ALA-光动力疗法对人SCC细胞凋亡的影响

目的 深入探讨5-氨基乙酰丙酸-光动力学疗法(ALA-PDT)对SCC细胞凋亡的影响,进一步明确阐明5-ALA-PDT在治疗皮肤鳞状细胞癌中的作用.方法 本研究将以鳞状细胞癌细胞系A431为研究对象,一组为对照组(不处理),另一组为ALA-PDT组(0.4mg/ml的ALA避光孵育3h后激光照射),将细胞用active...     

毫米波辐射对人急性早幼粒白血病细胞诱导凋亡的作用

目的 探讨毫米波对人急性早幼粒白血病细胞增殖和凋亡的影响。方法 以波长7.1mm,频率42.2GHz的毫米波辐射体外培养的NB4细胞,光镜及电镜观察细胞形态改变,生长曲线测定细胞生长及增殖情况。流式细胞仪（FCM）检测细胞周期分布。细胞凋亡指数及凋亡相关基因表达的改变。结果 1mW/cm^2的毫米波辐射,每日1次,30min,可明显抑制NB4细胞的生长,辐射第3天细胞生长抑制率为44.1%;光镜及电镜下可见凋亡细胞形态,FCM示G0/G1期细胞及凋亡百分比增加;p21、p53、Bax和Fas表达增加,c-Myc、Bcl-2表达下降,5mW/cm^2的毫米波对细胞增殖及凋亡的影响却不明显,虽然p53、Bax和Fax表达增加,Bcl-2表达下降,但c-Myc和p21的表达却无改变。结论 1mW/cm^2毫米波辐射适当时间后能显著抑制NB4细胞增殖、诱导细胞凋亡;其凋亡诱导机制可能与调控细胞凋亡相关基因的表达有关,其中对c-Myc蛋白表达的下调可能具有关键作用。     

细胞凋亡与胃癌

胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，死亡率占恶性肿瘤的第一位。胃癌的发生与胃粘膜上皮细胞和胃癌细胞凋亡、增殖调控失衡有关。现综述细胞凋亡及凋亡相关基因在胃癌的发生、发展、转归和治疗中的地位及其应用前景。     

光动力疗法对鼻咽癌细胞Bax mRNA表达和凋亡的影响

目的：探讨光动力疗法（PDT）对鼻咽癌细胞（NPC）Bax mRNA表达和凋亡的影响。方法：体外培养的NPC细胞,分别在PDT作用12、24、36和48h后用电镜动态观察分析细胞凋亡现象和凋亡指数,同时采用逆转录－聚合酶链反应技术（CT－PCR）检测Bax mRNA的表达情况。结果：PDT作用12、24、36和48h后NPC细胞凋亡指数分别为6．7％、71．6％、86．4％和98．3％,同时Bax mRNA表达检测发现。各对照组NPC细胞仅可见Bax mRNA扩增产物,实验组NPC细胞Bax mRNA表达均呈阳性,随PDT作用时间延长而逐渐增强,而者结果呈现一致。结论：PDT体可诱导鼻咽癌细胞凋亡,细胞凋亡指数上升与凋亡相关基因Bax mRNA表达上调有关。     

晚期鼻咽癌患者光动力治疗的观察与护理

鼻咽癌是我国常见恶性肿瘤之一，好发于东南亚一带及我国南方省份，又称为广东癌。光动力疗法（photodynamic therapy，PDT），是一种治疗恶性肿瘤新方法，通过给患者注射光敏制剂（photofrin是一种需在特定波长下才能激活的药物）、再用特定波长的激光来照射病灶而产生单太氧和血栓素A2来杀伤肿瘤细胞。PDT对于晚期鼻咽癌可解除或缓解梗阻，显著控制肿瘤，     

光动力疗法联合外科手术对皮肤鳞状细胞癌患者生活质量的影响观察

目的 研究光动力疗法联合外科手术治疗皮肤鳞状细胞癌（CSCC）的效果及对患者生活质量的影响。方法 将诊治的100例CSCC患者按随机数字表法分为对照组和研究组各50例。对照组行外科手术治疗,研究组于外科手术基础上采用光动力疗法治疗,比较两组治疗效果、复发率及治疗前后血清相关指标[鳞状细胞癌相关抗原（SCCA）、细胞角蛋白19片段（CYFRA21-1）]水平、生活质量。结果 研究组总有效率（92.00%）较对照组（76.00%）高（P<0.05）。治疗后,研究组血清SCCA、CYFRA21-1水平较对照组低（P<0.05）;生活质量评分较对照组高（P<0.05）。治疗后6个月内,研究组复发率比对照组（2.00%VS 16.00%）低（P<0.05）。结论 光动力疗法联合外科手术治疗CSCC的效果显著,可有效下调患者血清SCCA、CYFRA21-1水平,提升生活质量,减少复发率。     

光动力疗法对人胃癌细胞MGC-803的杀伤性干预

目的：观察5-氨基乙酰丙酸介导的光动力学疗法对人胃癌细胞MGC-803的干预作用，探讨光动力学疗法治疗胃癌的可能作用途径。方法：实验于2004-03／2004—12在全军神经医学研究所完成。试剂5-氨基乙酰丙酸购自美国Sigma公司；MGC-803人胃腺癌细胞株购于中山大学实验动物中心。①分别使用不同浓度的5-氨基乙酰丙酸培养MOC-803胃癌细胞，浓度分别为0．25，0．5，1．0，2．0，4．0mmol／L，给予相同剂量的激光辐照。②使用相同浓度的5-氨基乙酰丙酸培养MGC-803胃癌细胞，给予不同剂量的激光辐照，能量分别为6．25，12．5，25．0，50．0，100J／cm^2。③使用不同浓度的5-氨基乙酰丙酸培养MGC-803胃癌细胞，浓度分别为0．25，0．5，1．0，2．0，4．0mmol／L，不予激光辐照。④给予不同剂量的激光辐照培养MGC-803胃癌细胞，能量分别为6．25，12．5，25．0，50．0，100J／cm^2，不给予5-氨基乙酰丙酸。以上4个实验均以四甲基偶氮唑盐法检测细胞活力，以不加5-氨基乙酰丙酸、无激光辐照培养的细胞作为空白对照，细胞存活率=处理组细胞吸光度值／对照组细胞吸光度值x100％。⑤培养MGC-803胃癌细胞，随机分为4组，即单纯MGC-803胃癌细胞组、单纯5-氨基乙酰丙酸组、单纯给予激光组及光动力学治疗组，使用吖啶橙-溴化乙锭染色法检测细胞凋亡情况。结果：①5-氨基乙酰丙酸浓度不同、激光辐射剂量相同：随5-氨基乙酰丙酸浓度逐渐递增，MOC-803细胞的存活率逐渐下降，各组细胞存活率之间差异有显著性意义（F=266．39，P〈0．01）；但在浓度到达2．0mmol／L后，细胞存活率不再随着5-氨基乙酰丙酸的浓度的增加而下降。②激光能量不同、5-氨基乙酰丙酸浓度相同：随着激光剂量的增加MGC-803细胞存活率显著下降，各组细胞存活率之间差异有显著性意义伊=226．31，P〈0．01）。③5-氨基乙酰丙酸浓度不同、不给激光辐射：各组细胞存活率之间差异均无显著性意义（F=0．79，P=0．54）。④激光辐射剂量不同、不给5-氨基乙酰丙酸：各组细胞存活率之间差异均无显著性意义（F=0．61，P=0．66）。⑤只有光动力学治疗组出现细胞凋亡现象。而其他细胞组基本无凋亡细胞。结论：在较低的浓度范围内，5-氨基乙酰丙酸介导的光动力疗法对人胃癌MGC-803细胞的杀伤作用随着5-氨基乙酰丙酸浓度的增加而增加。在较高浓度时则存在饱和现象，而且杀伤力与光剂量成正比。单纯激光不能产生光动力效应，5-氨基乙酰丙酸本身对细胞无毒性作用。5-氨基乙酰丙酸介导的光动力学治疗能够有效的治疗胃癌，光动力学疗法诱导肿瘤细胞凋亡是其可能作用途径之一。     

光动力治疗基底细胞癌的疗效观察

目的 观察光动力疗法治疗基底细胞癌的临床治疗效果.方法 将61例基底细胞癌患者用光敏剂5-氨基酮戊酸(ALA)涂于皮损处,3 h后红光照射,能量密度为100～120 J/cm2,时间约20 min,每周照射1次,共4周,疗程结束后评价疗效.结果 61例基底细胞癌患者中,完全缓解45例,部分缓解9例,无效7例,总有效率88.52%(54/61).所有患者无严重毒副作用.结论 光动力疗法治疗基底细胞癌痛苦小、无创伤、无副作用,是一种安全有效的治疗方法.     

食管鳞状细胞癌组织中细胞凋亡与增殖的研究

目的 :探讨食管鳞状细胞癌组织中细胞凋亡、增殖细胞核抗原 (PCNA )之间的关系及与食管癌发生、发展及预后的关系。方法 :47例原发性食管鳞癌手术切除标本为一组 ,2 0例正常食管黏膜组织为对照组 ,采用免疫组织化学方法及TUNEL法检测其PCNA的表达及细胞凋亡。结果 :癌组织中平均增殖指数 (PI)、平均凋亡指数(AI)及PI/AI比值均较正常组高 (P <0 0 5 )。PI随肿瘤病理分级及临床分期的增加以及淋巴结转移和浸润深度的增加而增高 (P <0 0 5 ) ;AI则随肿瘤病理分级的升高而降低 (P <0 0 5 ) ;PI/AI比值随肿瘤病理分级的升高及淋巴结的转移而增加 (P <0 0 5 )。食管鳞癌组织中PCNA高表达组 (PI >5 0 % )的术后 5年生存率低于PCNA低表达组(PI≤ 5 0 % ) (P <0 0 5 )。结论 :PCNA的异常表达状态能较好地反映食管鳞癌的浸润、转移能力 ,对预后判定有一定价值。增殖凋亡失衡贯穿于食管鳞癌发生、发展的整个过程 ,PI/AI比值有可能作为一个监测肿瘤发生的标志     

重组IL-6和维甲酸诱导肾癌细胞凋亡的研究

目的：探讨重组白细胞介素６（ＩＬ－６０在体外对肾癌细胞ＧＲＣ－１（ＲＣＣ ＧＲＣ－１）凋亡的诱导作用。方法：在ＲＣＣ ＧＲＣ－１细胞培养体系中加入ＩＬ－６诱导,反式维甲酸（ＲＡ）作为对照药物,琼脂糖凝胶电脉和流式细胞仪观察ＩＬ－６和ＲＡ对细胞ＤＮＡ电泳和细胞周期动力学的影响。结果：ＩＬ－６诱导肾癌细胞ＤＮＡ出现典型的梯状改变,ＲＡ有轻度诱导肾癌细胞凋亡作用。流式细胞仪ＤＮＡ直方图上ＩＬ－６诱导肾癌     

曲古抑菌素A对鼻咽癌CNE2细胞凋亡的影响及机制研究

目的探讨曲古抑菌素A(TSA)对鼻咽癌CNE2细胞凋亡的影响及作用机制。方法以不同浓度(300、400、500 nmol/L)TSA作用鼻咽癌CNE2细胞株,采用流式细胞术测定TSA作用前后鼻咽癌细胞凋亡情况;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析TSA作用后鼻咽癌细胞中细胞周期素依赖性蛋白激酶抑制因子1A(P21)表达的变化。结果以300、400、500 nmol/L TSA分别诱导CNE2细胞凋亡,作用24 h后凋亡率分别为12.52%±1.57%、19.69%±3.00%、19.63%±2.68%;48 h后凋亡率为24.50%±4.45%、36.24%±3.92%、34.82%±6.45%;与对照组(0 nmol/L TSA)比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR检测发现,TSA可诱导CNE2细胞内p21基因表达明显增加(P<0.01)。结论 TSA能明显诱导CNE2细胞凋亡,其作用机制可能与p21基因的异常表达有关。     

抗菌肽LL-37对口腔鳞癌SCC-090细胞增殖、侵袭和凋亡影响的体外实验研究

目的 研究抗菌肽LL-37对口腔鳞癌SCC-090细胞的增殖、侵袭和凋亡的影响.方法 体外培养口腔鳞癌SCC-090细胞,设置空白对照组(抗菌肽LL-37为0μg/mL)、不同浓度的抗菌肽LL-37(25、50、100、150、200μg/mL),分别培养细胞24、48、72 h后,细胞增殖-毒性法检测细胞的增殖情况,...     

紫杉醇对Daudi细胞增殖活性与表面超微结构的影响

目的:研究紫杉醇对Burkitt淋巴瘤细胞株Daudi细胞凋亡的影响.方法:用原子力显微镜(AFM)分析细胞膜超微结构的改变,CCK8法检测Daudi细胞增殖活性,流式细胞术(FCM)测定凋亡率.结果:AFM显示紫杉醇可引起细胞形貌的改变,正常Daudi细胞呈圆形,表面较光滑:紫杉醇处理后,Daudi细胞坍塌,细胞表面粗糙、凹凸不平.紫杉醇对Daudi细胞的增殖具有抑制作用,且呈时间浓度依赖性.FCM检测示Daudi细胞凋亡率各实验组均明显高于对照组(P<0.05),呈浓度依赖性.结论:紫杉醇可改变细胞膜超微结构,抑制Daudi细胞的增殖,促进其凋亡.     

慢病毒介导环氧化酶-2的沉默对食管鳞癌细胞增殖的抑制效应

目的制备环氧化酶-2(COX-2)的RNA干扰(RNAi)重组慢病毒(lentivirus),观察COX-2表达沉默对人食管鳞癌(ESCC)细胞增殖的影响。方法将目的基因短发卡RNA(sh RNA)载体与包装载体共转染293T细胞,收集上清液后浓缩纯化、滴度测定、感染ESCC细胞;应用荧光显微镜观察包装效率及感染效率,实时荧光定量PCR及Western blot评价COX-2基因沉默效应,MTS法检测细胞的增殖。结果成功制备了沉默COX-2的重组慢病毒,该病毒感染ESCC细胞后,COX-2 m RNA和蛋白的表达量分别降低了80%和50%左右,细胞的增殖明显减慢。结论慢病毒介导的sh RNA干扰能有效沉默ESCC细胞COX-2基因,COX-2表达沉默抑制ESCC细胞增殖。     

Genistein在调节肝癌HepG2细胞Fas基因表达及诱导细胞凋亡中的作用

目的: 探讨三磷酸肌醇( IP3) 和Fas基因表达变化在genistein诱导肝癌细胞凋亡中的作用。方法:以肝癌HepG2 细胞培养72h为对照,以20,40.60,80μmol/ L genistein作用于 HepG2 细胞72h和60μmol/L genistein 作用于 HepG2 细胞6h、12 h、24 h、48 h、72 h，应用同位素试剂盒IP3 - [3H] Birtrak检测细胞IP3 含量，RT-PCR分析Fas mRNA表达，Western blotting 分析细胞Fas蛋白表达，流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果: 各浓度的genistein作用于肝癌HepG2 细胞72 h，IP3 含量显著高于对照组[（17.7±1.3）pmol/106cells、（11.2±0.9）pmol/106cells、（4.9±0.5）pmol/106cells、（4.8±0.3）pmol/106cells vs （29.4±0.5）pmol/106cells]，Fas mRNA表达显著高于对照组[RI（灰度与面积之积与β-actin的相对强度）0.25±0.002、0.30±0.01、0.28±0.04、0.30±0.03 vs 0.19±0.01]，Fas蛋白表达显著高于对照组[RI1.08±0.01、 1.11±0.02、1.05±0.06、1.03±0.01 vs 0.17±0.01]，细胞凋亡率显著高于对照组[（10.1±0.9）%、（18.7±1.6）%、（28.7±2.5）%、（27.9±2.0）% vs （2.6±0.1）%]；60 μmol/L genistein 作用于肝癌HepG2 细胞6h、12 h、24 h、48 h、72 h，6h后IP3 含量显著高于对照组[（22.6±0.9）pmol/ 106cells、 (12.0±1.4) pmol/ 106cells、(7.5 ±0.8) pmol/ 106cells、(5.6 ±0.5) pmol/ 106cells、(4.3 ±0.6) pmol/ 106cells vs (29.2 ±0.6) pmol/ 106cells。P < 0.01）；12h后Fas mRNA表达显著高于对照组[RI0.24±0.01、0.24±0.01、0.24±0.02、0.30±0.001 vs 0.20±0.01]，6h后Fas蛋白表达显著高于对照组[RI 0.55±0.08、 1.01±0.03、1.62±0.03、1.46±0.09 、1.56±0.04 vs 0.18±0.01]，24 h后各时相细胞凋亡率为显著高于对照组[(7.4 ±0.5) %、(20.5 ±2.0) %、(30.7 ±1.6) % vs (2.6 ±0.1) %。P < 0.01]。结论: Genistein能减少IP3 生成,上调Fas基因表达,诱导肝癌细胞凋亡。     

体外膀胱癌细胞光动力学杀伤效应的研究

目的：探索叶绿素衍生物（ＣＰＤ４）光动力学疗法在体外人膀胱癌细胞的杀伤效应中不同的激光波长、能量和ＣＰＤ４浓度之间的关系。方法：采用ＭＴＴ比色分析法判别体外人膀胱癌Ｔ－２４和ＳＣａＢＥＲ细胞对不同的激光波长、能量和ＣＰＤ４浓度的光敏效应。结果：ＣＰＤ４的光敏效应与激光能量和药物浓度呈正相关，并在相同激光能量和药物浓度的情况下，绿光（５１０ｎｍ）的光敏效应明显强于红光（６３０ｎｍ）。结论：ＣＰＤ４光动力学作用对体外人膀胱细胞癌有明显杀伤效应，而绿光明显强于红光，这为临床采用绿光治疗膀胱癌早期病变和预防术后肿瘤复发提供了实验依据     

Apoptotic effect of Helicobacter pylori on oesophageal squamous-cell carcinoma cells in vitro

Backbround The relationship between Helicobacter pylori (Hp) infection and oesophageal squamous‐cell carcinoma (ESCC) risk is still inconclusive. Our previous study found an inverse association between the two, but its mechanism is still unknown. Thus, we conducted in vitro studies to clarify the issue. Materials and methods One ESCC (CE 81T/VGH) cell line was co‐cultured with Hp, using one gastric adenocarcinoma (AGS) cell line as the control. Hp–induced cell apoptosis was determined by flow cytometry, terminal transferase‐mediated dUTP nick end labelling (TUNEL) assay and staining; caspase‐3 protein expressions in cell lysates were detected by Western immunoblot. Results Increased apoptosis was found in CE 81T/VGH, but not in AGS cells, by flow cytometry and TUNEL assay after being co‐cultured with Hp at the multiplicity of infection of 1/100 (but not at 1/400) for 36 h. The amount of activated caspase‐3 (17/19 kDa) also increased in CE 81T/VGH, but not in AGS cells, after co‐culturing with Hp at MOI of 1/100 for 36 h. The results were confirmed by triplicate experiments in which the different apoptotic assays remained consistent. Conclusions Our study provides indirect evidence of the inverse association between Hp infection and ESCC risk, which is possibly due to Hp‐induced apoptosis in ESCC cells. A further in vivo study is necessary to confirm our findings.     

卡介苗对人鼻咽癌CNE-2Z细胞周期及凋亡的影响

目的 探讨卡介苗(BCG)对鼻咽癌CNE-2Z细胞周期及凋亡的影响.方法 碘化丙啶染色法检测细胞周期,Annexin V-FITC检测细胞凋亡,Western blotting检测周期相关蛋白表达.结果 BCG作用不同时间后,G1期细胞百分率由未处理细胞(对照组)的(47.1±0.9)%升高至72 h作用组的(65.3±1.3)%,S期细胞百分率由对照组的(39.2±0.7)%降低至72 h作用组的(17.6±0.5)%.不同处理时间组和对照组均未检出明显细胞凋亡.CyclinD1蛋白表达随着BCG作用时间的延长逐渐减弱.结论 BCG体外诱导鼻咽癌CNE-2Z细胞CyclinD1低表达,促使细胞周期发生G1/S期阻滞.     

miR-219a-5p对皮肤鳞状细胞癌细胞凋亡的影响及机制

目的探讨miR-219a-5p对皮肤鳞状细胞癌细胞凋亡的影响以及潜在的作用机制。方法设置miR-con组、miR-219a-5p组、anti-miR-con组、anti-miR-219a-5p组、miR-219a-5p+pcDNA组、miR-219a-5p+pcDNA-SMC4组、miR-con+SMC4-WT组、miR-con+SMC4-MT组、miR-219a-5p+SMC4-WT组、miR-219a-5p+SMC4-MT组,转染均用脂质体法。qRT-PCR检测miR-219a-5p和SMC4 mRNA表达水平;Western Blot检测蛋白表达;MTT法检测细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性。结果相较于人正常皮肤细胞HaCaT,皮肤鳞状细胞癌细胞HSC-2、Colo-16、SCL-1中SMC4 mRNA和蛋白表达水平显著升高,miR-219a-5p表达水平显著降低(P<0.05)。过表达miR-219a-5p可抑制皮肤鳞状细胞癌细胞增殖,诱导细胞凋亡;促进Caspase-3蛋白表达,抑制Cyclin D1蛋的表达;抑制Wnt/β-catenin信号通路激活。miR-219a-5p靶向负调控SMC4的表达,转染SMC4野生型表达载体的HSC-2细胞荧光素酶活性显著降低(P<0.05);而转染SMC4突变型表达载体的HSC-2细胞荧光素酶活性差异不显著。且过表达miR-219a-5p,SMC4表达水平显著降低;抑制miR-219a-5p表达,SMC4表达水平显著升高。过表达SMC4能逆转miR-219a-5p对皮肤鳞状细胞癌细胞HSC-2的增殖抑制和凋亡促进的作用。结论miR-219a-5p可抑制皮肤鳞状细胞癌细胞增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能与Wnt/β-catenin及SMC4信号通路有关,将为皮肤鳞状细胞癌的预防和治疗提供新靶点。     

聚焦超声对肝癌细胞SMMC 7721超微结构的影响

目的观察聚焦超声对体外肝癌细胞SMMC7721超微结构的影响。方法0.8MHz聚焦超声照射体外培养的SMMC7721细胞25s,将照射后的细胞体外培养24h以后对存活贴壁的细胞进行电镜观察。结果部分照射后存活的细胞有超微结构的改变:线粒体肿胀、脂质沉积,粗面内质网扩张。结论0.8MHz聚焦超声照射体外肝癌细胞SMMC7721以后,大部分细胞死亡,存活的细胞中部分细胞有超微结构的改变。