p38参与单磷酰脂A预处理的延迟保护作用

目的探讨丝裂素活化蛋白激酶p38MAPK是否参与单磷酰脂A(MLA)预处理的延迟保护作用.方法建立大鼠心肌缺血/再灌注损伤(I/R)模型.分别应用MLA、p38的特异性抑制剂SB203580预处理心脏, 24 h后对心脏进行缺血再灌注,观察各组心功能、心肌梗死范围、血浆乳酸脱氢酶(LDH)活性, 同时用Western印迹法检测MLA预处理后即刻、10、15、30 min 、SB203580加单磷酰脂A预处理15 min时p38磷酸化水平.结果 MLA预处理组较I/R组心功能明显改善, 心梗范围明显缩小, 血浆LDH活性升高程度减轻(P<0.01).p38磷酸化在MLA预处理后即刻稍微增高,10 min轻度升高、15 min达到高峰、30 min开始下降, 而用SB203580可明显抑制p38活性, 且预处理延迟保护作用被消除, 分别与单纯缺血再灌注组相似 (P>0.05).结论 MLA预处理对24 h后缺血/再灌注心肌有保护作用.p38参与心肌预处理后的延迟保护作用,MLA预处理后p38适度激活可能是药物延迟保护作用的重要机制之一.     

单磷酰脂A预处理对老年大鼠心脏的延迟保护作用及其机制探讨

目的 探讨老年大鼠心脏药物预处理现象及其保护机制。方法 在老年大鼠离体灌注心脏及缺血于灌注（Ｉ／Ｒ）模型（Ｉ／Ｒ组）上，观察单磷酰脂Ａ（ＭＬＡ）预处理（ＭＬＡ组）对心脏Ｉ／Ｒ损伤的影响及其对丝裂知化蛋白激酶（ＭＡＰＫ）活性和金属硫蛋白（ＭＴ）含量的影响，结果 ＭＬＡ组明显减轻离体心脏的Ｉ／Ｒ损伤，其冠状动脉流出液中乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）活性为（１４１±１５）Ｕ／Ｌ肌红蛋白（Ｍｂ）含量主（５．３±１．     

环氧化酶-2表达在单磷酰脂A诱导的大鼠延迟性心肌保护中的作用

目的探讨单磷酰脂 A(MLA)预处理对大鼠缺血再灌注心肌的影响及环氧化酶-2(COX-2)表达的作用。方法雄性 Wistar 大鼠24只分为4组:健康对照组(NC 组)、单纯缺血再灌注组(I/R 组)、单磷酰脂 A 预处理组(MLA-DP组)、单磷酰脂 A 预处理与 COX-2抑制剂 NS-398组(MLA+NS-398组);检测各组心功能、心肌梗死的范围;测定 MLA 预处理后24 h COX-2蛋白表达及心肌中前列腺素类化合物的含量。结果与 NC 组比较,MLA-DP 组心功能明显改善[左室内压峰值(LVSP)分别为:(124.1±12.0)mm Hg和(112.0±26.3)mm Hg,P<0.01],与 MLA-DP 组比较,MLA+NS-398组心功能下降(P<0.01)、心肌梗死范围增大[分别为(14±3)%和(32±9)%,P<0.01]。与 NC 组比较,MLA-DP 组 COX-2蛋白水平明显增加(P<0.01),心肌中前列腺素类化合物含量明显增加(P<0.01)。同 MLA-DP 组比较,MLA+NS 398组蛋白水平无明显变化,但MLA+NS-398组前列腺素类化合物含量明显减少(P<0.01)。结论 MLA 预处理适度上调了心肌细胞 COX-2蛋白表达,增加心肌前列腺素类化合物前列腺素 E_2的量,从而对大鼠缺血再灌注心肌有延迟保护作用。     

在单磷酰脂A预处理过程中心肌环氧化酶-2表达的作用

1材料与方法 随机选取健康雄性Wistar大鼠,体重(250±30)g,由同济医科大学动物中心提供,以20%乌拉坦(1g/kg)麻醉,实验分4组:(1)对照(NC)组.(2)单纯缺血再灌注(I/R)组.(3)单磷酰脂(MLA)预处理(MLA-DP)组:于I/R前24h由舌静脉滴入MLA(450μg/kg).(4)NS-398组:先同MLA-DP组应用药物,再于第2天I/R前35min应用COX-2抑制剂NS-398(5mg/kg),在相同时点不用药物组,则用等量生理盐水作为平衡对照.各组6只动物于再灌注120 min后双重染色心肌,用IBAS全自动处理系统计算各部面积,并计算出心肌梗死面积.每组用药前及手术后分别取静脉血测定血浆乳酸脱氢酶(LDH)活性.将MLA-DP、NS-398组的另一批动物于预处理后24 h(I/R组前)处死,同时处死另一批正常动物.快速取各组处死动物的心脏左室前壁心肌,一部分液氮保存,用于提取所取心肌中的总蛋白,另一部分用于提取前列腺素类化合物.从每组标本蛋白质样品中取20μg,凝胶电泳分离-转膜-封闭-加入兔抗环氧化酶-2(COX-2)的单克隆抗体-再加入辣根过氧化物酶偶联的羊抗兔IgG抗体-最后加入ECL试剂-曝光.将Westem blot条带进行密度扫描.每组COX-2表达量以NC组积分光密度的百分率表示.提取前列腺素类化合物,使用前列环素E2(PGE2)作为内参.使用PGE2,6酮-前列腺素F1α(6-K-PGF1α)相应的EIA试剂盒检测两者的量.实验数据以x±s表示,两组间比较用单因素方差分析.     

急性胰腺炎患者单个核细胞中p38MAPK、磷酸化p38MAPK水平变化及意义

目的探讨急性胰腺炎(AP)患者外周血单个核细胞p38MAPK基因表达及其与疾病严重程度的关系。方法采用实时荧光PCR法检测29例轻型胰腺炎(MAP)患者(MAP组)、23例重症胰腺炎(SAP)患者(SAP组)及21例查体健康者(对照组)外周血单个核细胞(PBMC)p38MAPK mRNA表达水平,Western blot法检测PBMCp38MAPK和磷酸化p38MAPK(P-p38MAPK)蛋白表达水平。结果 p38MAPK mRNA表达水平:SAP组明显高于对照组(P<0.05),MAP组与对照组比较无显著差异;p38MAPK总蛋白量SAP组明显高于对照组(P<0.05),MAP组与对照组比较无显著差异;P-p38MAPK水平SAP组明显高于对照组和MAP组(P<0.01、<0.05);MAP组明显高于对照组(P<0.05)。结论 p38MAPK磷酸化水平在AP患者PBMC中显著升高,并与AP严重程度呈正相关。     

心肌预处理延迟保护作用与COX-2表达

大量研究表明：预处理刺激(如缺血、药物或物理刺激)，可导致心肌细胞内发生复杂的信号级联事件，最终导致心脏保护性基因的转录激活及表达增加，从而产生预处理延迟保护作用(protective effect of preconditioning，PEP)，以保护缺血再灌注心肌。诱导一氧化氮合成酶(iNOS)是PEP中的第一个已明确的效应因子，然而，考虑到预处理延迟保护期间激活的信号通道的复杂性，     

心肌缺血预处理延迟保护作用的实验研究

本实验旨在探讨心肌缺血预处理延迟保护的作用机制。采用大鼠心脏缺血预处理模型,检测缺血预处理后即刻、１２、２４、４８和７２ｈ各时相点再行心肌缺血１ｈ复灌１２ｈ时心肌细胞间粘附分子（ＩＣＡＭ－１）的表达及心肌梗塞范围、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）含量及白细胞（ＰＭＮｓ）浸润数的变化。结果显示,与单纯缺血再灌注组比较,预处理后２４～７２ｈＩＣＡＭ－１表达明显减少,ＳＯＤ含量增高,ＰＭＮ浸润数减少,心肌梗塞范围缩小（Ｐ＜０．０５）,以４８ｈ最显著。本实验表明,预处理后２４～７２ｈ心肌对再次长时间缺血／再灌注的损伤有保护作用,其产生可能与ＩＣＡＭ－１表达降低所介导的ＰＭＮｓ浸润减少及ＳＯＤ含量增加有关     

洛伐他汀预处理的延迟性心肌保护作用及其机制

目的探究洛伐他汀在大鼠心脏急性缺血/再灌注中的延迟性心肌保护作用及其机制。方法SD大鼠24只随机分为3组（每组8只）:模型对照组（C）;Lovastatin组（L）,洛伐他汀直接灌胃两周15mg/（kg·d）;Lovastatin复合LNAME组（N）,洛伐他汀15mg/（kg·d）直接灌胃2周同时腹腔注射LNAME30mg/（kg·d）;2周后建立在体急性缺血/再灌注心脏模型,监测缺血/再灌注前后血流动力学各项指标,同时观察各组血脂水平及其血浆中MDA、SOD、LDH以及CK的变化情况。结果L组和N组较C组心率显著减慢（P<0.01）,缺血/再灌注心律失常消失和再灌注时-dp/dtmax下降显著改善（P<0.05）;各项血脂指标不变的情况下,洛伐他汀显著减少再灌注时血浆中MDA生成和LDH及CK的释放（P<0.01）,并且提高心肌组织SOD活性（P<0.05）。结论Lovastatin对在体大鼠心脏急性缺血/再灌注时具有非降脂外的延迟性心肌保护作用。NO合酶途径是其心脏保护作用的诸多途径之一。     

内源性保护蛋白与心肌缺血预处理的延迟效应

缺血预处理 （IP）对长时间缺血的心肌具有明显的保护作用。 IP的延迟效应 （DP）比早期效应更有意义 ,它持续的时间较长、作用更广泛。内源性保护蛋白在 DP中扮演着关键的角色。那么 ,这些内源性蛋白究竟有哪些 ?它们的作用机制及其临床意义又怎样 ?本文作者就 DP中内源性保护蛋白的研究进展做一综述。     

p38MAPK抑制剂与急性肺损伤的保护

急性肺损伤可由多种诱因引起,是急性呼吸衰竭最主要部分,死亡率高.p38MAPK信号转导途径参与急性肺损伤的发生、发展.p38MAPK抑制剂是一类合成的小分子有机化合物,通过特异性阻断p38减少急性肺损伤时炎症因子表达,改善血流动力学,减轻组织损伤,有望成为急性肺损伤治疗的新途径.     

乳酸杆菌对幽门螺旋杆菌脂多糖作用下的SGC-7901细胞p38MAPK磷酸化水平和凋亡率的影响

目的:探讨保加利亚乳酸杆菌(lactobacillus bulgaricus,LBG)对幽门螺旋杆菌悉尼株脂多糖(H pyloriSS1-LPS)作用下SGC-7901细胞的p38有丝分裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)磷酸化水平和凋亡率的影响.方法:使用LBG(1×1013CFU/L)或p38MAPK通路阻滞剂SB203580(10 μmol/L)预处理SGC-7901细胞,1 h后分别加入2.5×103,2.5×104,2.5×105EU/L的H pyloriSS1-LPS,干预2 h后使用免疫细胞化学方法检测各组细胞磷酸化p38MAPK(P-p38MAPK)的水平,4,5,6 h后使用MTT法检测细胞活性,6 h后使用流式细胞仪检测各组细胞凋亡率.结果:与对照组比较,H pyloriSS1-LPS直接干预后,SGC-7901细胞的活性明显下降(0.1 64±0.028 vs 0.622±0.068,P＜0.05),凋亡率(10.000%±0.510% vs 4.175%±0.206%,P＜0.05)和P-p38MAPK水平明显上升(79.771±1.424 vs 4.075±0.135,P＜0.01),呈剂量依赖性;LBG预处理各组的细胞凋亡率和P-p38MAPK水平无明显改变;SB203580预处理各组的细胞活性和细胞凋亡率无明显改变.结论:HpyloriSS1-LPS可诱导SGC-7901细胞凋亡,其机制可能包括诱导生成P-p38MAPK;而LBG能对抗H pyloriSS1-LPS的促凋亡作用,其机制可能抑制H pyloriSS1-LPS诱导生成P-p38MAPK.     

受体酪氨酸激酶系统在心肌缺血预处理延迟保护机制中的作用

预先反复短暂缺血可以减轻后续长期缺血所造成的心肌损伤，如限制心肌梗塞面积、减少心律失常发生和改善心肌收缩功能，这种现象称为缺血预处理（ｉｓｃｈｅｍｉｃｐｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇ；ＩＰ）［１］。其心脏保护作用包括两个时相：即早期保护（ＩＰ后即刻出现...     

p38蛋白激酶抑制剂对大鼠膝骨关节炎的软骨保护作用

目的观察p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)抑制剂SB203580对大鼠膝骨关节炎(OA)的软骨保护作用。方法将40只大鼠随机均分为A、B、C、D组,均行单侧膝关节前交叉韧带切断。A、B组术后分别于关节腔注射0.1ml浓度为100、10μm/L的SB203580,每周1次,连续6周;C组注射等量生理盐水;D组不做任何处理。术后6周处死动物,比较各组软骨的大体变化、OA评分、软骨表面分级及Mankin炎性分级。结果A、B组软骨大体评分、软骨表面分级及Mankin炎性分级均轻于C、D组。结论关节腔注射p38 MAPK抑制剂能延缓软骨退变程度,具有软骨保护作用。     

芬太尼延迟性预处理对体外循环下心脏瓣膜置换术的心肌保护作用

目的:观察术前给予芬太尼对全麻体外循环下行心脏瓣膜置换术患者心肌的保护作用。方法:择期在全麻体外循环下行心脏瓣膜置换术患者共60例,心功能Ⅱ～Ⅲ级(NYHA标准)。随机被分为芬太尼预处理组和对照组:芬太尼预处理组术前2d给予0.3μg/kg.h芬太尼泵微量持续注射,分别在术前,主动脉开放1h、6h、12h、24h、48h采集血标本,测定肌钙蛋白I(cTnI)水平;并记录术中体外循环时间、主动脉阻闭时间、停跳液量、复跳方式、ICU停留时间等指标以及计算在ICU停留期间正性肌力药物得分。结果:芬太尼组血清cTnI整体升高水平低于对照组,其中在主动脉钳夹开放后6h、12h、24h与对照组相比有显著差异(P均0.05);芬太尼组在ICU停留的时间显著少于对照组(P0.05);在进入ICU后12h、24h、48h的正性肌力药物使用得分显著低于对照组(P均0.05)。结论:术前给予阿片受体激动剂芬太尼的延迟预处理对全麻体外循环下行心脏瓣膜置换术的患者具有心肌保护作用。     

丝裂素活化蛋白激酶参与心肌缺氧预处理的延迟保护作用

目的　探讨丝裂素活化蛋白激酶 (mitogen- activated protein kinase,MAPK)在心肌缺氧预处理延迟保护中的作用。方法　在培养乳鼠心肌细胞缺氧预处理的模型上 ,检测预处理后即刻、1h、6 h和 12 h的 MAPK活性变化 ,观察细胞缺氧 /复氧损伤后、延迟预处理后及蛋白激酶 C(PKC)抑制剂 chelerythrine(Ch)干预后的细胞存活率、L DH的释放、MDA含量和 SOD活性。结果　 MAPK活性在预处理后即刻明显增加 (P<0 .0 1) ,在 6 h后降至或接近对照水平。与未预处理组心肌细胞缺氧 /复氧损伤相比较 ,预处理后 2 4 h心肌细胞存活率增高 [(5 8.6 4± 5 .5 3) %vs (44 .2 9± 4 .2 7) % ,P<0 .0 1],L DH[(5 9.5 0± 11.0 8) U/ L vs(83.17± 13.6 9) U/ L,P<0 .0 1]和 MDA含量[(2 .33± 0 .4 9) nmol/ L vs(3.2 9± 0 .2 6 ) nmol/ L,P<0 .0 1]均降低 ,SOD活性增加 [(2 1.5 3± 3.6 3) n U/ m l vs(12 .86± 2 .6 8) n U/ ml,P<0 .0 1]。PKC抑制剂 chelerythrine可消除预处理的延迟保护作用。结论　预处理 2 4 h心肌细胞对再次缺氧 /复氧有保护作用 ,PKC、MAPK均参与心肌细胞预处理后的延迟保护作用     

缺血预处理的保护作用

缺血预处理（Ｉｓｃｈｅｍｉｃｐｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇ;ＩＰ）是一种对一次或多次短暂缺血及再灌注的快速适应性反应,提高组织（目前主要指心肌）对随后较长时间缺血及再灌注的耐受力,是一种内源性保护作用现象,是因内源性保护物质的释放而产生的。目前ＩＰ的...     

p38抑制剂对蛛网膜下腔出血大鼠神经元的保护作用

目的探讨丝裂原活化蛋白激酶p38抑制剂对蛛网膜下腔出血(SAH)后神经功能的保护作用及其机制。方法取SPF级成年雄性SD大鼠27只,选用视交叉前池注血法制作SAH模型,剔除3只死亡大鼠,采用随机数字表法将24只大鼠分为假手术组、SAH组、二甲基亚砜(DMSO)组、DMSO+p38抑制剂组,每组6只。采用Western blot分别检测p38、磷酸化p38、帕金森病蛋白7(DJ-1)、自噬相关基因5(Atg5)、自噬接头蛋白p62、微管相关蛋白Ⅰ轻链3(LC3)-Ⅰ和LC3-Ⅱ蛋白表达,并用Garcia神经功能评分标准判断神经损伤。PC12细胞加氧合血红蛋白建立体外SAH模型,完全随机分为假手术组、SAH组、DMSO组及DMSO+p38抑制剂组,利用荧光探针JC-1观察线粒体膜电位的变化。结果 (1)4组大鼠p38、磷酸化p38和DJ-1蛋白表达的差异均有统计学意义(F值分别为94.959、150.293和698.476,均P0.01)。4组PC12细胞线粒体膜电位的差异均有统计学意义(F值为24.989,P0.01)。4组大鼠自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Atg5和p62表达的差异均有统计学意义(F值分别为235.319、110.490和36.311,均P0.01)。4组大鼠神经功能评分的差异有统计学意义(F值25.550,P0.01)。(2)与假手术组比较,SAH后p38、磷酸化p38和DJ-1蛋白表达均显著上调(分别为0.43±0.06、0.41±0.02和0.07±0.01上升至0.61±0.08、0.79±0.07和0.17±0.03,均P0.01),线粒体膜电位去极化(8.29±0.28上升至9.23±0.42,P0.01);Atg5蛋白表达上调及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ升高(分别为0.23±0.04和0.25±0.04上升至0.47±0.04和0.46±0.04,均P0.01),p62蛋白表达下调(1.09±0.14下降至0.54±0.10,P0.01);神经功能评分降低[(17.5±0.6)分降至(11.3±2.7)分,P0.01]。p38抑制剂显著下调SAH后磷酸化p38蛋白表达(0.79±0.07降至0.47±0.04,P0.01),上调DJ-1蛋白表达(0.17±0.03上升至1.02±0.06,P0.01),线粒体膜电位恢复(9.23±0.42降低至8.47±0.36,P0.01),细胞自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Atg5表达上调(分别为0.46±0.04、0.47±0.04上调为0.77±0.06、0.95±0.12,均P0.01),P62表达变为SAH水平(0.57±0.09变为0.54±0.10,P=0.650),神经功能评分得到显著升高[(11.3±2.7)分上升至(15.5±1.0)分,P0.01)]。结论 SAH后,p38抑制剂下调磷酸化p38活性后可能通过上调DJ-1蛋白表达,抑制异常自噬,维持线粒体功能,进而发挥神经保护功能。     

睡眠剥夺对老龄大鼠学习记忆及磷酸化p38MAPK信号、Aβ表达的影响

目的 探讨睡眠剥夺(SD)对老龄大鼠学习记忆的影响及可能机制.方法 90只雄性SD老龄大鼠随机分成对照组、模型组、SB203580干预组.改良多平台SD法建立SD模型.SDI d、3d、5d光镜观察海马区神经细胞形态变化,免疫组化法和Western印迹法检测海马磷酸化P38 MAPK蛋白和β淀粉样肽(Aβ)表达,水迷宫法测试动物学习记忆功能.结果 与对照组比较,模型组中,随睡眠剥夺时间延长,SD老龄大鼠海马神经元结构损伤明显,磷酸化P38MAPK和Aβ阳性细胞数及表达增多,动物学习记忆能力减退;与模型组比较,SB203580组中脑组织形态损伤程度减轻、磷酸化P38 MAPK和Aβ阳性细胞数及表达,动物学习记忆功能得到改善.结论 睡眠剥夺可加重老龄大鼠学习记忆功能障碍,与P38 MAPK信号过度活化、Aβ沉积有关.