肺结核蛋白指纹图谱诊断技术研究

目的探索应用蛋白质组学技术于肺结核诊断。方法从本院临床肺结核病例中,选择痰检测结核分枝杆菌培养阳性、阴性肺结核患者共130名,以健康者65名为对照,进行血清蛋白指纹图谱检测,分析其相关蛋白峰值并进行统计学处理。结果130例活动性肺结核患者,与65名正常人群血清蛋白质质谱数据的比较,5个蛋白峰(5335、8048、11683、11700 、11526m/z)有差异,有统计学意义(P<0.01)。该诊断模型判别的总准确率为92.3%（180/195）,特异度100%(65/65),灵敏度88.5%(115/130)。130例活动性肺结核患者中,菌（+）65例,质谱仪检测结果峰值为：5335 m/z 24例,11683 m/z 16例,8048 m/z 14例,11700m/z5例,占90.8%（59/65）;菌（ ）65例,峰值为：8048 m/z 20例,5335 m/z 14例,11526 m/z 8例,11683 m/z 7例,11700 m/z 6例,占84.6%（55/65）。结论血清蛋白质指纹图谱技术简便、快速,标本用量少,是筛选结核病特异性标志物的有效手段,有望成为活动性肺结核的早期辅助诊断指标。     

原发性胆汁性肝硬化血清蛋白质谱的初步研究

目的筛选与原发性胆汁性肝硬化（PBC）相关的血清蛋白质分子标志物并建立指纹诊断模型。方法收集30例PBC患者血清,30例年龄、性别相匹配正常人,采用弱阳离子磁珠（MB-WCX）为检测介质,基质辅助激光解吸电离质谱（MADIL-TOF-MS）检测得到蛋白质谱,再应用基于磁珠的多维纳升级高效液相色谱及液体蛋白芯片指纹图谱（CLINPROT）系统比较两组血清蛋白质谱。结果在m/z100～10000范围内,检测出的129个蛋白峰中11个蛋白峰差异有统计学意义（P〈0.05）,其中m/z为4963.6、5805.33、1544.45、2292.16、2466.45、2845.85在PBC中表达上调,而m/z为3262.24、3191.2、4090.5、4072.43、3277.46的蛋白峰在PBC中下调;选择m/z为3262.24、3191.2这2个蛋白峰建立的蛋白芯片指纹图谱（CLINPROT）系统对PBC诊断的敏感性为90%,特异性为95%。结论筛选出的11个蛋白分子标志物可能与PBC有关,其中m/z4963在PBC中表达最明显;蛋白芯片指纹图谱（CLINPROT）系统可能对PBC的诊断具有一定临床意义。     

γ-干扰素诱导蛋白10在结核性胸膜炎辅助诊断中的应用价值

目的 探讨胸腔积液γ-干扰素诱导蛋白10（IP-10）在结核性胸膜炎中的诊断价值。 方法 选择2010年10月至2011年10月在北京胸科医院门诊及收住入院的胸腔积液患者195例,其中结核性胸腔积液患者112例(结核性胸腔积液组),恶性肿瘤胸腔积液患者83例（恶性胸腔积液组）,采用双抗夹心酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测患者胸腔积液IP-10浓度,研究两组患者IP-10浓度的差异。 结果 结核性胸腔积液组IP-10浓度［196 855（4518～1 512 550） pg/ml］明显高于恶性胸腔积液组［7432（173～97881）pg/ml］,差异有显著统计学意义（U=575.00,P<0.001）;结核性胸腔积液组IP-10阳性患者构成比为82.14%（92/112）,恶性胸腔积液组IP-10阳性患者构成比为6.02%（5/83）,两组比较差异有显著统计学意义（χ²=110.49,P<0.001）。ROC曲线分析结果显示,胸腔积液中IP-10的诊断临界值为10 964 pg/ml,诊断敏感度为82.14%（92/112）,特异度为93.98%(78/83),准确度为87.18%(170/195)。 结论 胸腔积液IP-10水平检测对结核性胸膜炎的早期诊断与鉴别诊断具有重要价值。     

降钙素原在鉴别结核性和恶性胸腔积液中的应用价值

目的探讨胸腔积液中降钙素原(PCT)对鉴别结核性胸膜炎和恶性胸腔积液的临床价值。方法分析63例经内科胸腔镜胸膜活检确诊的结核性胸腔积液(33例)和恶性胸腔积液(30例)患者的胸腔积液中PCT水平,确定结核性胸膜炎患者胸腔积液中PCT的诊断最佳临界值。结果结核性胸腔积液中PCT水平为(0.387+0.199)ng/ml,明显高于恶性胸腔积液组的(0.126+0.069)ng/ml,差异有统计学意义(P<0.05);应用受试者工作曲线(ROC曲线)确定胸腔积液中PCT诊断结核性胸膜炎的最佳临界值为0.341 ng/ml,敏感性为80.1%,特异度为84.5%。结论胸腔积液中的PCT水平可以作为鉴别结核性和恶性胸腔积液的参考指标。     

联合检测VEGF、CEA、ADA对结核性与恶性胸腔积液的鉴别诊断价值

目的：探讨血管内皮生长因子（VEGF）、癌胚抗原（CEA）、腺苷脱氨酶（ADA）联合检测对结核性与恶性胸腔积液的鉴别诊断价值。方法：选择胸腔镜检查、并取活检病理确诊的96例胸腔积液患者,分别采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）、酶联免疫分析法（EIA）、比色分析法检测胸腔积液中VEGF、CEA、ADA的含量、并对统计结果进行分析。结果：恶性胸腔积液组中VEGF、CEA值分别为（307±132）pg／L、（16．3±7．8）μg／L,分别显著高于结核性胸腔积液组的（34±11．2）pg／L、（2．3±1．1）μg／L（均P〈0．01）。恶性胸腔积液组ADA含量为（12．46±4．61）U／L,低于结核性胸腔积液组（44．98±11．78）U／L,两者间差异有统计学意义（P〈0．05）。联合检测VEGF和CEA,对诊断恶性胸水的敏感性为95．4％,特异性为99．8％。结论：检测胸腔积液中VEGF、CEA及ADA对胸水的鉴别诊断有一定的价值,其联合检测综合诊断能提高恶性胸水与结核性胸膜炎的诊断准确率。     

血清CRP及胸腔积液ADA、LDH、CEA联合检测在胸腔积液鉴别中的意义

联合检测36例恶性胸腔积液（恶性组）、27例结核性胸腔积液患者（结核组）血清C反应蛋白（CRP）及胸水腺苷脱氨酶（ADA）、乳酸脱氢酶（LDH）、癌胚抗原（CEA）水平,结果结核组血清CRP及胸腔积液ADA水平均显著高于恶性组（P均〈0.05）;而恶性组胸腔积液LDH、CEA水平均显著高于结核组（P均〈0.05）;血清CRP及胸腔积液ADA、LDH、CEA联合检测较单项检测敏感性、准确性及特异性均明显提高,其中血清CRP联合胸腔积液CEA、ADA检测诊断恶性积液敏感性、特异性最高。认为血清CRP及胸腔积液ADA、LDH、CEA联合检测对鉴别恶性、结核性积液有较好价值,以血清CRP联合胸腔积液CEA、ADA为佳。     

胸腔积液中IL-27及Gene Xpert MTB/RIF联合检测有助于结核性胸膜炎的快速诊断

目的：观察胸腔积液中白介素-27（IL-27）、结核杆菌利福平耐药基因（Gene Xpert MTB/RIF）表达水平在结核性胸膜炎快速诊断中的应用价值。方法：回顾性分析128例结核性胸膜炎患者的临床资料，另选择同期收治的128例非结核性胸膜炎胸腔积液患者为对照（恶性胸腔积液组、类肺炎性胸腔积液组与漏出性胸腔积液组分别61例、36例与31例），采用酶联免疫吸附法检测患者胸腔积液中IL-27水平，并予以Gene Xpert MTB/RIF试验，以临床综合诊断结果为金标准，评估IL-27、Gene Xpert MTB/RIF水平在结核性胸膜炎诊断中的应用价值。结果：结核性胸膜炎组胸腔积液中IL-27水平显著高于恶性胸腔积液组、类肺炎性胸腔积液组与漏出性胸腔积液组（F=112.944，P均<0.05）；IL-27诊断结核性胸膜炎的AUC值为0.875，敏感度为73.43%、特异性为85.16%；Gene Xpert MTB/RIF诊断结核性胸膜炎敏感度、特异性分别为77.34%、100.00%；两者联合诊断结核性胸膜炎的敏感度为86.72%，特异性为100.00%。结论：胸腔积液中IL-27、Gene Xpert MTB/RIF水平对结核性胸膜炎的诊断有一定意义，联合检测有助于结核性胸膜炎的诊断。     

血管内皮生长因子及转化生长因子-β联合检测在老年结核性与恶性胸腔积液中的价值

目的 监测老年结核性胸腔积液和老年恶性胸腔积液中血管内皮生长因子（VEGF）和转化生长因子-β（TGF-β）在鉴别老年结核性和老年恶性胸腔积液中的价值。方法 老年结核性胸腔积液组31例，老年恶性胸腔积液组30例，分别行胸腔闭式引流术。采用酶联免疫吸附法（ELISA）法检测2组患者的胸液中VEGF及TGF-β的水平。结果 恶性胸腔积液中VEGF及TGF-β的水平呈正相关（r=0．438，P〈0．05）。恶性胸腔积液中VEGF及TGF-β水平[（269±62）ng／L，（125．5±12．0）mg／L]较结核性胸腔积液[（104±55）ng／L，（81±23）mg／L]升高，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论 VEGF及TGF-β在老年恶性胸腔积液的形成起重要作用，对恶性胸腔积液与结核性胸腔积液的鉴别具有重要价值。     

胸液蛋白电泳及腺苷脱氨酶在结核性与恶性胸腔积液鉴别诊断中的应用

目的对结核性及恶性胸腔积液患者的胸液蛋白电泳进行分析及ADA检测，探讨二者在结核性胸腔积液与恶性胸腔积液诊断中的应用价值。方法对36例结核性胸腔积液患者及38例恶性胸腔积液患者的胸液标本行琼脂糖凝胶蛋白电泳并应用比色法检测腺苷脱氨酶（ADA）浓度。结果结核性胸腔积液组与恶性胸腔积液组的胸液a．球蛋白分别为4．32±1．35和3．41±0．97（P〈0．05），α2球蛋白分别为8．98±1．50和6．01±1．53（P〈0．000），0t2球蛋白／白蛋白的比值分别为0．155-0．03和0．09±0．03（P〈0．000），ADA分别为71．35±24．00和31．21±11．90（P〈0．000）。根据ROC曲线结果判断分别取0．13及45为界值，计算α2球蛋白／白蛋白对诊断结核性胸腔积液的敏感性、特异性及准确性分别为76％、89％、83％；ADA的敏感性、特异性及准确性分别为82％、78％、80％。采用平行试验方法，联合α2球蛋白／白蛋白和ADA指标，其敏感性、特异性和准确性分别达到88％，100％和94％。结论（1）结核性胸腔积液患者的胸液∞球蛋白、α2球蛋白、α2球蛋白／白蛋白的比值及ADA均高于肿瘤组，差异有显著性（P〈0．05）。（2）联合检测α2球蛋白／白蛋白和ADA可以提高结核性胸腔积液诊断的敏感性、特异性和准确性。     

联合检测对结核性和恶性胸腔积液的鉴别诊断价值

目的探讨联合检测胸腔积液中腺苷脱氨酶(ADA)、C反应蛋白(CRP)、癌胚抗原(CEA)、乳酸脱氢酶(LDH)对结核性和恶性胸腔积液的诊断价值。方法以我院2012年1月至2012年12月112例住院的胸腔积液患者为研究对象,其中62例结核性胸腔积液患者,50例恶性胸腔积液患者,以酶比色法,免疫比浊法,速率法和电化学发光法检测上述患者胸腔积液中ADA、CRP、CEA和LDH浓度。结果结核性胸腔积液患者ADA和CRP的诊断敏感性显著高于恶性胸腔积液患者(P0.01),恶性胸腔积液患者CEA的诊断敏感性较结核性胸腔积液患者明显增高(P0.01)。以胸腔积液CEA7 ng/ml及LDH245 U/L为诊断标准,诊断恶性胸腔积液的敏感性,特异性分别为78.0%,80.6%;而以CEA7 ng/ml,LDH245 U/L及ADA40 U/L,CRP5 mg/L为诊断标准,诊断恶性胸腔积液的敏感性,特异性分别为94.0%,95.2%。以胸腔积液ADA40 U/L,CRP5 mg/L为诊断标准,诊断结核性胸腔积液的敏感性,特异性分别为82.3%,86.0%;而以CEA7 ng/ml,LDH245 U/L及ADA4 0U/L,CRP5 mg/L为诊断标准,诊断结核性胸腔积液的敏感性,特异性分别为96.8%,92.0%。结论联合检测胸腔积液中ADA、CRP、CEA、LDH的浓度可提高结核性和恶性胸腔积液鉴别诊断的敏感性和特异性。     

结核性与癌性胸腔积液的实验室检测比较研究

目的比较研究实验室检测腺苷脱氨酶(ADA)、乳酸脱氢酶(LDH)、癌胚抗原(CEA)、蛋白(TP)、葡萄糖(GLU)等多项指标对结核性与癌性胸腔积液的鉴别诊断价值。方法对151例明确诊断为结核性或癌性胸腔积液分别测定胸水ADA、LDH、CEA、TP、GLU和血清TP,并进行统计分析。结果结核性胸腔积液中ADA、LDH、TP含量都明显高于癌性胸腔积液,其中胸水ADA以28U/L作为诊断结核性胸水的临界值则其敏感性和特异性均极高,结核性胸水中GLU含量则低于癌性胸水,癌性胸水CEA的阳性率高达76.0%,而结核性胸水CEA均阴性。结论联合检测胸水ADA、LDH、CEA、TP和GLU可以作为结核性与癌性胸腔积液的诊断和鉴别诊断依据,其中ADA28U/L可以考虑作为结核性胸腔积液的单独诊断依据。     

内科胸腔镜检查在良恶性胸腔积液的诊治应用分析

目的认识内科胸腔镜检查在良恶性胸腔积液的病因学诊断价值。方法对34例胸腔积液患者实施胸腔镜检查,对恶性胸腔积液的患者采取多部位钳夹（8～10个部位）,闭式引流管保留1～3天。结果34例患者经病理确诊32例,确诊率为91．4％。结核性胸膜炎41．2％（14／34）;非典型炎性病变5．9％（2／34）;恶性肿瘤52．9％（18／34）。14例结核性胸膜炎患者术后均在1周内完全缓解（CR）;18例恶性胸腔积液检查后完全缓解（CR）率66．7％（12／18）,总有效率83．3％（15／18）,无效（PD）3例均有严重低蛋白血症。12例完全缓解（CR）患者,10例未出现胸水复发,2例出现胸水复发,复发率16．7％。结论内科胸腔镜检查能准确诊断胸膜疾病的病因,而且对结核性胸膜炎和恶性胸腔积液均有很好的治疗效果。     

ADA、IFNγ-、sIL-2R检测在鉴别结核性和癌性胸水中的价值

目的研究腺苷脱氨酶（ADA）、γ干扰素（IFN-γ）、可溶性白介素2受体（sIL-2R）对结核性胸水和癌性胸水鉴别诊断的价值。方法采用酶法和ELISA方法检测47例结核性胸水患者和47例癌性胸水患者胸水中ADA活性和IFNγ-、sIL-2R水平。结果结核性胸水组的ADA（72.3±21.7 U/L）、IFN-γ（481.3±257.1 pg/m l）和sIL-2R（611.0±184.4 pmol/L）都显著高于癌性胸水组（P〈0.01）;当以ADA≥46.8 U/L、IFNγ-≥209.0 pg/m l和sIL-2R≥491.5 pmol/L为临界值,三项指标对结核性胸水的敏感度分别为93.6%,87.2%,70.2%;特异度分别为91.5%,91.5%,78.7%。结论胸水中ADA、IFN-γ和sIL-2R对结核性胸水和癌性胸水的鉴别诊断都有较高的临床价值。     

腺甘脱氨酶、肿瘤坏死因子α、白细胞介素对结核性与恶性胸水鉴别诊断的价值

目的探讨胸水中腺甘脱氨酶（ADA）、肿瘤坏死因子-α[（TNF—α）、白细胞介素-2（IL-2）和IL-6水平对结核性与恶性胸水鉴别诊断的价值。方法采用酶法和化学发光法对49例结核性胸水与43例恶性胸水患者ADA、IL-2、IL-6、TNF-α水平进行检测。结果结核性胸水组患者胸水中ADA、IL-5、TNF-α含量明显高于恶性胸水组（P〈0．01）,而胸水IL-2含量在两组患者间比较无统计学意义（P〉0．05）。结论检测胸水中ADA、IL-5、TNF-α的水平对鉴别结核性与恶性胸水有较高的临床价值。     

蛋白质指纹图谱技术在肺结核、肺癌鉴别诊断中的应用研究

目的 探索应用表面增强激光解析离子化飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS）技术于肺结核、肺癌的鉴别诊断。 方法 肺结核、肺癌患者及正常人各65例,收集其血清标本,采用WCX2芯片技术对血清蛋白进行捕获,用蛋白芯片阅读器PBSⅡ对芯片进行扫描、分析。 结果65例活动性肺结核与65例肺癌患者血清蛋白质谱数据的比较,4个蛋白峰(5 335 m/z、8 048 m/z、11 700 m/z、11 683 m/z)倾向于肺结核,以此鉴别肺癌差异有统计学意义(P<0.01)。该诊断模型判别的总准确率为74.6%（97/130）,灵敏度80.0%(52/65),特异度69.2%(45/65)。 结论 此方法简便、快速,标本用量少,为肺结核、肺癌患者提供了1种新的无创诊断和鉴别诊断方法 。     

联合检测TOLL样受体2和γ-干扰素对结核性胸腔积液的诊断价值

目的探讨联合测定胸水中TOLL样受体2（TLR2）和γ-干扰素（IFN-γ）水平对结核性胸腔积液的诊断价值。方法收集确诊结核性胸腔积液、恶性胸腔积液和细菌性胸腔积液患者的胸水和血清,应用酶联免疫吸附试剂盒（ELISA）测定TLR2和IFN-γ的浓度,并对数据进行分析。结果 （1）结核组患者胸水TLR2（22.19±2.12）ng/L、IFN-γ（2 287.20±408.34）ng/L均比其相应血清水平高,差异有统计学意义（P〈0.05）。结核组患者胸水的TLR2和IFN-γ水平均高于恶性组和细菌组,差异有统计学意义（P〈0.05）。（2）TLR2诊断结核性胸腔积液的工作特征曲线（ROC）下面积（ACU）为0.696（95%CI：0.501～0.849）,灵敏度为66.67%,特异度为80%。同样,IFN-γ的ACU为0.945（95%CI：0.875～1.014）,灵敏度为87.5%,特异度为97.9%。结论联合测定TLR2和IFN-γ指标有助于结核性胸腔积液的诊断。     

结核性胸腔积液与恶性胸腔积液患者危险因素的对比研究

目的 探索结核性胸腔积液与恶性胸腔积液患者危险因素的不同,为临床个体化诊治胸腔积液提供依据。 方法 连续性入选2006年1月至2012年12月间在青岛市中心医院呼吸科确诊为结核性胸腔积液或恶性胸腔积液的患者264例,其中结核性胸腔积液患者147例,恶性胸腔积液患者117例。调查并比较两组患者的年龄、性别、合并糖尿病、呼吸系统基础疾病史、经济状况、工作劳累感、群体居住行为、运动量不足、进食规律性、睡眠时间、心理应激程度、吸烟指数、类似病家族史等13个项目,采用logistic单因素和多因素回归分析,对结核性胸腔积液和恶性胸腔积液的发病独立危险因素进行对比,以说明两者危险因素的差异。 结果 单因素分析结果显示,结核性胸腔积液与恶性胸腔积液两组数据比较,合并糖尿病［15.0%（22/147）vs 6.8%（8/117）,χ²=4.571,P=0.034］、经济状况差［38.1%（56/147）vs 29.9%（35/117）,χ²=5.103,P=0.028］、有群体居住行为［29.3%（43/147） vs 9.4%（11/117）,χ²=4.977,P=0.030］,是结核性胸腔积液的危险因素;年龄＞40岁［45.6%（67/147）vs 78.6%（92/117）,χ²=4.752,P=0.032］、心理应激程度高［15.0%（22/147）vs 33.3%（39/117）,χ²=6.031,P=0.017］、吸烟指数＞400［25.9%（38/147）vs 32.5%（38/117）,χ²=5.228,P=0.024］和有类似病家族史［9.5%（14/147）vs 34.2%（40/117）,χ²=3.976,P=0.046］是恶性胸腔积液的危险因素。在排除其他因素影响后,合并糖尿病（χ²=5.391,P=0.027,OR=2.457,95%CI：5.051～1.773）和群体居住行为（χ²=5.491,P=0.022,OR=3.636,95%CI：6.494～2.584）仍然是结核性胸腔积液的危险因素;年龄＞40岁（χ²=5.364,P=0.022,OR=2.323,95%CI：1.197～2.588）和有类似病家族史（χ²=5.897,P=0.021,OR=3.080,95%CI：2.233～4.018）是恶性胸腔积液危险因素。 结论 胸腔积液患者如果合并糖尿病或有群体居住行为更容易出现结核性胸腔积液,如果年龄＞40岁或有类似病家族史,更容易出现恶性胸腔积液。     

联合测定分泌型白细胞蛋白酶抑制因子和腺苷脱氨酶在结核性胸腔积液中的诊断意义

目的探讨联合测定胸腔积液中分泌型白细胞蛋白酶抑制因子（SLPI）和腺苷脱氨酶（ADA）浓度对结核性胸腔积液的诊断价值。方法收集103例胸腔积液及其同源外周血,其中结核性胸腔积液组为45例,恶性胸腔积液组31例,细菌性胸腔积液组16例,漏出液组11例。应用ELISA法测定胸水上清液和血清中SLPI的浓度,用比色法测定ADA水平,并对结果及意义进行分析。结果 （1）结核组SLPI浓度（193790±15476）pg/ml,与恶性组（121700±13101）pg/ml、细菌组（92885±26962）pg/ml、漏出液组（109360±21619）pg/ml相比差异均有统计学意义（P〈0.05）;恶性组、细菌组及漏出液组间相比差异均无统计学意义（P〉0.05）。结核组及细菌组ADA水平与恶性组及漏出液组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。（2）受试者工作特征曲线（ROC曲线）结果显示,胸腔积液SLPI浓度对于诊断结核性胸腔积液的最佳阈值为236071pg/ml,曲线下面积（AUC）为69.9%（95%可信区间为58.2%～81.6%）,灵敏度和特异度分别为43.2%和91.4%（P〈0.05）;ADA对于诊断结核性胸腔积液的曲线下面积、灵敏度、特异度、诊断阈值分别是71.9%（可信区间60.9%～82.8%）、75%、64.2%和29.5（P〈0.001）;SLPI和ADA同时高于各自的诊断阈值,得出最佳诊断特异度为95%;SLPI或ADA高于诊断阈值,得出最佳诊断灵敏度为89%。结论单独测定SLPI及ADA均有助于诊断结核性胸腔积液,但联合测定更能提高诊断效能。