苦参碱诱导横纹肌肉瘤细胞凋亡的实验研究

目的探讨苦参碱对人RD横纹肌肉瘤细胞生长抑制和诱导凋亡作用。方法将不同浓度的苦参碱作用于培养的RD横纹肌肉瘤细胞，通过MTT比色法、流式细胞仪和DNA凝胶电泳、电子显微镜技术观察检测细胞凋亡，研究分析其对RD横纹肌肉瘤细胞的生长抑制和诱导凋亡作用。结果苦参碱浓度为0．5、1．0、1．5g／L时，细胞生长抑制率分别为13．2％、23．7％、40．5％；流式细胞术测定RD横纹肌肉瘤细胞的凋亡率分别为10．1％、17、7％、26．3％；DNA电泳见DNA“梯形”图谱；电镜显示肿瘤细胞的凋亡形态。结论苦参碱能抑制RD横纹肌肉瘤细胞增殖，诱导其凋亡。     

热休克蛋白与应激诱导的细胞凋亡

组织细胞在受到包括烧伤在内的外界各种因素的刺激后会发生一系列非特异性防御反应。应激反应中可产生对细胞起保护作用的应激蛋白．主要是热休克蛋白(heat shock protein．HSPs)．后者能够快速短暂调整应激过程中细胞机能．保护细胞抗损伤．并有助于细胞恢复正常结构和机能的重建．而细胞凋亡普遍存在于生物的生理、病理过程中．是     

热疗对纤维肉瘤S180株的抑瘤作用及其生物学机制

目的 探讨热疗对纤维肉瘤S180株的抑瘤作用及其生物学机制.方法 40只昆明小鼠,接种S180肿瘤细胞株后用加热进行实验干预,标本于实验后6、2、54h取材,原位末端标记法(TUNEL)检测凋亡细胞,流式细胞仪测定细胞周期分布,RT-PCR检测bcl-2基因的mRNA表达.结果 热疗对纤维肉瘤有显著的治疗作用,可以诱导纤维肉瘤S180株细胞凋亡,改变细胞周期分布,使发生G1期阻滞,下调Bcl-2基因.结论 热疗可以诱导纤维肉瘤S180株细胞凋亡,改变细胞周期分布,使发生G1期阻滞,下调bcl-2基因,为进一步的基因配合热放疗治疗肿瘤和选择肿瘤放化疗结合时机和化疗药物提供了理论基础.     

热休克蛋白和细胞凋亡

热休克蛋白 (ＨＳＰ)是普遍存在于生物体细胞中的一个蛋白质家族 ,是在热休克状态下启动一系列特殊基因编码合成的蛋白质。ＨＳＰ能保护细胞并促进细胞从各种刺激所造成的损伤中自身修复 ,具有多种生物学功能。如帮助蛋白折叠、装配、向内质网易位及分解错装的蛋白等分子伴娘功能[1 ,2 ] 、参与抗原提呈[3] 、免疫调控[4] 、预防和控制感染[5] 、抗肿瘤[6] 及参与自身免疫病的发生[1 ,7] 等生理和病理作用。ＨＳＰ和细胞凋亡均为目前国际上研究的热点 ,但有关二者的相关性报道甚少 ,本文就近年来的研究进展情况介绍如下。1　ＨＳＰ家族及其…     

尤文肉瘤细胞凋亡及p15表达的研究

通过对尤文肉瘤细胞凋亡指数及相关调控基因表达产物p15蛋白的检测,了解其在尤文肉瘤中的表达水平,并初步探讨其临床及生物学意义.     

热疗联合DDP诱导大肠癌细胞凋亡和bcl—2表达的实验 …

目的：研究热化疗诱导大肠癌（ＬｏＶｏ）细胞凋亡及其与ｂｃｌ－２基因表达的关系，探讨热化疗治疗大肠癌的机制。方法：应用热疗联合顺铂（ＤＤＰ）在不同药物浓度、时间和温度条件下诱导ＬｏＶｏ细胞凋亡，以流式细胞仪检测其凋亡率及ｂｃｌ－２基因的表达。结果：随着药物浓度的升高、作用时间的延长，细胞凋亡率增加；热疗联合ＤＤＰ所致凋亡率大于单纯化疗组和单纯热疗组之和；随着药物浓度的升高，ｂｃｌ－２的表达下凋；各处     

茶多酚诱导人胃癌细胞凋亡

为寻找新的肿瘤细胞凋亡诱导剂，选用茶的主要活性成分茶多酚，采用噻唑蓝（ＭＴＴ）还原法，ＤＮＡ凝胶电流透射电镜技术，观察茶多酚对人胃癌细胞（ＭＧＣ－８０３）凋亡的影响。结果表明，被１２５μｇ．ｍｌ＾－１茶多酚２４ｈ后，ＭＧＣ细胞进行凝胶电泳呈现出典型的ＤＮＡ条带，透射电镜下看到凋亡小体；茶多酚对ＭＧＣ细胞凋亡的诱导活性平行于它的细胞毒作用。     

凋亡素与热休克蛋白70启动子区热休克元件特异结合诱导HepG2细胞凋亡

目的 探讨凋亡素下调HepG2细胞热休克蛋白70 (HSP70)的分子机制.分析凋亡素与HSP70启动子区热休克元件(HSE)的相互结合作用.方法 应用凝胶电泳迁移率分析(EMSA)法检测凋亡素与HSE的结合;荧光素酶报告基因实验进一步分析凋亡素在细胞内与HSE的结合能力.结果 EMSA结果表明凋亡素在体外和细胞水平可以直接与HSP70启动子区的HSE结合,凋亡素浓度越高,与HSE结合能力越强;Luciferase报告基因结果显示凋亡素对HSE具有专一的结合能力,揭示在与HSE结合上,凋亡素与HSF1间存在竞争关系.结论 凋亡素与HSP70启动子区HSE序列结合,抑制HSP70转录的起始,显著下调HSP70的表达,解除HSP70对肿瘤细胞的保护作用,诱导肿瘤细胞的凋亡.     

flavopiridol体外诱导人尤文肉瘤细胞凋亡机制的研究

目的:探讨细胞周期蛋白激酶抑制剂flavopirido(lFP)体外抑制人尤文肉瘤细胞(WE-68细胞)增殖及诱导凋亡作用机制。方法:四甲基偶氮唑蓝(MTT)还原法测定细胞活力;流式细胞计数法检测细胞周期和凋亡率。免疫印迹(Western blot)法检测Bcl-2、Bax、活化型多聚ADP核糖多聚酶(PARP-85)、pro-caspase-3和活性型caspase-8蛋白水平的表达。结果:FP通过诱导细胞凋亡抑制WE-68细胞生长,并呈时间和剂量依赖性,Bcl-2和Bax的蛋白表达无变化,PARP-85和活性型caspase-8的表达上调,pro-caspase-3的表达下调。结论:FP可诱导WE-68细胞发生凋亡,其机制可能与死亡受体激活信号转导途径有关。     

左旋棉酚联合低浓度阿霉素诱导纤维肉瘤细胞凋亡及其机制

目的研究左旋棉酚联合低浓度阿霉素(ADM)诱导纤维肉瘤HT1080细胞凋亡及其作用机制。方法采用噻唑蓝(MTT)检测药物对细胞的抗增殖作用,应用瑞氏-姬姆萨(WG)染色、赫斯特33258(hoechst 33258)染色、透射电镜观察细胞的形态学变化,流式细胞仪检测细胞的凋亡率和细胞周期。蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测Bcl-2、Bax蛋白的表达,比色分析法检测细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3、caspase-9的活性变化。结果左旋棉酚与低浓度ADM对HT1080细胞具有抑制增殖作用,联合应用作用增强,有浓度与时间依赖性。药物作用后出现细胞凋亡的特征性改变,琼脂糖凝胶电泳观察到梯状带型,流式细胞仪检测发现两药能诱导肿瘤细胞凋亡,联合应用更强。左旋棉酚使细胞阻滞于G1期,ADM使细胞阻滞于S期,联合应用S期的细胞明显增加。细胞内Bcl-2蛋白表达减少,Bax蛋白表达增多,同时出现caspase-9、caspase-3的相继活化,联合应用变化更加明显。结论左旋棉酚与低浓度ADM对纤维肉瘤HT1080细胞有明显抑制增殖及诱导凋亡的作用,联合应用作用加强。     

昆明鼠纤维肉瘤细胞系的建立及特性

对昆明鼠自发性纤维肉瘤细胞进行体外培养并建立昆明鼠纤维肉瘤细胞系（ＫＭＦ９２）至１９９２年１２月已传８９代群体倍增时间９６ｈ，集落形成率２６７％，染色体众数７９～８１条，细胞异型性明显，成束或漩涡状排列胞质内未见肌微丝，胞质粗面内质网甚多，外质膜未见外板ＫＭ，ＢＡＬｂ／ｃ鼠移植生长瘤结，并保持原发瘤生物特征ＫＭＦ９２的建立，有利于纤维肉瘤细胞生物学的研究及抗癌药筛选，并可进一步研究昆明鼠的生物学特性     

Bim对热疗诱导的人宫颈癌Hela细胞凋亡的作用

目的研究Bim在热疗诱导的人宫颈癌Hela细胞凋亡中的作用。方法用不同温度(41、42.5、43.5℃)水浴对Hela细胞加热刺激,处理后继续培养24 h。用Hoechst 33258染色细胞核,计数细胞凋亡率;采用Western blot方法检测Bim及Caspase-3蛋白的表达水平;用lipofectamine 2000转染干扰片段后观察干扰效率及对凋亡的保护作用。结果人宫颈癌Hela细胞受到不同温度(41、42.5、43.5℃)刺激后,分别引起约(16.81±0.23)%、(29.52±0.56)%和(31.22±0.67)%细胞凋亡。Bim mRNA及蛋白质呈温度依赖地表达上调。小分子干扰Bim的表达后,细胞凋亡率从(30.51±0.54)%下降到si-Bim-1(12.52±0.67)%、si-Bim-2(15.23±0.43)%。结论 Bim介导了热疗诱导的人宫颈癌Hela细胞凋亡,可能在热疗治疗宫颈癌中发挥重要作用。     

热休克对卵巢癌细胞凋亡影响的实验研究

目的：探讨热休克对卵巢癌细胞A2780经TNF－α诱导凋亡的影响,为卵巢癌细胞凋亡与热休克相关关系提供实验依据。方法：采用脱氧核苷酸末端转移酶介导的DUTP缺口末端标记法（TUNEL）检测细胞凋亡指数（AI）,^3H-TdR掺入试验检测DNA合成情况。结果：热休克组凋亡指数比非热休克组的凋亡指数明显下降,差异有显著性意义,且呈剂量依赖效应,cpm值热休克组细胞比非热休克组明显增高,抑制率下降,也呈剂量依赖效应。结论：热休克对卵巢癌细胞A2780凋亡具有抑制作用,且呈剂量依赖效应。     

荷肉瘤小鼠肿瘤细胞凋亡显像实验研究

目的制备细胞凋亡显像剂99mTc-annexinⅤ,并在荷肉瘤小鼠体内对凋亡肿瘤组织进行活体显像。方法利用硫酸铵沉淀和Octyl-Sepharose疏水层析纯化来源于毕赤酵母重组表达、带有内在螯合位点的annexinⅤ。通过葡庚糖酸盐配体在annexinⅤ上直接标记放射性核素99mTc,SephadexG-25脱盐处理制备99mTc-annexinⅤ。在Balb/C小鼠右侧腋下接种肉瘤株S-180,1周后荷肉瘤小鼠经腹腔注射化疗药物环磷酰胺诱导肉瘤细胞凋亡。化疗18h后经小鼠尾静脉注射99mTc-annexinⅤ,扫描6h后肿瘤组织的SPECT图像。分别于放射性药物注射后0.5、1、3、6h处死动物,测定各脏器、组织的放射性计数,分析99mTc-annexinⅤ在荷肉瘤小鼠体内的生物分布。结果经过硫酸铵沉淀和Octyl-Sepharose疏水层析纯化,annexinⅤ纯度达到95%。直接标记和脱盐处理制备出的99mTc-annexinⅤ放射性化学纯度为90%。将99mTc-annexinⅤ注射到环磷酰胺处理的荷肉瘤小鼠体内,肿瘤组织能够显像。结论我们标记合成了99mTc-annexinⅤ,该探针可以活体显示肿瘤组织的凋亡情况,可能为临床应用和药物开发提供了一种手段。     

丝裂霉素诱导人膀胱癌细胞凋亡的研究

为进一步探讨丝裂霉素膀胱内灌注治疗膀胱肿瘤的机制，研究丝裂霉素诱导人膀胱癌ＢＩＵ－８７细胞凋亡的规律，形态学观察具有典型凋亡征象，胞浆浓缩，染色质凝集，核固缩，裂解及凋亡小体。凋亡指数与诱导时间呈正相关（Ｐ〈０．０１）；流失细胞仪ＤＮＡ直方图上出现特征性的亚二倍体（亚Ｇ１）峰，凋亡过程中伴Ｂｃｌ－２基因的下调，且与诱导时间呈负相关（Ｐ〈０．０１），提示丝裂霉素诱导癌细胞凋亡是腔内化疗的重要机制，降     

中药诱导白血病细胞凋亡研究近况

细胞凋亡 ( apoptosis)或程序化细胞死亡( programmed cell death,PCD)是由基因控制的细胞主动死亡过程。自从 70年代初病理学家 Kerr等发现细胞凋亡以来 ,关于细胞凋亡的研究受到人们的重视。细胞凋亡不仅发生于胚胎发育过程中 ,而且也出现在成年的表皮、肠道、造血等组织器官     

中药诱导肝癌细胞凋亡

凋亡(apoptosis)一词由Kerr于1972年首先提出.细胞凋亡是指在特定时空中发生的、受机体严密调控的细胞"自杀"现象,它呈现其独特的、有别于细胞坏死的形态学和生物化学特点,被普遍认为是有机体维持个体内稳态恒定的极其重要的机制之一.它与有丝分裂相反而又互补,并共同参与调控细胞群落、细胞数量的恒定,其调控机制的失常则是包括肿瘤在内的一系列疾病的产生根源.因此,细胞凋亡已成为当前细胞生物学,尤其是肿瘤学基础与临床研究的前沿与热点.近年来,有关中药诱导肝癌细胞凋亡的研究报道逐年增多.作者简介:李柏(1964-),男,博士研究生,副教授.     

大肠癌与细胞凋亡及诱导凋亡治疗

大肠癌为常见的恶性肿瘤,细胞凋亡调控失常在其发生和发展中起着重要作用。近年来,随着对大肠癌与细胞凋亡相关机制研究的不断深入,诱导细胞凋亡治疗成为大肠癌治疗的一个新的研究方向。该文就大肠癌与细胞凋亡及诱导凋亡治疗的相关研究进展进行综述。     

大肠癌与细胞凋亡及诱导凋亡治疗

大肠癌为常见的恶性肿瘤,细胞凋亡调控失常在其发生和发展中起着重要作用.近年来,随着对大肠癌与细胞凋亡相关机制研究的不断深入,诱导细胞凋亡治疗成为大肠癌治疗的一个新的研究方向.该文就大肠癌与细胞凋亡及诱导凋亡治疗的相关研究进展进行综述.     

热休克蛋白与细胞凋亡的关系

就热休克蛋白(heat shock protein，HSP)与细胞凋亡的关系及HSP参与细胞凋亡的机制作一综述。