间充质细胞源性细胞在骨关节发育和病损过程中的深化

胚胎时期，存在于中胚层高度集中的多功能性间充质细胞形成骨的最初雏形，长管状骨在透明软骨雏形的基础上通过软骨内化骨与塑形的过程发育而成；发育中的两块开骨之间的间充同细胞分化为关节及其辅助结构。软骨雏形和生长板中软骨细胞表型有规律的转化，尤其最终出现的成骨（样）细胞或细胞表达成骨表型，是软骨－骨转化发生机制的关键环节。在这一过程中，细胞定向性分化的发生、发展受特异性成骨细胞转录因子（Ｏｓｆ２／Ｃｂｆａ     

软骨样脂肪瘤1例

软骨样脂肪瘤（chondroid lipoma）是近年来报道的一种良性脂肪细胞肿瘤的特殊类型，十分罕见，其应与黏液样脂肪肉瘤和骨外黏液样软骨肉瘤相鉴别，现报道如下。     

关节腔注射人重组白细胞介素1对家兔颞下颌关节…

将人重组白细胞介素１（ｒｈＩＬ－１）注入家兔颞下颌关节腔内，采用Ｘ线和多种组织学染色，观察ＩＬ－１造成家兔颞下颌关节病理损害的特征。结果表明，ＩＬ－１可导致滑膜增生、滑膜炎症、胶原纤维断裂掀起、软骨基质丢失、软骨细胞缺失、软骨崩解及软骨下骨吸收；关节盘也发生胶原纤维松解断裂、玻璃样变和软骨样变。     

关节腔注射人重组白细胞介素1对家兔颞下颌关节的影响

将人重组白细胞介素１（ｒｈＩＬ－１）注入家兔颞下颌关节腔内，采用Ｘ线和多种组织学染色，观察ＩＬ－１造成家兔颞下颌关节病理损害的特征。结果表明，ＩＬ－１可导致滑膜增生、滑膜炎症、胶原纤维断裂掀起、软骨基质丢失、软骨细胞缺失、软骨崩解及软骨下骨吸收；关节盘也发生胶原纤维松解断裂、玻璃样变和软骨样变。     

尺骨软骨样副脊索瘤1例及文献复习

目的：探讨尺骨软骨样副脊索瘤的临床病理特征，及其与原发或转移性肿瘤的鉴别诊断。方法：对1例原发于尺骨的软骨样副脊索瘤的标本，通过光镜，免疫组化进行病理组织学观察和会诊及病理读片会讨论等方法。结果：组织学特征为：肿瘤细胞呈大小不等的小叶状或小梁状排列，小叶边缘为软骨样小梁；小叶间血管扩张充血；小叶内瘤细胞呈片状，小梁状、岛状分布，细胞大小不一，核多靠边，浆呈大空泡状，类似脂肪样细胞，有的核居中，类似软骨样细胞，核异形性不明显，未找到核分裂，瘤细胞间为淡兰色或粉染的粘液样物质。免疫组化（ABC）：CK、EMA、S－100蛋白、NSE Vimentin染色均为阳性，Desmin、CD34均为阴性。会诊和读片会讲座均诊为软骨样副脊索瘤。结论：原发于尺骨的软骨样副脊索瘤非常罕见，组织形态学上很难确诊。免疫组化有助于明确诊断。     

关节软骨损伤组织工程修复的实验研究

目的：（1）研究不同体外培养时间软骨的生物学特性，探讨运用于软骨组织工程中软骨种子细胞的最适宜培养时间和条件。（2）应用组织工程技术探讨运用自体关节软骨细胞修复关节软骨缺损的可行性。（3）应用组织工程技术探讨应用同种异体软骨细胞修复关节软骨缺损的可行性。（4）研究修复关节软骨缺损的软骨细胞来源。方法：（1）取新西兰兔关节软骨细胞体外培养，观察软骨细胞的形态学变化，生长曲线，酸性粘多糖及胶原分泌情况。（2）建立关节软骨缺损模型，应用自体关节软骨细胞复合生物支架Pluronic修复关节软骨缺损，观察修复效果。（3）应用同种异体软骨细胞复合生物支架Pluronic修复关节软骨缺损，观察修复效果。（4）应用3H－TdR放射自显影方法，确定修复关节软骨缺损的细胞来源。结果：（1）体外培养第四代软骨细胞的增殖能力达到高峰，而第二代软骨细胞分泌基质能力最强。（2）自体或同种异体软骨细胞复合Pluronic修复关节软骨缺损，12周后缺损表面较平滑，与正常软骨界面愈合较好，MASSON三色染色显示胶原分布已较均匀， 骨细胞呈柱状排列，II型胶原在细胞周围阳性表达，而空白对照和材料对照组未见明显修复。（3）3H－TdR放射自显影方法证实修复软骨组织的细胞来源于体外移植细胞，软骨细胞植入体内早期仍进行有丝分裂，而在中后期软骨细胞以分泌基质为主，植入的细胞与周围软骨细胞间存在物质交换。结论：（1）软骨细胞在体外培养2－3周左右是作为软骨组织工程种子细胞的最佳时机。（2）自体或同种异体组织工程化软骨是修复关节软骨缺损的较好方法。（3）组织工程化软骨修复关节软骨缺损的细胞来源于体外移植的软骨细胞。     

无镁诱导培养的大鼠皮层神经元癫痫样放电

目的：观察无镁细胞外液短暂处理培养的胚胎鼠大脑皮层神经元能否诱导自发、反复的惊厥样放电。以期提供一种较好的研究发育中脑癫痫活动的细胞模型。方法：采用全细胞电流钳记录技术，记录体外培养12－18d的大脑皮层神经元在正常细胞外液、无镁细胞外液、无镁细胞外液处理3h继而恢复正常细胞外液后1－2h、24h、72h神经元电活动的变化。结果：（1）神经元在正常细胞外液中自发放电形式表现为兴奋性突触后电位（EPSP）及约16次／min左右的动作电位（n=29)。（2）无镁细胞外液孵育3h，孵育期间100％的细胞（n=25)放电形式发生改变，表现为两种形式：持续强直的高频爆发及“楔形”去极化。（3）经无镁细胞外液孵育3h恢复正常细胞外液后2h 100%的细胞发生异常放电（n=12),72h仍有近80％的细胞发生异常放电，主要表现为阵发性持续棘波样爆发、“楔形”去极化及PDSs样发作（paroxysmal depolarizing shifts)。结论：培养的胚胎鼠皮层神经元予短暂的无镁处理后可诱导自发、反复的惊厥样活动，且惊厥样活动可持续72h，为进一步研究发育中惊厥性脑损伤及保护提供了较好的癫痫细胞模型。     

鸡胚额骨成骨细胞样细胞^14C—脯氨酸掺入动力学观察

成骨细胞样细胞体外培养~（１４）Ｃ－脯氨酸掺入液闪测定及放射自显影（ＡＲＧ）观察显示：鸡胚额骨分离细胞原代培养３ｄ就出现比较高的~（１４）Ｃ－脯氨酸的掺入值，峰值出现在培养７ｄ，细胞外~（１４）Ｃ－脯氨酸掺入最大值出现在培养１０ｄ并持续一定时间，这与细胞内胶原合成及分泌有密切的关系。结果显示体外培养成骨细胞样细胞较早就有胶原合成；细胞增殖和细胞胶原合成同时发生，且细胞内胶原合成率在细胞的对数增殖期最高。该实验为今后进一步研究药物对成骨细胞样细胞体外培养实验中~（１４）Ｃ－脯氨酸掺入提供最佳参考时间。     

佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞的原代培养及分泌功能研究

分离、培养佐剂性关节炎（ＡＡ）大鼠膝关节滑膜细胞，倒置相差显微镜观察细胞形态，检测细胞增殖能力及培养上清中白细胞介素１（ＩＬ－１）、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）的生物活性和前列腺素Ｅ２（ＰＧＥ２）的含量。结果表明ＡＡ大鼠滑膜细胞存在三种不同的形态，即巨噬细胞样细胞（ＭＣｓ）、树突状细胞（ＤＣｓ）、成纤维细胞样细胞（ＦＣｓ）；滑膜细胞增殖能力增强；其分泌ＩＬ－１、ＴＮＦ－α和ＰＧＥ２的能力增强。本实验为研究类风湿性关节炎的病理及筛选抗风湿药提供了理想的实验材料。     

人胎关节软骨细胞体外培养的生物学特性

目的：研究软骨组织工程中传软软骨细胞与原代的差异，方法：用5个月人胎关节软骨分离培养细胞，观察细胞存活率，贴壁率，生长曲线和组织形态学的改变。结果：（1）软骨块在4℃下，3天内细胞存活率可达93．4％－97．6％。（2）原代细胞为圆形或三角形；第4代有一半转变成梭形，到第6代全部变为长梭形。（3）传代细胞贴壁时间（2－3h)短于原代（4－7h)。玻璃瓶内贴壁率传代细胞为78．7％－85．5％，原代8．8％。（4）生长曲线表明，从原代到第4代都有高增殖力；到第8代时增殖降低；到第12代几乎丧失细胞增殖。结论：软骨块4度冷藏，3天内对细胞存活率无明显影响。第4代细胞壁壁快，增殖 ，适于作为组织工程用细胞，第8代以后不适合。     

亚硝胺类化合物MNNG诱导人胃粘膜上皮细胞系GES—1恶性转化的研究

本文首次报道以人胃粘膜上皮细胞系ＧＥＳ－１为靶细胞，用与人类胃癌相关的亚硝胺类化合物Ｎ－甲基－Ｎ－硝基－Ｎ－亚硝基胍（ＭＮＮＧ）对人胃粘膜上皮细胞系ＧＥＳ－１做进一步的恶性转化，从形态学及细胞生长特性的变化、染色体数及结构等方面进行了观察、分析。结果表明，ＧＥＳ－１细胞经ＭＮＮＧ处理后（命名为ＭＣ），细胞形态及生长特性均发生了改变。随着传代的延续，细胞从上皮样变为梭形，呈典型的“岛样”克隆生长，获     

贫血与非贫血不同群体外周血MF—RBC初步对比观察

人体外周血有一种形成髓磷脂样丝的细胞，简称髓丝细胞（ＭＦ－ｃｅｌ）。分为髓丝红细胞（ＭＦ－ＲＢＣ）、髓丝白细胞（ＭＦ－ＷＢＣ）两大类。作者重点观察前者的变化。国外有些学者采用暗视野、位相或电镜定性观察报告认为，ＭＦ－ＲＢＣ的大量出现与某些贫血症有关。...     

涎腺多形性腺瘤不同组织成份NOR定量研究

采用核仁组织导体区银染技术（ＡｇＮＯＲ技术），对涎腺多形性腺瘤中各种组织成份进行定量研究，结果发现在实性及腺管样区域中肿瘤性上皮细胞ＡｇＮＯＲ颗粒均数为４２０，大小颗粒之比接近１∶３；软骨样细胞者为１８０，大小颗粒之比接近１∶１；粘液样细胞者为２０６，大小颗粒之比接近１∶１，前者与后两者间有显著性差异（Ｐ＜００５），结果表明：实性及腺管样区域中的肿瘤性上皮细胞活性较软骨样细胞、粘液样细胞高，结果提示肿瘤性上皮成份丰富的ＰＡ可能更具有癌变的潜能     

磷脂酶C—γ1在人胚组织中的表达

目的 研究磷脂酶C－γ1（PLC－γ1）在人胚组织中的表达情况。方法 收集人胚组织（包括软骨、软骨膜、骨骼肌）并行石蜡包埋及切片,采用免疫细胞化学ABC染色法观察人胚组织细胞中PLC－γ1的表达情况。结果 PLC－γ1在这几种细胞中均有较强的表达,主要位于胞质中。结论 PLC－γ1相关的细胞内信号传递途径对于人早期胚胎细胞的发育、增殖具有重要的生物学意义。     

鲨鱼软骨制剂对三种细胞系的抑制效应

目的：研究鲨鱼软骨制剂（ＳＣＰ）对人胃癌细胞（ＭＧＣ８０－３）、红白血病细胞Ｋ５６２）、人脐静脉血管内皮细胞（ＶＥＣ３４０）的生长抑制作用,探讨其抗癌作用机制。方法：采用盐酸胍抽提、丙酮分级沉淀、烘干、微孔滤膜过滤等步骤从鲨鱼软骨粉中提取鲨鱼软骨制剂;采用ＭＴＴ法检测不同浓度ＳＣＰ对体外培养的ＭＧＣ８０－３细胞系、Ｋ５６２细胞系和ＶＥＣ３４０细胞系的生长抑制作用。结果：ＳＣＰ明显抑制ＭＧＣ８０－３     

转化生长因子—β对骺软骨细胞增殖和PCNA表达的影响

采用１４天鸡胚股骨无血清培养、５－溴尿嘧啶核苷（ＢｒｄＵ）掺入标记和细胞核增殖抗原（ＰＣＮＡ）免疫染色方法，研究转化生长因子－β（ＴＧＦ－β）对骺软骨细胞增殖的作用。结果显示：ＢｒｄＵ阳性软骨细胞数目与分布都位于ＴＧＦ－β作用剂量和时间密切相关，ＴＧＦ－β可以促进骺板成熟区和肥大区软骨细胞增殖，与ＢｒｄＵ标记相比，ＰＣＮＡ阳性细胞分布区域和数目远多于前者，根据染色情况可以将ＰＣＮＡ阳性细胞分为Ｓ期和Ｓ期细胞两种。结论：ＴＧＦ－β参与和调节骺软骨各部位软骨细胞增殖活动，并能诱导非增殖软骨细胞表达ＰＣＮＡ，用ＰＣＮＡ作为细胞增殖的指标是不适宜的。     

细胞-支架复合体构建及其异体移植修复关节软骨缺损的形态学观察

目的 探讨应用组织工程技术进行异体移植修复关节软骨缺损的有效性和可行性。方法 采用动态倒置显微镜与扫描显微镜观察及大体，组织学和免疫组织化学观察方法，以优化获取的单层传代培养幼兔关节软骨细胞及结构与性能优化的CPPf(Calcium polyphosphate fibers,CPPf)/PLLA(poly-L-lactic acid,PLLA)自制支架复合材料，进行细胞－支架复合体体外构建与培养及其异体移植修复关节软骨缺损的病理形态学实验研究。结果 将适宜密度培养细胞种植于支架材料中，细胞密集，分布均匀，经一定时间体外培养，基种植细胞与支架材料粘附，生长繁殖并分泌细胞外基质，支架材料保持培养前的外形与内部微结构。其细胞－支架复合体异体移植修复关节软骨缺损的病理形态学特征为：（1）修复后的关节面光滑，与周围组织整合良好；（2）软骨细胞呈柱状排列；（3）Ⅱ型胶原及硫化糖胺多糖在空间上分布均匀；（4）软骨下板得以重建;(5)修复组织与其下方骨质紧密结合；（6）支架材料逐渐降解吸收。结论 应用细胞－支架复合体异体移植进行关节骨缺损修复，具有种植细胞来源广泛，可根据缺损大小和形状设计支架外形，使缺损完全生物学再上修复的优点，这一组织工程技术为关节软骨缺损完全再生修复提供了一条新的有效途径。     

犬骨髓基质千细胞向软骨样细胞诱导分化的条件研究

目的研究犬骨髓基质干细胞在体外培养中定向诱导分化为软骨样细胞的最佳条件。方法从幼年犬骨髓中分离基质干细胞进行培养扩增,观察其生长特性,体外应用碱性成纤维细胞生长因子（b-FGF）和转化生长因子β1（TGF．B1）对第3代传代细胞诱导分化,并通过细胞的染色和Ⅱ型胶原免疫组化鉴定诱导分化细胞的类型。结果原代培养的基质干细胞集落融合周期约6～9d左右。第3代传代细胞经碱性成纤维细胞生长因子（b—FGF）和转化生长因子（TGF．131）诱导后,传代细胞在形态上呈软骨样改变;甲苯氨蓝异染性、阿新蓝染色阳性;Ⅱ型胶原免疫组化染色呈阳性。结论犬骨髓基质干细胞在体外培养在碱性成纤维细胞生长因子（b—FGF）和转化生长因子（TGF—β1）作用下可被诱导分化为软骨样细胞。     

骨关节炎滑膜的uPA表达与关节软骨破坏程度的相关研究

骨关节炎是一种以软骨退行性变为核心，累及骨质，包括滑膜，关节囊及关节囊外其他结构的不同程度的炎性病变。软骨退行性变表现为纤维素样改变，呈蟹肉样外观，以及软骨坏死脱落，软骨下骨外露并出现“象牙化”等软骨破坏征象。软骨破坏的原因是多方面的。目前认为与物理、化学、免疫以及酶的降解有关，我们检测骨关节滑膜中尿激酶型纤溶酶原激活物（Urokinase—typeplasminogen activator uPA）的表达，     

佛波酯对促进人绒毛膜癌AJR细胞侵入机制的研究

目的：探讨佛波酯（PMA）是否通过改变细胞因子的生成而影响滋养细胞的侵袭性。方法：用反转录聚合酶链反应（RT－PCR）检测人绒毛膜癌JAR细胞与侵袭力调节有关的多种细胞因子基因表达的变化。结果：JAR细胞表达肝细胞生长因子（HGF）、胰岛素样生长因子Ⅱ（IGF－Ⅱ）、转化生长因子β（TGF-β）、白细胞介素1β（IL－1β）和血管内皮生长因子（VEGF），且VEGF的表达以VEGF121和VEGF165为主，而不表达IGF－I。100nmol/L PMA处理细胞24h可显著上调IL－1β、HGF、IGFⅡ mRNA的表达，同时抑制TGF－β2、TGF－β3 mRNA的表达，而对TGF－β1、VEGF mRNA的表达未见有明显变化。结论：HGF、IL－1β、IGF－Ⅱ对滋养细胞的侵入起促进作用，而TGF－β2、TGF－β3具有抑制效应。说明丝裂原PMA可能通过调节这几种细胞因子的自分泌机制，从而增强JAR细胞的侵袭能力。