抗血管生成类细胞因子对血管瘤内皮细胞生长的影响

血管瘤是婴幼儿最常见的良性肿瘤，其主要特点是毛细血管的内皮细胞增生。到目前为止，其确切的发病机制仍不清楚。血管瘤通常在出生后1个月内出现，之后有7～11个月的增生期，然后是缓慢的消退期。通常在10岁以内，90％的血管瘤可以自然消退。但仍有10％的患儿随着年龄的增长，肿瘤逐渐增大，引起颌面部、肢体的畸形，视力、呼吸等功能障碍。     

血管瘤内皮细胞培养的研究进展

血管瘤是以血管内皮细胞增殖和肥大细胞聚集为特征的血管性疾病,以前的研究多局限于免疫组化及临床研究。近年来,一些学者用细胞培养的方法研究血管瘤并取得了可喜的成果。本文综述了血管瘤内皮细胞培养方法的发展,以及通过此方法发现的血管瘤内皮细胞生物学性状,为血管瘤的进一步研究提供参考。     

细胞生长因子与内皮细胞增殖在血管瘤中的研究进展

近年来一些研究发现细胞生长因子通过调控内皮细胞的增殖。在血管瘤的发生和发展中起非常重要的作用。本文对目前研究较多的几种细胞生长因子与血管瘤之间的相互关系进行了综述。为进一步研究血管瘤的发生，退化和治疗提供参考。     

细胞生长因子与内皮细胞增殖在血管瘤中的研究进展

近年来一些研究发现细胞生长因子通过调控内皮细胞的增殖,在血管瘤的发生和发展中起非常重要的作用。本文对目前研究较多的几种细胞生长因子与血管瘤之间的相互关系进行了综述,为进一步研究血管瘤的发生、退化和治疗提供参考。     

血管瘤内皮细胞培养的研究进展

血管瘤是以血管内皮细胞增殖和肥大细胞聚集为特征的血管性疾病,以前的研究多局限于免疫组化及临床研究。近年来,一些学者用细胞培养的方法研究血管瘤并取得了可喜的成果。本文综述了血管瘤内皮细胞培养方法的发展,以及通过此方法发现的血管瘤内皮细胞生物学性状,为血管瘤的进一步研究提供参考。     

非内皮细胞在血管瘤生长周期中的作用

血管瘤是婴儿和青少年常见的肿瘤,通常情况下血管瘤的生长可分为增殖期、消退期以及消退完成期。目前多种因素都被证实可以导致血管瘤血管内皮细胞的异常增殖,本文从非内皮细胞的角度,总结了近年的研究成果,探讨血管瘤发生发展的机制。     

脂质体鱼肝油酸钠对人血管瘤内皮细胞的作用

目的:研究鱼肝油酸钠普通剂型和脂质体剂型对人增殖期血管瘤内皮细胞(HEC)的病理作用。方法:以体外原代培养的HEC为实验对象,分别加入鱼肝油酸钠的普通剂型和脂质体剂型,通过形态学(倒置显微镜、Giemsa染色、透射电镜观察)、细胞毒性试验(MTT试验)及流式细胞仪检测,探讨2种剂型的鱼肝油酸钠对血管瘤内皮细胞的作用及其机制。采用SPSS11.0软件对实验结果进行单因素方差分析。结果:普通剂型组出现了细胞水肿、线粒体肿胀、内质网扩张、细胞膜破裂等变化,最终导致细胞坏死;脂质体剂型组出现了染色质凝集、碎裂并向胞膜移动,最终脱离细胞,形成典型的凋亡小体。细胞活性测定显示,普通剂型组活细胞数目下降速度显著快于脂质体剂型组(P<0.01)。结论:鱼肝油酸钠的普通剂型对人血管瘤内皮细胞表现为剧烈的毒性作用,呈现坏死性变化;而脂质体鱼肝油酸钠制剂对人血管瘤内皮细胞表现为渐进性的缓释作用,诱导细胞发生凋亡。     

平阳霉素抑制血管瘤血管内皮细胞增殖的体外实验

血管硬化剂的选择是决定血管瘤治疗预后的重要因素,平阳霉素是近年来被广泛采用,并取得满意疗效的理想药物之一［１,２］,但其作用机制尚缺乏详细深入的基础研究。本文通过观察平阳霉素对体外培养血管瘤内皮细胞增殖的影响作用,初步探讨其治疗机制。材料和方法１试剂...     

牙龈卟啉单胞菌对脐静脉血管内皮细胞产生sICAM-1的影响

目的：观察牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)对人类脐静脉血管内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)产生可溶性细胞间粘附分子－1（soluble intercellular adhesion molecule-1,sICAM-1)的影响。方法：应用厌氧袋法培养P.gingivalis，并用其感染HUVECs，采和酶联免疫吸附实验（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定培养上清中sICAM-1的含量，结果：HUVECs基础表达少量的sICAM-1;P.gingivalis剂量依赖性增强HUVECs产生sICAM-1蛋白的水平；紫外线、超声波和65℃的热处理都不能抑制P.gingivalis的作用；sICAM-1蛋白水平在P.gingivalis刺激后的4h未见改变，增高的作用从刺激后的8h开始，在12h,16h和20h继续增加。结论：活的和灭活的P.gingivalis都剂量依赖性和时间依赖性地增强HUVECs产生sICAM-1,P.gingivalis可能同样诱导牙龈血管内皮细胞表达sICAM-1，升高的sICAM-1可能参与调节牙周病炎症反应和免疫反应过程。     

免疫脂质体鱼肝油酸钠作用于人血管瘤内皮细胞的实验研究

目的：探讨免疫脂质体鱼肝油酸钠的制备方法及其对人增殖期血管瘤内皮细胞的作用。方法：以N-琥珀酰-3-2-联硫基吡啶-丙酸盐（（N-Succinimidyl-3-（2-pyridyldithio））propionate,SPDP）作为耦联剂,将针对血管内皮生长因子受体2（VEGFR2/KDR）的单克隆抗体耦联到脂质体表面,运用吹膜挤压法制备免疫脂质体鱼肝油酸钠,通过激光共聚焦显微镜和倒置显微镜观察、Giemsa染色、透射电镜观察、MTT以及流式细胞仪检测,探讨其对人增殖期血管瘤内皮细胞的作用。结果：制备的免疫脂质体鱼肝油酸钠平均粒径为122.9nm,具有良好的稳定性;与普通脂质体制剂相比,其与人血管瘤内皮细胞结合能力更强、更早,促凋亡作用更为明显,而对人血管瘤内皮细胞的毒性作用与普通脂质体制剂类似,作用较为缓和。结论：成功制备免疫脂质体鱼肝油酸钠,其在体外具有良好的特异性主动靶向能力,可以诱导人增殖期血管瘤内皮细胞发生较为普遍的凋亡。     

丹参对槟榔碱诱导血管内皮细胞凋亡的保护作用

目的:探讨丹参对槟榔碱诱导血管内皮细胞凋亡的保护作用。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞(Vein Endothelial Cells,VEC)为模型,槟榔碱作为致伤因素,丹参作为保护因素,用Hoechst 33258染色,在荧光显微镜下观察凋亡细胞核形态学改变并计算凋亡百分率。结果:正常培养的血管内皮细胞凋亡较少,槟榔碱刺激后可见到明显的细胞凋亡,丹参预处理后则凋亡细胞明显减少,凋亡率与槟榔碱组相比有显著性差异(P<0.05)。结论:丹参对槟榔碱诱导的VEC凋亡有一定的保护作用。     

牙龈卟啉单胞菌感染对血管内皮细胞与单核细胞黏附的影响

目的：研究Pg感染对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）与单核细胞黏附的影响。方法：建立Pg感染HUVEC细胞株EA．hy926的体外模型,虎红染色法观察Pg381和Pg33277菌株感染HUVEC 6 h和24 h后,HUVEC与人单核细胞株THP-1细胞黏附量的变化。结果：培养6 h时Pg381感染组的THP-1细胞黏附量相对值为0．210±0．025,高于Pg33277感染组（0．078±0．024,P＜0．05）和空白对照组（0．062±0．022,P＜0．05）,Pg33277感染组和空白对照组无差异。24 h时3组间无差异（P＞0．05）。结论：Pg381感染HUVEC后能显著促进其与单核细胞的黏附。     

平阳霉素瘤内注射对婴幼儿血管瘤血清中血管内皮生长因子表达的影响

目的：探讨平阳霉素瘤内注射对婴幼儿增殖期血管瘤血清中血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）表达的影响及意义。方法：选取增殖期血管瘤婴幼儿23例,分别于平阳霉素瘤内注射治疗前及治疗后3、7、14d时采集瘤内血,应用酶联免疫吸附（ELISA）法检测瘤内血清中VEGF的含量。结果：平阳霉素瘤内注射治疗后3d和7d时,瘤内血清中VEGF表达水平较治疗前明显降低（P〈0．05）;治疗后14d时,瘤内血清中VEGF表达水平与治疗前相比,其差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：平阳霉素瘤内注射治疗婴幼儿增殖期血管瘤,能明显降低瘤内血清中VEGF表达水平,但具有时效性,仅依此来评估婴幼儿血管瘤生长增殖速度及平阳霉素的治疗效果有待商榷。     

不同时期血管瘤内皮细胞黏附分子和HLA-DR的表达

目的:探讨黏附分子对血管瘤增殖退化病理生理演变过程的影响及作用机制。方法:应用SABC免疫组化法,检测增殖期血管瘤及退化期血管瘤的细胞间黏附分子-3(Intercellularadhesionmolecule-3,ICAM-3)、CD34和有核细胞表面的组织相容性抗原DR型(Histocompatibilityantigens-DR,HLA-DR)在血管内皮细胞上的表达情况,将2个时期进行比较;同时以血管畸形及正常皮肤为对照。采用行×列表卡方检验进行统计学分析。结果:ICAM-3和CD34均在增殖期血管瘤高表达(分别为26/28和28/28),而退化期低表达或不表达(分别为20/22和20/22),2个时期差异有显著性(P<0.001);而血管畸形和正常皮肤几乎不表达,这与不同时期血管瘤相比差异有显著性(P<0.001);HLA-DR则与血管内皮细胞的高分化阶段密切相关,增殖期基本不表达(4/28),在分化好的退化期高表达(17/22),2个时期差异有显著性(P<0.001)。结论:ICAM-3、CD34可能在血管形成早期发挥作用,介导内皮细胞间黏附,参与血管瘤发病和消退的病理过程。HLA-DR可能与内皮细胞成熟表型的获得及活化状态有关。     

平阳霉素白蛋白微球抑制血管内皮细胞生长的实验研究

目的:观察平阳霉素白蛋白微球(PYM AMS)对体外培养的人脐静脉血管内皮细胞株(ECV304)生长的抑制作用。方法:采用MTT法、流式细胞仪检测不同浓度的PYM AMS、PYM注射剂和空白AMS作用24、36、48、72h后,血管内皮细胞的生长抑制率、细胞凋亡率。结果:空白AMS对ECV304生长没有抑制作用,反而有轻度促进生长的作用;PYM AMS和PYM注射剂对ECV304生长有抑制作用。统计分析表明,相同剂量的PYM AMS与PYM注射剂抑制作用基本一致,而抑制作用具有剂量依赖性和时间依赖性。而且PYM AMS和PYM诱导血管内皮细胞凋亡的作用与细胞生长抑制的作用有良好的相关性,有浓度依赖性和时间依赖性,同时PYM AMS有缓释作用。结论: 本研究的PYM AMS能够对血管内皮细胞造成损伤,其损伤程度与浓度、时间成正相关,与单用PYM基本一致,并且有缓释作用效果;而空白AMS不具有损伤血管内皮细胞的作用。     

苯妥英钠对大鼠骨髓间充质干细胞向血管内皮细胞分化的影响

目的：研究苯妥英钠（PHT）对大鼠骨髓间充质干细胞（rBMSCs）向血管内皮细胞（rVECs）分化的影响。方法：建立rBMSCs 与 rVECs 共培养组及 rBMSCs 单独培养组,各组分别添加不同浓度的 PHT（0、20、40μg／ml）,培养14 d 后 real-time PCR 检测各组细胞中 ICAM-1、VCAM-1、KDR 和 RUNX2基因的 mRNA 表达水平。结果：添加 PHT 后,各组细胞中 ICAM-1、KDR 和 RUNX2基因的 mRNA 表达均上调。添加相同浓度 PHT 时,共培养组较单独培养组中 rBMSCs 的 ICAM-1、KDR 和RUNX2基因的 mRNA 表达量增高,而 VCAM-1基因的 mRNA 表达量降低。结论：PHT 可能促进大鼠骨髓间充质干细胞向血管内皮细胞分化。     

血管内皮细胞对牙周组织细胞增殖的影响

目的：通过血管内皮细胞与牙周组织细胞复合培养模拟牙周组织再生环境,观察血管内皮细胞对牙周组织细胞增殖的作用规律,探讨血管内皮细胞对牙周组织修复再生的影响。方法：应用原代培养的血管内皮细胞,在Transwell嵌套中实现与人牙周膜成纤维细胞、牙龈成纤维细胞间的复合培养,分别于复合培养第2、4、6、8和10天,以细胞计数手段检测血管内皮细胞共存条件下2种牙周组织细胞的增殖情况,并与单独培养的2种牙周组织细胞作为对照,采用SPSS13.0软件包对数据进行统计学分析。结果：在血管内皮细胞存在条件下,2种牙周组织细胞的增殖速率均显著高于单独培养条件。血管内皮细胞存在时,牙周膜成纤维细胞增殖速率逐渐超越牙龈成纤维细胞(第6天起),并在第8天细胞数量上超过牙龈成纤维细胞,差异具有显著性(P<0.01)。结论：血管内皮细胞的存在,对牙周组织细胞的增殖具有促进作用,对牙周膜成纤维细胞增殖的促进作用显著高于牙龈成纤维细胞。     

牙龈卟啉单胞菌对不同组织来源血管内皮 细胞的作用及机制的研究进展

牙龈卟啉单胞菌是重要的牙周可疑致病菌。牙龈卟啉单胞菌可黏附、侵入并损伤血管内皮细胞,并进入远隔组织器官内,以此参与动脉粥样硬化、阿尔兹海默病等全身疾病的发生和发展过程。近年来研究发现牙龈卟啉单胞菌对不同组织来源血管内皮细胞的致病性及其作用机制均有不同。本文就牙龈卟啉单胞菌对不同组织来源血管内皮细胞的作用及机制作一综述,以拓宽牙龈卟啉单胞菌与全身性疾病的研究思路。     

Effect of lipopolysaccharide on cell proliferation and vascular endothelial growth factor secretion of periodontal ligament stem cells

PurposePeriodontal ligament stem cells (PDLSCs) have considerable potential for use as a means of achieving periodontal regeneration due to their noteworthy proliferative properties and secretory functions. In particular, PDLSCs secrete vascular endothelial growth factor (VEGF) which enhances angiogenesis and osteogenesis. The resulting repair and development of blood vessels and hard tissues which would occur in the presence of these cells could be central to an effective periodontal regeneration procedure.The bacterial biofilm of tooth surface related to the periodontium might provide either an inhibition or a stimulus to different factors involved in a regenerative process. Cell culture experiments have been investigated in vitro by adding lipopolysaccharide (LPS) to the culture medium but the effect of various concentration of LPS in these circumstances has not been investigated. Therefore, this study aimed to investigate the effect of LPS concentrations on proliferation of PDLSCs in vitro and on their secretion of VEGF.Materials and methodsPDLSCs were treated with 0, 5, 10 and 20 µg/mL of Escherichia coli LPS. At 48 and 96 h, total cell numbers of control and LPS treated PDLSCs were counted by haemocytometer under a microscope. The VEGF concentration in the conditioned media of the PDLSCs was measured by ELISA.ResultsRate of cell proliferation of PDLSCs decreased significantly in all LPS treated groups at both 48 h and 96 h except for the group treated with 5 µg/mL of LPS at 48 h. At both 48 and 96 h, VEGF secretion from PDLSCs was reduced significantly at all three LPS concentrations. There was no statistically significant difference in cell proliferation and the amount of VEGF secretion of PDLSCs among the groups treated with different LPS concentrations. No statistically significant change was found in cell proliferation of LPS treated PDLSCs over time, whereas VEGF secretion of PDLSCs was found to have increased significantly with time despite the LPS treatment.ConclusionsLPS reduced cell proliferation and VEGF secretion of PDLSCs, suggesting that periodontal pathogens might reduce the capability of PDLSCs in periodontal regeneration. Yet, LPS treated PDLSCs remained viable and VEGF secretion increased significantly over time. Further research is needed to study the potential use of PDLSCs in periodontal regeneration and the relationship of biofilm LPS accumulations.