恶性疟原虫子孢子从猴感染给猴的实验

Collins等(1972)报告按蚊能感染夜猴的恶性疟原虫,并能传染给人或猩猩,完成孢子生殖环。但至今用子孢子从猴感染猴仅有一次成功。Sodeman等(1969)观察到夜猴体内恶性疟原虫红细胞外期裂殖体的部分发育,但染色后表现异常,也不释放感染性裂殖子,认为夜猴的肝细胞里缺乏一种裂殖子发育成熟所必需的物质。从野外捕回来经实验感染的夜猴,在肝组织的病理检查中,6只夜猴中发现2只有进行性脂肪肝或水肿性的肝     

应用合成肽研究针对间日疟原虫子孢子的抗体反应

在哺乳动物宿主体内,疟原虫子孢子能诱导一种具有种和期特异性的主要针对环子孢子蛋白重复序列的抗体反应。间日疟原虫环子孢子蛋白的重复区域包括9种氨基酸的大约20次重复,它们是天冬氨酸-精氨酸-丙氨酸-天冬氨酸-甘氨酸-谷氨酸-脯氨酸-丙氨酸-甘氨酸(DRADGQPAG,称为变异体D)或天冬氨酸-精氨酸-丙氨酸-丙氨酸-甘氨酸-谷氨酸-脯氨酸-丙氨酸-甘氨酸(DRAAGQPAG,称为变异体A)。迄今为止,已进行的序列分析表明不同地理株虫体环子孢子蛋白内的D和A变异体的排列各异。为了产生D和A变异体对的可能结合,即DD,     

一种与间日疟原虫相类似的猴疟原虫:吼猴疟原虫的环子孢子蛋白基因

环子孢子蛋白(CSP)是一种种特异的子孢子表面蛋白,也是一种疫苗候选抗原。CSP基因的重复和非重复序列相关的结构特征,也用于研究疟原虫演化相关的标志。吼猴疟原虫(P.simium)的形态和生物学均与间日疟原虫近似,它们感染的红细胞均有薛氏点,但在蚊内发育的时间较间日疟     

用食蟹猴疟原虫子孢子感染豢养的食蟹猴

在生活史的许多方面与人间日疟原虫相似的食蟹猴疟原虫(Plasmodium cynomolgi)已广泛用于抗疟药及红外期的研究。能感染该虫的灵长类虽有多种,但一般均用猕猴作试验。近因来源短缺且幼猴价昂,已影响研究工作的进行。为解决供根治药试验的猴模型。作者用捕获的食蟹猴(Macaca fascicularis)繁衍的后代进行了感染试验。接种子孢子量及切脾对原虫血症的影响:共用18只食蟹猴(♂11,♀7)进行试验。4只为小剂量组(接种子孢子0.8～1.7×10~6个),8只为大剂量组(3～10×10~6个),另     

啮齿动物约氏疟原虫期特异性和种特异性的单克隆抗体及交叉反应抗原

疟原虫感染可产生抗疟原虫抗体,但诱导这些抗体应答的抗原数量和位置以及其特征仍不清楚。过去在识别和分离个别疟原虫抗原以及评定其对免疫的产生和抑制作用亦很困难。而现今应用杂交瘤技术使有可能产生大量对单一疟原虫抗原决定簇的单克隆抗体,并用以识别和最终纯化疟原虫抗原。本文报道了用18种杂交瘤细胞系研究啮齿动物约氏疟原虫的种特异性,期特异性以及血清交叉反应抗原的情况。     

用恶性疟原虫子孢子免疫对人的防护作用的特异性

试验的结果如下: 1.一名从未患过疟疾的健康受试者,在421天内间隔不同时间,先后受严重感染缅甸(Thau)株(抗4—氨基喹啉和乙胺嘧啶)恶性疟原虫子孢子经X线平均剂量17,500拉德照射过的按蚊叮咬13次,共接受减弱的子孢子1,441个。在第98天和327天,这个受试者和几个未免疫的对照者同时受感染同株     

人疟原虫的子孢子与红内期虫体间具有免疫交叉反应的证据

疟原虫在哺乳类宿主体内的发育是复杂的,不少研究认为子孢子表面与红内期原虫间无共同抗原。但本文证明,人恶性疟原虫子孢子表面与红内期原虫具有共同抗原,此抗原并能刺激人体发生强免疫应答。作者以间接免疫荧光法,用抗人工培养的恶性疟原虫泰国株(Kl)的单克隆抗体,测试恶性疟原虫子孢子,在22个单克隆抗体中,有一个(McAb5.1)与子孢子呈强阳性反应,其稀释滴度高达1:10~6;而且,其对子孢     

人恶性疟原虫(缅甸Thau株)子孢子传播给夜猴

作者将重度感染疟原虫子孢子的斯氏按蚊(印度株)26只,分为2组,每组各分别饱吸已切除脾脏的夜猴Ao-073和Ao-176的血液。在实验开始前的30天内,对各猴作数次血涂片检查疟原虫。在接种的前一天,给Ao-073腹腔注射1毫升免疫抑制剂——硫唑嘌吟(Imuran,每毫升含50毫克)和以后6周给予口服0.2克dl-蛋氨酸(Pedameth),每周5天。Ao-176仅用硫唑嘌吟。2天后,对1毫升冷却蚊虫培养基内尚存活的蚊虫进行涎腺解剖,将0.5毫升捣碎的含有子孢子的涎腺给各猴静脉接种,而后隔日作血涂片检查疟原虫。     

以种特异性的放射免疫法测定蚊体内疟原虫子孢子的实验室评价

本文报道以单克隆抗体(Mab)放射免疫法(RIA)检测按蚊体内的疟原虫子孢子抗原。实验使用3种单克隆抗体,其中2种为抗诺氏疟原虫子孢子(2G3和8E11),另一种为抗食蟹猴疟原虫子孢子,实验蚊均自泰国分离的大劣按蚊。将受检蚊置塑料微量离心管内,用玻璃棒研碎,加入50μl蛋白酶抑制剂PBS,通过     

经EB病毒转化的人淋巴细胞产生抗恶性疟原虫子孢子的抗体

为了制备抗恶性疟原虫红内期无性体的人体单克隆抗体,作者曾用聚蔗糖-泛影葡胺液密度梯度离心获得的外周血淋巴细胞,与EB病毒的细胞株B95-8于37℃培养1小时后,以含有20%V/V胎牛血清、100IU/ml青霉素、100mg/ml链霉素和2 mmol/l谷氨酰胺的RPMI 1640培养基制成10~6细胞/ml的悬液。将上述淋巴细胞加入25 ml Falcon     

杂交细胞瘤直接对疟原虫子孢子产生的保护性抗体

作者以γ-射线照射感染伯氏疟原虫的蚊子反复叮咬免疫BALB/c株小鼠。再以1.4×10~8免疫小鼠脾细胞和1.4×10~7浆细胞瘤(P3U1)细胞,按Kohler和Milstein方法杂交。杂交细胞瘤培养物是否产生子孢子抗体,用间接免疫荧光试验或子孢子沉淀(CSP)反应测定。经测定600个杂交细胞瘤培养物,其中5个的上清液于融合后2周有子孢子抗体产生,但只有1个杂交瘤细胞系(3D11)繁殖成功,现保种于含10%胎牛血清     

间日疟原虫环子孢子蛋白Ⅱ区抗体的精细表位特异性与结合重组蛋白和子孢子的能力有关

子孢子表面蛋白(环子孢子蛋白CSP)是疟原虫疫苗的主要候选蛋白,大量研究表明无论是针对CSP重复区表位或非重复区表位的抗体应答都具有重要性。 本文作者检测了自然暴露于间日疟原虫的人群血清对一些CSP重叠肽的抗体特异性,包括对重复区和重复区以外区,特别是Ⅱ~+区的抗体的特异性,此外还研究了间日疟原虫CSPⅡ~+区合成肽在小鼠体内的免疫原性和Ⅱ区特异性抗体识别间日疟原虫子孢     

恶性疟原虫合子/动合子、表面蛋白Pfs25特异性传播阻断抗体亦影响子孢子的发育

已知Pfs25表达于刚形成的配子的表面,并持续存在于合子和动合子期,其与抵御蚊中肠的消化,动合子的运动,穿透围食膜及识别中肠表皮细胞受体等功能有关。由于Pfs25特异性单抗系传播阻断性抗体,因此该蛋白被认为是传播阻断疫苗的主要候选抗原。本文目的在于探讨Pfs25是否存在于卵囊期,如果存在,其特异性抗体是否影响卵囊的发育。3～5日龄斯氏按蚊或冈比亚按蚊感染恶性疟原虫配子体(NF54)后,于第3,6,8天     

恶性疟和间日疟原虫子孢子传播的效能

为了了解疟疾流行区子孢子接种率以及接种率与原虫率之间的关系,在巴布亚新几内亚选择马当周围22km内的8个村为调查区。当地疟疾全年严重传播,主要媒介为刻点按蚊种团。1983年9月～1984年6月进行疟疾调查,包括脾肿率、疟原虫种类、原虫率     

感染恶性疟原虫或间日疟原虫蚊体内子孢子和环子孢子抗原的定量测定

准确地估计蚊虫体内疟原虫子孢子的数量对于疟疾的监测、预防和媒介控制都是非常必要的。目前使用的蚊虫体内子孢子数量测定法是定量环子孢子(CS)ELISA试验。该法快速、准确,具有种特异性。但近年来的实践证明,该法需要改进。为使目前用于恶性和间日疟原虫子孢子定量检测的CS ELISA法试剂标准化,以及进一步确定蚊虫体内CS抗原量与子孢子数之间的相关性,开展了双抗体夹心法ELISA定量测定恶性疟原虫(Pf)、间日疟原虫(Pv210)和Pv247CS抗原和子孢子的研究。抗Pf、Pv210和Pv247CS抗原的单克隆抗体(MAb)来自WHO疟疾子孢子参考实验…     

人环子孢子抗体对感染疟原虫按蚊的影响

蚊媒吸血时获得的人体环子孢子(CS)抗体能否影响子孢子的感染性目前尚有争议。作者对西肯尼亚恶性疟高发地区的媒介——冈比亚按蚊(An.gambiae)和催命按蚊(An.funestus)作了调查,包括野栖按蚊     

伯喹和向溶酶体胺抑制疟原虫子孢子侵入人肝细胞

哺乳类动物的疟疾感染是从子孢子进入血循环而后侵入肝实质细胞后开始。据报道子孢子侵入肝实质细胞是子孢子对肝细胞表膜的识别而后结合的特异性过程,此过程可为向溶酶体胺类药剂所破坏。为进一步观察这种作用,作者以伯喹和向溶酶体胺类进行了如下的实验。实验使用Hep G_2人肝肿瘤细胞。斯氏按蚊叮咬伯氏疟原虫感染的NIH/NMRI小鼠血21天后解剖,取其唾腺,在灭活鼠血清中分离获得子孢子。子孢子侵入肝细胞的试     

人血清与一种间日疟原虫环子孢子蛋白变异重复肽的广泛反应性

最近从泰国分离获得一株含环子孢子(CS)蛋白变异重复肽的间日疟原虫(Thai VK 247),它和所有已知的间日疟原虫CS蛋白均不同。本文报告了以合成的Thai VK 247CS蛋白对1987年从巴西亚马逊丛林地区2个部     

用人和猴的血孢子虫抗原检验人疟原虫萤光抗体的灵敏度

为了观察疟原虫(恶性疟、P.fieldi、P.cynomolgi langur和Hepatocystis kochi)抗原进行萤光抗体试验(IFA)时的交叉反应,作者用以下方法制备4种抗原玻片:用P.fieldi和P.cynomolgi虫株实验感染切脾的南非小猴,在裂殖增殖前8天内感染上升期采血制成薄的抗原涂片(原虫密度为每个高倍视野5个以上)。恶性疟抗原取自带虫的人体胎盘,将胎盘的母体面纵切开,在无菌的pH7.2磷酸缓冲盐水中榨出内容物,将血—磷酸缓冲盐水混合液以2,500转/分离心10分钟,弃去上清液,然后将沉积的细胞混悬     

在冈比亚婴儿中检出先天传递的抗疟原虫子孢子抗体

鉴于非洲婴儿在初生的几个月内对疟疾有抵抗力,作者等在西非的一个恶性疟高度流行区,研究了抗子孢子抗体是否能从有自然免疫的母亲被动地传给她们的子女。研究的对象为20名母亲及其新生儿。全部婴儿用血涂片法在3个月内均未检出疟原虫。恶性疟原虫子孢子是用冈比亚按蚊离体吸含配子体血感染后,饲养在实验室,然后解剖唾腺所得。疟原虫子孢子期的特异抗体是用环子孢子沉淀反应(CSP)和间接荧光抗体试验(IFA)检出的。在孵育后的未经稀释的血浆标本中,若有10%以上活的子孢子形成末端沉淀,即为环子孢子沉淀反应阳性。荧光抗体反应是用成二醛固定的恶性疟子孢子孵育血浆稀释液,然后用FITG结合的抗人IgG染色。