结核分枝杆菌感染小鼠模型的建立与评价

目的建立结核分枝杆菌感染的小鼠模型,分析感染小鼠重量指数、组织荷菌量、组织病理改变随感染时间的变化。方法以1.1×10^5菌落形成单位（CFU）的结核分枝杆菌标准株H37Rv经尾静脉感染50只雌性BALB/c小鼠,于感染后1、2、3、4、8周杀鼠,每个时间点剖杀10只,观察肺组织病理改变并称重,计算重量指数,同时做肺和肝菌落计数。结果感染1、2、3、4、8周小鼠的肺脏器重量指数分别为0.0112±0.0036、0.0101±0.0071、0.0112±0.0046、0.0151±0.0057和0.0198±0.0069,差异有统计学意义（F=4.24,P〈0.01）;肝脏器重量指数分别为0.0558±0.0059、0.0591±0.0094、0.0569±0.0076、0.0582±0.0030和0.0619±0.0079,差异无统计学意义（F=0.86,P〉0.05）;脾脏器重量指数分别为0.0107±0.0034、0.0146±0.0060、0.018±0.0034、0.0174±0.0026和0.0204±0.0066,差异有统计学意义（F=4.01,P〉0.05）;肺菌落数分别为（4.472±0.504）log、（5.539±0.429）log、（6.294±0.478）log、（6.250±0.315）log和（6.836±0.196）log,差异有统计学意义（F=43.90,P〈0.01）。感染后1周小鼠肺组织可见病理改变,且随着感染时间的增加病变范围逐渐扩大,病变程度逐渐严重。结论成功建立了结核分枝杆菌感染小鼠模型,该模型可用于结核疫苗和药物研究。     

结核分枝杆菌潜伏感染豚鼠模型的建立

目的 建立MTB潜伏感染豚鼠模型,研究MTB体内增殖动力学及与PPD试验的关系.方法 62只豚鼠按随机数字表法分成对照组(20只)和模型组(42只),模型组又分为4周组(12只)、8周组(21只)和12周组(9只).采用恢复毒力的H37Rv株500 CFU经豚鼠腹股沟皮下注射攻毒,攻毒后2周,模型组给予异烟肼(10 mg/kg)和吡嗪酰胺(40 mg/kg)每周3次灌胃,控制MTB增殖,分别于4周、8周和12周停药.模型4周组停药后观察结核病自然复发情况,模型8周组和12周组停药后观察结核病自然复发和地塞米松诱导复发情况.在建立模型过程中进行PPD试验,检测豚鼠的脾、肺荷菌量及组织切片病理,分析PPD试验与结核病活动或潜伏感染的关系.结果 对照组豚鼠攻毒后2周脾荷菌量为3.3 lgCFU,6周后出现腹股沟淋巴结肿大,脾、肺荷菌量分别为4.5和1.8 lg CFU,18周时脾、肺荷菌量分别达5.3和5.4 lg CFU.观察期间,模型4周组停药后结核病均自然复发;模型8周组有结核病自然复发和地塞米松诱导复发;模型12周组无结核病自然复发,但地塞米松可诱导结核病复发.PPD试验反应越强,结核病越容易复发,PPD试验反应阴性豚鼠则无结核病复发.结论 H37Rv攻毒豚鼠后,用异烟肼和吡嗪酰胺联合化疗可抑制MTB增殖,成功建立豚鼠MTB潜伏感染模型,潜伏感染可致豚鼠结核病的自然复发或地塞米松诱导复发.PPD试验反应强弱与结核病复发有关.     

不同感染途径建立的结核分枝杆菌急性肺感染小鼠模型的比较

目的 比较3种不同感染途径建立的结核分枝杆菌急性肺感染小鼠动物模型,为结核病研究中动物模型的建立、选择与实际应用提供实验依据.方法 将结核分枝杆菌标准株H37Rv稀释至1×106菌落形成单位(cfu)/mL,分别采用尾静脉注射、滴鼻、气雾攻击方式感染小鼠,感染后6周,观察肺组织病变情况、菌落计数,肺组织行HE染色、抗酸染色,免疫组织化学检测肺组织TNF-α单位面积表达量.数据行t检验.结果 气雾攻击组、滴鼻组和尾静脉组小鼠肺部结核分枝杆菌数分别为(6.290±0.028)、(6.150±0.021)和(6.120±0.008) lg cfu/mL,对照组肺部无结核分枝杆菌;各感染组与对照组比较,差异均有统计学意义(t=3.762,P＜0.01),但不同感染途径感染组间差异无统计学意义(P＞0.05).各感染组小鼠肺组织均有病理学改变,抗酸染色阳性.单位面积TNF-α表达量在尾静脉注射组、滴鼻组和气雾攻击组分别为0.049×106、0.759×106和1.042×106,差异有统计学意义(t=2.504,P＜0.05).结论 气雾攻击感染方式建立的小鼠急性肺结核病模型较尾静脉注射和滴鼻方式更为有效.     

重组结核分枝杆菌11 000蛋白对结核分枝杆菌感染的鉴别作用

目的 研究重组结核分枝杆菌11 000蛋白对结核分枝杆菌感染的鉴别作用.方法 以不同分枝杆菌分别致敏豚鼠,致敏成功后给所有动物皮内注射重组结核分枝杆菌11 000蛋白和结核菌素纯蛋白衍生物(PPD)或胞内分枝杆菌纯蛋白衍生物(PPD-B),用双盲法记录注射后24 h和(或)48 h注射局部皮肤反应的纵、横径,计算其均值.结果 PPD或PPD-B对所有分枝杆菌致敏豚鼠的皮肤反应均为阳性,局部硬结直径均大于10 mm;重组结核分枝杆菌11 000蛋白对结核分枝杆菌活菌、牛分枝杆菌、非洲分枝杆菌和堪萨斯分枝杆菌致敏豚鼠的皮肤试验为阳性,局部硬结直径依次为(14.7±2.0)、(9.3±3.8)、(18.7±2.4)和(14.8±4.2) mm,而对灭活结核分枝杆菌、卡介苗和其他非结核分枝杆菌致敏豚鼠的皮肤试验均为阴性.结论 重组结核分枝杆菌11 000蛋白可有效鉴别结核分枝杆菌活菌感染和卡介苗接种、结核分枝杆菌死菌致敏以及其他非结核分枝杆菌的感染.     

结核分枝杆菌感染小鼠动物模型的建立及研究进展

小鼠动物模型是结核分枝杆菌(MTB)感染研究中应用最为广泛的动物模型,能不同程度地模拟人体结核病发展过程,并且可以较为准确地评价结核病的病理损伤、存活时间以及免疫学机制,为研究感染状态下MTB生理特性,抗原表达情况及解释MTB感染的发生、维持、活化提供病原体方面的信息。成功建立MTB感染的小鼠动物模型对MTB感染研究工作非常重要。     

西安市非结核分枝杆菌感染现状调查分析

目的 了解西安市结核病患者中非结核分枝杆菌感染情况。方法 收集西安市胸科医院检验科分离培养的分枝杆菌临床菌株,利用两步PCR方法及PCR产物直接测序的方法进行菌种鉴定。结果 经鉴定发现,收集的202株分枝杆菌中有195株为结核分枝杆菌,3株为牛结核分枝杆菌,2份为鸟分枝杆菌,1份为堪萨斯分枝杆菌,1份为灰色链霉菌,非结核分枝杆菌感染率为1.5%(3/201)。结论 西安市尚存在一定比例非结核分枝杆菌感染,进一步菌种鉴定有利于临床正确诊断和合理用药治疗。     

非结核分枝杆菌感染特点与药物选择研究进展

非结核分枝杆菌亦称非典型分枝杆菌,指结核杆菌以外(不包括麻风杆菌)的分枝杆菌,由该菌感染所致疾病叫非结核分枝杆菌病。近年来,随着引起免疫功能低下的疾病不断增多及艾滋病的流行,结核病和非结核分枝杆菌引起的感染性疾病发病率有所上升,严重威胁着人类的健康和生命安全。     

分枝杆菌感染状况和结核分枝杆菌耐药性分析

目的了解本地区就诊患者分枝杆菌感染状况和结核分枝杆菌耐药情况。方法用对患者标本进行分枝杆菌培养鉴定和药敏试验。结果 9653份标本分枝杆菌培养阳性2759例,其中1229株分枝杆菌行菌种鉴定和药敏试验,非结核分枝杆菌219株,结核分枝杆菌1010株,纳入929株药敏结果进行分析,对4种一线抗结核药物至少耐一药232株,耐二药51株、耐三药49株,耐四药33株,耐多药92株。结论本地区分枝杆菌非肺部感染应引起高度重视,结核菌总耐药率和耐多药率近几年维持在稳定高位,结核菌耐药情况仍然十分严重。     

结核分枝杆菌潜伏感染动物模型及评价

结核分枝杆菌（MTB）感染动物模型是用于阐明结核病发病机制，评估抗结核新药、疫苗和诊断试剂。多年来，为探讨结核病的发病机制，寻找有效的治疗、预防措施，研究者已在包括小鼠、大鼠、豚鼠、猴、兔等不同的动物体内成功复制出结核病模型。由于对MTB进入机体后感染潜伏的生物学特性和宿主免疫特性缺乏了解，而动物模型为研究潜伏和复发、新药及疫苗提供了工具。     

西安市非结核分枝杆菌感染现状调查分析北大核心CSCD

目的了解西安市结核病患者中非结核分枝杆菌感染情况。方法收集西安市胸科医院检验科分离培养的分枝杆菌临床菌株,利用两步PCR方法及PCR产物直接测序的方法进行菌种鉴定。结果经鉴定发现,收集的202株分枝杆菌中有195株为结核分枝杆菌,3株为牛结核分枝杆菌,2份为鸟分枝杆菌,1份为堪萨斯分枝杆菌,1份为灰色链霉菌,非结核分枝杆菌感染率为1.5%(3/201)。结论西安市尚存在一定比例非结核分枝杆菌感染,进一步菌种鉴定有利于临床正确诊断和合理用药治疗。     

北京基因型结核分枝杆菌感染的相关因素分析

目的 研究感染北京基因型MTB菌株的危险因素及其与耐药和临床症状的相关性.方法 2007年9月至2008年3月痰涂片阳性肺结核患者172例(男132例,女40例),平均年龄(56±10)岁.收集痰标本,采用罗氏培养法,培养阳性菌株行DNA提取,使用基因RD105缺失法及7个位点可变数量串联重复序列(VNTR-7)方法进行基因分型.两组间率的比较采用χ~2检验,定量资料比较采用t检验.结果 172例痰标本中共得到培养阳性菌株116株,其中非MTB菌株4株,MTB菌株112株.来自上海及江浙地区的MTB菌株中北京基因型占86.6%(84/97),非北京基因型占13.4%(13/97).女性患者的北京基因型(31/84,36.9%)明显高于非北京基因型(1/13,7.7%),初治患者中CD_4/CD_8<1者北京基因型(17/41,41.5%)明显高于非北京基因型(0/7,0%),差异均有统计学意义(χ~2值分别为4.436和4.494,均P<0.05).采用VNTR-7分型方法,北京基因型菌株可分为31种基因型,各型之间的分布不均匀,有4种基因型集中了47.6%(40/84)的MTB菌株及43.6%(17/39)的耐药菌株.结论 上海及江浙地区的MTB菌株以北京基因型为主,女性及免疫功能低下的初治肺结核患者可能是感染北京基因型菌株的危险因素.北京基因型菌株与耐药及临床症状可能无明显相关性.     

血清抗结核分支杆菌抗体对结核病的诊断价值

目的研究血清抗结核分支杆菌抗体在活动性结核病诊断和病情变化的意义。方法观察血清抗结核分支杆菌抗体在各类结核患者中的敏感性和特异性，与痰涂片及ＰＰＤ皮试的一致性，以及与疾病转归的关系。结果血清抗结核分支杆菌抗体诊断结核病的敏感性为７１．９％，特异性为９１．９％，与痰涂片阳性和ＰＰＤ皮肤试验阳性的一致率分别为８０．２％和６１．６％。抗结核分支杆菌抗体水平与病情变化有一定的相关性。结论血清抗结核分支杆菌抗体可用来诊断活动性结核病及评估结核病的转归。     

气溶胶感染小鼠急性结核病模型的建立及应用

目的建立气溶胶感染小鼠急性结核病模型,应用该模型评价抗结核新化合物的体内活性。方法应用气溶胶感染装置对BALB/C系小鼠进行不同浓度的H37Rv雾化感染,10d后应用抗结核药及新化合物开始治疗,给予15个剂量,在感染后3d、10d及30d分别进行小鼠解剖、肺活菌计数,统计分析该感染模型及药物的有效性。结果感染106cfu/ml的菌量可以较好的作为模型感染剂量,肺活菌计数和组织病理学结果均表明成功建立气溶胶感染小鼠急性结核病模型。INH治疗后肺活菌计数比较空白对照组可以降低5.95lgcfu,应用该模型筛选到新的抗结核活性化合物JYS-17。结论气溶胶感染小鼠急性模型适合抗结核新药早期活性筛选和评价。     

结核感染T细胞斑点实验临床检测研究

目的探讨结核感染T细胞斑点实验（T-SPOT.TB）在临床快速诊断结核病中的应用价值。方法利用T-SPOT.TB方法检测外周血中结核感染特异的效应T淋巴细胞的频率。同时与涂片抗酸染色、BACTEC960培养及实时定量PCR方法做比对。结果164例结核病患者中,155例T-SPOT.TB阳性,提示方法敏感度为94.5％（155/164）,显著高于其他方法。60例非结核呼吸道疾病对照组中有5例阳性,20例健康对照均为阴性,方法的特异度为93.8％（75/80）。结论T-SPOT.TB方法敏感度和特异度均非常高,可用于结核病的快速诊断,尤其是对于结核病和非结核分枝杆菌病的早期鉴别。     

干细胞与结核分枝杆菌交互作用的研究进展

结核分枝杆菌是引起人类结核病的主要病原菌。作为胞内致病菌,结核分枝杆菌在宿主细胞内潜伏或增殖,其不仅能被宿主吞噬细胞所吞入,还可入侵以造血干细胞和间充质干细胞为代表的干细胞。由于干细胞具有自我复制、多能分化、高度迁移和免疫调节等特性,其在结核病发生和发展中的作用不可忽视。作者主要从结核分枝杆菌与干细胞之间的交互作用这一角度对结核病的发病机制和防治策略进行综述和展望。     

结核分枝杆菌L型细菌的研究进展

结核分枝杆菌L型由于其细胞壁缺陷,其形态表现为多形性特点,并可以逃避机体免疫而长存于患者体内,由于其在普通培养基内不容易生长,而导致误诊、漏诊、复发.L型菌感染有可能与某些疾病的发生有关.本文对结核分枝杆菌L型的形成、生物学特点、检测、诊断技术、遗传学、致病性等方面进行阐述.