家兔极低密度脂蛋白受体的组织分布研究

极低密度脂蛋白受体(VLDLR)在介导甘油三酯代谢的过程中起重要作用.目前已经知道,vLDLR分为两种类型其一带有O-连结的糖链区(I型),另一种则不带有该区域(Ⅱ型).采用RT-PCR技术获得家兔VLDL受体的cDNA,PCR扩增后经电泳鉴定显示在选取的全部六种组织中均有I型受体分布,并且在脂肪、肝脏、脾脏三种组织中还同时伴有Ⅱ型受体的分布.该结果支持受体与组织能量代谢密切相关这一观点,并提示Ⅱ型受体可能具有除参与脂代谢之外的其它不为人知的重要功能.     

极低密度脂蛋白受体亚型与脂蛋白的结合效应及其摄取能力的差异

目的 探讨人极低密度脂蛋白受体（VLDLR）不同亚型与配体的结合效应及其摄取能力的差异，明确其在脂蛋白代谢和泡沫细胞形成中的作用。方法 应用基因重组技术获得分别稳定表达全长VLDLR（I型）和（Mink糖链区缺失的VLDLR（Ⅱ型）的ldlA7细胞株。核素标记VLDLR的天然配体VLDL、β-VLDL以观察配体结合能力；以VLDL温育细胞，检测细胞内脂质含量，油红O染色法观察胞内脂质堆积及泡沫细胞形成情况。结果 实验发现，稳定表达Ⅰ型VLDLR的ldl—A7细胞表面结合^125I-VLDL和^125I-β—VLDL的量与胞内甘油三酯和总胆固醇的含量均明显高于表达Ⅱ型VLDLR的ldl—A7细胞，泡沫细胞形成显著。结论Ⅰ型VLDLR与VLDL、β-VLDL的结合和摄取能力明显高于Ⅱ型VLDLR，泡沫细胞形成过程中Ⅰ型VLDLR发挥着重要作用。     

Ⅰ型和Ⅱ型TGF—β受体在人增生性瘢痕和瘢痕疙瘩中表达的研究

运用免疫组化技术检测增生性瘢痕（HTS）和瘢痕疙瘩（KS）中Ⅰ型（RⅠ）和Ⅱ型（RⅡ）TGF－β受体的表达和分布情况，了解TGF－β受体在人HTS和KS形成中的作用。结果发现，HTS成纤维细胞（Fb）表面RⅠ和RⅡ有阳性表达，而且随着病程的延长，受体表达逐渐减弱，直到消失；KS浸润部Fb表面RⅠ和RⅡ呈强阳性表达，中央部未见受体表达阳性的Fb；正常皮肤Fb表面受体表达阴性。提示在HTS形成过程中，不仅TGF－β增高，Fb表面Ⅰ型和Ⅱ型TGF－β受体也增高，使TGF－β作用放大；TGF－β及其受体可能与KS的浸润性生长有关。     

重组生长激素对烫伤创面PDGF及其受体的影响

目的研究重组生长激素（ｒｈＧＨ）在促进创面愈合过程中对血小板源性生长因子（ＰＤＧＦ）及其受体的影响。方法采用大鼠深Ⅱ度烫伤模，观察大鼠深Ⅱ度烫伤后创面愈合过程中ｒｈＧＨ对ＰＤＧＦ、血小板源性生长因子受体（ＰＤＧＦＲ）、Ⅰ、Ⅲ型胶原、组织形态学和血胰岛素样生长因子Ⅰ（ＩＧＦ－Ⅰ）变化的影响。结果用ｒｈＧＨ治疗５、１０ｄ后，其创面ＰＤＧＦ、ＰＤＧＦ－α受体、ＰＤＧＦ－β受体的表达明显增强，Ⅰ、Ⅲ型胶原     

肾病综合征大鼠血管紧张素Ⅱ系统的变化及意义

目的：探讨血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）在肾病水肿及蛋白尿形成中的作用。方法：采用放射免疫分析及逆转灵－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术，检测了阿霉素肾病大鼠血浆和肾组织ＡｎｇⅡ含量及肾血管紧张素Ⅱ－Ⅰ型受体（ＡＴ１Ｒ）ｍＲＮＡ表达。结果：阿霉素肾病组血浆及肾组织ＡｎｇⅡ水平均高于正常对照，而肾ＡＴ１ＲｍＲＮＡ表达较正常减 。结论：表明阿霉素肾病大鼠存在ＡｎｇⅡ及其受体的异常ＡｎｇⅡ通过影响肾小球血流动     

隔药灸调节大鼠溃疡性结肠炎肠纤维化TGF-β及其受体的研究

目的：观察隔药灸对大鼠溃疡性结肠炎肠纤维化结肠组织TGF－β及其受体基因表达的影响，探讨隔药灸防治大鼠溃疡性结肠炎肠纤维化的相关机制。方法：在建立大鼠溃疡性结肠炎肠纤维模型的基础上，采用针灸进行治疗，疗程结束后，剖取大鼠结肠组织，应用RT－PCR法检测各组动物结肠组织中TGF－β1及其TGF－βRⅠ、TGF－βRⅡmRNA表达情况，结果：与正常动物相比较，模型大鼠结肠组织中TGF－β1及其TGF－βRⅠ、TGF－βRⅡmRNA表达均有显著的上升，经隔药灸治疗则可明显改善这种异常状况，结论：隔灸防治溃疡性结肠炎肠纤维化可能与调节大鼠溃疡性结肠炎肠纤维化结肠TGF－β1及其受体TGF－βRⅠ、TGF－βRⅡmRNA表达，减少炎症组织TGF－β1的产生，并抑制其受体信号转导有关。     

鼻咽纤维血管瘤凝集素受体的研究

对１５例鼻咽纤维血管瘤的凝集素受体进行研究。结果表明，鼻咽纤维血管瘤组织中含有多种特异性糖蛋白，可被多种凝集素受体标记。凝集素受体呈胞膜型、胞浆型和混合型３种分布形式，定位于肿瘤上皮细胞、血管内皮细胞和间质细胞。麦胚凝集素（ＷＧＡ）受体分布广泛，说明该瘤组织中含有丰富的Ｄ－ＧａｌＮＡＣ、ＮＡＮＥ特异性结合的糖基。荆豆凝集素受体（ＵＥＡ－ｌ）仅分布在小血管和毛细血管内皮细胞膜上。在ＵＥＡ－ｌ分布广泛的瘤组织中，其小血管、纤维组织丰富，与ＷＧＡ受体分布广泛的瘤组织相比，后者出血倾向大于前者。     

血管紧张素Ⅱ1型受体mRNA和蛋白在人胰腺癌组织中的表达

目的：探讨血管紧张素Ⅱ1型受体（angiotensin Ⅱ type 1 receptor,AT1R)mRNA和蛋白在人胰腺癌组织中的表达。方法：标本取向8例手术切除的胰腺癌、癌旁组织及3例正常胰腺组织，RT－PCR方法检测人胰腺癌及正常胰腺组织中AT1R mRNA的表达；免疫组织化学方法与聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS－PAGE）检测人胰腺癌组织中蛋白的表达。结果：AT1R mRNA和蛋白在人胰腺癌组织中均有表达。RT－PCR显示AT1R mRNA在人胰腺癌组织与人正常胰腺组织中的阳性表达率分别为87．5％（7／8）和0（0／3），免疫组织化学染色显示AT1R蛋白在人胰腺癌组织中的阳性表达率为62．5％（5／8），明显高于癌旁组织的12．5％（1／8），差异有高度显著性（P＜0．01）；SDS－PAGE蛋白电泳也证实胰腺癌组织有AT1R蛋白的存在，而在人正常胰腺组织中则未见AT1R蛋白的阳性表达。结论：AT1R在人胰腺癌的生长中具有重要作用，抑制AT1R可能是一种有效的治疗策略。     

老年高血压病合并冠心病患者AT IR基因多态性的研究

目的：探讨血管紧张素Ⅱ-Ⅰ型受体（ATIR）基因A1166／C多态性与老年原发性高血压的关系，并探讨原发性高血压的发病机制。方法：应用聚合酶链式反应、限制性内切酶酶解（PCR－RFLP）的方法检测40例健康人和24例原发性高血压、31例高血压病合并冠心病患者的ATIR基因型；用生化技术测定血脂水平。结果：原发性高血压组、合并冠心病组的C等位基因频率14．6％、14．5％，分别高于正常对照组的3．7％（P＜0．05）；带有C等位基因的原发性高血压患者无论是否合并冠心病，其血浆LP（a)水平均增高。结论：提示ATIR基因可能是老年原发性高血压的重要遗传因素，ATIR基因可能参与脂质的调节。     

鼻咽纤维血管瘤凝集素受体的研究

对１５例鼻咽纤维血管瘤的凝集素受体进行研究。结果表明，鼻咽纤维血管瘤组织中含有多种特异性糖蛋白，可被多种凝休素受体标记。凝集素受体呈胞膜型、胞浆型和混合型３种分布形式，定位于肿瘤上皮细胞、血管内皮细胞和间质细胞。麦胚凝集素（ＷＧＡ）受体分布广泛，说明该瘤组织中含有丰富的Ｄ－ＧａｌＮＡＣ、ＮＡＮＥ特异性结合的糖基。荆豆凝素集素受体（ＵＥＡ－１）仅分布在小血管和毛细血管内皮细胞膜上。在ＵＥＡ－１分布广     

Ⅳ型胶原、Ⅳ型胶原酶及TIMP-1在喉癌组织中的表达

目的：探讨Ⅳ型胶原、Ⅳ型胶原酶及组织基质金属蛋白酶抑制剂－1（TIMP－1）在喉癌组织中的表达及意义。方法：应用免疫组化方法对44例喉癌组织及22例喉癌旁正常组织中Ⅳ型胶原、Ⅳ型胶原酶（包括MMP－2和MMP－2）及TIMP－1的表达进行了检测。结果：与正常组织相比，喉癌组织中Ⅳ型胶原的表达明显降低，MMP－2、MMP－9及TIMP－1的表达明显增高，差别均有显著性意义（P＜0．01）；喉癌组织中Ⅳ型胶原表达的阳性率，有颈淋巴结转移者低于无颈淋巴结转移者（P＜0．05），Ⅲ－Ⅳ期低于Ⅰ-Ⅱ期（P＜0．05），G2－3低于G1（P＜0．01）； MMP－2表达水平，Ⅲ-Ⅳ期高于Ⅰ-Ⅱ期（P＜0．05），G2－3，高于G1（P＜0．01），N0与N1－3间无显著差别（P＞0．05）；MMP－9的表达水平，N1－3高于NP（P＜0．05），在Ⅲ-Ⅳ期与Ⅰ-Ⅱ期、G2－3与G1间无显著差别（均P＞0．05）。结论：Ⅳ型胶原、Ⅳ型胶原酶及TIMP－1的表达与喉癌进展及其肿瘤生物学行为相关。     

胰岛素样生长因子基因在胸腺的表达与分布

胰岛素样生长因子基因在胸腺的表达与分布杨毅陈莲章红志曹凌峰本课题为国家自然科学基金资助项目作者单位：２０００３２上海医科大学儿科医院胰岛素样生长因子（ＩＧＦｓ）是人体最重要的生长因子之一，由两种多肽（ＩＧＦ－Ⅰ，ＩＧＦ－Ⅱ）、两类受体（ＩＧＦ－ＩＲ，...     

重症肌无力患者烟碱型乙酰胆碱受体抗体致鼠脑干听觉诱发电位

目的：神经肌接头（NMJ）处乙酰胆碱（ACh）传递障碍，是重症肌无力（MG）发病机制．然而，近年有研究表明部分MG患者有中枢神经系统（CNS）受损的症状和神经电生理方面的异常表现，本研究为探讨其机制．方法：从烟碱型乙酰胆碱受体抗体（nAChR－ab）阳性的全身型MG患者血清中提取IgG，将其注入SD大鼠脑室系统，观察其对脑干听觉诱发电位（BAEP）的影响．结果：nAChR－ab使脑干听觉传导功能异常，表现为Ⅰ波后各波消失，Ⅰ-Ⅱ,Ⅰ－ⅤIPLs延长，Ⅴ／Ⅰ波幅比值降低．表明MG患者nAChR－ab可能与CNS中的神经-烟碱型乙酰碱受体…     

IGF-ⅠR、IGF-ⅡR反义基因对SMMC-7721肝癌细胞生物学行为的影响

目的 研究胰岛素样生长因子I型及Ⅱ型受体（IGF－ⅠR、IGF-ⅡR）反义基因对SMMC－7721肝癌细胞生物学行为的影响。方法 应用反义技术，在已转染了IGF－Ⅰ R反义基因的肝癌SMMC－7721（7721－IGF－I R－AS）细胞基础上，继续利用IGF-ⅡR反义基因真核表达系统，通过DOTAP脂质体介导的转染技术，将IGF－ⅡR反义基因导入该细胞，经G418及潮霉素双重筛选获得稳定表达IGF－ⅠR、IGF-ⅡR反义基因的7721－IGF－R－AS细胞。采用电镜、电镜观察形态学变化，双层软琼脂克隆形成实验、MTT细胞生长曲线；在软琼脂培养基中的生长能力降低（P＜0．01）；在裸鼠体内的致瘤能力也降低（P＜0．05）；但细胞生长曲线与对照组比较则无明显差异。结论 IGF－ⅠR、IGF-ⅡR反义基因对SMMC－7721肝癌细胞的恶性行为有明显抑制作用。利用反义技术干预肝癌细胞生长因子受体基因表达可能给肝癌的基因治疗提供新的途径。     

Musashi -1和尾侧型同源转录因子2在肠上皮化生及胃癌组织中的表达及意义

目的：探讨Musashi－1（Msi－1）和尾侧型同源转录因子2（CDX2）在损伤胃黏膜组织中表达的相互关系及意义。方法采用免疫组织化学EnVision二步法和免疫荧光双标法检测Msi－1和CDX2蛋白在慢性浅表胃炎（CSG），Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型肠上皮化生（IM），低级别上皮内瘤变（LIN）及早期胃癌（EGC）组织中的表达情况。结果免疫组化显示：CSG，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型IM，LIN，EGC中Msi－1的阳性表达率分别为22.2％、42.4％、60.6％、77.3％、87.9％、92.4％，CDX2的表达阳性率分别为13.9％、84.8％、83.3％、63.6％、50.0％、31.8％，CSG与各组织比较差异均有统计学意义（ P＜0.05），在IM组织中Msi－1和CDX2表达之间呈弱相关性（礸2＝4.383，C＝0.147，P＜0.05）。免疫荧光双标显示：CSG中并未见到Msi－1、CDX2共表达，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型IM，LIN及EGC组织中Msi－1、CDX2共表达率分别为（32.64±9.01）％、（43.82±10.09）％、（52.27±9.00）％、（57.19±12.64）％、（28.71±7.52）％，其中Ⅰ型IM与EGC、Ⅲ型IM与LIN比较差异无统计学意义（P＞0.05），其余两两比较差异均有统计学意义（ F＝16.194，P＝0.000）。结论 Msi－1、CDX2表达及Msi－1、CDX2共表达与IM存在相关性，Msi－1、CDX2共同表达可能是促使IM组织向胃黏膜瘤变进展的相关因素。     

皮肤黑色素瘤细胞中TGF-βRⅠ型和Ⅱ型受体表达的研究

目的：探讨转化生长因子β受体（TGF‐βR）Ⅰ、Ⅱ型在皮肤黑色素瘤细胞中的表达情况。方法应用反转录‐实时荧光定量PCR（RT‐PCR）和蛋白免疫印迹（Westernblot）方法,对TGF‐βRⅠ、Ⅱ型的mRNA及其蛋白在人皮肤黑色素瘤A375细胞和人正常黑素细胞中的表达进行检测。结果A375细胞中TGF‐βRⅠ、Ⅱ型的mRNA和蛋白表达均显著低于正常人黑素细胞。结论在黑色素瘤细胞的TGF‐β／Smad信号通路中出现TGF‐βR表达的下调,可能是皮肤黑色素瘤发病机制之一。     

天津地区IL-1 Ra基因内含子2可变串联重复序列与脓毒症的相关性研究

目的：探讨白细胞介素-1受体拮抗剂（IL-1 Ra）基因第2内含子中可变串联重复序列（VNTR）多态性与脓毒症的相关关系。方法：应用PCR法,观察90例脓毒症患者、120例健康对照者的IL-1 Ra基因VNTR多态性的分布。结果：两组人群中共发现了IL-1 RNI／I、IL-1RN Ⅰ／Ⅱ、IL- 1RNI／Ⅳ3种基因型,以I型等位基因为主,未发现Ⅲ型和Ⅴ型。正常对照组中Ⅱ型等位基因和Ⅰ／Ⅱ基因型的分布频率与脓毒症组相比明显增加（8％vs2％,P〈0．05;17％vs4％,P〈0．05）。另外,不携带Ⅱ型等位基因的基因型（Ⅰ／Ⅰ和Ⅰ／Ⅳ）和非Ⅱ型等位基因携带者（Ⅰ,Ⅳ）与携带Ⅱ型等位基因的基因型（Ⅰ／Ⅱ）和Ⅱ型等位基因携带者相比发生脓毒症的相对危险度分别为4．3和4．0。结论：I-1RN Ⅱ型等位基因可能在脓毒症的发生发展过程中具有潜在的保护作用。     

单纯疱疹病毒Ⅰ型Stocker株gD膜外区基因的克隆与序列测定

目的：为了克隆单纯疱疹病毒Ⅰ型（HSV－1）gD膜外区基因。方法：采用Vero细胞培养HSV－I Stocker株,并提取病毒DNA作为PCR模板。PCR扩增出的gD片段经EcoR Ⅰ和Pst Ⅰ双酶切,插入质粒pB220相应位点,转化E.coliDH5α。重组质粒经PCR、酶切鉴定命名为pBV220-gD。对克隆的HSV－I Stocker株gD基因进行序列,并与其他HSV－Ⅰ,ⅡgD基因相应部分进行比较。结果：核苷酸序列同源性分别为99．77％、86．55％,氨基酸序列同源性分别为99．31％、88．28％。结论：SHV－Ⅰ gD基因的克隆为表达该基因,进一步研制重组抗原诊断试剂、研究亚单位疫苗及gD,gD受体的结构功能奠定了基础。     

洛汀新对阿霉素肾病大鼠肾血管紧张素Ⅱ-Ⅰ型受体基因表达的影响

目的观察血管紧张素转化酶抑制剂洛汀新对阿霉素肾病（ＡＮ）大鼠肾脏血管紧张素Ⅱ（ＡＴⅡ）浓度及受体表达的影响。方法采用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术检测大鼠肾组织血管紧张素Ⅱ－Ⅰ型受体（ＡＴ１Ｒ）ｍＲＮＡ表达情况，以放射免疫分析法测定血浆及肾组织ＡＴⅡ含量。结果洛汀新可降低ＡＮ大鼠血浆及肾组织ＡＴⅡ含量，使肾脏ＡＴ１ＲｍＲＮＡ表达增强。结论洛汀新对ＡＮ大鼠肾脏ＡＴ１ＲｍＲＮＡ表达的影响与降低血浆及肾组织ＡＴⅡ含量有关。     

大鼠脑神经生长因子受体分布的实验研究

本文报道了一种测定脑内神经生长因子（ＮＧＦ）受体的竞争性结合分析法。应用１２５Ｉ－ＮＧＦ作为放射配基，在含有过量未标记ＮＧＦ条件下，１２５Ｉ－ＮＧＦ与不同脑组织细胞膜于３７℃下孵育３０ｍｉｎ达到可逆的平衡状态的。Ｓｃａｔｃｈａｒｄ分析，根据其与配体亲和力的不同分为高亲和力（Ⅰ型）与低亲和力（Ⅱ型）结合位点两种受体亚型，平衡解离常数（Ｋｄ）分别约为４ｐｍｏｌＬ－１及１．６ｎｍｏｌＬ－１，最大结合能力（Ｂｍａｘ）约为０．５ｆｍｏｌ／Ｌｍｇ－１（蛋白）及２４ｆｍｏｌ／Ｌｍｇ－１（蛋白）。脑内各分区ＮＧＦ受体的结合容量依次为中隔、小脑、脑干、大脑皮质、下丘脑、嗅脑。