生物传感器技术在分离赤芍抗内毒素单体成分中的研究

目的 :利用生物传感技术从赤芍中分离抗内毒素单体成分。方法 :以LipidA包被生物传感器样品池表面 ,建立筛选靶点 ,并以传感器上回收物的紫外扫描结果为参照 ,通过跟踪测定硅胶柱层析、高效液相色谱 (HPLC)流出组分与LipidA的结合能力 ,分离抗内毒素的单体成分 ,并应用鲎试剂法测定单体成分与体外脂多糖 (LPS)的中和作用。结果 :从生物传感器回收到可与LipidA结合的组分 ,其紫外吸收峰分别为194、215、275nm波长。通过HPLC分离出与LipidA具有较高结合活性的单体成分为1 ,2 ,3 ,4 ,6—O—五没食子酰—β—D—葡萄糖 (PGG ) ,浓度为8、4、2μg/ml的PGG分别能够中和0 1EU/mlLPS活性的68 8 %、43 7 %、31 4 %。结论 :利用生物传感器技术 ,以LipidA为靶点分离赤芍抗内毒素单体成分是可行的 ,且具有高效、快速、准确等优点 ,适合于大规模地从中草药中分离抗内毒素的单体成分。     

赤芍拮抗内毒素活性的实验研究

目的:提取分离中药赤芍中拮抗内毒素(LPS)的有效成分并进行药理学活性检测。方法:通过生物传感器,结合常规的中药分离技术,分离提取出赤芍拮抗LPS的有效成分,应用鲎实验和ELISA法检测该有效成分对LPS的中和作用。结果:赤芍中的有效成分与LPS具有较高的结合作用,该结合作用具有较强的中和LPS活性,在体外能够显著抑制由LPS介导小鼠RAW 2 6 4.7细胞释放TNF α。结论:以LPS为靶点,应用生物传感器技术,可快速、有效地提取分离赤芍中具有较强的中和LPS活性的有效成分。     

中药赤芍抗内毒素活性的实验观察

目的：通过提取中药赤芍中抗内毒素（LPS）活性的有效成分,进行药理学观察,探讨赤芍抗内毒素活性的内在机制。方法：将常规中药化学分离技术与生物传感器相结合,分离赤芍抗LPS的有效成分,应用酶联免疫吸附试验（ELISA）法和鲎试验法检测该有效成分对LPS的中和作用。结果：赤芍中抗LPS的有效成分具有较强的中和LPS的活性．该有效成分能够在体外实验中显著抑制由LPS介导的培养细胞系释放TNF-α。结论：中药赤芍中存在高活性的抗LPS有效成分．该成分可以LPS为靶点,应用常规中药化学分离技术与生物传感器相结合的方法进行快速、有效地提取分离。     

以lipid A为靶点应用生物传感器技术筛选抗炎中药

目的应用生物传感器跟踪检测技术从传统抗炎中药中筛选具有拮抗内毒素作用的中药，并对其进行活性物质含量排序。方法将lipid A包被于生物传感器的非衍生板，建立靶点，测定22种去鞣质后的中药水煎液与lipid A的亲和力；选择具有较高亲和力的药物与定量脂多糖（5ng／mL）于37℃混合孵育30min，再测定其与lipidA的亲和力，以评价药物水提液中活性物质的含量。结果22种中药均具有与lipidA较高的亲和力（大于100RU）；侧柏叶、地骨皮、石榴皮等16种中药中与lipidA特异性结合的活性物质含量较高。结论应用生物传感器技术建立的筛选平台快速而客观，筛选出的16种中药均含有能与lipidA发生特异性结合作用的非鞣质类活性物质。     

赤芍拮抗内毒素活性物质的分离及生物学活性研究

目的 通过生物传感器技术，应用常规分离技术寻找赤芍中的非鞣质类的抗LPS活性成分。方法 以生物传感器技术和薄层色谱技术为指导，建立赤芍抗LPS成分的有效提取方法。再利用高效液相色谱技术（HPLC）从赤芍中定向分离出具有拮抗LPS作用的活性组分。最后对其进行拮抗LPS活性的药理学评价。结果 利用生物传感器技术完成了对不同产地和不同煎煮方法的赤芍拮抗LPS活性的筛选，确定出醇提法的四川的赤芍中拈抗LPS活性成分的含量最高。并从中定向分离出6个具有与Lipid A结合活性的组分。     

以Lipid A为靶点拮抗内毒素中药的筛选

目的利用生物传感器跟踪技术从抗炎中药中筛选出具有拮抗内毒素的中药,为进一步对中药拮抗内毒素活性成分的分离纯化提供实验依据。方法将革兰阴性细菌的脂质A(Lipid A)包被于生物传感器的非衍生板建立靶点,跟踪测定赤芍、大黄、黄芩等78种中药的水提物和醇提物与Lipid A的结合活性,再将筛选出的中药去鞣质后与定量的内毒素(LPS,20、50ng·ml-1)37℃孵育30min后,测定孵育后的样品与Lipid A的结合情况,以评价样品内的活性物质含量。结果在所筛选的78种中药中有12种中药的水提物与Lipid A具有较高的亲和活性,在这12种中药中有6种中药的醇提物与Lipid A也具有较高的亲和活性;通过对所筛选出的12种中药的水提物去除鞣质后与LPS的消耗实验,发现所筛选出的12种中药均含有除鞣质以外的与lipid A具有特异性结合的物质,并且12种中药中能与Lipid A发生特异性结合作用的活性物质含量存在较大的差异。结论生物传感器跟踪技术是一种快速、准确、有效的筛选平台,筛选出的12种中药均含有非鞣质类能与lipid A发生特异性结合作用的物质,为进一步对12种中药抗内毒素有效部位或单体的分离提供了重要的实验依据。     

以CpG ODN为靶点应用生物传感器技术筛选抗炎中药

目的:筛选具有拮抗CpGODN作用的抗炎中药。方法:将CpGODN包被于生物传感器的生物素化样品池上,测定78种中药水煎液与CpGODN的亲和力;选择具有较高亲和力的中药水煎液,与CpGODN(33μg·ml-1)37℃孵育30min后,再次测定与CpGODN的亲和力。结果:78种中药中,地榆、大黄、藏青果等14种中药含有结合CpGODN的活性成分;鸦胆子、赤芍、地榆等9种中药活性成分含量较高。结论:筛选得到9种活性含量较高的中药,为下一步分离提纯有效成分单体提供了实验依据。     

应用生物传感器技术筛选拮抗细菌基因组DNA中药的研究

目的:从传统抗炎中药中筛选具有拮抗细菌基因组DNA(Cytidine -phosphate -guanosine DNA,CpG DNA)活性的中药并对其进行活性物质含量的排序。方法:将CpG DNA包被于生物传感器的生物素样品池以建立靶点,测定114种中药水煎液去鞣质后与CpG DNA的亲和力;选择亲和力较高的35种药物与定量CpG DNA (16.5μg.mL-1)于37℃混合孵育30min ,再测定其与CpG DNA的亲和力,以评价药物水提液中活性物质的含量。结果:114种中药中,半枝莲、薄荷、侧柏叶等35种中药与CpGDNA具有较高亲和力( >100RU) ;侧柏叶、地骨皮、大黄等19种中药与CpG DNA特异性结合的活性物质含量较高。结论:应用生物传感器跟踪检测技术筛选具有结合CpG DNA作用的中药具有可行性,筛选出的19种中药均含有非鞣质类能与CpG DNA发生特异性结合作用的活性物质。     

双黄连注射液在生物体内抗细菌内毒素的效果观察

目的：探讨双黄连注射液在物体内抗细菌内毒素的效果。方法：观察双黄连注射液对毒素休克小鼠的生存时间及对内毒素所致大鼠肝、肺、肾等病理改变的影响。用鲎试剂法测定双黄连注射液所致大鼠和人体血浆内毒素的含量变化。结果：双黄连注射液可明显降低动物和人体血浆内毒素含量，延长内纱休克小鼠的平均生存时间，对内毒素所致大鼠的肝、肺、肾等损害具有保护作用。结论：双黄连注射液在生物体内具有显著的抗内毒素作用。     

板蓝根抗内毒素活性化学成分的筛选

目的:对从板蓝根中分离到的31种化合物做抗内毒素活性筛选.方法:将31种化合物分别制成1 mg•mL 1的无菌水溶液,按《中华人民共和国药典》细菌内毒素检查法检查,再将有活性的化合物溶液分别与可使家兔产生典型发热反应的内毒素温育后,按《中华人民共和国药典》热原检查法做体内实验.结果:6种化合物有体外抗内毒素作用,其中1种化合物有半体内抗内毒素活性.结论:从已分离到的板蓝根化学成分中可筛选出抗内毒素活性化合物.     

赤芍药理作用的研究进展

赤芍为毛茛科植物芍药或川赤芍的干燥根,具有清热凉血、通经及清肝消痈的功效。本文通过调研国内杂志及近十年的国外杂志,对赤芍的药理作用及其在中药复方中的应用进行了总结,为其研究开发治疗心脑血管疾病及其他疾病的药物提供有价值的参考。     

川产赤芍中芍药苷的含量测定

目的:积累川产赤芍中芍药苷含量的数据,为赤芍质量标准研究提供科学依据。方法:采用 HPLC 法,比较不同流动相对川产赤芍中芍药苷的分离效果。条件为 Kromasil-C_(18)柱(4.6mm×200mm,5μm),流动相:乙腈:水(20:80),检测波长:230nm(R≥1.5)。结果:芍药苷在0.4044～2.022μg范围内具有良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率为98.4%,RSD 为2.0%。结论:该法操作简单、准确,可作为质量控制方法之一。     

赤芍片提取工艺的研究

目的:筛选赤芍片水煎提取的最佳工艺条件。方法:应用正交试验得到最佳提取条件。结果:赤芍加水首次10倍量,煎煮2小时。第二次加水8倍量,煎煮1小时。结论:此提取条件最佳。     

黄芩汤配伍使用白芍、赤芍抗溃疡性结肠炎作用比较

目的 基于网络药理学分析和动物实验比较黄芩汤配伍使用白芍、赤芍抗溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的作用差异。方法 从TCMSP数据库和文献中检索白芍与赤芍活性成分,通过Swiss Target Prediction预测潜在靶点;以Ulcerative Colitis为关键词在DisGenet、OMIM、Genecard数据库检索疾病靶点;利用Venny 2.1.0获取交集靶点,Cytoscape 3.7.2软件构建“药物-成分”靶点网络,STRING平台进行蛋白质互作(protein-protein interaction,PPI)网络分析,Metascape数据库进行GO/WIKI分析。采用葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)诱导建立UC小鼠模型,观察分别黄芩汤配伍使用白芍(HQT-BS)和赤芍(HQT-CS)对UC的防治作用,并比较异同。结果 HQT-BS、HQT-CS治疗UC的活性成分别有7,11个,其中共有成分5个;靶点分别有146,157个,其中共有靶点106个,HQT-BS核心靶点为SRC、HSP90AA1、PIK3...     

赤芍、白芍的LC-MS色谱峰与细胞抑制率的谱效关系研究

目的确定川赤芍、赤芍、白芍抑制脂多糖(LPS)诱导大鼠肺泡巨噬细胞NR8383过度激活的"药效成分组"。方法以川赤芍、赤芍、白芍不同提取物LC-MS图谱峰面积及其抑制LPS诱导的NR8383细胞活力增强为基础,采用偏最小二乘回归法,对LC-MS图谱和抑制细胞增殖的内在联系进行谱效分析。结果 LC-MS图上的X11、X6、X1、X2、X9、X3这6个成分组成的"药效成分组"对川赤芍、赤芍、白芍抑制NR8383细胞增殖药效的贡献较大。结论 "药效成分组"的研究显示,同基源的赤芍、白芍在抑制LPS诱导的NR8383细胞增殖方面具有相同的化学成分(X1、X2、X9、X3),但同时也有某些成分(X11、X6)仅能在赤芍中检测到,这提示不同的化学成分及含量差异可能是造成赤芍、白芍功效不同的物质基础。     

HPLC法测定赤芍饮片中芍药内酯苷及芍药苷的含量

目的建立同时测定赤芍中芍药内酯苷和芍药苷含量的方法。方法采用高效液相色谱法。色谱柱:LichrosphereC18(4.6mm×250mm,5μm);流动相:甲醇-水(35∶65);流速:1.0mL.min-1;柱温:30℃;检测波长:230nm。结果芍药内酯苷和芍药苷分别在0.00788~0.15760μg(r=0.9999)和0.08356~1.67120μg(r=0.9999)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为93.85%和96.58%。结论该法快速、简便、准确、专属性强,可用于赤芍饮片的质量控制。     

同基原赤、白芍增强小鼠免疫作用的异同及成分相似度比较

目的:探讨同基原赤、白芍增强小鼠免疫作用的异同并比较其化学成分的相似度,寻求免疫作用的物质基础。方法:腹腔注射环磷酰胺复制免疫低下动物模型,随机分为赤、白芍高、中、低剂量组、空白组、阳性对照组,测定碳粒廓清、迟发型超敏反应、血清溶血素含量以及巨噬细胞吞噬功能;采用HPLC法分析比较起效赤、白芍提取物中的化学成分。结果:赤、白芍给药组与对照组相比,均能显著提高免疫低下模型小鼠免疫器官质量(P<0.05)、极显著增强巨噬细胞吞噬能力(P<0.01)、极显著升高血清溶血素的含量(P<0.01)。此外,HPLC图谱显示本次试验中的赤、白芍起效成分提取物在230nm下具有17个共有峰,相似性为81.29%。结论:同基原赤、白芍化学成分具有相似性,在本次试验中增强小鼠免疫的作用相似,提示其相似的化学成分可能为增强免疫的物质基础。     

赤芍挥发油成分的GC-MS分析

目的:分析赤芍中挥发油的化学成分,为其质量评价提供科学依据。方法:采用水蒸气蒸馏法提取赤芍挥发油,用气相色谱毛细管柱进行分析,归一化法测定其相对含量,并用气相色谱-质谱联用法鉴定化学成分。结果:检出134个色谱峰,鉴定出35个化合物,占挥发油总量的74.90%。其中n-十六烷酸、(Z,Z)-9,12-十八碳烯酸、油酸、十五烷酸、[1S-(1α,2α,5α)]-6,6-二甲基-二环[3.1.1]庚烷-2-甲醇、十六烷酸乙酯、9,12-十八碳烯酸乙酯、Z-β-松油基苯甲酸脂、1(-2-羟基-4-甲氧基苯基)-乙酮、(R)-1-甲烯基-3(-1-甲基-乙烯基)环己烷是主要成分,占挥发油总量的64.54%。结论:本试验为赤芍挥发油的进一步研究奠定了基础。