肺癌组织中wip1的表达及其临床意义

目的：通过检测非小细胞肺癌组织及其癌旁组织中wip1、p38MAPK、p53表达水平,探讨非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer）中wip1表达的临床意义。方法：用实时定量聚合酶链反应（quantitative realtime PCR）检测60例肺癌及其癌旁组织中wip1、p38MAPK、p53 mRNA表达,分析wip1 mRNA表达与临床病理之间的关系;Western blotting方法检测标本中wip1、p38MAPK、p53蛋白表达。结果：正常组和肿瘤组相比p38MAPK、p53的mRNA表达无差异。肿瘤组wip1 mRNA相对表达量为2.40±1.1,与正常组比较表达量明显升高,差异具有统计学意义（t=9.94,P〈0.001）。wip1在肿瘤组和正常组中相对蛋白表达量分别为0.38±0.11、1.09±0.32,肿瘤组较正常组高,差异具有统计学意义（t=15.8,P〈0.01）。正常组与肿瘤组比较,正常组p38MAPK及p53蛋白表达明显升高,差异均具有统计学意义（前者t=11.1,P〈0.01;后者t=17.80,P〈0.01）。wip1表达与肿瘤病理及分期有关,差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论：wip1在早期非小细胞肺癌中高表达,对p53、p38MAPK蛋白表达起负反馈抑制作用,初步研究结果提示wip1可能在非小细胞肺癌发生发展过程中起着重要的致癌作用。     

不育男性精子DNA损伤与年龄和精液常规参数的相关性研究

目的 探讨不育男性精子DNA损伤与年龄和精液参数的相关性. 方法 收集171例不育男性的精液标本,用精子染色质扩散实验( sperm chromatin dispersion, SCD)测定DNA碎片率( DNA fragmentation index, DFI) ,同时行常规精液分析;据DFI值将患者分为DFI＜15%、15%≤DFI＜30%和DFI≥30%组,比较组间年龄和各项精液参数,并进行相关性分析. 结果 各组间年龄、精子浓度、前向运动精子、正常形态率比较差异有统计学意义( P＜0. 05 );DFI与年龄、精子浓度、前向运动精子、正常形态率成负相关( P＜0. 05 ). 结论 精子DNA损伤随男性年龄增加而增加,与精液常规参数具有相关性,是评价男性生育力的一个较好指标.     

精子DNA碎片指数与单精子显微注射妊娠结局的相关性分析

目的 分析精子DNA碎片指数(DNA fragmentation index, DFI)对接受卵胞浆内单精子显微注射(Intracytoplasmic sperm injection, ICSI)助孕后冷冻胚胎移植后的临床妊娠率的影响。方法 回顾性分析接受ICSI助孕的87对夫妇的一般资料,排除女性因素不孕与夫妇双方染色体结构异常和男性Y染色体微缺失,对不同DFI男性患者进行分组,并对2组患者睾丸体积(超声多普勒)、血清促卵泡素(follicle stimulating hormone,FSH)等激素、精液常规分析、精子DFI和临床妊娠率进行统计学分析。结果 不同DFI患者组的女方年龄、男方年龄、不孕时间、冷冻解冻胚胎移植(Frozen embryo transfer,FET)日雌二醇(E2)、FET日子宫内膜厚度等差异无统计学意义;DFI≤25%组的受精率、双原核(2 Pronucleus,2PN)形成率、卵裂率、优质胚胎率、囊胚形成率分别为80.92%、85.37%、96.34%、23.56 %、31.78 %,DFI>25%组分别为70.51 %、71.71%、88.05 %、11.30 %、14.14 %,上述各指标DFI≤25%组均大于DFI>25%组且差异有统计学意义。DFI≤25% 组的临床妊娠率(45.24%)大于DFI>25% 组(20.00%),且差异有统计学意义(χ²=6.340, P=0.012)。结论 精子DFI与妊娠结局密切相关,异常升高的精子DFI(DFI>25%)将对临床妊娠率产生不利影响。     

精索静脉曲张对精子DNA碎片、活力、形态和体外受精结局的影响

目的:探讨精索静脉曲张对精子DNA碎片、活力、形态和体外受精结局的影响。方法:选取医院2017年1月—2019年7月收治的60例精索静脉曲张所致的男性不育患者作为观察组,另选取同期的60例行IVF治疗精液正常患者作为对照组。检测两组的精子DNA碎片率、精液量、正常精子形态率、精子浓度、圆形细胞数、前向精子活力等参数;并对精子形态学及观察组的体外受精结局进行分析。结果:观察组患者的精液量、正常精子形态率、精子浓度、圆形细胞数、前向精子活力均明显低于对照组,比较差异显著(P均<0.05);精子DNA碎片率、无光晕、小光晕、中光晕、大光晕、退化精子率均明显高于对照组,比较差异显著(P均<0.05);观察组患者的体外受精率、卵裂率明显低于同期组,比较差异显著(P均<0.05)。结论:精索静脉曲张会增加男性不育患者的精子DNA碎片率,使得精子的活力、形态发生改变,降低体外受精率及卵裂率,严重影响了患者的受精结局。     

玻璃化冷冻与慢速冷冻对微量精子活动力和DNA完整性的影响

目的比较玻璃化冷冻与慢速冷冻微量精子对精子活力和DNA完整性的影响。方法取70份正常精液标本上游处理后,每份标本分别进行慢速冷冻和玻璃化冷冻。观察冷冻前及2组冷冻组复苏后精子活动率和DNA碎片指数（DFI）,比较两种方法的冷冻效果。结果冷冻前精子活动率和DNA碎片指数分别为（93.24±2.26）%和（6.70±5.78）%;玻璃化冷冻复苏后精子活动率及DFI分别为（63.07±6.69）%和（9.26±7.00）%;慢速冷冻复苏后精子活动率及DFI分别为（63.99±5.88）%和（9.58±6.89）%。两种方法复苏后精子活动率均较冷冻前显著性降低（P〈0.05）,两种方法复苏后精子DFI均较冷冻前显著性升高（P〈0.05）,两种冷冻方法复苏后精子活动率和精子DFI差异无统计学意义（P〉0.05）。结论玻璃化冷冻和慢速冷冻均导致精子活动率下降及DNA损伤,但两种冷冻方法之间无显著差异。     

DNA损伤检测点介质1和p53结合蛋白1在人食管癌细胞系TE-1.TE-13.Eca109中的表达及意义

目的 研究DNA损伤检测点介质1(MDC1)和p53结合蛋白1(53BP1)在人食管癌细胞系中的表达及意义.方法 采用半定量RT-PCR、免疫细胞化学法、间接免疫荧光法和Western blotting检测MDC1、53BP1mRNA和蛋白在人食管癌细胞系TE-1.TE-13.Eca109的表达水平.结果 RT-PCR结果显示MDC1、53BP1mRNA在所检测的人食管癌细胞系中均有表达;免疫细胞化学法、间接免疫荧光法和Western blotting均在人食管癌细胞系中检测到MDC1、53BP1的蛋白表达.结论 首次证实了MDC1、53BP1在食管癌细胞系中的表达.推测MDC1、53BP1可能和食管癌细胞的放射敏感性有关.     

精子形态与活力检测在不育症中的研究

目的探讨精子形态与活力检测在男性不育症中的临床研究和诊断意义。方法选取我院2010年3月～2011年3月84例不育症男性的精液作为观察组，对其进行精子形态和精液常规分析，同时选取同期84例正常男性精液样本作为对照组进行对比。分析两组患者精液的精子活力、正常精子和畸形精子所占比例。结果观察组84例患者中，精子活力不足、正常精子和畸形精子所占比例分别为54．76％（46／84）、29．76％（25／84）和70．23％（59／84）．与对照组相应的三组数据30．95％（26／84）、91．67％（77／84）和8．33％（7／84）比较，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。结论精子的形态和活力是男性精液质量的重要组成部分，是检测男性不育症的重要指标，对男性不育或者生育能力低下有着重要的参考价值，值得临床广泛应用。     

精子DNA碎片率和精液常规参数与年龄的相关性研究

目的 分析男性不育患者年龄与精子DNA碎片率和精液常规参数的相关性。方法 选择2018年1～12月在本院男科就诊的患者725例,按照年龄将患者分为三组。20～29岁组(n=229),30～39岁组(n=371),40～49组(n=125),采用染色质扩散(SCD)实验检测精子DNA碎片率,按照《世界卫生组织人类精液检查与处理实验室手册》(第5版)中标准检测精液常规各参数。分析精子DNA碎片率(DNA fragmentation index,DFI)和精子参数在各组的差异及年龄与精子DNA碎片率和精液参数的相关性。结果 年龄与DFI之间存在正相关关系(r=0.273,P0.01),与精子活力(r=-0.131,P0.01)、精液pH(r=-0.080,P0.05)之间存在负相关关系,与精子浓度之间的相关性差异无统计学意义。精液pH与精子浓度之间存在正相关关系(r=0.285,P0.05)。结论 伴随着男性年龄的增长,精子的活力会降低,并使男性的生育力下降以及对子代产生不良影响,精子DFI与精液常规各参数无相关性。故精子DNA碎片检测可作为精液常规分析的补充,进一步反映男性的生育能力。     

卵巢上皮性癌组织中 WAF1基因的表达

【目的】探讨卵巢上皮性癌组织中WAF1表达情况及其与肿瘤临床病理参数的关系。【方法】用RT-PCR和免疫组化分别检测30例正常卵巢、32例良性卵巢上皮性肿瘤和55例卵巢上皮性癌组织中WAF1mRNA和WAF1蛋白表达情况,并结合临床病理进行探讨。【结果】正常卵巢、良性卵巢上皮性肿瘤、卵巢上皮性癌组织中WAF1mRNA阳性表达率分别为73%、56%、40%(P=0.012),WAF1蛋白阳性表达率分别为80%、56%、36%(P=0.001),卵巢上皮性癌WAF1mRNA及其蛋白表达均低于其它两组。卵巢上皮性癌中WAF1mRNA表达与其蛋白表达呈正相关。WAF1蛋白低表达与卵巢癌FIGO分期晚有关(P=0.032),与年龄、组织学类型、病理分级、残余肿瘤大小无关(P>0.05),而WAF1mRNA与上述各项临床病理参数均无关(P>0.05)。【结论】与正常卵巢和良性卵巢肿瘤相比较,卵巢上皮性癌存在WAF1基因转录抑制及蛋白表达低下,WAF1下调可能与上皮性卵巢癌发生有关;晚期卵巢上皮性癌较早期者WAF1蛋白表达低,提示WAF1蛋白低表达与卵巢上皮性癌的恶性生物学行为有关。     

膀胱癌中p53诱导基因3的表达及意义

 目的探讨膀胱癌组织中p53 诱导基因3（PIG3）的表达在膀胱癌发生发展中的作用。方法应用免疫印迹（Westernblot）法，对40 例膀胱尿路上皮癌组织标本中PIG3 的表达进行检测。其中男27 例，女13 例，年龄42~87 岁，平均年龄59 岁。临床分期T118例，T213 例，T39例。复发性膀胱癌7 例。15 例非肿瘤膀胱组织作对照。结果15 例非肿瘤膀胱组织PIG3 蛋白表达积分吸光度值141.8±11.9；T1与T2垣T3期膀胱癌组织中PIG3 蛋白表达积分吸光度值分别为75.4±12.5，32.1±5.4，组间比较差异有统计学意义（ P< 0.05）。复发性膀胱癌PIG3蛋白表达积分吸光度值为42.7±6.2。结论PIG3 与膀胱癌发生发展有关，检测膀胱癌组织中PIG3 蛋白表达可以作为评估膀胱癌进展程度的一种指标。     

Cyclin G1与p53基因在血管瘤组织中的表达及关系

目的 探讨Cyclin G1与p53基因在血管瘤发生、发展及退化过程中的表达状况及关系.方法 采用免疫组织化学方法 (S-P法)检测人皮肤血管瘤增生期、退化期及正常皮肤组织中Cyclin G1和p53基因的表达水平,并结合第Ⅷ因子相关抗原的免疫组织化学染色证实表达CyclinG1和p53的细胞是血管内皮细胞.利用计算机图像分析技术测量不同时期血管瘤组织和正常皮肤组织Cyclin G1和p53表达的平均光密度和平均阳性面积.结果 增生期血管瘤内皮细胞Cyclin G1和p53表达水平高于退化期,差异有显著性(P＜0.001),退化期血管瘤内皮细胞Cyclin G1和p53表达水平与正常皮肤组织相比,差异无显著性(P＞0.05).结论 Cyclin G1和p53通过促进血管内皮生成在血管瘤的形成过程中起了重要作用.     

同源盒基因PBX1和p53基因在食管鳞癌的表达及临床意义

目的 探讨PBX1和p53蛋白在食管癌中的表达及其与食管癌病理参数之间的关系。方法 用免疫组化SP法对56例食管癌原发灶标本进行染色,分析PBX1和p53蛋白表达及其预后的关系。结果PBX1和p53蛋白(+)性表达率分别为26.8％(15/56)和48.2％(27/56),PBX1表达强度与食管癌的组织学分级呈负相关,PBX1(+)性组5a生存率显著高于(-)性组,在食管癌PBX1和p53表达无相关性。结论 PBX1表达在食管鳞癌发生起一定作用,PBX1可能是提示食管癌预后良好的指标之一。     

人胃癌组织WAF1基因的缺失与不表达

探讨ＷＡＦ１与胃癌的关系，为胃癌基因治疗提供有价值的依据。方法３２例胃癌和３０例正常胃粘膜标本提取细胞ＤＮＡ、总ＲＮＡ，ＭＴＳ１ｃＤＮＡ探针采用随机引物法进行３２Ｐ－ｄＡＴＰ掺入标记，ＷＡＦ１与所提ＤＮＡ、ＲＮＡ进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交分析，检测标本中有无ＷＡＦ１的缺失和ｍＲＮＡ的不表达。ｐ５３抗体与提取的蛋白质进行Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹分析，检测标本中有无ｐ５３的表达。结果ＷＡＦ１Ｓｏｕｔｈｅｒｎ和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交分析结果显示，３２例胃癌标本ＷＡＦ１基因缺失率及ｍＲＮＡ不表达率分别为３４．４％和４０．６％，明显高于正常胃粘膜组。ＷＡＦ１基因缺失率及ｍＲＮＡ不表达与胃癌浸润的深度及分化程度有关，胃癌侵及肌层组ＷＡＦ１基因缺失及ｍＲＮＡ不表达率分别为５２．６％和５７．９％，胃癌未侵及肌层组分别为７．７％和１５．４％，高、中分化胃癌组ＷＡＦ１基因缺失及ｍＲＮＡ不表达率分别为７．１％和１４．３％，而低分化及印戒细胞胃癌组分别为５５．８％和６１．１％。结论胃癌的发生与ｐ５３失活及ＷＡＦ１ｍＲＮＡ不表达有关，胃癌组织中ｐ５３失活与ＷＡＦ１ｍＲＮＡ不表达关系密切。     

p21WAF1／CIP1基因及p53蛋白在大肠癌的表达及意义

用免疫组织化学方法对４２例大肠癌组织ｐ２１ＷＡＦ１／ＣＩＰ１基因及ｐ５３蛋白的表达进行检测,结果表明：ｐ２１ＷＡＦ１／ＣＩＰ１阳性率４２．９％,ｐ５３蛋白阳笥率６４．１％;两者与大肠癌批发化。淋巴结转移及术后生存率之间有关,并随着肿瘤恶性程度的增加,;ｐ２１ＷＡＦ１／ＣＩＰ１阳性率下降,ｐ５３蛋白阳性率增加。     

人胃癌组织WAF1基因的缺失与不表达

目的 探讨ＷＡＦ１与胃癌的关系，为胃癌基因治疗提供有价值的依据。方法 ３２例胃癌和３０例正常胃粘膜标本提取细胞ＤＮＡ，总ＲＮＡ，ＭＴＳ１ｃＤＮＡ探针采用随机引物法进行＾３２Ｐ－ｄＡＴＰ掺入标记，ＷＡＦ１与所提ＤＮＡ，ＲＮＡ进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交分析，检测标本于中无ＷＡＦ１的缺失和ｍＲＮＡ的不表达。ｐ５３抗体与提取的蛋白质进行Ｗｅｓｔｒｎ印迹分析，检测标本中有无ｐ５３的表达，结果     

宫颈鳞癌组织中HPV E6与野生型p53和PinX1表达的关系及其临床意义

目的 探讨宫颈鳞癌、宫颈鳞癌癌旁及正常宫颈组织中HPV E6、野生型p53及PinX1表达及其关系.方法 收集第三军医大学大坪医院野战外科研究所妇产科2013年3月至2014年2月17例宫颈鳞癌患者宫颈鳞癌、宫颈鳞癌癌旁组织,选取10例正常宫颈组织作为对照.采用Real-TimePCR、Western blot、免疫组织化学方法检测3组组织中HPV E6、野生型p53和PinX1的mRNA、蛋白的表达及分布.结果 宫颈鳞癌组织中mRNA及蛋白水平结果均显示HPV E6的表达水平显著高于癌旁组织(P＜0.01),而野生型p53和PinX1的表达水平明显低于癌旁及正常组织(P＜0.05).相关性分析提示:宫颈鳞癌组织中野生型p53(R=-0.605,P＜0.01)和PinX1(R=-0.496,P＜0.05)表达水平的下降与HPV E6的表达水平升高存在负相关,野生型p53与PinX1的表达呈正相关(R=0.824,P＜0.01).结论 宫颈鳞癌组织中HPV E6表达上调与野生型p53、PinX1的表达负相关,PinX1的表达与野生型p53密切相关,HPV E6可能通过抑制野生型p53、PinX1导致宫颈鳞癌的发生、发展.     

cyclin D1和p53基因在早期食管癌中的表达

目的探讨cyclinD1和p53基因在食管癌发生中的作用及其相关性。方法应用免疫组织化学s—P法检测cyclinD1和p53基因在19例食管早期癌、20例异型增生以及10例正常食管黏膜标本中的表述。结果cyclinD1和p53基因在早期癌中的表达均高于正常食管黏膜（P〈0．05）。结论cyclinD1和p53基因与食管癌的发生有关,他们的变化是食管癌发生中的早期事件。