A20基因在动脉粥样硬化损伤中对内皮细胞的保护作用

目的　探讨A2 0基因抑制氧化型低密度脂蛋白 (oxidizedlowdensitylipoprotein ,oxLDL)诱导内皮细胞凋亡及相关机制。方法　逆转录 聚合酶链反应检测A2 0基因在oxLDL诱导内皮细胞中的表达。DOTAP脂质体转染pCAGGSEHA2 0和pMAMneo于原代培养的脐静脉内皮细胞 ,经G4 18筛选 ,A2 0表达经免疫荧光鉴定。原位末端标记法、原位杂交检测转染前后oxLDL诱导内皮细胞凋亡情况及同型半胱氨酸蛋白酶 (caspase 3)的表达情况。结果　A2 0基因在oxLDL诱导内皮细胞中不表达。oxLDL诱导内皮细胞凋亡达 2 6 % ,A2 0基因能显著抑制oxLDL诱导的内皮细胞凋亡情况及caspase 3的表达。结论　A2 0基因在动脉粥样硬化的防治中可能有一定作用     

饮酒对冠心病和高密度脂蛋白的影响

饮酒对冠心病和高密度脂蛋白的影响南京医科大学第一附属医院心脏科张仕清，综述杜福昌审校长期大量饮酒可引起高血压、心绞痛、脑卒中、酒精性心肌病、各种心律失常和猝死［１－３］。可是，小量至中等量饮酒可降低冠心病的发病率和心肌梗塞的死亡率［４－６］。研究发现...     

中国汉族人载脂蛋白E基因多态性与高密度脂蛋白亚类组成的研究

目的:探讨中国汉族人载脂蛋白E基因多态性与高密度脂蛋白(HDL)亚类组成变化的关系。方法:采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性和双向电泳免疫印迹检测法,分析335例中国汉族人的apoE基因型、HDL亚类组成及相对含量。结果:apoE等位基因频率分别为:ε2(8.96%),ε3(81.94%),ε4(9.10%)。等位基因ε2携带者血清TG较ε3携带者升高、apoE和apoE/CⅢ较ε3和ε4携带者升高,而等位基因ε2携带者血清LDLC和HDL3b较ε3携带者下降,其差异有统计学意义(P<0.05)。等位基因ε2携带者血清HDL2a较等位基因ε3携带者有升高的趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:apoE基因多态性可能与血清HDL部分亚类的含量变化相关。     

载脂蛋白AⅠ和高密度脂蛋白对内皮细胞保护作用的对比实验观察

载脂蛋白ＡⅠ和高密度脂蛋白对内皮细胞保护作用的对比实验观察刘清华，蒋雷，金军华，李健斋（卫生部北京老年医学研究所，北京医院１００７３０）对比观察高密度脂蛋白和载脂蛋白Ａ－Ⅰ在保护血管内皮细胞拮抗低密度脂蛋白损伤方面的作用。实验表明：预加入高密度脂蛋白...     

内源性高甘油三酯血症患者体内存在氧化型低密度脂蛋白、极低密度脂蛋白和高密度脂蛋白

为探讨内源性高甘油三酯血症患者体内密度脂蛋白、极低密度脂蛋白及高密度脂蛋白是否发生氧化修饰，对２５例内源性高甘油三酯血症患者与２５例年龄性别相匹配的下沉人的血糖、血脂、载脂蛋白及脂过氧化物进行了分析，并对其血浆低密度脂蛋白、极代旨蛋白及高密度脂蛋白的电泳移率、２３４ｎｍ光吸收和硫代巴比妥酸反应物质含量的改变     

甘油三酯与高密度脂蛋白预测冠状动脉病变的意义

７８例患者选择性冠状动脉（冠脉）造影，其中冠脉病变５１例，冠脉正常２７例。测定了其高密度脂蛋白（ＨＤＬ）及其亚组分和甘油三酯（ＴＧ）。结果表明：冠脉狭窄与ＨＤＬ２负相关（ｒ＝－０．３２，Ｐ＜０．０１）、与ＴＧ正相关（ｒ＝０．３４，Ｐ＜０．０１），认为高ＴＧ和低ＨＤＬ２对于预测冠脉病变有重要意义。     

甘油三酯与高密度脂蛋白预测冠状动脉病变的意义

７８例患者经选择性冠状动脉（冠脉）造影，其中冠脉病变５１例，冠脉正常２７例。测定了其高密度脂蛋白（ＨＤＬ）及其亚组分和甘油三脂（ＴＧ）。结果表明：冠脉狭窄与ＨＤＬ＿２负相关（ｒ＝－０．３２，Ｐ＜０．０１）、与ＴＧ正相关（ｒ＝０．３４，Ｐ＜０．０１），认为高ＴＧ和低ＨＤＬ＿２对于预测冠脉病变有重要意义。     

低浓度乙醇对血管内皮细胞损伤的保护作用

目的研究乙醇对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐带静脉内皮细胞损伤的保护作用与内源性一氧化氮合酶抑制物的关系。方法在培养的人脐带静脉内皮细胞中加入ox-LD(L100μg/ml)诱导内皮细胞损伤。检测细胞培养液中非对称性二甲基精氨酸(ADMA)、丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮(NO)和肿瘤坏死因子-(αTNF-α)的含量。结果体外给予ox-LD(L100μg/ml)显著诱导内皮细胞损伤,增加培养液中ADMA、MDA、LDH和TNF-α水平,而降低NO水平。两个剂量乙醇(5或15μg/ml)均能显著抑制ox-LDL所致ADMA、MDA、LDH和TNF-α浓度升高和NO的降低。结论低剂量乙醇对ox-LDL诱导的人脐带静脉血管内皮细胞损伤有保护作用,其保护作用与降低ADMA和TNF-α浓度有关。     

洛伐他汀能下调人脐静脉内皮细胞血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体mRNA的表达

目的　探讨洛伐他汀对人脐静脉内皮细胞表达血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体mRNA和摄取氧化型低密度脂蛋白的影响。方法　用TRIzol试剂常规方法提取人脐静脉内皮细胞总RNA ,逆转录聚合酶链反应检测血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体mRNA含量 ,检测12 5　I标记的氧化型低密度脂蛋白放射活性法来确定内皮细胞摄取率 ,分光光度法测量乳酸脱氢酶含量。结果　人脐静脉内皮细胞与 1、10和 5 0 μmol/L洛伐他汀孵育 4 8h后 ,血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体mRNA的表达分别为对照组的 84 %、6 9%和 4 8% ;与 10 μmol/L洛伐他汀孵育 2 4、4 8和 96h后 ,血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体mRNA的表达分别为对照组的 82 %、6 9%和 5 2 %。洛伐他汀使人脐静脉内皮细胞对氧化型低密度脂蛋白的摄取减少 ,对乳酸脱氢酶含量没有影响。结论　洛伐他汀能降低血凝素样氧化型低密度脂蛋白mRNA的表达和对氧化型低密度脂蛋白的摄取。     

H型高血压患者HDL亚组分的改变及对内皮细胞抗炎功能的影响

目的观察H型高血压患者血同型半胱氨酸水平(Hcy)与高密度脂蛋白(HDL)亚组分的相关性,并研究HDL亚组分对内皮细胞抗炎功能的影响。方法选取健康人群133例、单纯高血压患者76例、H型高血压患者85例,测定空腹血糖(FBG)、血清肌酐(SCr)、尿酸(UA)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)、HDL2、HDL3和Hcy等指标。分别留取各组血清各6例,应用快速蛋白液相色谱法(FPLC)提取大颗粒HDL(L-HDL),观察L-HDL对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)炎症的改善作用。结果健康对照组、单纯高血压组和H型高血压组UA、FBG、TC、LDLC水平差异无统计学意义(P>0.05)。对比单纯高血压患者和健康对照组,H型高血压患者具有更低的HDLC、HDL2水平及更高的HDL3水平(P<0.001);血Hcy水平与血HDLC、HDL2呈显著负相关(P<0.01),但是与HDL3无显著相关性(P=0.083)。健康对照组、单纯高血压组L-HDL均可下调TNF-α诱导的血管内皮细胞表达血管细胞黏附分子1(VCAM-1),而H型高血压组L-HDL并不能明显减低VCAM-1表达。结论H型高血压患者可能通过高Hcy影响HDL的亚组分分布以及L-HDL对内皮细胞的抗炎功能。     

Effects of troglitazone on in vitro oxidation of LDL and HDL induced by copper ions and endothelial cells

Summary Troglitazone is a new oral antidiabetic agent able to reduce lipid peroxidation. In this study we evaluated its effect on the susceptibility of LDL and HDL to in vitro oxidation induced by copper ions and endothelial cells. In Cu ⁺⁺ -induced LDL modification, different amounts of troglitazone were added to aliquots of the same pool of plasma with subsequent ultracentrifuge separation of LDL and HDL. Differences in LDL and HDL susceptibility to in vitro oxidation with Cu ⁺⁺ were studied by measuring the changes in fluorescence intensity (expressed as lag phase). LDL derived from plasma incubated with different amounts of troglitazone were also incubated with umbilical vein endothelial cells (HUVEC), the modification being monitored by LDL relative electrophoretic mobility and fluorescence. During Cu ⁺⁺ - and HUVEC-induced LDL oxidation, the decay rate of vitamin E, and the potency of troglitazone as a radical scavenger in comparison with vitamin E were also studied. Troglitazone determined a significant, dose-dependent decrease in Cu ⁺⁺ -induced LDL and HDL oxidation. Incubation with HUVEC was also followed by a progressive, significant decrease of LDL relative electrophoretic mobility and fluorescence intensity. During Cu ⁺⁺ - and HUVEC-induced-LDL modification, troglitazone significantly reduced the rate of vitamin E decay. In this study we also demonstrated that under the same oxidative stress, troglitazone was much more potent as a radical scavenger than vitamin E. In conclusion, the results demonstrate that troglitazone can reduce LDL and HDL in vitro oxidation and that, during this process, it can protect vitamin E. In addition to ensuring blood glucose control, the drug may therefore be useful in inhibiting lipoprotein peroxidation. [Diabetologia (1997) 40: 165–172] Received: 26 August 1996, and in revised form: 29 October 1996     

槲皮素、异鼠李素对体外低密度脂蛋白氧化修饰的影响

目的 :观察槲皮素 （Que）、异鼠李素 （Iso）在体外对 Fe2 + 介导的人血浆低密度脂蛋白 （L DL ）氧化修饰的影响。方法 :采用一次性密度梯度法分离正常人血浆 L DL ,在体外用 Fe2 + 进行氧化修饰。抗氧化组在温育前加入不同浓度 Que或 Iso（5 0～ 2 0 0μm ol· L- 1 ）。通过检测脂蛋白中丙二醛 （MDA）、维生素 E（Vit E）及超氧化物歧化酶 （SOD）活性 ,比较 L DL受氧化程度。结果 :Que和 Iso明显减少 OX- L DL中 MDA含量 （P<0 .0 1） ,并呈现一定的浓度效应 ,同时明显延缓内源性抗氧化物质 Vit E含量降低 ,显著提高 SOD活性 （P<0 .0 1）。结论 :Que和 Iso均对 Fe2 + 介导的体外 L DL氧化修饰具有明显的抑制作用 ,其作用途经可能与抗自由基氧化活性有关。     

二陈汤合桃红四物汤含药血清对ox-LDL诱导内皮细胞损伤的保护作用及机制

目的观察二陈汤合桃红四物汤含药血清对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导内皮细胞损伤的保护作用并探讨其可能的机制。方法培养EA.hy926细胞,随机分为对照组、ox-LDL组、干预组、抑制剂组。流式细胞仪检测各组细胞凋亡水平,比色法检测细胞内丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)水平及超氧化物歧化酶(SOD)活性,ELISA检测细胞上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)水平,Western blot检测磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化AKT(p-AKT)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白表达水平。结果与对照组比较,ox-LDL组细胞上清液中TNF-α和IL-6水平显著升高(P0.01),细胞内MDA含量显著升高(P0.01),SOD活性明显降低(P0.05),上清液中NO水平显著降低(P0.01),活性氧(ROS)含量和细胞凋亡率明显升高,PI3K、eNOS蛋白表达水平和AKT蛋白磷酸化水平显著降低(P0.01)。与ox-LDL组比较,干预组细胞上清液中TNF-α和IL-6水平显著降低(P0.01),细胞内MDA含量显著降低(P0.01),SOD活性明显升高(P0.05),上清液中NO水平显著升高(P0.01),ROS含量和细胞凋亡率明显降低,PI3K、eNOS蛋白表达水平和AKT蛋白磷酸化水平显著升高(P 0.01)。与干预组比较,抑制剂组细胞上清液中TNF-α和IL-6水平显著升高(P0.01),细胞内MDA含量显著升高(P0.01)、SOD活性明显降低(P0.05),上清液中NO水平明显降低(P0.05),细胞内ROS含量升高,PI3K、eNOS蛋白表达水平和AKT蛋白磷酸化水平显著降低(P0.01)。结论二陈汤合桃红四物汤含药血清能有效保护ox-LDL诱导的内皮细胞损伤,其机制可能与激活PI3K/AKT/eNOS信号通路有关。     

Metabolism by human endothelial cells of very low density lipoprotein subfractions isolated from Type 1 (insulin-dependent) diabetic patients

Summary The very low density lipoprotein (VLDL) fraction was isolated from 11 normolipidaemic Type 1 (insulin-dependent) diabetic patients in good to fair glycaemic control and from 11 age-, sex- and race-matched, non-diabetic, control subjects. The rate of receptor-mediated degradation by human endothelial cells was significantly greater (p<0.02) for the total VLDL fraction isolated from diabetic patients compared to control subjects and averaged 1008±300 and 717±150 ng·mg cell protein^–1·16 h^–1, respectively. The total VLDL fraction was separated into three subfractions: VLDL-I, S_f 100–400 (S_f = Svedberg units); VLDL-II, S_f 60–100; VLDL-III, S_f20–60. Rates of receptor-mediated degradation of VLDL-I and VLDL-II isolated from diabetic patients were significantly greater than the comparable subfraction isolated from control subjects and averaged 1023±279 vs 361±122 (p<0.01) and 433±70 vs 294±70 ng·mg cell protein^–1·16 h^–1 (p<0.03), respectively. Rates of receptor-mediated degradation of the V-III subfraction isolated from the two groups did not differ significantly. There were no significant differences in the chemical composition or in the plasma concentrations of the VLDL subfractions isolated from diabetic patients compared to control subjects. There was a significant increase in the apoprotein E content of VLDL-I (p<0.01) and VLDL-II (p<0.05) isolated from diabetic patients. There was a significant increase in the ratio of apoprotein C compared to apoprotein E (p<0.03) in VLDL-I isolated from control subjects compared to the diabetic patients. There were no significant differences in the apoprotein composition of VLDL-III isolated from the two groups.     

颈动脉粥样硬化影响内皮祖细胞功能的研究进展

动脉粥样硬化是威胁人类健康的最严重的心脑血管疾病之一,阐明动脉粥样硬化发生机制和防治动脉粥样硬化已成为医学界研究的热点。颈动脉粥样硬化在一定程度上可反映全身动脉粥样硬化斑块发展状况,由于颈动脉位置表浅,易于探及检查,已被证实可作为了解和评估全身动脉粥样硬化的"窗口"。经研究证实,内皮祖细胞可修复受损内膜,延缓动脉粥样硬化的发生发展。本文针对颈动脉粥样硬化患者内皮祖细胞数量和功能的变化,以及内皮祖细胞对该病发生发展的作用进行概括和总结,为动脉粥样硬化的治疗与防治提供新的策略。     

Effects of nicotinic acid on serum cholesterol concentrations of high density lipoprotein subfractions HDL2 and HDL3 in hyperlipoproteinaemia

Nicotinic acid was given in a 4-g daily dose for 6 weeks to 41 weight-stable patients of mean age (+/- SD) 52 +/- 9 years, with type IIa, type IIb or type IV hyperlipoproteinaemia (HLP), in order to study its effects on serum cholesterol concentrations of high density lipoprotein (HDL) subfractions HDL2 and HDL3. The triglyceride and cholesterol levels of serum very low density (VLDL) and low density (LDL) lipoproteins decreased during treatment (P less than 0.001). Serum HDL and HDL2 cholesterol levels increased by 37% and 135%, respectively. These changes were positively correlated (r = 0.93; P less than 0.001). There was no significant change in mean serum HDL3 cholesterol concentration. A negative correlation existed between changes in HDL3 and HDL2 cholesterol levels (r = -0.54; P less than 0.001). Multiple stepwise linear regression analyses revealed that the initial HDL3 cholesterol predicted more than 30% of the increase in HDL2 cholesterol. Changes in the concentrations of HDL2 and HDL3 cholesterol after 6 weeks of drug treatment were not related to the type of HLP, neither were these effects of nicotinic acid correlated with changes in VLDL or LDL lipid levels. The concept has previously been proposed, on the basis of in vitro data, that HDL2 is formed from HDL3 particles in the blood. Our results suggest that, in man, this reaction is stimulated in vivo by prolonged nicotinic acid therapy.     

miR-24对氧化低密度脂蛋白胆固醇诱导的人脐静脉内皮细胞自噬的影响

目的 探讨微小RNA(miR)-24对氧化低密度脂蛋白胆固醇(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)自噬的调控作用及相关分子机制.方法 将HUVECs随机分为正常组,ox-LDL组,阴性对照组,anti-miR-24组,miR-24组.正常组细胞正常培养,ox-LDL组细胞用100μg/ml ox-LDL...     

阿托伐他汀对氧化型低密度脂蛋白诱导的人脐静胁内皮细胞增殖及白细胞介素-18分泌的影响

目的:观察阿托伐他汀对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖及白细胞介素-18(IL-18)分泌的影响.方法:体外培养的HUVEC株,第3～9代用于实验.实验分3组:①空白对照组;②ox-LDL组(100 mg/L);③阿托伐他汀组:先将阿托伐他汀0.01、0.05、0.1、0.5、1.0μmol/L分别,作用于内皮细胞4 h,然后加ox-LDL(100 mg/L)作用细胞24 h.采用细胞酶联免疫吸附分析检测细胞培养上清液IL-18含量;采用四唑盐比色法检测各孔的吸收度(OD),以评价增殖效果.结果:与空白对照组比较,100 mg/L ox-LDL抑制内皮细胞增殖(P＜0.01),阿托伐他汀呈剂量依赖性地促进ox-LDL诱导的内皮细胞增殖(P＜0.05,P＜0.01).正常内皮细胞不分泌IL-18,而100 mg/L ox-LDL促进IL-18分泌.0.01/μmol/L阿托伐他汀对ox-LDL诱导的HUVEC分泌IL-18无影响(P＞0.05),0.05,0.1,0.5,1.0 μmol/L阿托伐他汀能明显抑制oxLDL诱导的HUVEC分泌IL-18(P＜0.05,P＜0.01),抑制效应呈浓度依赖性.结论:阿托伐他汀呈剂量依赖性地抑制ox-LDL诱导的人HUVECs分泌IL-18,促进内皮细胞增殖,保护内皮功能,从而发挥他汀类药物调脂外抗动脉粥样硬化作用.     

极低密度脂蛋白及低密度脂蛋白对HepG 2细胞纤溶酶原激活物抑制物-1分泌的影响

目的观察极低密度脂蛋白(VLDL)与低密度脂蛋白(LDL)是否能刺激肝细胞纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-l)的分泌。方法将不同浓度的VLDL与LDL加到培养的HepG2细胞,应用酶联免疫吸附法测定细胞上清液中的PAI-1抗原,采用逆转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)观测HepG2细胞中PAI-1mRNA的表达。结果VLDL能刺激HepG2细胞PAI-1抗原的分泌并具剂量效应关系,同时PAI-1mRNA表达增加。相反LDL则不能刺激细胞PAI-1基因的表达。结论VLDL能刺激肝细胞PAI-1基因表达,VLDL的这种作用可能参与了致动脉粥样硬化的病理过程。