蛋白C与血管内皮细胞的抗凝功能

血管内皮细胞的主要功能为抗血栓形成 ,这也是维持血液流动性的重要机制之一。凝血过程本身是一个系列酶促连锁反应 ,丝氨酸蛋白酶是这些酶促反应的主体。限速因素是凝血辅因子 ,凝血辅因子有 3个 ;高分子激肽原 ,因子Ⅴ和因子Ⅷ。抗凝系统包括丝氨酸蛋白酶抑制物和辅因子抑制物。其中蛋白C系统是与血管内皮细胞有关的抑制因子Ⅴ和因子Ⅷ的天然抗凝系统。这个系统发挥抗凝作用与血管内皮细胞上的分子凝血酶调节蛋白 (TM)、蛋白C受体 (EPCR)及血浆中的蛋白S(PS)等有关。蛋白C(PC)系统发挥抗凝作用的机制和其他与血管内皮细胞有关的抗凝…     

绿色荧光蛋白-小鼠纤维介素蛋白融合基因表达载体的构建和表达

目的：构建绿色荧光蛋白(GFP)和小鼠纤维介素蛋白(mfgl2)的融合蛋白表达载体，在仓鼠卵巢(CHO)细胞中表达，为mfgl2的RNA干扰体外研究提供简便的判断手段。方法：用PCR从mfgl2cDNA文库中扩增出mfgl2cDNA片段，插入到GFP表达载体pEGFP—N2中GFP基因序列的上游，构建成GFP—mfgl2融合基因表达载体pEGFP—mfgl2，将该载体转染到CHO细胞后24—48h，通过荧光显微镜观察并摄片。结果：扩增出长约1．3kb的基因片段，经双酶切鉴定和测序鉴定无误；重组载体转染CHO细胞后，在荧光显微镜下可观察到GFP的表达。结论：成功构建了pEGFP．mfgl2融合基因表达载体；重组载体可在CHO细胞中表达出GFP—mfgl2融合蛋白，为下一步进行mfgl2RNA干扰研究提供了简便的判断手段。     

布鲁菌蛋白抗原的研究进展

布鲁菌病在世界众多国家中广泛流行,严重威胁人类健康,由于缺乏特异性临床表现和敏感度较高的诊断方法,易造成误诊、漏诊。近年来国内外对布鲁菌蛋白抗原的研究层出不穷,增加对布鲁菌蛋白的认识、寻找免疫原性和免疫反应性更强的抗原,不仅有助于探索可用于人类的有效的布鲁菌疫苗,而且有助于新的、敏感度更高的诊断方法的研发。本文对目前具有诊断意义的布鲁菌蛋白抗原进行综述。     

急性心梗患者PC系统改变的临床意义

采用Laurell’s火箭电泳法对急性心梗(AMI)患者的蛋白 C PC:Ag),总蛋白 S(TPS)和游离蛋白S(FPS)进行了检测。AMI患者入院当天及第14天的PC系统指标无明显改变,但急性期死亡患者的PC:Ag及FPS明显低于对照组(P<0.05,P<0.02);再发梗塞患者的PC:Ag和FPS亦明显低于正常对照组(p<0.05,p<0.02),TPS明显高于对照组(P<0.05)。AMI患者PC:Ag与ATⅢ:Ag呈直线负相关。     

急性肺血栓栓塞症患者凝血纤溶系统功能变化相关研究

目的 探讨急性肺血栓栓塞症(acute PTE)患者凝血纤溶系统部分抗凝、促凝因子的变化及其临床意义.方法 人选60例急性PTE患者,其中大面积急性PIE 10例,非大面积急性FTE 50例;40例正常人(对照组);采用凝固试验定量检测法测定三组的血浆蛋白C(PC)、血浆蛋白S(PS)活性;采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血栓调节蛋白(TM).结果 PC、PS活性:急性大面积急性FTE组分别为(69.5±21.7)%、(69.1±14.4)%;非大面积组为(93.1±18.8)%、(83.3±18.9)%,均显著低于正常对照组的(105.5±27.7)%、(112.4±28.6)%(P均<0.01);大面积组PC、PS活性显著低于非大面积组(PC:P<0.01,PS:P<0.05).TM含量:急性大面积肺栓塞组分别为(19.7±10.2)ng/mL,非大面积组为(16.6±10.0)ng/mL,均显著高于正常对照组的(7.5±4.3)ng/mL(P<0.01);大面积和非大面积比较差异无统计学意义.病例组PC、PS阳性率分别为20.0%、26.7%,明显高于正常对照组的5%、5%(P<0.05),比数比(OR)和95%可信区间依次为4.75(1.16-19.3)、6.9(1.75-27.2).结论 血浆PC、PS活性减低容易发生肺栓塞,PC、PS活性减低的程度与栓塞病情程度有正相关性;血浆TM水平显著增高,提示各种因素引起肺血管内皮损伤是发生FTE的高危因素.     

FHIT、Bcl-2及Bax在宫颈癌中的表达及意义

目的:研究宫颈癌组织中Fhit蛋白及Bcl-2/Bax蛋白的表达,探讨FHIT与凋亡相关因子在宫颈癌中的关系。方法:应用免疫组织化学S-P法检测26例正常宫颈组织、38例CIN和80例宫颈癌组织的石蜡标本中Fhit蛋白的表达,以及宫颈癌组织中Bcl-2/Bax蛋白的表达。结果:在正常宫颈组织、CIN组织及宫颈癌组织中Fhit蛋白的阴性表达率分别为0、31.58%及63.75%,Fhit的低表达或不表达与宫颈癌的病理类型无关(P﹥0.05),而与临床分期、组织学分化程度及有无淋巴结转移有关(P﹤0.05)。宫颈癌中Fhit蛋白表达与Bcl-2、Bax蛋白表达有显著相关性(P﹤0.05)。结论:①FHIT参与宫颈癌的发生、发展,是一个候选的抑癌基因。②宫颈癌中Fhit表达失活,可能通过上调Bcl-2蛋白和下调Bax蛋白的表达抑制细胞凋亡,导致宫颈癌的发生。     

Survivin、Her-2、P16和PTEN在膀胱癌中的表达及意义

目的研究Survivin、Her2、P16和PTEN蛋白在膀胱癌中的表达及其生物学意义。方法采用免疫组织化学SP法检测43例膀胱移行细胞癌和10例正常膀胱组织中以上4种蛋白的表达。结果4种蛋白在膀胱癌中的表达与在正常膀胱黏膜比较差异均有显著性意义(均为P<0.01)。不同临床分期间Her2和PTEN表达的差异具有显著性意义(P<0.05);不同病理分级间Survivin、Her2和PTEN表达的差异具有显著性意义(P<0.05或P<0.01)。Her2和Survivin蛋白表达间存在正相关(r=0.821,P<0.05)。结论Her2和Survivin的高表达是膀胱癌预后不良的指征;P16可作为早期诊断的标记物;PTEN则可作为膀胱癌预后不良的独立性指标。     

靶向Hsp90-Cdc37蛋白-蛋白相互作用小分子抑制剂的研究进展

热休克蛋白90(Hsp90)参与肿瘤生理与病理的多个过程,设计与开发有效的Hsp90抑制剂一直是抗肿瘤药物研发的热点。目前,传统的N端抑制剂的研发正处于瓶颈期,C端抑制剂的发展也受到了限制,阻碍Hsp90与细胞分裂周期蛋白Cdc37的相互作用已经成为了抑制Hsp90的全新方向。研究表明,很多的蛋白激酶需要依靠Cdc37而聚集到Hsp90上,从而完成空间构象的正确折叠。因此,靶向Hsp90-Cdc37能够具有针对性地抑制Hsp90的激酶类客户蛋白,降低不良反应。随着对Hsp90与Cdc37相互作用机制越来越深入的研究,很多能够干扰Hsp90-Cdc37的天然产物被发现,本文从发现过程、作用机制这两方面综述这些小分子抑制剂的研究进展。     

测定血清酸溶性蛋白与C-反应性蛋白的比较研究

我们对120例临床标本血清中 ASP 和 CRP 进行了比较。结果表明,检测人血清CRP 和 ASP 的符合率为85.85%。而且微量比色法检测 ASP 具有简单、敏感、快速和价廉的优点。据此我们认为用检测血清 ASP 的方法代替血清 CRP 的检测是可行的。     

甲状腺癌E-cad、P53、BcI-2蛋白表达的意义及临床应用研究

目的 探讨甲状腺乳头状癌、甲状腺低分化癌中E-cad、P53、Bcl-2蛋白表达情况与它们的病理分级、转移、预后的关系。方法 用HE和组织化学方法对23例甲状腺乳头状癌、17例甲状腺低分化癌进行诊断，用SP免疫组织化学方法检测E-cad、P53、Bcl-2蛋白表达情况。结果 甲状腺乳头状癌、甲状腺低分化癌中E-cad蛋白阳性表达率分别为78．3％（18／23）和23．5％（4／17），2组阳性表达率有显著性差异（呈负相关），P〈0．05；P53蛋白阳性表达率分别为21．7％（5／23）和76．5％（13／17），2组阳性表达率有显著性差异（呈正相关），P〈0．05；Bcl-2蛋白阳性表达率分别为17．4％（4／23）和70．6％（12／17）．2组阳性表达率有显著性差异（呈正相关），P〈0．05。甲状腺乳头状癌组肺转移2例，甲状腺低分化癌组肺转移8倒。原发灶E-cad蛋白均为失表达。结论 E-cad、P53、Bcl-2蛋白表达与甲状腺癌病理分级有显著相关性，E-cad与甲状腺癌远隔脏器（肺）转移明显相关。它们可作为判断预后、指导临床治疗的检测指标联合应用。     

蛋白磷酸酶1和2A抑制剂的研究进展

目的 综述国内外对于蛋白磷酸酶(PP)1和2A抑制剂的研究进展.方法 参阅相关文献,对PP1和PP2A抑制剂的结构类型、药理作用、构效关系研究进行归纳和综述.结果与讨论 需进一步认清PP1和PP2A生理、药理学机制,了解其抑制剂的作用原理及特点,为设计新的、高活性的化合物奠定基础.     

特发性肺纤维化患者蛋白C系统的研究

目的观察在特发性肺纤维化(IPF)患者支气管肺泡灌洗液(BALF)中凝血酶-抗凝血酶复合物(TAT)和Ⅲ型前胶原(PCⅢ)质量浓度的变化及二者间的相关性。观察IPF患者BALF和血浆中蛋白C(PC)、蛋白S(PS)及血栓调节蛋白(TM)水平的变化,探讨PC系统内各成分质量浓度的变化及其对肺内凝血活性的升高及肺纤维化形成的影响。方法选取正常对照16例,IPF患者16例。IPF患者及8例正常对照行支气管镜检查后取BALF并同时抽血留取血浆,其余8例对照仅留取血浆。采用ELISA法测定BALF及血浆TAT、PC、PS、TM质量浓度及BALF中PCⅢ质量浓度。结果IPF组BALF中PCⅢ和TM质量浓度明显高于对照组(P<0.01,P<0.05),PS质量浓度明显低于对照组(P<0.05)。IPF组血浆中TAT质量浓度明显高于对照组(P<0.01),PC质量浓度明显低于对照组(P<0.05)。IPF组BALF中PCⅢ质量浓度与TAT质量浓度呈线性正相关(r=0.52,P<0.05)。结论IPF患者存在血液的高凝状态。IPF患者肺内凝血活性的升高,与肺内胶原代谢的活动性及肺纤维化的形成相关。IPF患者存在PC及PS质量浓度的下降及TM质量浓度的升高,提示PC途径作用的减弱与凝血活性的升高及肺纤维化的形成具有一定的关系。     

甲状腺癌E-cad、P53、BcI-2蛋白表达的意义及临床应用研究

目的探讨甲状腺乳头状癌、甲状腺低分化癌中E-cad、P53、BcI-2蛋白表达情况与它们的病理分级、转移、预后的关系。方法用HE和组织化学方法对23例甲状腺乳头状癌、17例甲状腺低分化癌进行诊断,用SP免疫组织化学方法检测E-cad、P53、BcI-2蛋白表达情况。结果甲状腺乳头状癌、甲状腺低分化癌中E-cad蛋白阳性表达率分别为78.3%(18/23)和23.5%(4/17),2组阳性表达率有显著性差异(呈负相关),P<0.05;P53蛋白阳性表达率分别为21.7%(5/23)和76.5%(13/17),2组阳性表达率有显著性差异(呈正相关),P<0.05;BcI-2蛋白阳性表达率分别为17.4%(4/23)和70.6%(12/17),2组阳性表达率有显著性差异(呈正相关),P<0.05。甲状腺乳头状癌组肺转移2例,甲状腺低分化癌组肺转移8例。原发灶E-cad蛋白均为失表达。结论E-cad、P53、BcI-2蛋白表达与甲状腺癌病理分级有显著相关性,E-cad与甲状腺癌远隔脏器(肺)转移明显相关。它们可作为判断预后、指导临床治疗的检测指标联合应用。     

P53、Caspase-3和凋亡调节蛋白FasL在乳腺癌的表达及其意义

目的:通过在人乳腺癌组织和癌旁(相对正常)乳腺组织中观察p53、Caspase-3和FasL凋亡调节蛋白的表达,探讨p53、Caspase-3及FasL在乳腺癌疾病发生、发展过程中的作用及关系,为提高生物治疗乳腺癌疾病提供一定的实验依据。方法:运用免疫组织化学方法检测21例收集于手术切除患者的乳腺癌组织和癌旁相对正常乳腺组织中的p53、Caspase-3及FasL。结果:P53蛋白在乳腺癌组织中的阳性表达率为61.9%明显高于癌旁组织(相对正常)乳腺组织的0%;而Caspase-3蛋白在乳腺癌组织中的阳性表达率为38.0%明显低于癌旁乳腺组织的80.9%;FasL蛋白在乳腺癌组织中的阳性表达率为57.1%明显高于癌旁乳腺组织的19.0%。结论:在乳腺癌发生、发展过程中p53、Caspase-3和FasL蛋白发挥着既独立又协同的作用。     

不明原因发热患者血清蛋白变化及其蛋白电泳分析

目的探讨血清前清蛋白（PA）、清蛋白（ALB）及其蛋白电泳检测在不明原因发热患者病因判断和治疗中的应用价值。方法收集26例健康体检者和86例不明原因发热患者血清,测定其血清前清蛋白、清蛋白并进行蛋白电泳分析。结果不明原因发热患者组血清PA、ALB降低,与对照组相比差异均有显著性（P〈0．01）,肿瘤性疾病与感染性疾病和血管结缔组织病相比PA降低较显著（P〈0．05）。蛋白电泳图谱分析显示患者组ALB与正常组比较显著性降低（P〈0．01）;感染性疾病多表现为ALB降低、α2、β球蛋白升高（P〈0．01）;肿瘤性疾病多表现为ALB降低、α1球蛋白升高（P〈0．01）和1球蛋白升高（P〈0．05）;血管结缔组织病多表现为ALB降低、α2球蛋白升高（P〈0．01）和α1,、β球蛋白升高（P〈0．05）。肿瘤性疾病与感染性疾病和血管结缔组织病相比α2球蛋白显著降低（P〈0．05）。结论通过测定不明原因发热患者的蛋白变化,可对患者有针对性地进行进一步的检查,从而尽快地确定不明原因发热的病因,给临床治疗提供一定的帮助。