巴曲酶(DF-521)对大鼠局灶性脑缺血/再灌注模型CD54表达的影响

目的：探讨巴曲酶对大鼠局灶性脑缺血后CD54表达的影响。方法：建立大鼠大脑中动脉缺血／再灌注(MCAO)模型，用免疫组化的方法观察CD54在脑缺血／再灌注后不同时间的动态变化，比较巴曲酶组和模型组的异同。结果：与模型组比较，巴曲酶组CD54阳性表达在脑缺血再灌注6h，3天，4天，7天均降低，6h降低最明显，主要位于神经元严重受损的缺血区。结论：巴曲酶对脑缺血／再灌注后CD54表达有降低趋势，     

石蜡线栓的大鼠局灶性脑缺血再灌注模型

目的 :探讨石蜡线栓在局灶性脑缺血再灌注模型中的效果。方法 :12 0只Wistar大鼠分为石蜡组 (组 1,按不同的手术方式分为组 1a和组 1b)及硅胶组 (组 2 ) ,比较拔出线栓的形态、栓塞成功例数、灌洗效果、梗死体积、术中出血量及手术时间。结果 :组 2梗死体积显著减少 (P <0 0 1) ,组 1a灌洗效果最好 (P <0 0 1) ;组 1b的平均手术时间最短 (P <0 0 1) ,但出血量最多 (P <0 0 1) ;组 2的栓塞成功率低 (P <0 0 5 )。结论 :石蜡线栓使模型的成功率提高 ;从ECA进入并结扎PPA的术式出血减少 ,灌洗效果好、可靠。     

大鼠局灶性脑缺血模型的建立

急性脑缺血溶栓研究已有20余年的历史,曾因导致出血频繁而停用。随着新型溶栓药物的出现,其安全性逐渐提高,引起人们对溶栓疗法的重新认识。目前适用于溶栓研究的局灶性脑缺血动物模型均有不足之处。我们采用并改良Overgaard K[1]等的颈内动脉注入自体血凝块的方法,制作大鼠局灶性脑缺血模型,此模型具有与人类脑缺血极其相似的特点,最适用于溶栓研究,现报道如下。     

大鼠脑局灶缺血/再灌注对循环CD34+造血干/祖细胞和血管内皮生长因子的影响

近年来学者们发现人和动物的循环血液中存在一群来自骨髓的造血干／祖细胞，CD34抗体标记阳性。它们在一定的条件下能分化成内皮细胞，参与新血管形成。所以学者们又将这一部分细胞称为内皮前体细胞(Endothelial Progenitor Cells EPCs)。在体内缺血或体外细胞因子的刺激下，循环的内皮前体细胞(EPCs)能够定向迁移到缺血或损伤部位，参     

CD45RB在大鼠短暂局灶性脑缺血时神经元的表达

目的探讨细胞共同抗原ＣＤ４５ＲＢ在缺血性脑损伤中作用。方法选用ＳＤ成年大鼠阻塞大脑中动脉２ｈ,再灌流０．５～４８ｈ制成短暂局灶性脑缺血,用ＣＤ４５ＲＢ对缺血性脑组织进行免疫组化染色。结果正常组及假性手术组的脑组织有散在的神经元弱表达ＣＤ４５ＳＲＢ。缺血脑组织,皮质层锥体细胞、纹状体及下丘脑区的神经元ＣＤ４５ＲＢ强阳性,其胞核形态及对苏木素着色均正常;轻度变性的神经元弱表达ＣＤ４５ＲＢ：细胞核固缩死亡的神经元ＣＤ４５ＲＢ阴性。结论本实验证实ＣＤ４５ＲＢ在缺血时形态正常的神经元呈强表达,其重要意义尚需进一步研究。     

巴曲酶治疗进展性脑梗死的血液流变学及疗效观察

目的评价巴曲酶(DF-521)治疗进展性脑梗死的血液流变学变化及临床疗效、安全性观察。方法采用随机分组、安慰剂对照方式分为试验组及对照组,2组均采用丹参注射液作为基础治疗,试验组采用巴曲酶(DF-521)注射液静滴,对照组加安慰剂静滴,均为隔日1次,共3次,同时对治疗组血液流变学进行动态观察。结果巴曲酶(DF-521)能改善血液流变学的某些因素,对血小板数、出凝血时间、肝肾功能无不良影响。试验组疗效明显优于对照组。结论巴曲酶(DF-521)治疗进展性脑梗死疗效肯定,而且安全性高、不良反应少,宜于早期应用。     

国产降纤酶对大鼠局灶性脑缺血/再灌注后行为学和梗死体积的影响

目的：探讨国产降纤酶对大鼠局灶性脑缺血／再灌注动物模型的神经行为学和脑梗死体积的影响，以证明其是否有脑保护作用。方法：采用线检法制作大鼠大脑中动脉闭塞模型，用Zea Longa 5分制评分和TTC染色法评价神经行为学和脑梗死体积。由吉林大学第一医院和复旦大学华山医院共同进行实验研究，每部分实验动物各做一半。动物随机分为缺血3h及再灌注3h,6h,24h和72h；缺血6h及再灌注3h,6h,24h;缺血24h等共10组。降纤酶采用8U／kg腹腔注射给药。结果：行为学结果：在10组中仅于缺血6h再灌注6h组Zea Longa评分有明显改善（P＜0．05），其余各组与盐水对照组比较无显著性差异。梗死体积测定结果：在缺血3h各组中，只有缺血3h再灌注72h这个时间点比盐水组无明显缩小（P＞0．05），其余各时间点梗死体积均明显缩小（P分别＜0．05、0．01和0．001）。在缺血6h和24h组中，各时间点与盐水组比较均明显缩小（分别为P＜0．01和P＜0．05）。结论：国产降纤酶对大鼠局灶性脑缺血及再灌注损伤有一定的保护作用。     

大鼠局灶性脑缺血再灌注后CAD表达与细胞凋亡的关系

目的　探讨大鼠局灶性脑缺血再灌注后缺血半暗带 Caspase-3激活的 DNA酶 (CAD)基因的表达变化与细胞凋亡的关系。方法　线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞 (MCAO)及再通模型。应用 RT-PCR技术检测MCAO再通后不同时相缺血半暗带皮质 CAD基因的表达 ,同时利用 TU NEL法观察对应区域细胞凋亡的动态变化规律。结果　脑缺血再灌注 6h,半暗带皮质 CAD m RNA显著升高 ,密度比值为 0 .74± 0 .0 4,再灌注 2 4h达到高峰 (1.13± 0 .11)。对应各时相均可见神经细胞凋亡 ,凋亡细胞以再灌注 48h组为最高 (113 .10± 13 .88)。结论　脑缺血再灌注可致 CAD基因表达上调 ,可能参与了缺血后神经细胞凋亡过程     

巴曲酶对大鼠脑缺血再灌注Fas基因和FasL基因表达变化的影响

目的探讨巴曲酶对大鼠脑缺血再灌注FasmRNA和FasLmRNA表达变化的影响。方法取健康Wister大鼠40只,随机分5组,即Ⅰ组为假手术组,Ⅱa组为等渗盐水缺血6h组,Ⅱb为等渗盐水缺血6h再灌注6h组,Ⅲa组巴曲酶缺血6h组,Ⅲb组巴曲酶缺血6h再灌注6h组。线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)及再通模型,应用RT-PCR技术检测MCAO及再灌注后缺血半暗带皮质FasmRNA和FasLmRNA表达水平。结果Ⅰ组Fas mRNA、FasLmRNA均未见表达,Ⅱa组表达水平明显增高(分别是0.90±0.05,0.45±0.02),Ⅱb表达水平明显增高(分别为0.94±0.06和0.51±0.03),Ⅲa组表达水平明显下降(分别是0.45±0.03,0.40±0.06),Ⅲb组表达水平明显下降(分别是0.22±0.03,0.16±0.01)。结论巴曲酶可影响脑缺血再灌注FasmRNA和FasLmRNA表达水平。     

局灶性脑缺血大鼠脑内Angiogenin表达水平的变化

目的　脑梗死患者存活时间与脑内血管增生程度相关。血管生长素 ( angiogenin)具有促血管生成作用。本研究旨在观察大鼠脑缺血后血管生长素在脑内表达水平的变化。方法　大鼠大脑中动脉栓塞法 ( MCAO法 )制作局灶性脑缺血模型 ,脑切片免疫组织化学染色检测血管生长素蛋白表达。结果　血管生长素在正常大鼠脑中普遍弱阳性表达 ,脑膜、室管膜及血管染色较为明显。脑缺血后 6 h缺血脑区血管生长素表达水平明显增强 ( P<0 .0 1) ,缺血 2 4 h内血管生长素表达水平逐渐升高。结论　脑缺血可诱导缺血脑区血管生长素蛋白表达增强     

高血压对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤组织病理结构的影响

目的研究高血压对脑缺血性损伤的病理及其超微结构的影响。方法用线栓法将肾性高血压大鼠和正常大鼠制成局灶性脑缺血再灌注模型；TTC染色及图像分析系统测定局部脑缺血后不同时间的梗死灶体积．同时HE染色及透射电镜观察大鼠局灶脑缺血再灌注后及假手术组的组织病理及超微结构的变化。结果高血压大鼠与正常血压大鼠相比局部缺血再灌注在同等时间内梗死灶的面积较大，超微结构改变也较明显。结论高血压引起脑内微小动脉的改变．侧支循环减少．加重脑缺血损伤。     

局灶缺血诱导大鼠脑肝细胞生长因子表达的动态观察

目的:探讨肝细胞生长因子(HGF)在局灶脑缺血边缘区表达的动态变化及其意义。方法:采取线栓法建立局灶脑缺血模型,根据缺血时间分为1h、3h、12h、24h组,RT-PCR法检测HGF的表达及其动态变化。结果:缺血1h脑缺血边缘区即有HGF的表达,且随着缺血时间的延长其表达逐渐增强,24h尤为明显。结论:HGF在局灶脑缺血诱导的高表达可能在脑缺血损伤组织的保护及修复过程中起重要作用。     

亚低温对局灶脑缺血再灌注后脑血流、血脑屏障、神经细胞损伤作用的研究

目的对比研究不同时期亚低温（ＭＨＴ３２℃±０．２℃）对局灶脑缺血再灌注损伤的作用。方法６４只雄性ＳＤ鼠被随机分成常温（ＮＴ）、缺血期亚低温（ＭＨＴｉ）、再灌注期亚低温（ＭＨＴｒ）、缺血期加再灌注期亚低温（ＭＨＴｉ＋ｒ）四组,并用改良Ｋｏｉｚｕｍｉ＇ｓ局灶脑缺血模型,分别观察了动物缺血３小时再灌注３小时过程中,缺血周边和核心区局部脑血流（ｒＣＢＦ）改变,再灌注３小时后血脑屏障（ＢＢＢ）破坏及再灌注７２小时后缺血梗塞灶体积。结果ＭＨＴｉ＋ｒ及ＭＨＴｉ均有改善缺血周边区再灌注后急性高灌注和继发低灌流及核心区持续低灌流、减轻血脑屏障破坏、减少缺血梗塞灶体积的作用。该作用尤以ＭＨＴｉ＋ｒ为明显。ＭＨＴｒ作用有限。结论ＭＨＴｉ＋ｒ对皮层的保护作用较ＭＨＴｉ好。由此可推知,局灶脑缺血再灌注损伤是个持续的过程,亚低温治疗不但要考虑开始时间,其持续时间对疗效具有同样重要价值     

大鼠局灶性脑缺血后CPP32和P53蛋白的表达

目的　探讨大鼠脑缺血后神经元损害过程中CPP32和P5 3蛋白表达的变化。方法　建立大鼠大脑中动脉闭塞 (MCAO 2h)模型 ,采用免疫组化方法观察CPP32和P5 3蛋白在大鼠脑缺血后不同时间的动态变化。结果　CPP32蛋白在脑缺血再灌注 2 2h和 4 6h ,阳性表达最明显。而P5 3在脑缺血再灌注 2 2h阳性表达最明显 ,并持续至再灌注 70h。阳性表达主要位于神经元严重受损的缺血区内。结论　CPP32和P5 3蛋白表达与脑缺血后神经细胞死亡关系密切。     

Effects of tetrahydrobiopterin on cerebral infarction after transient focal ischemia in rats

Abstract

Objectives: The present study investigated the effects of tetrahydrobiopterin (BH4) on cerebral infarction after transient focal ischemia in rats.

Methods: Focal ischemia (1·5 hours) was created in male Sprague-Dawley rats (250-280 g) by middle cerebral artery occlusion. Some rats were treated with 20 mg/kg tetrahydrobiopterin by intraperitoneal injection 30 minutes before reperfusion. At 2, 6, and 12 hours of reperfusion, the brains were harvested for the nitric oxide synthase (NOS) activity and nitric oxide (NO) level assays. At 12 hours of reperfusion, the brains were harvested for infarct size measurement.

Results: NOS activity and NO level were all augmented after reperfusion. BH4 treatment significantly further increased NOS activity and NO level. Cerebral infarct size was significantly bigger in BH4 treatment group compared to that in no treatment group.

Conclusions: The data indicate that BH4 enhances cerebral infarction after transient focal ischemia in rats, through NOS and NO pathway.     

缺血预处理对大鼠局灶性脑缺血的保护作用

目的 探讨缺血预处理对大鼠局灶性脑缺血的保护作用及其机制。方法 将30只雄性SD大鼠随机分为假手术组、缺血组和缺血预处理组,每组10只。使用改良线栓法制作大鼠局灶性脑缺血模型。采用Longa-Bederson（LB）评分法评估缺血预处理对大鼠局灶性脑缺血后神经功能的影响,采用TTC染色方法分析大鼠海马区梗死面积,采用TUNEL染色法分析大鼠海马区细胞凋亡,使用气相色谱方法分析缺血预处理后大鼠海马区域丙酮酸含量。结果 缺血预处理组大鼠LB评分[（1.67±0.21）分}明显优于缺血组[（3.17±0.31）分;P<0.05]。缺血预处理组大鼠海马区梗死面积[（154±8.1）mm2]明显少于缺血组[（221.20±5.86）mm2;P<0.05]。缺血预处理组大鼠海马区域丙酮酸含量[（3.70±0.20）μmol/g]明显高于缺血组[（2.58±0.17）μmol/g;P<0.05]。结论 缺血预处理对大鼠局灶性脑缺血具有显著神经保护作用,其机制可能与明显减少大鼠脑组织梗死、增加海马丙酮酸含量、减少细胞凋亡有关。     

流式细胞仪检测大鼠局灶性脑缺血再灌流后细胞凋亡的研究

本研究采用流式细胞仪（ＦＣＭ）检测大鼠局灶性脑缺血再灌流后凋亡细胞ＤＮＡ断裂百分率。结果表明：随再灌流时间的增加，ＤＮＡ断裂百分率逐渐增加，再灌流１ｄ时达高峰，再灌流３～７ｄ逐渐下降。结果提示：细胞凋亡在局灶性脑缺血再灌流损伤中呈动态过程且系神经细胞死亡的重要形式。     

Regional brain polyamine levels in permanent focal cerebral ischemia

Transient global cerebral ischemia has been shown to induce marked changes in the polyamine pathway with a significant increase in putrescine, the product of the ornithine decarboxylase reaction. This study examined the relationship between tissue and extracellular polyamines and regional cerebral blood flow and brain edema. Six hours of focal ischemia in cats (n=10) was produced by permanent middle cerebral artery occlusion. Extracellular polyamines were measured in extracellular fluid obtained by microdialysis. Regional cerebral blood flow using laser Doppler flowmetry and specific gravity, an indicator of brain edema, were measured in contralateral (non-ischemic), penumbra and densely ischemic brain regions. A significant increase in the tissue putrescine level was found in the penumbra but there was no difference in the putrescine levels between contralateral and densely ischemic regions. There was no significant change in the spermidine and spermine levels in the three regions. Extracellular levels of putrescine and spermidine were found to be significantly lower than the tissue levels and no change in polyamines was observed in any region. Significant edema formation was observed in densely ischemic and penumbra regions. This is the first demonstration that tissue putrescine is increased in the penumbra region, an area of incomplete ischemia that is developing brain edema.