人血清P21蛋白的Western印迹测定

建立了Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法测定人血清中ｒａｓ癌基因蛋白的方法，检测限值为３ｍｇ／ｌ血清。丽春红Ｓ染色后裁掉非靶蛋白部分硝酸纤维素膜，可大量节约一抗的用量，微波炉促进免疫结合，加速显色过程，用国产碱性磷酸酶ＡＢＣ试剂，可降低成本，实验结果可用５６０ｎｍ波长的色谱扫描或血清系列稀释法进行定量，并已用于职业肿瘤高危人群的筛检。     

膀胱癌P21、P185、P53蛋白表达及其临床意义

应用免疫组织化学方法检测膀胱移行细胞癌ｒａｓ,ｃ -ｅｒｂ -2及Ｐ5 3蛋白表达 ,旨在探讨癌基因及抑癌基因的改变与膀胱移行细胞癌生物学行为的关系 ,为临床诊断及判断预后提供理论依据。1　材料与方法1 1　材料 :选取有完整随访资料的膀胱移行细胞癌手术标本82例 ,另取 10例非癌膀胱粘膜作对照。标本经 10 %福尔马林固定、石蜡包埋。ｒａｓＰ2 1、Ｐ5 3鼠抗人抗体购自中山生物技术公司。Ｐ185鼠抗人抗体为美国ｏｎｃｏｇｅｎｅＳｃｉｅｎｃｅ公司产品。ＡＢＣ试剂盒为美国ｖｅｃｔｏｒＬａｂ公司产品。1 2　方法1 2 1　免疫组化染色 :石…     

PCNA、Ki-67和P21蛋白在尖锐湿疣组织中的表达及其临床意义

目的 检测PCNA、Ki-67和P21蛋白在女性尖锐湿疣（CA）组织中的表达情况，探讨它们在CA发病中的作用。方法 用免疫组化方法对41例CA组织和8例正常外阴皮肤中的PCNA、Ki-67和P21蛋白的过度表达情况分别进行检测。结果 41例CA组织中PCNA、Ki-67和P21蛋白的阳性过度表达率分别为72．4％、85．4％和41．5％，而正常外阴皮肤中除Ki-67蛋白过度表达率为25％外，PCNA和P21蛋白均无过度表达。CA组和对照组比较均有统计学差异（P〈0．05或0．01）。结论 CA组织中PCNA、Ki-67和P21蛋白的过度表达，可能与CA的发病有关。     

P53和P21蛋白在鼻咽癌中的表达及其临床意义

目的：探讨P53和P21蛋白在鼻咽癌（NPC）、癌旁组织和鼻咽慢性炎症中表达的差异，及其与肿瘤生物学行为的关系。材料与方法：首程放疗前的NPC病人100例，癌旁组织和鼻咽慢性炎症对照组各20例，用SP法进行P53和P21蛋白免疫组化染色，P53阳性细胞的标准为：癌巢内肿瘤细胞核有棕色沉着的细胞；P21阳性细胞的标准为：癌巢内肿瘤细胞浆有棕色沉着的细胞。结果：在鼻咽癌、癌旁组织和鼻咽慢性炎症组织中，P53蛋白的阳性率分别为：78．0％、35．0％和0．0％，P＝0．001；P21蛋白的阳性率分别为：83．0％、75．0％和65．0％，P＝0．170。在鼻咽癌原发灶早期（T1＋2）和晚期（T3＋4），颈结阴性和阳性及临床早期（Ⅰ Ⅱ）和临床晚期（Ⅲ Ⅳ）各组中，P53蛋白和P21蛋白的阳性率均无差异（P＞0．05）。结论：P53基因的突变与鼻咽癌的发生有一定的关系。P53蛋白可能是鼻咽癌癌病变的指标；P21的突变可能与鼻咽癌的发生无明显的关系，P53蛋白和P21蛋白的阳性率与鼻咽癌原发灶的早晚，颈结转移，和临床分期无关。     

p21结构功能与研究新进展

细胞周期是由周期依赖激酶(CDK)和细胞周期蛋白共同作用而完成。尤其是G1期过渡到S期受细胞周期负调节因子家族周期蛋白依赖激酶抑制因子(CDKI)的调节,p21可以和p53共同构成细胞周期G1检查站,因DNA损伤后不经过修复则无法通过,减少受损DNA的复制和积累,从而发挥抑癌作用。当p21、Cyclin、CDK,PCNA四聚体的功能受到抑制,则使增殖信号大量活化,导致细胞异化和恶变。p21作为一种负性调节因子,在依赖野生型p53的表达通路上与肿瘤的表达、表达含量、表达位置,以及预后都密切相关。     

慢性粒细胞白血病p53及p21蛋白表达及其意义

对30例慢性粒细胞白血病（CML）患阿霉素诱导前后的p53及p21蛋白进行免疫组化染色分析。发现7例在阿霉素诱导前即有p53蛋白高表达,多为CML进展期患,其中6例对应的p21蛋白在阿霉素诱导前后均为弱表达或不表达,1例慢性期患p53及p21在阿霉素诱导前后均无表达,此7例患预后差。     

P53，P21蛋白在人类白血病细胞表达及其临床意义

有关单一基因与白血病的关系已有较多报道,而多种癌基因联合研究的报道尚较少,故本研究采用免疫组化方法对40例白血病骨髓活检标本进行了P53、P21蛋白检测,旨在探讨这两种蛋白与白血病的分类及预后的关系,为进一步深入研究提供线索。     

大肠癌中P21基因表达的研究

目的:通过检测P21基因表达,以探讨其在大肠癌的发生、发展中的作用及与大肠癌临床病理特征之间的关系。方法:采用免疫组织化学S-P方法,对大肠癌组织(20例)、癌切缘组织(20例)、大肠腺瘤(10例)、炎性息肉(20例)、炎性溃疡(10例)、血吸虫病(6例)及正常大肠粘膜组织(10例)同步检测P21基因蛋白。结果:P21蛋白除了正常大肠粘膜中无阳性表达外,在癌组织、癌切缘组织、腺瘤、炎性息肉、炎性溃疡及血吸虫病肠粘膜组织中表达的阳性率分别为60.00％、10.00％、40.00％、15.00％、10.00％、16.67％。癌组织阳性率与其他组织阳性率相比差异有显著性(P<0.05);P21阳性表达与大肠癌病变部位、患者的年龄和DUKE’S分期均无关(P>0.05),但高、中分化腺癌合并后阳性率与低分化及粘液腺癌合并后阳性率相比差异有显著性(P<0.05)。结论:P21基因表达在大肠癌的发生、发展中起到重要作用。     

慢性粒细胞白血病p53及p21蛋白表达及其意义

对 3 0例慢性粒细胞白血病 (CML)患者阿霉素诱导前后的 p53及 p2 1蛋白进行免疫组化染色分析 ,发现 7例在阿霉素诱导前即有 p53蛋白高表达 ,多为CML进展期患者 ,其中 6例对应的 p2 1蛋白在阿霉素诱导前后均为弱表达或不表达。 1例慢性期患者 p53及 p2 1在阿霉素诱导前后均无表达。此 7例患者预后差。     

肝细胞癌组织中P16、P21蛋白表达的临床病理意义

目的　探讨P16和P2 1蛋白表达与肝细胞癌 (HCC)临床病理的关系。方法　应用免疫组织化学SABC法检测 4 6例HCC癌及其配对 38例癌旁肝组织P16和P2 1蛋白的表达 ,结合临床病理资料分析其意义。结果　P16蛋白的表达缺失率 ,在HCC癌组织 (5 8.7% )明显高于癌旁肝组织 (34.2 % ) (P <0 .0 5 ) ;在EdmondsonⅢ～Ⅳ级HCC(78.9% )显著高于EdmondsonⅠ～Ⅱ级HCC(4 4 .4 % ) (P <0 .0 5 ) ,在直径 >3cmHCC(6 5 .0 % )显著高于直径≤ 3cm早期HCC(16 .7% ) (P <0 .0 1) ,但在有无门脉癌栓组间比较则无明显差别。P2 1蛋白的表达缺失率 ,在HCC(80 .4 % )也显著高于癌旁组织 (4 7.4 % ) (P <0 .0 1) ,但在不同分化程度、肿瘤大小及有无门脉癌栓形成组间比较则无统计学差别。结论　P16蛋白的表达缺失与HCC分化程度及侵袭进展密切相关。     

膀胱癌Ha-ras基因突变、P21蛋白表达及其意义

目的：为探讨ras基因突变及P^21蛋白表达与膀胱癌发生发展关系。方法：采用聚合酶链反应—单链DNA构象多态性分析和免疫组化使霉菌抗生物素蛋白—过氧化物酶法，对30例膀胱癌组织Ha—ras基因ExonⅠ突变及P^21蛋白表达情况进行了检测。结果：膀光癌组织Ha—ras基因ExonⅠ突变率为46.7％，高于其周边组织的16．7％，经X^2检验，差异有显著性(P＜0.025)，其P^21蛋白表达率前者为60．0％，也明显高于其周边组织26．7％(P＜0．01)。结论：Ha—ras ExonⅠ点突变及其P^21蛋白的过度表达在膀胱癌的发生发展中起着重要作用。     

p16、Rb和rasp21蛋白在子宫内膜癌组织中的表达

①目的 研究p16、Rb和rasp21蛋白在子宫内膜癌中的表达及与雌激素受体（ER）和孕激素受体（PR）表达的关系,探讨子宫内膜癌发生、发展过程中存在着的多因素、多步骤、多阶段的癌变机制。②方法 应用免疫组化SABC法检测21例正常子宫内膜、19例子宫内膜上皮内瘤样病变（EIN）及45例子宫内膜癌组织中p16、Rb和rasp21蛋白表达,同时检测子宫内膜癌组织中ER和PR的表达情况。③结果 子宫内膜癌中p16和Rb蛋白的阳性表达率低于正常子宫内膜（χ^2=9．03、4．37,P〈0．01、0．05）,正常子宫内膜中rasp21蛋白阳性表达率低于子宫内膜癌和EIN（χ^2=10．99、3．87．P〈0．01、0．05）,其表达与子宫内膜癌的临床分期、肌层浸润及组织分级有关（P=0．015,χ^2=7．29、6．65,P〈0．01）。子宫内膜癌组织中,p16与Rb蛋白的表达呈正相关（r=0．42,P〈0．01）,rasp21蛋白与ER、PR的表达呈负相关（r=0．46、-0．42,P〈0．01）。④结论 p16、Rb和rasp21基因均参与子宫内膜癌的发生,rasp21基因的异常表达是子宫内膜癌发生的早期事件,并与ER和PR有协同作用,为子宫内膜癌恶性进展和预后的不利因素。     

放疗后脑恶性胶质瘤细胞内p53和p21^WAF1蛋白的表达

目的 探讨放射治疗后脑恶性胶质瘤细胞内p53蛋白及其下游靶基因p21^WAF1和Eax表达的变化与内源性细胞内p53状态的关系。方法 Wertern Blot测定在放疗后不同时间点时两种人恶性胶质瘤细胞株：U87MG(野生型p53)和T98G(突变型p53)内p53、p21^WAF1和Bax蛋白的表达，应用密度测定仪对表达的蛋白进行半定量分析。结果 照射后2h，U87MG细胞内p53蛋白水平较照射前增加6倍，在24h内保持稳定，随后3d内继续增加。而p53下游靶基因p21^WAF1蛋白被p53转录激活后6h开始增加，在12h大约是基线的10倍，随后其进一步增加。而在T98G细胞中放疗后p53蛋白表达无明显改变，在放疗后72h内没有观察到p21^WAF1的表达。这两个细胞株中，Bax蛋白表达在放疗后均没有明显变化。结论放疗后恶性胶质瘤细胞内p53蛋白和其靶蛋白的激活和积聚取决于其内源性细胞内p53的状态。而Bax水平没有变化表明放射诱导的细胞凋亡并不需要bcl—2家族中该成员的参与。     

大肠癌组织P21蛋白的表达研究

研究P21蛋白的表达与大肠癌发生的关系.应用免疫组化SABC法分别检测大肠癌组织及其癌瘤手术切除的切缘组织P21蛋白的表达.P21蛋白在大肠癌组织中的阳性率为65.0%,在切缘组织中的阳性率为15.0%,大肠癌组织与切缘组织阳性率比较有极显著性差异,P＜0.01.结果表明P21蛋白的表达与大肠癌的组织学类型、Dukes分期、分化程度无关,P＞0.05.提示P21蛋白在大肠癌的发生中发挥重要作用.     

抑癌蛋白p21和p53表达与胃癌细胞增殖的关系

为探讨抑癌蛋白ｐ２１和ｐ５３的表达与胃癌恶性生长的关系，选择８８例手术切除的胃癌和胃溃疡蜡块标本，用免疫组织化学方法检测上述标本中ｐ２１，ｐ５３和ＰＣＮＡ的表达。结果表明：胃癌组织中ｐ５３的突变蛋白表达率约为４０％，ｐ２１蛋白在胃粘液腺癌和低分化及未分化型腺癌表达明显低下，ＰＣＮＡ在胃腺癌中的表达水平高。提示胃癌细胞ｐ２１蛋白水平（低）和ｐ５３的突变与胃癌的发病有一定的关系，而与胃癌细胞恶性增长的关系不明显     

P21蛋白在浸润性乳腺癌中的表达和意义

目的:探讨P21蛋白的表达与乳腺癌临床病理特征的关系.方法:应用免疫组化SABC法检测42例乳腺癌组织中P21蛋白的表达.结果:P21蛋白定位于细胞核,在Ⅰ/Ⅱ期和Ⅲ/Ⅳ期乳腺癌P21蛋白阳性率分别为90.3%和45.5%(P＜0.05),在生存期≥5 a组和＜5 a组P21蛋白阳性率分别为88.2%和37.5%(P＜0.05).结论:P21蛋白表达对判断乳腺癌预后有重要意义.