表没食子儿茶素没食子酸酯联合TRAIL对黑素瘤A375细胞的凋亡作用

为探讨肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体(TRAIL)与表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)联合应用对人恶性黑色素瘤A375细胞的抑制作用,采用以甲基噻唑基四唑(MTT)比色法检测TRAIL和EGCG作用组的抑制率,并以流式细胞仪检测各组凋亡率,流式检测EGCG单独作用后A375细胞表面死亡受体DR4、DR5的变化.亚毒剂量的TRAIL、EGCG及联合作用组致恶性黑素瘤细胞A375细胞凋亡率分别为12%、5.1%、60%.Caspase-3活性明显增强.单独应用组与联合应用组之间存在显著性差异(P<0.01).EGCG单独作用于A375细胞24 h后,死亡受体TRAIL-R1/DR4在细胞的表达明显(P<0.05).TRAIL-R2/DR5表达无明显变化.TRAIL和EGCG联合应用对A375细胞具有明显的协同杀伤效果,这一作用可能与EGCG上调DR4的表达及增强Caspase-3活性有关.     

表没食子儿茶素没食子酸酯对中波紫外线诱导人原代表皮黑素细胞光损伤干预作用的研究

目的:观察中波紫外线(UVB)诱导人原代表皮黑素细胞光产物的形成和清除情况,以及表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)的干预作用.方法:选择10、20、40、80、100 mg/L 5种浓度EGCG作用于体外培养的人表皮黑素细胞72 h,测定细胞增殖活性.采用免疫斑点印迹技术在30 mJ/cm2UVB照射及EGCG干预下.分别取照射后0.5 h和24 h检测环丁烷嘧啶二聚体(CPDs)的产生和清除量.结果:低浓度(＜20 mg/L)EGCG能促进黑素细胞增殖.UVB照射后黑素细胞内光产物形成较快,但清除缓慢.EGCG对UVB诱导光产物的形成无明显影响,但能加速光产物的清除(P＜0.05).结论:EGCG能加速UVB照射后黑素细胞内光产物的清除.     

表没食子儿茶素没食子酸酯对人表皮黑素细胞黑素合成的影响及机制

目的：观察表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对体外培养的人表皮黑素细胞的黑素合成和酪氨酸酶（TYR）活性以及TYR、酪氨酸酶相关蛋白（TRP）-1、TRP-2mRNA表达的影响,探讨EGCG对黑素合成的影响及其作用机制。方法：选择5．0、10．0、12．5、15．0、20．0μg／mL5个浓度的EGCG作用于体外培养的人表皮黑素细胞72h,分别测定细胞增殖活性、TYR活性、黑素含量;采用逆转录（RT）-PCR半定量检测EGCG对黑素细胞中TYR、TRP-1、TRP-2 mRNA表达的影响。结果：EGCG显著抑制黑素合成和TYR活性,且呈浓度依赖性;EGCG可明显抑制黑素细胞中TYR mRNA和TRP-1 mRNA的表达,但对TRP-2mRNA的表达无明显影响。结论：EGCG可抑制黑素合成和TYR活性,这种作用可能与EGCG下调TYR和TRP-1的表达有关。     

外用表没食子儿茶素没食子酸酯抵抗中波紫外线对小鼠皮肤的慢性光损伤作用

目的：研究中波紫外线（UVB）慢性辐射BALB／C小鼠后皮肤的组织病理改变、表皮细胞凋亡情况及表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对其的影响。方法：EGCG局部外用于小鼠耳、背部皮肤后分别给予不同强度的UVB辐射，每日1次．连续1个月，石蜡切片苏木精-伊红染色观察不同处理条件下皮肤组织病理变化，同时应用末端转移酶介导的缺口末端标记（TUNEL）法检测小鼠表皮中的凋亡细胞。结果：UVB慢性辐射对BALB／C小鼠皮肤有明显影响，主要表现有表皮过度角化、棘层肥厚、海绵样水肿、晒斑细胞、真皮乳头层水肿、毛细血管扩张、炎性细胞浸润等。EGCG预处理能减轻UVB诱导的上述组织病理变化。另外，对慢性低剂量UVB辐射组，EGCG有一定的促细胞凋亡作用。结论：不同剂量UVB慢性辐射后小鼠皮肤组织病理改变明显，EGCG可保护UVB辐射诱导的光损伤作用，并对低剂量慢性UVB辐射后BALB／C小鼠皮肤细胞有促进凋亡作用。     

表没食子儿茶素没食子酸酯抑制长波紫外线诱导的HaCaT细胞氧化损伤和凋亡

目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)是否能对长波紫外线(UVA)诱导的人角质形成细胞(HaCaT细胞)氧化损伤和凋亡起保护作用以及其可能的作用机制.方法:将HaCaT细胞分成空白组、EGCG组、UVA照射组以及UVA照射 EGCG组.采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性,筛选最佳药物浓度;检测细胞上清液中的超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性以及丙二醛(MDA)含量变化;流式细胞仪检测细胞膜电位变化;末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法检测不同组细胞凋亡率.结果:UVA照射组的SOD和GSH-Px明显下降、MDA相应上升,线粒体膜电位下降,凋亡率上升(P＜0.05).EGCG处理的细胞UVA照射后其活性以及上清液中的SOD、GSH-Px活性相对于未加药UVA照射组明显增加,MDA相应下降;线粒体膜电位上升,细胞凋亡率明显下降(P＜0.05).结论:EGCG可以减少UVA诱导HaCaT细胞氧化损伤和细胞凋亡.其机制可能与增强抗氧化成分活性和减少氧自由基有关.     

表没食子儿茶素没食子酸酯减轻UVB诱导的朗格汉斯细胞凋亡作用

目的 研究中波紫外线(UVB)对人表皮朗格汉斯细胞(LC)的光损伤作用以及绿茶活性成分表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)的光保护作用。方法 采用密度梯度离心和免疫磁珠的方法分离纯化人表皮LC,将分离纯化的LC随机分为对照组、30 mJ/cm² UVB辐射组以及辐射后加用200μg/mL EGCG处理组,4h后以PI染色并经流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果 30 mJ/cm² UVB辐射组的凋亡率明显高于对照组,EGCG干预组的凋亡率低于单纯UVB辐射组,但仍高于非照射对照组;且辐射后S期细胞数明显增加。几乎没有G₂/M期的细胞,EGCG处理辐射细胞后,S期细胞数减少。结论 UVB可诱导人表皮LC凋亡,而EGCG具有一定的保护作用。     

UVB诱导皮肤免疫抑制和表没食子儿茶素没食子酸酯光保护作用

目的 探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对不同剂量中波紫外线（UVB）慢性辐射BALB／c小鼠皮肤的保护作用。方法 EGCG局部外用于小鼠背部皮肤后予不同强度UVB辐射，每日1次，连续1个月，RT-PCR法检测IFN-γ和IL-10mRNA的表达水平变化。结果 不同剂量UVB慢性辐射后小鼠皮肤中IFN-γ mRNA表达水平较对照组降低（P〈0．01），IL-10mRNA表达水平较对照组升高（P〈0．01），并与UVB辐射强度呈一定剂量依赖关系。EGCG处理后可影响UVB辐射诱导上述细胞因子表达（P〈0．01）。结论 UVB辐射下调IFN-1和上调IL-10转录水平，可能与UVB辐射诱导局部免疫抑制有关。     

表没食子儿茶素没食子酸酯明胶纳米粒的制备及体外透皮性质研究

目的：制备表没食子儿茶素没食子酸酯-明胶纳米粒(EGCG-N)并研究其体外透皮性。方法：以激光粒度仪测定EGCG-N的粒度及Zeta电位,超滤-HPLC法测定EGCG-N的载药量及包封率,Franz扩散装置检测EGCG-N体外透皮性。结果：所制备的EGCG-N粒径分布均匀,平均粒径为(72.63±0.47)nm,Zeta电位为-28.0mV。EGCG-N中EGCG的载药量和包封率分别为(29.82±2.16)%和(83.91±0.93)%。EGCG-N中EGCG 24 h单位面积累积透过量及皮肤滞留量分别为(133.77±22.79)μg/cm²和(492.57±37.68)μg/g均明显高于EGCG溶液剂(53.30±21.12)μg/cm²和(165.88±17.96)μg/g(均P<0.01)。结论：EGCG-N制备简便,能够提高EGCG的经皮渗透能力。     

表没食子儿茶素没食子酸酯-补骨脂脂质体的制备及体外透皮性质研究

目的：制备表没食子儿茶素没食子酸酯-补骨脂脂质体（EGCG-PL）并检测其体外透皮性。方法：采用逆向蒸发法制备EGCG-PL，以激光粒度仪测定EGCG-PL的粒度及Zeta电位，超滤-HPLC法测定包封率，Franz 扩散装置比较EGCG-PL与EGCG-补骨脂醇溶液组（EGCG-PS）体外透皮性质的差异。结果：所制备的EGCG-PL粒径分布均匀，平均粒径为(118.1±17.0)nm，Zeta电位为-29.3 mV。EGCG-PL中EGCG、补骨脂素及异补骨脂素的包封率分别为(85.58±1.07)%、(55.49±2.82)%和(53.73±1.29)%。体外透皮试验结果显示，EGCG-PL中EGCG、补骨脂素及异补骨脂素24 h单位面积累积透过量及皮肤滞留量均明显高于EGCG-PS。结论：EGCG-PL制备简便、质量稳定。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对紫外线辐射后小鼠表皮细胞凋亡的影响

目的：观察表没食子儿茶素没食子酸酯[（-）-epigallocatechin-3-gallate,EGCG]脂质体对急、慢性中波紫外线（UVB）辐射后BALB／c小鼠表皮细胞凋亡的影响。方法：EGCG脂质体局部外用于BALB／c小鼠背部皮肤,将小鼠分为5组,分别给予中波紫外线180mJ／cm^2照射1次为急性损伤组：30mJ／cm^2每天照射1次,持续30d,为慢性损伤组。采用末端转移酶介导的缺口末端标记法（TUNEL）检测小鼠表皮中的凋亡细胞。结果：急性损伤组中接受UVB照射的小鼠表皮中大部分细胞发生凋亡,EGCG脂质体未表现出对表皮细胞凋亡的影响;慢性损伤组中照光加药组的凋亡细胞多于其他组,EGCG脂质体表现为促凋亡作用（P〈0．05）。结论：EGCG脂质体不影响急性大剂量UVB辐射所致的表皮细胞凋亡;对慢性低剂量UVB辐射有促凋亡作用。     

DJ-1降低细胞内ROS并抑制细胞凋亡保护黑素细胞抵抗H202诱导的氧化应激北大核心CSCD

目的探讨DJ-1蛋白在原代培养的人黑素细胞中的表达以及抵抗HO诱导的氧化应激作用。方法免疫荧光方法鉴定DJ-1在原代培养黑素细胞中的表达;使用不同浓度HO处理黑素细胞24 h,改良MTT法选取适宜HO浓度为后续实验条件;Western印迹检测HO处理组细胞内DJ-1表达变化;采用反向转染方法 ,实验分为空白对照组(不含siRNA片段)、阴性对照组(转染非特异性siRNA)和实验组(转染DJ-1特异性siRNA)。光学显微镜观察细胞贴壁后形态学差异;改良MTT法、荧光探针2’,7’-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)、膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(AnnexinV-FITC/PI)分别检测HO处理后细胞活力变化、细胞内活性氧(ROS)水平及凋亡比例。结果免疫荧光显示DJ-1在黑素细胞细胞核和胞质中均表达,以细胞核表达为主;细胞活力随HO浓度增高呈剂量依赖关系下降,与对照组比较,0.5 mmol/L HO处理24 h后,细胞活力开始下降(P<0.05)。做诱导氧化应激的实验条件;Western印迹结果显示,0.5 mmol/L HO处理细胞24 h后,DJ-1表达增高为HO未处理组的2.23倍(P<0.05)。干涉DJ-1表达后,实验组黑素细胞形态与空白对照组相比,树突减少缩短,胞质空泡化改变。使用0.5 mmol/L HO处理24 h后,siRNA-DJ-1组细胞活力为对照组的35%(P<0.05)。细胞内ROS的荧光密度值(FI)值(902±40)和凋亡比例(58%±6.1%)增高,与空白对照组细胞内ROS的FI值(529±32)和凋亡比例(30%±3.8%)相比,P值均<0.05。结论 DJ-1在黑素细胞中能够通过降低细胞内ROs水平和抑制细胞凋亡,从而抵抗HO所诱导的氧化应激。     

咖啡酸衍生物WSY6对黑素细胞氧化应激损伤的保护作用及机制研究

目的 探讨咖啡酸衍生物WSY6对过氧化氢（H2O2）诱导的黑素细胞氧化损伤的保护作用和潜在分子机制。方法 体外培养原代人表皮黑素细胞,分为对照组（不做任何处理）、H2O2组（1 mmol/L H2O2处理）和6.25、12.5、25 μmol/LWSY6组（分别用6.25、12.5、25 μmol/L WSY6预处理1 h后再用1 mmol/L H2O2处理1 h）。继续培养24 h后,用MTS法测定黑素细胞存活率,乳酸脱氢酶（LDH）试剂盒检测LDH释放量。部分黑素细胞分为抑制剂组（用p38抑制剂预处理1 h,再用1 mmol/L H2O2处理1 h）和H2O2组（直接用1 mmol/L H2O2处理1 h）,处理完成后继续培养24 h,用试剂盒检测LDH的释放量。部分黑素细胞用25 μmol/L WSY6预处理1、2、4 h后,再用H2O2处理1 h,流式细胞仪检测细胞内活性氧（ROS）水平;部分黑素细胞用6.25、12.5、25 μmol/L WSY6处理1 h后,再用H2O2处理1 h,Western印迹法检测细胞色素C（cyto?c）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（caspase?3）、caspase?9和磷酸化丝裂原活化的蛋白激酶（p?p38 MAPK）、细胞外调节蛋白激酶（p?ERK）及c?Jun氨基末端激酶（p?JNK）的表达。结果 与对照组相比,H2O2组黑素细胞存活率明显降低（29.22% ± 1.31%,P < 0.05）,细胞内LDH释放量增加（47.19% ± 4.85%,P < 0.05）,ROS水平明显升高（18.37 ± 1.59,P < 0.05）,caspase?3和caspase?9的表达亦均升高。与H2O2组相比,6.25、12.5、25 μmol/L WSY6组细胞存活率明显增加（52.48% ± 1.17%、60.21% ± 0.25%、78.32% ± 1.73%,P < 0.05）,LDH释放量明显下降（21.99% ± 0.22%、15.38% ± 0.45%、13.18% ± 0.38%,均P < 0.05）,25 μmol/L WSY6处理1、2、4 h组细胞内ROS显著下降（7.59 ± 1.00、6.22 ± 0.52、5.15 ± 0.48,均P < 0.05）。同时p38抑制剂组黑素细胞LDH释放量较H2O2组显著下降（P < 0.05）。Western印迹法显示,WSY6预处理后,与H2O2组相比,caspase?3和caspase?9表达明显降低,p?p38表达下降,但p?ERK和p?JNK表达无明显变化;同时WSY6组p38 MAPK下游产物p?p53表达也下降,且WSY6浓度越高,下降越明显。结论 WSY6对H2O2诱导的黑素细胞氧化应激损伤有显著的保护作用,可能通过p38 MAPK途径发挥作用。     

Protective effect of epigallocatechin gallate on the immune function of dendritic cells after ultraviolet B irradiation

Aim  To investigate the protective effect of epigallocatechin gallate (EGCG) on the immune function of dendritic cells (DCs) after ultraviolet B irradiation (UVB) and its underlying mechanisms.
Methods  The monocytes were isolated from peripheral blood and cultivated into DCs with cytokines, such as granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (GM-CSF) and interleukin (IL)-4. DCs were harvested after cultivation for 7 days and subjected to irradiation with different dosages of UVB. Then, 200 μg/mL of EGCG was added in certain groups 24 h before irradiation. DCs simply treated with UVB or treated with both UVB and EGCG were co-cultured with lymphocytes, and Mono-nuclear cell direct cytotoxicity (MTT) assay was used to detect the ability of DCs to stimulate proliferation of lymphocytes. Surface markers CD80, CD86, human leukocyte antigen(locus)-DR (HLA-DR), and CD40 were detected using flow cytometry, and the levels of IL-10 and IL-12 secreted from DCs 24 h after cultivation were measured using ELISA.
Results  UVB irradiation was able to inhibit the ability of DCs to stimulate the proliferation of lymphocytes and surface expressions of CD80, CD86, HLA-DR, and CD40 on DCs in a dose-dependent manner. The inhibition rate of DCs was improved to some extent after treatment with 200 μg/mL of EGCG. UVB showed no significant influence on the secretion of IL-10 and IL-12 from DCs, while EGCG was able to down-regulate the secretion level of IL-12 and up-regulate that of IL-10.
Conclusions  EGCG can antagonize the inhibitory effect on DCs induced by UVB irradiation. This function has some relationship with its protecting effect of the expression of the costimulating molecules on the surface of DCs and the secretion level of IL-10 and IL-12.     

茶多酚对CD8+T细胞杀伤白癜风患者黑素细胞的保护作用研究

目的 探讨茶多酚对CD8+T细胞杀伤白癜风患者黑素细胞的保护作用.方法 取白癜风患者白斑边缘处皮片组织,培养CD8+T淋巴细胞,细胞纯度用流式细胞仪进行鉴定,通过和黑素细胞共培养验证其针对黑素细胞的杀伤作用.将不同浓度茶多酚加入CD8+T细胞和黑素细胞共培养的体系,用流式细胞仪检测黑素细胞的凋亡.结果 取白癜风皮损边缘表皮组织中成功培养CD8+T淋巴细胞,纯度达90％以上,高表达活化抗原CD137和CD69.CD8+T细胞和黑素细胞共培养后,可明显诱导黑素细胞凋亡.200 μg/ml和400 μg/ml浓度茶多酚处理均可以降低黑素细胞的凋亡率.结论 白癜风皮损边缘组织来源的CD8+T细胞对白癜风患者黑素细胞有明显杀伤作用.茶多酚对抗CD8+T细胞杀伤黑素细胞,从而对黑素细胞有一定的保护作用.     

表没食子儿茶素没食子酸酯和补骨脂对莫诺苯宗诱导白癜风样小鼠的影响

目的 探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）和补骨脂对莫诺苯宗诱导的白癜风样小鼠的影响。 方法 C57BL/6小鼠40只,脱去背部2 cm × 2 cm区域毛,随机分为4组,每组10只。阴性对照组涂抹凡士林乳膏;模型组涂抹40%莫诺苯宗乳膏;EGCG组先后涂抹5% EGCG、40%莫诺苯宗乳膏;补骨脂组先后涂抹7%补骨脂、40%莫诺苯宗乳膏。观察小鼠皮肤和毛发脱色情况,组织病理检查观察淋巴细胞浸润,免疫荧光检测CD8+ T细胞表达量。 结果 阴性对照组小鼠皮肤和毛发无脱色现象。模型组小鼠在用药部位及非用药部位均有脱色现象,EGCG组和补骨脂组小鼠用药部位全部出现脱色,用药部位出现脱色斑的平均时间分别为16.7、29.3和19.9 d,脱色面积指数分别为4.00 ± 0.00、2.11 ± 0.54、2.84 ± 0.79,EGCG组、补骨脂组和模型组之间脱色面积指数差异有统计学意义（F = 14.17,P < 0.05）,EGCG组和补骨脂组分别与模型组比较,脱色面积指数差异均有统计学意义（均P < 0.05）;同时,EGCG组和补骨脂组非用药部位的脱色面积指数差异同样有统计学意义（P < 0.05）。EGCG组和补骨脂组CD8+ T细胞表达量均低于模型组,EGCG组和补骨脂组差异亦有统计学意义（P < 0.05）。 结论 EGCG和补骨脂对莫诺苯宗诱导的小鼠皮肤和毛发脱色均有干预作用,EGCG的干预作用比补骨脂的干预作用强,该动物模型与人类白癜风具有极高相似性。     

氧化应激下黑素细胞自噬相关基因差异表达分析

目的 探讨过氧化氢(H2O2)对黑素细胞自噬的影响及可能的调节机制.方法 取对数生长期健康人黑素细胞,分为空白对照组(不予任何处理)、阳性对照组(100 nmol/L西罗莫司处理)和实验组(体积分数为10-7～10-3的H2O2处理),处理4h后,使用CCK8法、流式细胞仪分别检测各组黑素细胞活性及凋亡率.吖啶橙染色检测自噬小泡,透射电镜下观察自噬小体,Western印迹检测自噬特异性蛋白Beclin 1、微管相关蛋白轻链3B(LC3B).最后采用包含84个自噬相关基因的RT2 Profiler PCR Array筛选自噬相关的差异表达基因.结果 黑素细胞分别经10-3、5×104、10-4、5×10-5、10-5、5×10-6、10-6H2O2处理后,细胞增殖活性及凋亡率与空白对照组相比差异均有统计学意义(F值分别为286.95、301.23,均P＜0.05),且随H2O2体积分数升高,增殖活性降低,凋亡率升高.除5×l0-6 H2O2组分别与10 5、10-6 H2O2组间相比细胞凋亡率差异无统计学意义外,上述各H2O2组间两两比较,黑素细胞增殖活性及凋亡率差异均有统计学意义(P＜0.05).吖啶橙染色及电镜观察发现,10-5 H2O2、10-6 H2O2和西罗莫司处理的黑素细胞中有自噬小体形成.Western印迹显示,10-5H2O2、10-6H2O2和西罗莫司组黑素细胞Beclin 1表达量和LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比率均较空白对照组显著升高(P＜0.05).RT2 Profiler PCR Array结果显示,与空白对照组相比,10-5 H2O2组、10-6H2O2组和西罗莫司组中ATG12、ATG3、ULK1、PIK3CG、PTEN、PIK3C3表达均显著上调,EIF2AK3表达显著下调;10-5 H2O2组和西罗莫司组mTOR表达显著下调,ULK2表达显著上调;10-6H2O2组mTOR表达未发生明显改变,AMPK、JNK1表达显著上调.结论 体积分数为10-5和10-6的H2O2均能有效诱导黑素细胞自噬,可能与影响相关信号分子表达相关.     

红外线照射对人表皮黑素细胞影响的研究

目的 探讨红外线(infrared,JR)照射促进体外培养的正常人表皮黑素细胞的酪氨酸酶活性及黑素含量的作用,寻找IR照射的最佳剂量.方法 将体外培养的正常人表皮黑素细胞分别给予不同的红外线剂量:0 J/cm2(对照组)、20 J/cm2、60 J/cm2、80 J/cm2、100 J/cm2、140 J/cm2、240 J/cm2、320 J/cm2,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法选择最佳剂量并以此作为照射条件,连续3d,检测黑素细胞的酪氨酸酶活性、酪氨酸酶活性增长率、黑素含量、红外线照射对黑素细胞影响率以及细胞周期.结果 红外线照射的最佳剂量为80 J/cm2,此照射下的酪氨酸酶活性0.3601±0.0301,高于对照组0.3114±0.0341 (P＜ 0.05),酪氨酸酶活性增长率为15.64％.照射组的黑素细胞含量为0.2748±0.0243,高于对照组0.2325±0.0254(P＜0.05),红外线照射对黑素细胞黑素含量影响率18.19％.细胞周期检测结果显示,G1细胞比例明显低于对照组(P＜0.01),G2期和S期细胞比例较对照组增加(P＜0.05).结论 80 J/cm2是IR照射的理想剂量,可以增加黑素细胞的黑素含量,提高酪氨酸酶活性,促进黑素细胞分化增殖.     

Nutlin-3对紫外线诱发的人黑素细胞DNA氧化损伤的保护作用

目的：评价Nutlin-3对紫外线诱发的人黑素细胞DNA氧化损伤的保护作用。方法：a—MSH预处理MC1R功能正常的人黑素细胞,分组予以紫外线照射（UVB,105mJ／cm2）、Nutlin-3（10创）和UVB＋Nutlin-3不同干预方法,并采用彗星实验确定各组DNA托尾率、尾距和尾矩数值。结果：UVB组DNA托尾率、尾距和尾矩数值高于其他各组（P〈0．05）,UVR＋Nutlin-3组明显低于UVB组（P〈0．05）。结论：Nutlin-3能够减少UVB诱导黑素细胞DNA损伤。     

白癜风表皮黑素细胞超微结构及小眼畸形相关转录因子转录调控研究

目的 研究白癜风黑素细胞超微结构和小眼畸形相关转录因子 （MITF）及其转录调控的酪氨酸酶相关蛋白（TRP）与白癜风临床类型与病程的相关性。方法 选择不同病程的寻常型白癜风（VV）12例和节段型白癜风（SV）8例,分别取白斑区、白斑边缘正常肤色区和远离白斑正常肤色区的表皮片,经组织学确定其表皮的完整性。透射电镜观察10例患者（VV 6例,SV 4例）不同区表皮黑素细胞的超微结构特点。对所有20例远离白斑正常肤色区的表皮片黑素细胞进行培养,应用免疫印迹方法检测 MITF及其转录调控的酪氨酸酶（TYR）、酪氨酸酶相关蛋白1（TYRP1）和酪氨酸酶相关蛋白2（TYRP2）的表达水平。结果 白癜风表皮黑素细胞超微结构病理改变：10例中7例白斑区表皮内未见黑素细胞,1例短病程和2例长病程VV分别可见少量黑素体显著减少或缺失的黑素细胞;白斑边缘正常肤色区,6例VV中,3例病程小于15个月者可见黑素细胞超微结构异常,而4例SV中仅1例异常;远离白斑正常肤色区,10例黑素细胞超微结构均正常。白癜风表皮黑素细胞MITF及其转录调控TRP的表达：VV的MITF表达下调与TYR、TYRP1、TYRP2的表达下调一致;SV存在MITF显著表达下调,而TYR、TYRP1、TYRP2几均正常表达。结论 VV和SV可能存在不同的表皮黑素细胞超微结构病理改变和MITF转录调控机制。     

过氧化氢对培养白癜风黑素细胞超微结构的影响

目的 探讨白癜风黑素细胞对外源性氧化剂的敏感性及氧化应激在白癜风发病中的作用.方法 以0.5mmol/L过氧化氢分别处理4例白癜风患者外观正常皮肤及6例正常对照皮肤培养的黑素细胞,采用透射电镜观察细胞的形态学变化,并应用图像分析技术和形态计量学方法,测定线粒体、粗面内质网及黑素小体的超微结构变化.结果 0.5mmol/L过氧化氢对正常人黑素细胞形态学及主要细胞器超微结构无明显影响.过氧化氢处理后的白癜风黑素细胞线粒体、内质网分别与处理前及正常对照处理后比较,数量明显减少,差异均有统计学意义(P<0.01).线粒体局部空化,内质网扩张.部分黑素小体体积显著增大,但黑素小体数量与过氧化氢处理前及正常对照处理后比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 过氧化氢可能通过破坏细胞的能量代谢和蛋白合成系统,使黑素细胞功能逐渐减退,促使白癜风的发生.