纤维蛋白原Bβ15-42肽对大鼠肾脏缺血再灌注损伤凋亡及相关蛋白的影响

目的:观察纤维蛋白原Bβ15-42肽(fibrinogen-derived peptide Bβ15-42,FgBβ15-42)对大鼠肾脏缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury, IRI)凋亡及相关蛋白的影响。方法:将24只SD大鼠随机分成假手术组(Sham组)、肾脏缺血再灌注模型组(I/R组)、FgBβ15-42肽治疗组(Fg+I/R组),每组8只。Sham组：分离肾动脉后关闭腹腔;I/R组：采用双侧肾动脉夹闭的方法制作肾脏IRI模型;Fg+I/R组：于肾脏缺血30 min后立即尾静脉注射FgBβ15-42肽3.6 mg/kg。采用血肌酐测定试剂盒和尿素氮测定试剂盒分别检测血清中肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)水平;HE染色观察肾组织病理变化,并半定量分析肾组织病理损伤程度;TUNEL凋亡试剂盒检测肾组织细胞凋亡;Western blot检测肾组织Bcl-2、Caspase-3、Bax蛋白表达。结果:与Sham组比较,I/R组Scr、BUN增加(P<0.05);肾小管上皮细胞水肿、肾小管管腔变小、刷状缘消失、部分上皮细胞脱落,间质可见炎症细胞浸润...     

蛇床子素预处理对肾脏缺血再灌注损伤炎症因子表达的影响

目的:探讨肾脏缺血再灌注损伤时致炎症因子TNF-α、IL-8、IL-6的表达及蛇床子素对其的保护作用及机制。方法:建立大鼠肾脏缺血再灌注损伤模型。我们随机将30只大鼠分为3组,假手术组(Sham)、缺血再灌注损伤组(IRI)、蛇床子素干预组(Osthole),收集各组血液和肾脏标本,分析肾功能和组织学变化。采用RT-PCR和ELISA分析肾组织和血液TNF-α、IL-8、IL-6的表达。结果:与IR组相比,Osthole预处理组显著改善了肾功能和肾脏组织学变化,以及由IR损伤导致的TNF-α、IL-8、IL-6的表达(P<0.05)。结论:蛇床子可以通过抑制炎症保护肾脏缺血再灌注损伤,蛇床子素可能是一种防治缺血再灌注损伤的新的治疗措施。     

高压氧对大鼠缺血再灌注损伤肾FasL和半胱氨酸蛋白酶3表达的影响

目的 研究高压氧(HBO)对大鼠缺血再灌注损伤(IRI)肾细胞凋亡相关基因(FasL)和细胞凋亡执行蛋白半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)表达的影响,并探讨其作用机制.方法 健康SD雄性大鼠随机分为假手术组(n=8)、IRI组(n=8)和IRI+HBO组(n=8).采用夹闭双侧肾动脉方法建立IRI模型.IRI+HBO组分别在再灌注后lh、24 h、48 h给予HBO处理,末次HBO后取双肾组织测定各组大鼠肾组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量 ;采用实时荧光定量PCR和免疫组织化学染色方法分别测定肾组织FasL mRNA、caspase-3蛋白表达.结果 与假手术组比较,IRI组SOD活性下降(P＜0.05),MDA含量升高(P＜0.05),经HBO治疗后SOD活性升高(P＜0.05),MDA含量降低(P＜0.05).FasL mRNA、caspase-3蛋白在假手术组呈低水平表达,而在IRI组表达显著上调(P＜0.01),IRI+HBO组表达较IRI组显著下调(P＜0.01).结论 大鼠肾缺血损伤后随着再灌注时间延长FasL mRNA 、caspase-3蛋白表达显著上调.早期HBO治疗后可以使FasL mRNA、caspase-3蛋白表达明显下调,抑制细胞凋亡,保护肾脏.     

缺血后处理减轻肾缺血再灌注损伤后肾小管间质的纤维化

目的 观察缺血后处理可以减轻大鼠肾缺血再灌注损伤(IPI)后肾小管间质纤维化的作用及其机制.方法 建立原位大鼠单侧肾缺血再灌注动物模型,摘除右肾后对左肾行缺血后处理,即10s再灌注,10 s缺血,6次循环后再灌注12周.实验动物分为缺血再灌注损伤组(IRI),缺血后处理组(IPO)和假手术组(Sham),全自动生化分析仪检测血尿素氮(BUN)和肌酐(Cr),Masson特殊染色法观察小管间质纤维化程度;Western blotin法测定α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子(TGF-β)和磷酸化Smad2蛋白表达(p-Smad2);免疫组织化学法观察肾脏α-SMA和TGF-β1的分布.结果 IRI组和IPO组较Sham组出现了明显肾间质纤维化,但是IPO组肾间质纤维化与IRI组比较有所减轻;α-SMA、TGF-β1和p-Smad2的水平明显减低,各组间差异有统计学意义(P＜0.05).结论 肾脏缺血再灌注损伤可以引起小管间质纤维化.缺血后处理可以影响此病理改变,其保护机制可能为缺血后处理抑制TGF-β1和p-Smad2信号通路激活.     

大鼠肝缺血再灌注损伤NF-κB与ICAM-1在脑组织的表达及意义

目的:观察大鼠在肝脏缺血再灌注(IR)过程中肝脏炎性细胞因子TNF-α、IL-1βmRNA表达与脑组织NF-κB、ICAM-1表达之间的关系,探讨肝脏IR是否可导致脑组织损伤及其可能的机制.方法: 选健康雄性Wister大鼠48只,随机分为对照组、缺血30min组(I组)、缺血30min再灌注组(IR组)、缺血30min再灌注后1h组(IR 1h组)、缺血30min再灌注后2h组(IR 2h组)、缺血30min再灌注后4h组(IR 4h组),每组8只.应用免疫组化法分别检测各组大鼠肝脏TNF-α及脑皮质、海马和下丘脑区NF-κB、ICAM-1的表达情况,应用原位杂交的方法检测肝脏IL-1βmRNA表达情况.结果:肝脏IR导致肝脏明显的损伤,表现为血清GPT、AKP、γ-GT升高(P<0.01),肝组织中TNF-α、IL-1βmRNA表达显著增加(P<0.01),肝细胞水肿,炎性细胞浸润,甚至细胞坏死.随着再灌注时间的延长,脑组织HE染色可见脑细胞水肿,甚至个别脑细胞坏死.与对照组比较, I组和IR组大鼠脑皮质、海马和下丘脑中NF-κB、ICAM-1表达的差异无统计学意义(P>0.05),IR 1h组、IR 2h组和IR 4h组的差异有统计学意义(P<0.05 ,P<0.01).IR 1h、IR 2h、IR 4h组与对照组、I组、IR组比较,各部位脑组织NF-κB、ICAM-1的表达显著增加(P<0.05或P<0.01).各组大鼠不同部位脑组织间NF-κB、ICAM-1表达无统计学意义(P>0.05).结论:肝脏IR对脑组织可产生损伤性影响,NF-κB、ICAM-1介导的炎性细胞反应,参与了脑组织损伤的发生机制.     

急性缺血再灌注损伤对肾脏的近期和远期作用

目的 探讨急性缺血再灌注（IR）损伤对大鼠肾脏的近期和远期作用及其机制。 方法 双侧肾蒂夹闭40 min后再灌注，制作大鼠IR模型。术后4 h、24 h、48 h、72 h、1周、5周和10周收集血样和肾脏标本，动态观察肾脏病理、肾功能和大鼠死亡情况。用透射电镜观察小管上皮细胞的超微结构；原位末端标记法（TUNEL）检测肾小管上皮细胞凋亡情况；Masson染色法观察小管间质纤维化程度；Western印迹法测定α?鄄平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达；免疫组织化学法观察肾脏α-SMA和转化生长因子β1 (TGF-β1)的分布和表达。 结果　 再灌注后IR组的Scr 和BUN水平逐渐升高，48 h达到最高峰。IR组病死率为32% (8/25)，假手术（Sham）组病死率为0 (0/22)。再灌注48 h IR组出现近端肾小管上皮细胞广泛性坏死和少量凋亡；IR组术后5周和10周有轻至中度的小管间质纤维化，术后1周肾脏α-SMA和TGF-β1蛋白表达显著升高，以后两者表达有所下降但仍高于Sham组。 结论 严重的缺血再灌注损伤不仅是早期肾小管大量坏死、肾功能急剧下降和病死率增高的原因，而且可以导致小管间质纤维化，影响肾脏的远期预后。TGF-β1过表达和肌成纤维细胞增多可能介导了纤维化病变。     

HMGB1/Caspase-1/GSDMD信号轴介导肝细胞焦亡在肝脏缺血-再灌注损伤中的作用

目的探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-1/Gasdermin D(GSDMD)信号轴介导肝细胞焦亡在肝脏缺血-再灌注损伤(IRI)中的作用。方法将C57BL/6小鼠随机分为假手术组(Sham组)、IRI 2 h组、IRI 6 h组、IRI 12 h组、甘草酸(GA)+Sham组和GA+IRI 12 h组(每组8只);将AML12细胞大致均匀地分为Sham组、IRI 12 h组、GA+Sham组和GA+IRI 12 h组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、白细胞介素(IL)-1β和IL-6的水平;采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝组织中IL-1β和IL-6信使核糖核酸(mRNA)水平;比较各组小鼠肝脏缺血病理学评分和细胞凋亡情况;采用免疫组织化学(免疫组化)法检测各组小鼠肝组织中HMGB1的表达情况;采用蛋白质印迹法检测小鼠肝组织和AML12细胞中HMGB1、Caspase-1、GSDMD蛋白的表达水平。结果与Sham组比较,IRI后各组小鼠血清中ALT、AST、IL-1β、IL-6水平,以及小鼠肝组织中的IL-1β、IL-6 mRNA相对表达量均升高(均为P<0.05),且随着再灌注时间的延长呈明显的时间依赖性。与Sham组比较,IRI后各组小鼠肝脏缺血病理学评分和肝细胞凋亡率均升高(均为P<0.05)。免疫组化结果显示,IRI后HMGB1在肝组织中的表达明显增多,且在2~12 h内随着时间延长而增多。蛋白质印迹法结果显示,在体内和在体外,与Sham组比较,IRI 12 h组HMGB1、Caspase-1和GSDMD蛋白相对表达量均升高;与IRI 12 h组比较,GA+IRI 12 h组HMGB1蛋白相对表达量升高,Caspase-1和GSDMD蛋白相对表达量均降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论肝细胞可能通过释放HMGB1激活Caspase-1/GSDMD通路,从而触发肝细胞发生焦亡,导致肝脏IRI,而通过GA抑制HMGB1的胞外释放可减轻肝脏IRI。     

经肾动脉灌注细胞间粘附分子—1小片段干扰RNA减轻移植肾缺血再灌注损伤

目的 探讨经肾动脉灌注细胞间粘附分子-1小片段干扰RNA(ICAM-1 siRNA)对移植肾缺血再灌注损伤(IRI)的影响.方法 将Fisher大鼠随机分为3组,接受原位肾移植.供肾在冷保存1 h后,按分组要求分别经肾动脉灌注生理盐水(NS组)、ICAM-1 siRNA(siRNA组)和完全错配siRNA(siRNA错配组),然后进行移植,切除受者自身双肾.分别于移植后6、12、24、48和72 h处死大鼠,测定血清肌酐(Cr),观察移植.肾组织学变化,测定移植肾组织中ICAM-1及其mRNA的表达情况.结果 与NS组和siRNA错配组相比,siRNA组各时点肾小管坏死和炎症细胞浸润程度均较NS组和siRNA错配组有所减轻.siRNA组12、24、48 h时的血Cr值明显低于NS组和siRNA错配组(P=0.01～0.001),尤以24 h时的相差幅度最大.从术后12 h起,siRNA组肾组织中ICAM-1 mRNA的表达明显低于NS组和siRNA错配组(P=0.01～0.001),24 h时的差异达到最大,ICAM-1表达的变化与ICAM-1 mRNA一致.NS组与siRNA错配组相比较,各观察指标的差异均无统计学意义(P>0.05).结论 移植前经肾动脉灌注ICAM-1siRNA可减轻移植肾IRI,其机理可能与下调ICAM-1及其mRNA的表达有关.     

辛伐他汀对肾脏缺血再灌注损伤中Axin和β-catenin表达的影响

目的:观察辛伐他汀对大鼠肾脏缺血再灌注损伤(IRI)中Axin和β-catenin表达的影响。方法:36只雄性Wistar大鼠,随机分为假手术组(Sham组)、缺血再灌注(IR)组、辛伐他汀(XF)组,每组12只。肾缺血再灌注6h、48h后,检测血清尿素氮(BUN)和肌酐(Scr)的含量;光镜下观察肾组织病理结果;采用免疫组织化学二步法和实时荧光定量PCR检测肾组织中Axin和β-catenin表达的情况。结果:与假手术组相比,IR组肾组织中Axin表达明显降低(P<0.05),β-catenin表达明显升高(P<0.05);辛伐他汀干预后,Axin表达较IR组显著下降(P<0.05),β-catenin表达较IR组显著上升(P<0.05)。相关性分析表明:Axin蛋白与β-catenin蛋白(rs=-0.843,P<0.01),AxinmRNA与β-cateninmRNA(rs=-0.741,P<0.01)均为负相关。结论:辛伐他汀对肾IRI具有一定的保护作用,其机制可能与调节肾组织Axin和β-catenin表达有关。     

肾缺血-再灌注损伤大鼠SDF-1、ICAM-1表达与肾小管坏死评分的相关性研究

目的探讨肾缺血-再灌注损伤(IRI)大鼠基质细胞衍生因子(SDF)-1、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)与肾小管坏死评分的相关性。方法将60只SD大鼠随机分成手术组、假手术组两组,每组各30只。根据手术后检测时间不同,每组再分为6个不同时段的亚组(1、6、12、24、48、72 h组),每个亚组有5只大鼠。手术组建立大鼠肾IRI模型,假手术组大鼠仅予游离双侧肾动脉后缝合切口。检测各个时间点肾功能、肾小管坏死评分及肾脏组织SDF-1、ICAM-1表达变化。对手术组大鼠肾组织SDF-1、ICAM-1表达与肾功能和肾小管坏死评分进行Pearson直线相关分析。结果手术组术后血尿素氮(BUN)、血清肌酐(Scr)较术前及相应时间段假手术亚组明显升高(均为P0.05),且于术后12 h显著升高,高峰期在术后48 h。手术组肾小管坏死评分随时间的延长逐渐增高(均为P0.05);肾小管坏死评分最高在手术48 h组(P0.05)。与手术1 h组比较,手术6 h组大鼠肾组织SDF-1、ICAM-1表达开始明显增多(均为P0.05);手术后48 h达高峰,于手术后72 h开始下降。手术组的肾组织SDF-1、ICAM-1表达与术后各时间段BUN、Scr、肾小管坏死评分呈正相关(r=0.614、0.662、0.751;0.640、0.703、0.785;均为P0.05)。结论当大鼠肾组织发生IRI时,SDF-1、ICAM-1表达上调,BUN、Scr升高,肾小管坏死评分升高,而且SDF-1、ICAM-1的表达与BUN、Scr、肾小管坏死评分呈正相关,提示SDF-1、ICAM-1表达增高程度可以作为反映肾IRI后严重程度的指标。     

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白和缺氧诱导因子1α在肾脏缺血再灌注损伤中的改变及意义

目的:探讨中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白在肾脏急性缺血再灌注损伤保护方面的调控机制研究。方法:选取生后3~4周龄的雄性Wistar大鼠,随机分为假手术组(Sham组)、急性缺血再灌注损伤组(IRI组)、二甲基乙二酰基甘氨酸(DMOG)处理组(IRI+DMOG组),每组6只。Sham组右侧肾脏切除,仅游离左侧肾动脉,但不钳夹;IRI组右侧肾切除,无创动脉夹夹闭左肾动脉45 min,之后松开动脉夹,恢复肾脏血流(术前24 h给予DMOG组等量的生理盐水腹腔注射);IRI+DMOG组IRI术前24 h给予腹腔内注射DMOG 40 mg/kg(用生理盐水溶解)。采用免疫组织化学方法和Western Blot方法检测各组肾组织的HIF-1α和NGAL蛋白表达水平,用Real Time PCR的方法检测Hmox-1和NGAL mRNA的表达水平。检测各组的肾功能(BUN、Scr、Cystatin C)、评价各组肾脏的形态学改变及肾小管间质损伤评分。TUNEL法检测各组肾组织的细胞凋亡情况。对各组结果的比较分析采用单因素方差分析和LSD-t检验。结果:DMOG处理后的大鼠肾脏急性缺血再灌注损伤时NGAL和HIF-1α的表达上调;并对大鼠肾脏急性缺血再灌注损伤发挥保护作用。结论:在肾脏急性缺血再灌注损伤时,NGAL可能受HIF-1α调控发挥保护作用。     

钴原卟啉诱导血红素氧合酶-1高表达减轻大鼠肾脏缺血再灌注损伤

目的 探讨钴原卟啉(CoPP)诱导血红素氧合酶-1(HO-1)高表达对大鼠肾脏缺血再灌注损伤(IRI)的影响及其机理.方法 以Wistar大鼠为实验对象,CoPP组分别于左肾血流阻断前48 h和24 h腹腔注射CoPP 2.5 mg/kg,然后阻断左肾血流47 min,恢复左肾血流的同时切取大鼠右肾,采用免疫组织化学染色和免疫印迹法检测其HO-1的表达.在再灌注24 h后,处死大鼠,取其下腔静脉血和左肾,测定血肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)浓度,观察肾组织学变化,检测肾组织中HO-1的表达.IRI组除不用CoPP处理外,其余同CoPP组.CoPP组和IRI组另有部分大鼠的血流阻断时间延长至80 min,恢复血流后不处死,观察14 d,记录其存活情况.结果 IRI组血清Cr及BUN分别为(134.37±24.26)μmol/L和(30.10±3.09)mmol/L,明显高于CoPP组的(48.92±12.92)μmol/L和(13.99±5.00)mmol/L(P＜0.05).IRI组肾小管细胞大片坏死,管型形成,与之相比,CoPP组肾小管坏死范围稍小,但肾小管病变范围仍较广泛,肾小管上皮细胞多处于水变性阶段,"缺血样"肾小球减少,管型形成较少.缺血前及再灌注24 h后,CoPP组的肾组织中HO-1均为高表达,主要位于肾间质的毛细血管处,IRI组再灌注24 h后也见肾组织中HO-1为高表达.术后14 d内,IRI组的6只大鼠中有4只死亡,而CoPP组的5只大鼠全部存活,两组大鼠存活率的差异有统计学意义(P＜0.05).结论 缺血前使用CoPP可减轻大鼠肾脏缺血再灌注损伤,该保护作用可能是通过CoPP诱导肾脏高表达HO-1来实现的.     

外源性硫化氢在大鼠肾脏缺血再灌注损伤中的保护作用

目的 观察不同剂量外源性硫化氢(H2S)供体硫氢化钠对大鼠肾脏缺血再灌注损伤( IRI)的保护作用.方法 健康雄性Wistar大鼠28只随机分为4组,即假手术组( Sham)、肾缺血再灌注(IR)组、硫氢化钠(NaHS)高剂量组、硫氢化钠低剂量组.大鼠右肾切除后,以NaHS作为硫化氢的供体,NaHS高、低剂量组分别经左肾动脉插管,按照1.5 μmol/min、300 nmol/min的剂量连续15 min给药,假手术组及IR组给予同体积生理盐水.停药5 min 后,NaHS组和IR组用无损伤微动脉夹夹闭左侧肾蒂45 min后解除阻断,建立大鼠急性IRI模型,假手术组不夹闭左肾动脉,其他操作同模型组.于肾脏恢复血流24h时留取血和肾组织标本,检测血清尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr);半定量分析肾脏病理损伤;检测肾组织H2S生成率;采用实时定量PCR法检测胱硫醚-β-合成酶(CBS)、胱硫醚-γ-裂解酶(CSE )mRNA表达.结果 与假手术组相比,IR组H2S生成率显著降低(P＜0.01);CBS、CSE mRNA表达显著下降(P＜0.01 );Scr、BUN显著升高(P＜0.01);肾脏病理表现为急性肾小管坏死,且最严重.与IR组相比,NaHS预处理组H2S生成率升高(P＜0.05);CBS、CSE mRNA表达升高(P＜0.01 );Scr、BUN降低(P＜0.01);病理损伤明显减轻.NaHS两个剂量组之间差异无统计学意义.结论 外源性H2S对大鼠IRI具有保护作用.     

脊髓缺血-再灌注损伤细胞间粘附分子-1及白细胞介素-1β的表达

目的:探讨脊髓缺血-再灌注损伤细胞间粘附分子-1(ICAM-1)及白细胞介素-1β(IL-1)的表达对血脊髓屏障损害的分子机制。方法:将77只同龄Wistar大鼠,随机分为正常对照组、单纯缺血组和缺血再灌组。手术方法采用Zivin法复制模型。应用逆转录-聚合酶链反应、地高辛标记cDNA探针技术、免疫组化及免疫荧光激光共聚焦扫描显微镜技术检测脊髓再灌注损伤血管内皮ICAM-1mRNA和IL-1βmRNA表达量。结果:正常组和单纯缺血组未引起细胞因子和粘附分子表达量的增加。而缺血再灌注后缺血区细胞因子、粘附分子的表达及多形核白细胞(PMN)的浸润先后发生了改变。再灌注2h,IL-1βmRNA的表达首先升高,约为对照组的2倍。再灌注6h达到高峰,并持续到12h。ICAM-1mRNA表达量于再灌注4h明显升高,再灌注12h其在单位微血管面积上的荧光强度约比单纯缺血组增加了1/2。结论:再灌注损伤后脊髓微血管内皮ICAM-1及其调节因子IL-1β的表达量增加是导致血脊髓屏障损害的重要分子基础。     

辣椒素对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨辣椒素对大鼠肾缺血再灌注损伤的作用及其机制。方法:将SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、肾缺血/再灌注损伤组(IRI)和辣椒素组(Capsaicin,CPS)。通过夹闭左侧肾蒂,去除右肾构建肾缺血再灌注损伤模型。ELISA检测血清中肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素(IL)-6的含量;HE染色检测肾脏病理形态;Western blotting检测肾脏JAK2,STAT3、p-JAK2、p-STAT3、p-p65和p65的表达;RTPCR检测IL-6、IL-1β和TNF-α的信使RNA水平。结果:辣椒素预处理可增加p-JAK2和p-STAT3的表达明显,减少肾脏病理形态的改变以及下调Cr、BUN、p-p65、IL-6、IL-1β和TNF-α表达,但对JAK2、STAT3和p65表达无影响。结论:辣椒素对肾脏缺血再灌注损伤有保护作用,其作用机制与促进JAK2/STAT3信号通路激活而抑制NF-κB信号通路激活介导的炎症相关。     

缺血再灌注损伤大鼠肾脏凝血纤溶相关蛋白的表达

目的 观察缺血再灌注(IR)大鼠肾组织凝血纤溶相关物质的蛋白表达并探讨其意义.方法 雄性Wistar大鼠48只被随机分为6组:假手术组(Sham组)、缺血再灌注0、2、6、12、24 h组(IR0h组、IR2h组、IR6h组、IR 12h组、IR 24 h组),每组8只.用无创动脉夹夹闭双肾动脉45 min建立IR模型.HE染色观察肾组织病理改变;免疫组织化学法检测肾组织内皮素(ET-1)、组织型纤溶酶原激活物(tPA)、纤维蛋白原样蛋白2(Fgl-2)凝血酶原酶蛋白的表达.结果 与Sham组相比,IR 24 h组大鼠血BUN及Scr升高,差异有统计学意义(P＜0.05).IR各组肾组织病理改变程度随再灌注时间延长而逐渐加重;与Sham组相比,IR各组肾小管损伤半定量评分明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05).IR各组肾ET-1蛋白表达增加,6h达高峰,与Sham组相比差异有统计学意义(P＜0.05).IR各组肾Fgl-2凝血酶原酶表达增加,12h达高峰,24 h基本恢复正常,与Sham组相比,差异有统计学意义(P＜0.05).肾组织t-PA表达增加,12h达高峰,与Sham组相比,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 肾脏IR损伤后存在肾组织凝血纤溶相关物质的异常表达,推测后者可能参与了肾脏IR损伤.     

青蒿琥酯通过NLRP3炎症小体抑制细胞焦亡减轻大鼠肾缺血-再灌注损伤

目的探究青蒿琥酯对大鼠肾缺血-再灌注损伤(IRI)的作用及机制。方法将25只SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(IRI组)、低剂量青蒿琥组(ART-L组)、高剂量青蒿琥酯组(ART-H组)和NLRP3炎症小体抑制剂组(INF39组),每组5只。分析各组大鼠血清肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)水平及肾组织病理损伤情况;检测各组大鼠血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6水平;用免疫组织化学染色法检测各组大鼠肾组织IL-1β的表达;免疫荧光染色和蛋白质免疫印迹法检测焦亡相关蛋白的表达。结果与Sham组比较,IRI组Scr和BUN水平升高,肾组织损伤较重,炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β表达水平升高,肾损伤分子(KIM)-1及焦亡相关蛋白NOD样受体蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-1、Gasdermin D(GSDMD)、IL-1β蛋白表达水平均升高;与IRI组比较,ART-L组、ART-H组和INF39组Scr和BUN水平均下降,肾组织损伤均较轻,TNF-α、IL-6、IL-1β表达水平均降低,KIM-1、NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β蛋白表达水平均下降。结论青蒿琥酯可抑制NLRP3炎症小体诱导的细胞焦亡,减少肾IRI后焦亡相关蛋白的表达及炎症因子的释放,减轻肾IRI。     

HIF-PHI减轻炎症反应预防小鼠肾缺血再灌注损伤

目的探讨低氧诱导因子—脯氨酰羟化酶抑制剂(hypoxia-inducible factor prolyl hydroxylase inhibitor, HIF-PHI)预处理小鼠能否减轻炎症反应, 减少细胞凋亡, 缓解肾脏缺血再灌注损伤。方法将雄性C57BL/6小鼠采用随机数字表法分为假手术(Sham)组、缺血再灌注损伤(IRI)组、IRI+HIF-PHI组, 每组6只, 其中IRI+HIF-PHI组提前1周隔天灌胃罗沙司他20 mg/kg。建立肾脏缺血再灌注模型后, 检测各组小鼠血清肌酐(sCr)水平;HE染色观察小鼠肾组织病理变化并进行损伤评分;原位末端标记法(TUNEL)评估肾组织细胞凋亡;实时定量逆转录聚合酶链(RT-PCR)反应检测肾脏组织内低氧诱导因子1α(HIF-1α)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)以及白介素1β(IL-1β)的mRNA表达水平;免疫荧光及免疫组化分别检测HIF-1α, 炎症因子TNF-α和IL-1β表达情况。结果与IRI组相比, IRI+HIF-PHI组小鼠sCr水平明显降低(P<0.01), 肾组织损伤情况明显改善, 肾小管损伤半定量评分更低(P...     

缺血后处理对大鼠肾缺血再灌注损伤后CD105及endostatin表达的影响

目的:探讨缺血后处理对大鼠缺血再灌注损伤后CD105及endostatin表达的影响。方法:将雄性Wistar大鼠随机分为三组,分别为假手术组(Sham组)、缺血再灌注损伤组(IRI组)及缺血后处理组(IPO组)。采用全自动生化分析仪检测血清尿素氮(BUN)及肌酐(Cr)含量;用HE染色观察病理组织学变化;用免疫组织化学法和蛋白质印迹法(Western blot)检测肾组织中CD105及endostatin的表达。结果:IRI组血清BUN及Cr含量较Sham组明显升高,IPO组血清BUN及Cr含量介于Sham组和IRI组之间;HE染色检测发现IRI组肾小管上皮细胞坏死明显;肾小管管腔扩张,IPO组较IRI组肾小管上皮坏死明显减轻;免疫组织化学以及Western blot检测均发现CD105在Sham组表达最强,IRI组表达明显减弱,IPO组表达则介于前二者之间;endostatin在Sham组表达最弱,在IRI组最强,IPO组则稍强于Sham组而明显弱于IRI组。结论:缺血后处理能减弱缺血再灌注损伤过程中endostatin的表达量,同时增加CD105的表达,因而有助于减轻肾脏的缺血再灌注损伤。     

姜黄素预处理对大鼠缺血再灌注肾小管上皮细胞凋亡的影响

目的：建立大鼠。肾脏缺血再灌注损伤（IRI）模型,观察姜黄素预处理对大鼠肾脏缺血再灌注肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法：36只SD雄性大鼠随机分为3组,分别为假手术（Sham）组、肾脏缺血再灌注模型（IR）组、姜黄素预处理（CUR）组,每组12只。CUR组在缺血前2h给予姜黄素100mg／kg剂量溶于0．1％二甲基亚砜1ml中,注入腹腔。24小时后沿原切口进入,切除左。肾。肾组织用4％多聚甲醛固定24h,常规石蜡包埋切片。采用TUNEL法检测各组缺血肾小管上皮细胞凋亡。结果：与Sham组相比,IR组肾小管上皮细胞凋亡明显增加。与IR组比较,CUR组肾小管上皮细胞凋亡减少（P＜0．05）。结论：姜黄素预处理可减轻肾脏IRI的肾小管上皮细胞凋亡。