 7X+11. 549(r=0. 999 8)。精密度试验:RSD=0. 79%;稳定性试验:色谱峰相对峰面积RSD平均值1. 716%;重复性试验:色谱峰相对峰面积RSD平均值2. 011%。马钱苷对照品溶液、菝葜皂苷元对照品溶液平均回收率分别为105. 719%、98. 865%,RSD分别为1. 29%、1. 36%。201805026、201806013、201807085等3个不同批次号的知柏地黄丸中,马钱苷成分和菝葜皂苷元成分的含量差异无统计学意义。结论:高效液相色谱法的操作简单,结果具有较好的精密度、稳定性和重复性,可作为知柏地黄丸质量控制的有效方法,而不同批次知柏地黄丸中有效成分含量未见明显差异。     

痔疮外用熏洗剂制备及质量控制

[目的]制备痔疮中药外用熏洗剂并制定质量控制标准。[方法]采用Thermo Syncronis C18(4.6×250mm,5μm)、Agilent ZORBAX SB-AQ(4.6×250mm,5μm)、SPOLAR C18(4.6×250mm,5μm);柱温:40℃;检测波长:280nm;流动相:甲醇-水-磷酸(45:55:0.2);流速:1.0mL/min。[结果]黄芩苷RSD=2.81%,供试品溶液在4h内稳定;苦参碱RSD=0.91%。黄芩苷平均含量为2.626mg/mL,RSD=1.96%,苦参碱为0.22mg/mL,RSD为1.8%。外观性状、pH值、相对密度、高效液相色谱等均无明显变化,均符合规定。黄芩苷RSD=2.40%;苦参碱RSD=1.80%。[结论]现代制药工艺研制工艺简单,组方合理,值得推广。     

传统煎法与现代煎药机制备三黄汤的高效液相色谱法指纹图谱

目的:探讨采用高效液相色谱法(HPLC)分析三黄汤传统煎法和现代煎药机法的指纹图谱差异。方法:选取10个不同批次的三黄汤配方,配制传统煎法三黄汤供试品溶液和现代煎药机三黄汤供试品溶液,色谱条件采用4.6 mm×250mm的DIAMONSIL C_(18)保护柱(5μm),以30℃为柱温,进样量为15μL以甲醇为流动相A1磷酸水为流动相B,检测波长为277 nm进行HPLC指纹图谱对比研究。结果:三黄汤专属性良好。线性关系考察显示黄芩苷回归方程Y=75.64X+21.31,r=0.999 8(n=5),黄芩苷对照品范围在0.5～12.0μg/mL,线性考察结果显示线性关系良好。精密度结果最终取大于总峰面积5%的色谱峰相对峰面积RSD平均值1.776%,三黄汤供试品溶液精密度良好。稳定性结果显示色谱峰相对峰面积RSD平均值1.843%,三黄汤供试品溶液24 h内稳定性良好。重复性试验结果显示色谱峰相对峰面积RSD平均值1.911%,三黄汤的重复性良好。加样回收率检测结果显示平均回收率99.81%,RSD 1.79%,高相液相检测方法所测加样回收率结果可靠。样品测定结果显示在同一色谱洗脱梯度下,传统煎法的三黄汤指纹图谱120 min即完成检测,而现代煎药机法制备的三黄汤指纹图谱在131.87 min才完成检测;另外从图谱中可见现代煎药机制备的三黄汤中色谱峰更多,可能与现代煎药机的高压煎煮设备能析出更多共有峰有关。从各自的指纹图谱相似度中可得,10批传统煎法三黄汤的相似度和10批现代煎药机法三黄汤的相似度均高于0.9其中传统煎法平均相似度为0.9714,现代煎药机法平均相似度为0.981 6,略高于传统煎法。结论:传统煎法和现代煎药机法制备的三黄汤的HPLC指纹图谱存在一定差异。     

超高效液相色谱法分析蒲地蓝消炎口服液的化学成分

目的:通过超高效液相色谱法分析蒲地蓝消炎口服液的化学成分。方法:采用Waters C_(18)色谱柱(型号为Xbridge),该色谱柱填料颗粒直径为5μm,色谱柱的长度为250 mm,色谱柱内经为4. 6 mm,柱温30℃。进样量为10μL,流动相采用乙腈(A相)和0. 2%磷酸水溶液(B相)的二元体系进行梯度洗脱,超高效液相色谱法方法严谨性考察,包括线性关系、精密度、重复性、稳定性和加样回收试验考察,基于超高效液相色谱法方法具有严谨性的前提下,对蒲地蓝消炎口服液中成分的含量进行测定。结果:1)线性考察结果显示回归方程、相关系数和线性范围分别是:结果表明黄芩苷在90. 59～1 449. 36μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,其回归方程为Y=17 465X+22 879(r=0. 999 9);菊苣酸得回归方程Y=39 728X+15 520(r=0. 999 8),在5. 48～54. 85μg范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系。2)精密度试验结果显示,黄芩苷峰面积的RSD=0. 18%,菊苣酸峰面积的RSD=0. 16%,结果表明超高效液相仪器精密度良好。3)稳定性试验结果显示黄芩苷峰面积的RSD=0. 96%,菊苣酸峰面积的RSD=0. 87%,符合色谱峰相对峰面积的RSD 3%则说明稳定性良好,提示蒲地蓝消炎口服液供试品溶液24 h内稳定性良好。4)重复性试验研究结果显黄芩苷峰面积的RSD=0. 99%,菊苣酸峰面积的RSD=1. 06%,符合色谱峰相对峰面积的RSD 3%表示重复性良好,提示蒲地蓝消炎口服液供试品溶液的重复性良好。5)加样回收试验结果显示黄芩苷对照品溶液、菊苣酸对照品溶液平均回收率分别为105. 887%、99. 033%,RSD分别为1. 03%、1. 11%,提示高相液相检测方法所测加样回收率结果可靠。6) 3个不同批次的蒲地蓝消炎口服液中黄芩苷成分和菊苣酸成分的含量差异无统计学意义,另外3批蒲地蓝消炎口服液的相似度检测结果也比较相近。结论:超高效液相色谱法的操作简单,方法严谨性强,可作为蒲地蓝消炎口服液质量控制的有效方法,而不同批次蒲地蓝消炎口服液中有效成分含量未见明显差异,且相似度高。     

高效液相色谱法测定冬凌利咽糖浆中冬凌草甲素含量

目的建立测定冬凌利咽糖浆中冬凌草甲素含量的方法。方法运用高效液相色谱法,设置参数色谱柱为250 mm×4. 6 mm,5μm的C18柱、55∶45比例甲醇-水流动相、1. 00 m L/min流速、239 nm检测波长。分别完成对照品、待试品、阴性对照3种不同液体精密吸取,并设定以上色谱条件,取出10μL液相色谱仪器置入其中,实时记录色谱图结果。结果 (1)根据记录的色谱图能够发现,处于此种色谱条件下能够在时间达到4. 1 min处保留时间,对比待试品以及对照品两种溶液产生色谱峰,但是在阴性对照溶液中,并未可见色谱峰。说明冬凌草甲素的测定不受其它杂质峰的干扰。(2)冬凌草甲素在0. 60～12. 00 mg/L浓度范围内线性关系良好(r=0. 999 9);(3)平均回收率98. 1%,RSD=1. 53%;(4)稳定性:冬凌草甲素峰面积的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)=0. 79%,表明供试品溶液在24 h内稳定性良好;(5)重复性:冬凌草甲素含量的RSD=0. 83%,表明重现性较好。(6)冬凌草甲素含量:批号20180105冬凌草甲素含量为0. 43 g/L,RSD为0. 96%,批号20180323冬凌草甲素含量为0. 38 g/L,RSD为1. 12%,批号20180511冬凌草甲素含量为0. 40 g/L,RSD为1. 03%。结论目前,高效液相色谱法仍然是分析冬凌草中冬凌草甲素最常应用的方法之一,但随着技术的发展,UPLC方法的应用也会越来越普及。方法简便、快速、准确,专属性强,能够对于测量冬凌利咽糖浆中的冬凌草甲素含量准确检测,确保检测结果相符实际的药物含量,因此可用于冬凌利咽糖浆中冬凌草甲素含量测定。     

柴葛解肌汤配方颗粒与传统煎剂中黄芩苷含量的比较研究

目的建立柴葛解肌汤中黄芩苷含量的HPLC测定方法。方法色谱柱:KromasilC18(200mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇-水-磷酸(47∶53∶0.2);检测波长:280nm;柱温:室温;流速:1.0mL/min。结果在0.3373～1.6865μg范围内峰面积与黄芩苷含量呈线性关系(r=0.9997),平均回收率为97.87%,RSD=1.66%。结论利用HPLC法测定柴葛解肌汤中黄芩苷含量操作简单,结果准确。