善得定抑制体外肺腺癌Spc-a1细胞生长的实验研究

[目的]研究生长抑素类似物善得定在体外对肺腺癌细胞株Spc-a1生长抑制和肺腺癌细胞凋亡的作用。[方法]以不同浓度（0．01，0．1，1．0，10，20μg／ml）善得定作用于肺腺癌细胞株Spc-a1 72h后，采用MTT法观察其抑瘤效应，采用TUNEL原位末端标记法检测肺腺癌细胞Spe—a1凋亡情况。[结果]善得定对肺腺癌Spc-a1细胞作用与药物剂量呈明显正相关（P=0．0001）；10μg／ml，20μg／ml善得定对肺腺癌细胞Spc—a1抑制率分别为6．264％、7．78％。善得定0．01μg／ml，0．1μg／ml，1．0μg／ml浓度时引起肺腺癌细胞株Spe—a1凋亡发生率分别为1．89％，3．56％，4．44％。[结论]在体外善得定可抑制肺癌细胞Spc—a1生长。     

善得定诱导卡铂腹腔淋巴化疗的实验研究

 为探讨善得定对腹腔化疗中淋巴药物浓度的影响,对16只兔腹腔注入卡铂50mg十生理盐水100ml,实验组加用善得定,分取门静脉血、外周血、淋巴液,应用原子吸收光谱法测定样本铂浓度.结果显示:实验组淋巴铂浓度达峰后可维持较高水平,其药-时曲线下面积(AUC)显著增加.外周血铂浓度却下降明显.提示:在卡铂腹腔化疗中应用善得定能提高化疗药物在淋巴中的作用效能,达到诱导腹腔淋巴化疗的目的.同时又可进-步减轻化疗药物的全身毒副反应.     

善得定治疗老年人上消化道肿瘤大出血临床研究

对５０例上消化道肿瘤所致的大出血病人用善得定治疗进行了临床研究。结果显示它比对照组明显缩短了止血时间，减少了出血量和输血量；止血百分率明显高于对照组（Ｐ＜０．００１），且未见明显副作用。本研究提示，善得定是上消化道肿瘤所致大出血的高效而安全的药物     

善得定治疗癌性上消化道出血的疗效观察

 消化道大出血是晚期上消化道肿瘤的严重并发症之一 ,也是导致晚期肿瘤病人死亡的原因之一。能否及时止血对延长或挽救病人的生命致关重要。近年我们采用善得定 (ｓａｎｄｏｓｔａｔｉｎ)治疗癌性上消化道出血 ,取得较好疗效。1　材料与方法1.1　临床资料　 1999年 3月～ 2 0 0 1年3月间住院进行化学治疗的恶性肿瘤患者 75例 ,均经病理组织学及其他特殊检查明确诊断。所有病例均为手术后复发或发现后已失去手术机会 ,均为Ⅲ期以上晚期恶性肿瘤。临床病理分期按ＵＩＣＣ国际ＴＮＭ标准。所有病例随机分成观察组和对照组 ,其中治疗组 38例 ,对照组 37例。治疗组中男性 2 0例 ,女性 18例 ,年龄 17～ 78岁 ,中位年龄5 2 .5岁。其中原发性肝癌 2 2例 ,胃癌10例 ,贲门癌 5例 ,食管癌 1例。对照组中男性 18例 ,女性 19例 ,年龄 2 0～ 75岁 ,中位年龄 5 0 .3岁。其中原发性肝癌2 3例 ,胃癌 8例 ,贲门癌 3例 ,食管癌 3例。两组病例在治疗前性别、年龄、出血程度、病理类型及肝功能等方面相比较无明显差异。1.2　给药方法　治疗组 :首先用善得定0 .1ｍｇ+0 .9%氯化...     

泰素帝诱导人肺腺癌细胞凋亡的实验研究

目的 探讨泰素帝诱导人肺腺癌细胞凋亡的作用机制。方法 应用形态学方法、流式细胞术（ＦＡＣＳ）、ＤＮＡ凝胶电泳、ＡｎｎｅｘｉｎＶ标记等方法检测细胞凋亡的发生,应用ＲＴ－ＰＣＲ检测凋亡相关基因Ｆａｓ、ｂｃｌ－２、ｃ－ｍｙｃ表达的变化。结果 泰素帝对人肺腺癌细胞系Ａ５４９细胞的生长有明显的抑制作用,使细胞分裂阻滞于Ｇ２Ｍ期,并诱导肿瘤细胞发生凋亡。凋亡细胞表现为细胞固缩,核染色质聚集或断裂,ＤＮＡ凝胶电     

善得定对腹腔化疗中淋巴药物浓度的调节

目的：探讨善得定对腹经疗时淋巴药物浓度的调节作用方法：大肠癌患者行卡铂腹腔化疗时联合应用善意得定,观察腹腔淋巴结,门静脉铂浓度变化。结果：应用善得定后腹腔淋巴铂浓度２小时后提高,而门静脉铂浓度变化不大。结论善得定可诱导卡铂铂腹腔淋巴化疗。     

番荔枝内酯单体squamocin诱导人肺腺癌A549细胞凋亡的实验研究

目的 观察番荔枝内酯单体squamocin对人肺腺癌A549细胞的体外增殖抑制及诱导凋亡的作用,并探讨squamocin诱导肿瘤细胞凋亡的机制。方法 MTT法检测不同浓度的squamocin对人肺腺癌A549细胞体外增殖的影响;流式细胞仪检测squamocin干预在不同时间点对人肺腺癌A549细胞凋亡率的影响;Western blotting检测squamocin干预前后细胞凋亡相关蛋白caspase-3、Bax和Bcl-2的表达情况。结果 MTT法显示,squamocin对人肺腺癌A549细胞的体外抑制作用随着squamocin浓度的增加和作用时间的延长而增强,24、48、72h半数抑制浓度（IC50）分别为16.54、9.28、6.17μg／ml;流式细胞仪检测显示,在24、48、72h实验组人肺腺癌A549细胞凋亡率之间及其与阴性对照组比较,差异均有统计学意义（P＜0.01）,其中实验组72h的细胞凋亡率最高,为（51.87±1.79）％Western blotting显示,squamocin干预后细胞凋亡相关蛋白caspase-3和Bax表达上调,Bcl-2表达明显下调。结论 squamocin可诱导人肺腺癌A549细胞凋亡,这可能与squamocin上调细胞凋亡相关蛋白caspase-3、Bax表达以及降低抑制细胞凋亡基因Bcl-2表达有关。     

HSV1—TK转染人肺腺癌细胞A549的实验研究

目的体内外观察HSV     

肺腺癌患者与健康人体外培养DC细胞的比较

目的:比较肺腺癌患者和健康人DC细胞形态学、增殖力及肿瘤抗原致敏后表型的差异.方法:采集患者和健康人外周血单个核细胞(PBMNC),诱导培养DC细胞;一定时间后观察DC细胞形态学变化,细胞计数仪检测DC的增殖力,提取原代培养的肺腺癌细胞抗原致敏DC,36h后流式细胞仪检测DC的表型变化.结果:两组DC细胞培养至第6天时,形态学无明显差异,而肿瘤患者细胞增殖速度比健康人缓慢.在肿瘤抗原修饰后36h,肺腺癌患者DC细胞的CD83、CD86、HLA-DR表达均比健康人降低.结论:体外培养的两组DC细胞形态学无明显差异,但肿瘤患者DC的增殖力及肿瘤抗原修饰后DC细胞表型的表达率均明显低于健康人.     

miR-320c靶向FADD基因抑制肺腺癌细胞凋亡促进癌细胞的迁移和侵袭

目的:研究miR-320c调控肺腺癌细胞迁移和侵袭的分子机制。方法:Real-time PCR方法检测miR-320c在肺腺癌细胞株A549和SPC-A-1中的表达情况。通过质粒转染构建miR-320c过表达和敲低的肺腺癌细胞株,采用Transwell实验检测miR-320c对肺腺癌细胞迁移和侵袭的影响。通过流式细胞技术检测肺腺癌细胞的凋亡率,免疫共沉淀检测凋亡通路关键复合体的表达判断细胞发生凋亡的情况。生信分析预测miR-320c的下游靶基因,并通过双荧光素酶实验验证。结果:与正常肺上皮细胞相比,miR-320c在肺腺癌细胞中表达升高。过表达miR-320c能够促进肺腺癌细胞的迁移和侵袭,而敲低miR-320c则抑制细胞的迁移和侵袭。进一步实验证实miR-320c通过抑制肺腺癌细胞凋亡发挥其促进迁移和侵袭的作用。荧光素酶报告基因系统验证了miR-320c直接靶向凋亡通路的关键基因FADD;FADD的上调可以有效逆转miR-320c mimic诱导的促进迁移和侵袭作用。结论:miR-320c通过靶向FADD基因抑制肺腺癌细胞凋亡促进癌细胞的迁移和侵袭。     

培美曲塞抑制肺腺癌细胞侵袭能力的研究

[目的]探讨纤连蛋白（FN）对非小细胞肺癌的黏附和迁移能力的影响及培美曲塞的干预作用。[方法]以肺腺癌细胞系A549为研究对象，观察FN对癌细胞增殖活性的影响及不同浓度培美曲塞的抑制作用。在FN包被的培养板和FN滤膜的Boyden浸润小室等体外侵袭模型中，观察培美曲塞预处理后细胞与FN黏附及迁移能力的变化。设立牛血清白蛋白作为FN的对照组。[结果]FN能明显提高A549细胞的增殖活性，培美曲塞40nmol／L和80nmol／L能有效抑制这种增殖活性的升高，但低浓度20nmol／L培美曲塞的抑制作用却不显著。A549细胞在FN培养板的黏附数量及在小室中的穿膜数量远高于对照组．而各浓度培美曲塞预处理细胞的黏附及迁移能力明显降低。[结论]FN能促进肺腺癌细胞的增殖活性、黏附和迁移能力，培美曲塞能在一定程度上阻断这种效应。     

New Insights into 4-Amino-2-tri-fluoromethyl-phenyl Ester Inhibition of Cell Growth and Migration in the A549 Lung Adenocarcinoma Cell Line

Objective: The present study was designed to investigate the probable mechanisms of synthetic retinoid4-amino-2-tri-fluoromethyl-phenyl ester (ATPR) inhibition of the proliferation and migration of A549 humanlung carcinoma cells. Materials and Methods: After the A549 cells were treated with different concentrationsof ATPR or all-trans retinoic acid (ATRA) for 72 h, scratch-wound assays were performed to assess migration.Immunofluorescence was used to determine the distribution of CAV1 and RXRα, while expression of CAV1,MLCK, MLC, P38, and phosphorylation of MLC and P38 were detected by Western blotting. Results: ATPRcould block the migration of A549 cells. The relative migration rate of ML-7 group had significantly decreasedcompared with control group. In addition, ATPR decreased the expression of a migration related proteins,MLCK, and phosphorylation of MLC and P38. ATPR could also influence the expression of RARs or RXRs. Atthe same time, CAV1 accumulated at cell membranes, and RXRα relocated to the nucleus after ATPR treatment.Conclusions: Caveolae may be implicate in the transport of ATPR to the nucleus. Change in the expression anddistribution of RXRα may be implicated in ATPR inhibition of A549 cell proliferation. The mechanisms of ATPRreduction in A549 cell migration may be associated with expression of MLCK and phosphorylation of MLC andP38.     

促红细胞生成素对肺腺癌A549细胞生长和凋亡作用的实验研究

背景与目的 促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)对肿瘤细胞的具体作用存在争议.本研究旨在探讨细胞因子超家族成员EPO对肺腺癌AS49细胞株生物学行为的影响.方法 构建真核表达质粒pcDNA3.1(-)-hEPO,并转染肺腺癌A549细胞株.采用酶联免疫吸附(ELISA)法检洲转染后目的基因的蛋白表达水平;MTT法和流式细胞仪检测转染后A549细胞生长、周期及凋亡率等生物学行为的变化;ELISA法检测转染后细胞VEGF表达水平的变化.结果 成功构建真核表达质粒pcDNA3.1(-)-hEPO;转染后各检测时间点,EPO转染组细胞生长均明显受抑(P<0.01);流式细胞术分析表明,EPO转染组S期细胞比例明显高于对照组(P<0.05).且凋亡率也明显增高(P<0.01);EPO转染组VEGF表达量明显降低(P<0.01).结论 EPO基因转染A549后有抑制细胞生长、促进凋亡的作用,并且还可抑制细胞表达VEGF.     

PKC抑制剂对人肺腺癌细胞的放射增敏作用

 目的　探讨PKC抑制剂对肺癌放射敏感性的影响; 方法　采用MTT法检测了人肺腺癌细胞株A549在PKC抑制剂白屈莱红碱(CH)处 理前后,2Gy照射的细胞存活分数(SF2),并采用流式细胞术,对其凋亡率以及p53、Bcl -2蛋白表达进行了检测;结果　CH处理后A549凋亡 率增高,SF2下降。p53在X线照射后表达增强,而CH处理组p53表达 呈相对抑制状态。Bcl-2在处理前后变化温和。结论　PKC抑制剂对A 549细胞株的放射敏感性有增强作用,这种作用可能与凋亡率升高有关,而p53可能与 PKC抑制剂诱导的凋亡无关。     

鹤草酚对人肺腺癌A549细胞株放射增敏作用的实验研究

[目的]探讨鹤草酚对人肺腺癌A549细胞株的放射增敏作用.[方法]MTT法测定0、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0和32.0μmol/L浓度鹤草酚对人肺腺癌A549细胞株的生长抑制率.实验分4组:常氧照射组、乏氧照射组、0.887 μmol/L鹤草酚+乏氧照射组和1.774μmol/L鹤草酚+乏氧照射组,测定各组存活分数(SF),计算细胞生存率,拟合细胞生存曲线并计算放射增敏比.[结果] MTT结果表明,鹤草酚对人肺腺癌A549细胞有生长抑制作用,不同浓度鹤草酚作用组间细胞抑制率有显著性差异(F=26.818,P=0.002).鹤草酚作用A549细胞的IC50为8.87μmol/L.0.887、1.774μmol/L鹤草酚联合乏氧照射组的D0、Dq和2Gy时的细胞存活分数(SF2)均小于单纯乏氧照射组.0.887μmol/L和1.774μmol/L鹤草酚联合乏氧照射组的放射增敏比(SER)分别为1.484和1.525.[结论]鹤草酚对人肺腺癌A549细胞株有抑制增殖作用,其常氧培养IC50值为8.87μmol/L.鹤草酚对乏氧培养的人肺腺癌A549细胞株有放射增敏作用,随着鹤草酚浓度的增加其放射增敏作用增强.     

人肺腺癌细胞系Ch-Huang-1的建立和生物学特性研究

背景与目的肺癌是严重威胁人类生存和发展的恶性疾病之一,本研究旨在建立人肺腺癌细胞系,探讨其生物学特性,为进一步明确肺癌的发生机理,提供一个技术平台。方法取人肺腺癌新鲜手术肿瘤标本,经组织块体外培养并克隆建系,命名为Ch-Huang-1。采用光镜、细胞生长曲线、染色体核型分析、克隆形成率及免疫缺陷小鼠成瘤实验对细胞系生物学特性进行分析。结果细胞系及移植瘤标本证实具有腺癌恶性细胞特征。生长曲线呈S型,细胞群体倍增时间为36 h。分裂指数曲线为倒V字型,培养第30小时处于分裂期的细胞最多。克隆形成率为0.803%±0.078%。观察到肿瘤细胞染色体数目为亚三倍体,有明显的染色体异常。裸鼠皮下异种移植形成移植瘤。结论根据细胞系特征显示该细胞系是一新建的肺腺癌细胞系。     

塞来昔布对肺腺癌A549细胞中COX-2、MRP1表达的影响

目的探讨塞来昔布(Celecoxib)对肺腺癌A549细胞COX-2与多药耐药相关蛋白1(multidrug related pro-tein 1,MRP1)表达水平的影响。方法采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT),观察Celecoxib对肺腺癌A549细胞株生长的抑制作用;不同浓度的Celecoxib干预A549细胞24 h后,采用RT-PCR法检测COX-2、MRP1 mRNA的表达情况,采用Western blot法检测两者蛋白表达水平。结果 Celecoxib对A549细胞株生长有抑制作用,呈浓度依耐性,不同浓度间抑制作用差异有显著性(P<0.05);Celecoxib可下调A549细胞中COX-2及MRP1 mRNA表达水平,呈时间和浓度依赖关系(P<0.05),Celecoxib亦可下调两者的蛋白表达水平,呈浓度依赖关系(P<0.05)。结论 Celecoxib可直接抑制肺腺癌A549细胞的生长和下调COX-2、MRP1表达水平。     

MiR-214对人肺腺癌细胞PC9增殖及凋亡的研究

摘 要：［目的］ 探讨miR-214对肺腺癌细胞PC9增殖和凋亡的影响。［方法］ 培养人肺腺癌细胞株PC9（EGFR基因19外显子缺失,对EGFR-TKI吉非替尼敏感）,将miR-214类似物(miR-214 mimic)及对照物（scramble）转染至PC9细胞中,在不同的时间点（24、48、72h）使用MTT检测细胞的增殖;转染细胞后,加入吉非替尼共培养48h后,使用流式细胞仪检测细胞凋亡;同时建立PC9荷瘤小鼠,观察荷瘤小鼠瘤体的生长曲线,及尾静脉注射miR-214抑制剂（antigomiR-214）后观察荷瘤小鼠瘤体的生长。［结果］ 在PC9细胞中,miR-214 mimic被转染入细胞后,48h及72h后细胞增殖率分别增加了27.9%和18.7%,相比转让了对照组的细胞差异均有统计学意义（P均<0.05）。吉非替尼可以诱导PC9细胞凋亡,但转染miR-214mimic后细胞凋亡率由86.5%下降为28.5%。在荷瘤小鼠中抑制miR-214后,小鼠瘤体明显缩小（P<0.05）。［结论］ miR-214可促进肺腺癌细胞增殖及抗凋亡,可能可作为肺腺癌治疗的新靶点。