吡格列酮对高脂饲料所致肥胖大鼠肝脏组织中脂联素的影响

目的 观察吡格列酮对高脂饮食诱导的肥胖SD大鼠肝脏组织中脂联素表达的影响.方法 选取SD大鼠40只,随机分为对照组(NC组)10只,给予普通饲料;高脂组(HF组)[包括:高脂对照组(HFN组)15只、高脂+吡格列酮组(HFP组)15只],给予高脂饲料,同时给予HFP组吡格列酮30 mg·kg-1·d-1灌胃2周,NC组和HFN组给予相同体积的0.9％氯化钠注射液灌胃,分别喂养12周后,测定大鼠体质量、空腹血糖、胰岛素、甘油三酯、总胆固醇水平,观察肝脏改变;用免疫组化法检测大鼠肝脏组织中脂联素的表达.结果 12周后,HF组胰岛素敏感指数显著低于NC组[(0.021±0.010)与(0.015±0.007),P＜0.05],HFN组大鼠肝脏组织中脂联素,与NC组相比显著降低[(2929.73±157.45)与(3814.21±211.42),P＜0.05)],HFP组大鼠肝组织中脂联素的表达显著低于HFN组[(2929.73±157.45)与(3657.68±217.31),P＜0.05].结论 吡格列酮可升高肥胖大鼠模型肝组织中脂联素的表达,缓解胰岛素抵抗.     

大鼠脂联素和脂联素受体R2 mRNA表达水平和与胰岛素抵抗

目的 研究脂联素及脂联素受体R2 mRNA水平与胰岛素抵抗的关系.方法 普通级雄性Wistar大鼠24只,随机分为高糖高脂组(A组)、罗格列酮组(B组)和正常对照组(C组).检测空腹血糖、空腹胰岛素和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);应用RT-PCR方法测定大鼠肝组织脂联素受体R2 mRNA的表达;ELISA法测定血浆脂联素水平.结果 与C组相比,A组脂联素及脂联素受体R2 mRNA水平均显著降低(P<0.05);B组的脂联素及其受体水平较高糖高脂组有所升高,但仅脂联素的升高差异有显著性(P<0.05);脂联素受体R2 mRNA与HOMA-IR负相关(r=-0.652,P<0.01).结论 脂联素参与胰岛素抵抗的发生,脂联素受体R2可能介导了该效应.     

吡格列酮对波动性高糖处理的人脐静脉内皮细胞脂联素受体表达的影响

目的探讨吡格列酮对波动性高糖处理的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)脂联素受体(AdipoR1和AdipoR2)表达的影响。方法将HUVEC在波动性高糖培养液(5.5、20mmol.L-1每隔8h轮换1次)中培养5d后,随机分为阴性对照组、吡格列酮处理组(10、1与0.1μmol.L-1)和阳性对照组。应用实时定量PCR方法检测脂联素受体mRNA表达的改变。结果与波动性高糖组比较,吡格列酮处理后HU-VECAdipoR1表达增高。当吡格列酮浓度增至1μmol.L-1以上时,AdipoR1mRNA表达增加呈现差异。各组细胞Adi-poR2表达量间差别无显著性。结论AdipoR1很可能是胰岛素增敏剂吡格列酮改善内皮胰岛素敏感性的作用机制之     

脂联素影响骨骼肌胰岛素抵抗模型中葡萄糖转运蛋白4表达的研究

目的：通过建立骨骼肌L6细胞胰岛素抵抗模型,探讨骨骼肌L6细胞中脂联素（ APN）的分泌,以及脂联素对骨骼肌胰岛素抵抗模型中葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）表达的影响。方法（1）体外培养大鼠L6成肌细胞,诱导分化后,给予不同浓度的棕榈酸（PA）,测定不同时间细胞培养上清液葡萄糖浓度,观察PA对L6细胞摄取葡萄糖的影响,建立胰岛素抵抗模型;（2）根据实验条件的不同分为三组：NC组（正常对照组,即骨骼肌L6细胞组）;IR组（胰岛素抵抗模型组）;IR＋PIO组（胰岛素抵抗模型＋吡格列酮组）。应用Western blot方法分别测定上述三组APN和GLUT4表达水平。结果（1）0．4 mmol· L^-1的棕榈酸在作用12、24、36 h以及0．6～0．8 mmol· L^-1棕榈酸作用8～36 h后,细胞培养上清液中葡萄糖含量,明显高于对照组。胰岛素抵抗模型建立;（2）Western blot结果显示：①与NC组比较,IR组APN和GLUT4表达均减少,差异有统计学意义;②与IR组比较,IR＋PIO组其APN和GLUT4表达均增加,差异有统计学意义。结论（1）大鼠L6成肌细胞培养并诱导分化后,经过一定条件下PA刺激,可以建立胰岛素抵抗模型;（2）大鼠L6细胞可分泌和表达脂联素,骨骼肌源性脂联素上调L6细胞GLUT4的表达;（3）吡格列酮作为PPAR-γ激动剂,可增加大鼠L6细胞脂联素的分泌,进而改善胰岛素敏感性。     

吡格列酮对2型糖尿病患者血清脂联素与胰岛素抵抗的影响

目的探讨吡格列酮对2型糖尿病患者血清脂联素水平及胰岛素抵抗的影响。方法2型糖尿病患者45例,两组年龄、性别匹配,按随机双盲法分为吡格列酮组（22例）和安慰剂组（23例）,干预治疗12周后比较其血清脂联素、游离脂肪酸（FFA）水平,同时测血糖、血压、血脂、身高、体重、腰围、臀围,计算体重指数（BMI）、腰臀比值（WHR）、空腹胰岛素（Fins）和胰岛13细胞功能（HOMA-IR）。结果治疗前两组的脂联素、游离脂肪酸水平无明显差别,经吡格列酮治疗后,患者血糖、胰岛素抵抗明显改善（P〈0．05）,血清脂联素水平显著升高（P〈0．05）,血清FFA水平下降（P〈0．05）,血清脂联素升高与FFA下降无显著相关性（P〉0．05）。结论吡格列酮除改善血糖及胰岛素抵抗外,还可使血清脂联素水平升高,FFA水平降低,提示吡格列酮可能通过降低FFA、升高脂联素水平改善2型糖尿病患者胰岛素抵抗。     

吡格列酮联合胰岛素对2型糖尿病患者脂联素水平的影响

目的观察吡格列酮联合胰岛素治疗2型糖尿病对患者血浆脂联素水平的影响。方法60例2型糖尿病患者随机分为2组,分别给予胰岛素及吡格列酮联合胰岛素治疗,疗程共12周。分别检测和记录2组患者治疗前后空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、脂联素以及胰岛素用量,观察吡格列酮对2型糖尿病患者血浆脂联素的影响。结果2组患者治疗后血糖和HbA1c均控制良好,其中观察组胰岛素日需求量明显低于对照组(P<0.05);观察组血浆脂联素水平较对照组明显升高(P<0.05)。结论吡格列酮联合胰岛素治疗2型糖尿病不仅可良好地控制血糖HbA1c,同时增加患者血浆脂联素水平,提高患者对胰岛素的敏感性,减少胰岛素用量。     

罗格列酮对糖耐量受损大鼠血清脂联素和肝脏脂联素受体表达的影响

目的探讨罗格列酮对糖耐量受损大鼠血清脂联素和肝脏脂联素受体-1表达的影响。方法60只Wistar雄性大鼠随机分为对照组(普通饲料喂养)和高脂组(高脂饲料喂养)。每周记录体质量变化,每2周作1次糖耐量试验;用HOMA胰岛素抵抗指数评价胰岛素抵抗程度,用反转录聚合酶链反应和蛋白印迹法分别测定脂联素受体1 mRNA和蛋白在肝脏的表达,成模后用罗格列酮干预4周。结果①12周时高脂组有18只大鼠成模,其2 h血糖均值达到了糖耐量受损的诊断标准,空腹血糖高于对照组(P<0.05),但未达到空腹血糖受损的诊断标准;②成模组大鼠体质量明显增加,空腹胰岛素和HOMA-IR指数高于对照组(P<0.05);③罗格列酮干预4周后血清脂联素水平较模型组升高(P<0.05),肝脏组织脂联素受体1 mRNA和蛋白的表达与模型组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论脂联素表达的下降在高脂饮食导致的胰岛素抵抗的发生中起着重要作用,罗格列酮可升高血清脂联素水平,但不影响肝脏脂联素受体-1的表达。     

肥胖大鼠非酒精性脂肪肝与血清脂联素和肿瘤坏死因子α的关系及吡格列酮干预

目的观察营养性肥胖大鼠非酒精性脂肪肝(NAFLD)与血清脂联素和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的关系,以及吡格列酮干预后的变化。方法45只SD♂大鼠随机分为3组:吡格列酮组(P)、高脂对照组(HF)和普通饮食组(NC),各15只。P、HF组给予高脂饮食,NC组给予普通饲料;12wk后,P组行吡格列酮10mg·kg-1.d-1灌胃,HF组和NC组用相应溶剂灌胃,均灌胃4wk。检测血清脂联素、TNF-α、游离脂肪酸(FFA)水平和其他生化指标等,计算Lee′s指数、HOMA-IR指数和肝脏指数,行肝脏病理切片和HE染色。结果与NC组相比,HF组大鼠体重、肝脏指数、FPG、FINS、ALT、HOMA-IR和血清TNF-α水平均明显增高,血清脂联素水平降低(P<0.05),肝细胞出现脂肪变性。与HF组比较,P组大鼠肝脏指数、HOMA-IR、FFA、TNF-α均降低,脂联素水平升高(P<0.05),肝细胞脂肪变性明显改善。HF组大鼠血清FFA、TNF-α与HOMA-IR、肝脏指数正相关,脂联素与之负相关(P<0.05)。结论高脂饮食可引起大鼠营养性肥胖、胰岛素抵抗和NAFLD;吡格列酮能提高胰岛素敏感性,改善脂肪细胞变性,可能与降低TNF-α、升高脂联素有关。     

脂联素在胰岛素抵抗中的作用

目的通过检测脂联素在肥胖及2型糖尿病大鼠腹部脂肪组织中的表达,明确它在胰岛素抵抗中的作用。方法用半定量RT-PCR测定正常、肥胖以及2型糖尿病大鼠内脏脂肪组织中脂联素的表达。结果肥胖及2型糖尿病大鼠脂联素的mRNA表达较对照组显著下降。脂联素与空腹血清胰岛素、血甘油三酯、体重和胰岛素敏感指数负相关。结论脂联素可能在肥胖和2型糖尿病相关的胰岛素抵抗中发挥重要作用。本研究通过对实验性2型糖尿病大鼠以及单纯肥胖大鼠脂肪组织中脂联素表达的分析,探讨它在肥胖及2型糖尿病中所起的作用。     

小檗碱加吡格列酮治疗早期糖尿病肾病及脂联素水平的分析

目的：分析小檗碱加吡格列酮治疗早期糖尿病肾病及脂联素水平的疗效。方法：将90例早期糖尿病肾病患者随机分成对照组与观察组,各45例,对照组采用吡格列酮药物治疗,观察组在对照组的基础上加用小檗碱药物治疗,比较两组患者治疗前后的空腹血糖、空腹胰岛素、脂联素、胰岛素敏感指数及C反应蛋白的指标变化情况。结果：观察组治疗后的空腹血糖、空腹胰岛素、C反应蛋白指标变化优于对照组;且对照组的脂联素和胰岛素敏感指数低于观察组,差异有统计学意义（P<0.01）。结论：小檗碱加吡格列酮治疗早期糖尿病肾病能够降低血糖、胰岛素和蛋白质,提高患者的脂联素水平,治疗效果显著,值得临床运用与推广。     

乳腺癌患者手术前后Lp(a)、adiponectin和TNF-α水平观察与分析

目的:测定乳腺癌患者手术前后血浆脂蛋白(a)、血清adiponectin和TNF-α含量,探讨其水平变化的临床意义。方法:分别用单克隆抗体浊度法和ELISA法测定了35例乳腺癌患者手术前后和38例健康女性的血浆脂蛋白(a)、血清adiponectin和TNF-α的含量。结果:与健康对照组相比,乳腺癌患者手术前血浆Lp(a)和血清TNF-α增高(P<0.01),血清adiponectin降低(P<0.01);手术后乳腺癌患者血浆Lp(a)和血清TNF-α水平下降接近健康对照组,与手术前比较差异均有显著性(p<0.01);手术后乳腺癌患者血清adiponectin增高,但与手术前比较差异无显著性。乳腺癌患者手术前血清adiponectin与TNF-α水平呈显著性相关(r=0.5748,P<0.01),手术后无显著性相关。结论:血浆脂蛋白(a)、血清adiponectin和TNF-α可能在乳腺癌病变发展过程中发挥重要作用。     

咖啡豆提取物对肥胖大鼠血清瘦素、脂联素水平及脂联素受体表达水平的影响

目的 研究咖啡豆提取物对高脂饮食肥胖大鼠的瘦素(Leptin,LP)、脂联素(APN)及脂联素受体表达的影响。方法 给予高脂饲料建立SD大鼠肥胖模型,灌胃给予咖啡豆提取物(800,267,133 mg·kg^-1),连续6周。测量大鼠体质量及脂体比,测定大鼠血浆总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、血清LP、APN;检测肝组织脂联素受体表达。结果 与正常对照组相比,给予高脂饲料6周的大鼠体质量明显增加(P<0.01),提示SD大鼠肥胖模型建立。与模型组比较,咖啡豆提取物给药后大鼠体质量、脂体比和LP水平下降(P<0.01或P<0.05),血清APN水平、APN受体的mRNA和蛋白表达显著增加(P<0.01或P<0.05)。结论 咖啡豆提取物对高脂饮食肥胖大鼠的体质量具有改善作用,作用机制可能是升高血清APN水平,降低LP水平及上调肝脏脂联素受体的mRNA和蛋白表达。     

脂联素及其受体2mRNA在非酒精性脂肪性肝炎大鼠的表达及替米沙坦的干预作用

目的探讨替米沙坦对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝组织脂联素及其受体R2mRNA表达的影响。方法 35只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(NC组,n=10)、模型组(FC组,n=15)和替米沙坦干预组(FT组,n=10)。FC和FT组给予高脂饲料喂养16周诱发脂肪性肝炎,其中FT组于高脂喂养12周后,给予替米沙坦(5mg·kg-1·d-1)灌胃治疗4周。取肝组织测肝指数;检测血清ALT及AST,RT-PCR方法测定大鼠肝组织脂联素及其受体R2mRNA的表达。结果与NC组相比,FC组血清ALT、AST均明显升高(P<0.01),脂联素及其受体R2mRNA水平均显著降低(P<0.01);FT组的血清ALT显著降低(P<0.01),脂联素及其受体R2mRNA水平较FC组均升高(P<0.05)。结论替米沙坦对实验性非酒精性脂肪肝大鼠具有一定的治疗作用,其作用机制之一是促进肝脏脂联素及其受体R2mRNA的表达。     

罗格列酮对高脂血症大鼠心肌脂联素系统的调节作用

目的探讨罗格列酮对高脂血症大鼠心肌脂联素及其受体表达的影响,阐述过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动药心肌保护的新机制。方法28只WKY大鼠随机分为普通饲料组、高脂饲料组和罗格列酮(4mg·kg-1.d-1)组。24wk处死动物,采用全自动生化分析仪测定血脂,HE和Masson染色观察心肌形态学变化、测定心肌肥厚指数和平均心肌细胞直径,ELISA、RT-PCR和免疫组化法测定心肌脂联素及脂联素受体1和2(AdipoR1和AdipoR2)的表达。结果罗格列酮显著抑制高脂饮食引起的血脂升高和体重增加、抑制细胞内脂质沉积及心肌细胞肥大、增加心肌组织局部脂联素水平及其受体1基因和蛋白的表达。结论罗格列酮通过改善脂质代谢、增加心肌局部脂联素水平及其AdipoR1基因和蛋白的表达拮抗高脂血症所致心肌损害,从而发挥心肌保护作用。     

脂联素在心脏X综合征炎性反应中的作用

目的:探讨脂联素(APN)在CSX炎性反应中的可能作用。方法:CSX患者22例和对照组18例,通过酶联免疫复合物法分别检测其血清APN水平,并进行比较。结果:与对照组比较,CSX组血清APN水平明显降低[(9.17±1.98)mg/mL vs(11.32±2.15)mg/L,P<0.01。]结论:CSX患者血清APN水平降低,增加血清APN水平可能抑制CSX的炎性反应。     

非酒精性脂肪性肝病患者肝组织脂联素表达及其意义

目的探讨肝组织脂联素表达在非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）发病机制中的作用及地位,为NAFLD的预防及治疗提供新的思路。方法47例NAFLD患者及20例正常对照均测量身高、体重,计算体重指数（BMI）;分别应用ELISA方法测定血清脂联素（adiponectin）浓度、血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）浓度;采用稳态模式评估法,计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）;对肝组织进行HE、Masson染色及脂联素免疫组化染色,对脂联素表达量进行半定量分析。结果非酒精性脂肪性肝炎（NASH）组肝组织脂联素表达较对照组及单纯性脂肪肝组显著减少（P〈0.05）,与血清脂联素浓度呈显著正相关（P〈0.01）,与血清TNF-α浓度、ALT、HOMA-IR及肝组织炎症、纤维化程度呈负相关（P〈0.01）,而与脂变程度不相关（P〉0.05）。多元线性逐步回归分析显示,肝组织脂联素表达是肝组织炎症及纤维化发生的保护因素。结论肝组织脂联素表达在NAFLD患者肝组织炎症及纤维化发生发展中起保护性作用。     

脂联素与急性冠脉综合征近期预后的相关性研究

目的：探讨脂联素（APN）与急性冠脉综合征（ASC）近期预后的相关性研究。方法：选择急性冠脉综合征患者62例。并选取门诊健康查体者20例作为对照组。在患者入院后30d内随访其心血管事件发发生情况,将ASC患者以随访结果分为再发生主要不良心血管事件组（MACE组）和未再发生主要不良心血管事件组（N--MACE组）。结果：ASC组脂联素浓度低于正常对照组脂联素浓度（5．95±0．55．9．35±0．66）mg／L,差异有统计学意义（P〈0．05）,比较MACE组和N—MACE组脂联素浓度,前者低于后者（5．75±0．48．6．08±0．56）mg／L,有统计学意义（P〈0．05）。结论：脂联素可能是预测ASC患者预后的有效指标。     

姜黄素对人脂肪组织脂联素分泌的影响

目的探讨在体外培养条件下不同浓度姜黄素干预对内脏脂肪组织与腹部皮下脂肪组织脂联素（APN）分泌的影响。方法用体外组织培养法培养手术中离体脂肪组织（n=84），分别予低浓度姜黄素（10μg·mL^-1）和高浓度姜黄素（100μg·mL^-1）干预不同时间，用酶联免疫吸附法（ELISA）测定干预前后组织培养液中APN的含量。结果与对照组相比，在姜黄素浓度为100μg·mL^-1干预下，内脏及腹部皮下脂肪组织APN分泌均有明显增加（P〈0．05），干预浓度为10μg·mL^-1时对脂肪组织APN分泌无明显影响（P〉0．05）；且基础状态下体外培养6h和24h时，腹部皮下脂肪比内脏脂肪APN分泌分别升高28．79％、19．76％。结论姜黄素干预脂肪组织可使APN分泌增加，而且与剂量有关。     

老年糖耐量异常者脂联素水平的改变及其影响因素

目的:探讨老年糖耐量异常者脂联素的改变及其影响因素。方法:对年龄≥60岁的糖耐量正常(NGT)、糖耐量低减(IGT)和2型糖尿病(DM)患者进行体质量、腰臀围、血压、血脂、氧化应激指标和脂联素的检测,以所有检测者脂联素水平的中位数为界限将患者划分为高、低脂联素组。结果:NGT、IGT和DM3组间脂联素水平逐步降低,其中DM组明显低于NGT和IGT组(P<0.01)。低脂联素组与高脂联素组相比较,NGT人数明显减少(7vs18),而DM人数则明显增加(27vs10),空腹血糖(FBS)、口服糖耐量试验(OGTT2h)血糖增高,高密度脂蛋白(HDL)水平降低,差别有统计学意义均(P<0.01)。Logistic多元回归分析显示血糖和血脂为影响脂联素水平变化的独立危险因素。结论:脂联素水平的下降可能在老年糖尿病高危人群糖耐量异常、肥胖、血脂异常和心血管疾病的发生中起着重要的作用。     

重组脂联素融合蛋白的表达及其生物学活性测定

目的 表达重组脂联素融合蛋白(adiponectin-Trx),并测定其生物学活性.方法 从小鼠脂肪组织提取总RNA,应用序列特异性引物经RT-PCR方法扩增获得全长脂联素基因序列,克隆至pGEM-T载体,序列经DNA测序证实.将目的 序列(18-247氨基酸)亚克隆至pET-32(a)表达载体,重组质粒adiponectin/pET32(a)的序列经测序证实.将adiponectin/pET32(a)转化表达宿主菌OrigamiTM(DE3),在27℃以1mmol/L IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)诱导表达目的 蛋白,SDS-PAGE和氨基酸测序检测目的蛋白的表达,目的 蛋白经组氨酸镍螫和树脂亲和纯化.以不同浓度的融合蛋白adiponectin-Trx和Trx蛋白处理体外培养的人脐静脉内皮细胞,细胞增殖法测定其生物学活性.结果 小鼠脂肪组织脂联素基因的编码序列,337位点上的碱基A被C置换,导致在113位的蛋氨酸被缬氨酸取代.序列测定表明,构建的重组表达载体adiponectin/pET32a序列完全正确,诱导工程菌主要表达可溶性的融合蛋白adiponectin-Trx,部分以包含体形式表达.表达产物的相对分子量(Mr)同预期分子量相同,adiponectin-Trx Mr为43 000,Trx Mr为19 000.在低浓度时融合蛋白刺激人脐静脉内皮细胞增殖.结论 小鼠脂肪组织脂联素基因编码序列与来自3T3-L1脂肪细胞的编码序列不同.成功地在E.coli中表达了重组脂联素融合蛋白并具有生物学活性.