足细胞标志蛋白在足细胞病中的研究进展

肾小球滤过屏障由肾小球内皮细胞、肾小球基底膜和足细胞组成,在维持肾小球的正常生理功能中起着重要作用.足细胞作为一种高度分化的细胞,在维持肾小球滤过屏障、产生系膜细胞、生成内皮细胞生长因子方面具有重要作用[1～2].以足细胞病变为显著特点的肾小球疾病称为足细胞病(podocytopathy),临床上可表现为大量蛋白尿、低...     

足细胞蛋白标志物在原发性足细胞病中的应用进展

原发性足细胞病常见于微小病变型肾病、局灶节段性肾小球硬化及膜性肾病。足细胞损伤是原发性足细胞病进程中的重要环节之一，而足细胞蛋白标志物在其中扮演重要角色。研究表明，足细胞蛋白标志物可作为原发性足细胞病的非侵入性诊断方法之一。本文综述足细胞蛋白标志物在原发性足细胞病中的应用研究进展，以期为原发性足细胞病的预防和诊治提供理论依据。     

肾小球上皮足突细胞培养

目的 :分离培养肾小球上皮足突细胞。方法 :机械分离低龄SD大鼠肾小球、胰酶 ,胶原酶消化后接种于选择性培养基K1体系 ,使肾小球大于 6 0个 /cm2 ,培养 8～ 10天后收获细胞 ,用形态学特征 ,嘌呤酶素选择性杀伤作用 ,抗受体相关蛋白 (RAP)免疫荧光技术鉴定细胞类型。结果 :收获的培养细胞为肾小球上皮足突细胞。结论 :该法能较为快捷、准确地获得所需的培养细胞类型。     

巢蛋白在肾小球足细胞中的研究进展

巢蛋白(Nestin)是一种属于中间丝的细胞骨架蛋白.自1990年Lendahl等[1]发现Nestin表达于CNS干细胞中以来,倍受研究者的关注.以往研究表明,在正常的中枢神经系统内,Nestin 主要在胚胎期和成熟的神经前体细胞一过性表达.因而Nestin常被视为神经前体细胞的标志物.然而,近年研究发现在肾脏足细胞中有大量Nestin表达.本文就Nestin在足细胞的研究进展作一综述.     

大鼠足细胞原代培养及观察

目的建立一种操作简便、重复性较好的大鼠肾脏足细胞分离和培养方法 ,并观察体外培养足细胞的生长特性。方法选用SD大鼠幼鼠,无菌取肾,采用低浓度胰蛋白酶短时间消化结合差异过筛法,获得较高纯度的肾小球,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃、5%CO2的恒温恒湿培养箱培养。采用细胞免疫组化技术,对所提取的细胞进行免疫染色鉴定,并在光学显微镜下对足细胞进行跟踪观察。结果培养第3天,可见有部分细胞从贴壁的肾小球爬出,第5天可见细胞成铺路石样生长,待第8天细胞汇合度达70%~80%,消化细胞传代培养,采用传代培养7 d的细胞进行免疫组化检测,细胞内足细胞标志蛋白Nephrin呈阳性表达,足细胞纯度高迏95%以上。足细胞生长良好,继续培养分化形成具有特殊形态的成熟足细胞。结论本实验成功建立了大鼠足细胞的提取、培养和鉴定方法,操作简单、重复性好、纯度高,为下一步足细胞相关研究奠定了基础。     

尿中足细胞数量和足细胞标志蛋白水平与狼疮性肾炎组织学的相关性研究

正狼疮性肾炎是系统性红斑狼疮的常见并发症,伴有双肾不同病理类型的免疫性损害,临床表现为蛋白尿、肾功能不全、血尿等,是系统性红斑狼疮主要死亡原因之一~([1-2])。随着免疫抑制等治疗方法的进步,狼疮性肾炎患者的死亡率和肾脏存活率显著改善,但仍有10%～30%患者发展为终末期肾脏疾病~([3-4])。肾穿刺活检是确诊活动性肾脏病肾组织病变类型的重要方法,但肾活检具有侵袭性,且费用昂贵,导致临床应用受限,因此寻找无创、敏感的狼疮性肾炎组织学分类标志物具有重要意义。足细胞作为过滤器在肾小球滤过功能中发挥重要作用,近年研究表明,足     

肾衰饮对糖尿病肾病大鼠足细胞标志蛋白、足细胞裂孔膜蛋白影响

目的 研究肾衰饮对糖尿病肾病（DKD）大鼠足细胞标志蛋白（PCX）、足细胞裂孔膜蛋白（Nephrin）的影响。方法 选取SPF级雄性SD大鼠72只随机分为空白组、DKD组、厄贝沙坦组、肾衰饮低剂量组、肾衰饮中剂量组、肾衰饮高剂量组。采用高脂高糖饲料喂养联合链脲佐菌素腹腔注射建立DKD大鼠模型。厄贝沙坦组采用厄贝沙坦2.7 mg/mL灌胃;肾衰饮低、中、高剂量组分别采用肾衰饮2.79、5.58、11.16 g/mL灌胃;空白组、DKD组采用等体积生理盐水灌胃。连续给药8周后检测各组大鼠尿蛋白（PRO）、总胆固醇（TC）、血肌酐（Scr）、甘油三酯（TG）、血尿素氮（BUN）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、葡萄糖（GLU）、谷丙转氨酶（ALT）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、谷草转氨酶（AST）含量;苏木素-伊红（HE）染色观察肾脏组织病理形态学变化;酶联免疫吸附试验检测血清碱性纤维母细胞生长因子（bFGF）、胰岛素样生长因子（IGF）、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达水平;蛋白免疫印迹法检测肾脏组织PCX、Nephrin蛋白表达水平。结果 与空白组比较,DKD组大鼠GLU、...     

足细胞蛋白Nephrin、Podocin和肾小球疾病

【摘要】肾小球疾病是指累及两侧肾小球的一类疾病,多以蛋白尿为主要临床表现,由于发病机理尚不明确,因此疾病早期缺乏准确有效的检测和诊断手段。近来研究发现足细胞蛋白Nephrin和Podocin在多种肾小球疾病发生发展和诊断预测中起重要作用。本文就近几年Nephrin、Podocin与肾小球疾病的相关研究作一综述。 【关键词】足细胞蛋白;Nephrin;Podocin;肾小球疾病     

足细胞蛋白Nephrin、Podocin与肾小球疾病

肾小球疾病是指累及两侧肾小球的一类疾病,多以蛋白尿为主要临床表现,由于发病机理尚不明确,因此疾病早期缺乏准确有效的检测和诊断手段。近来研究发现足细胞蛋白Nephrin和Podocin在多种肾小球疾病发生发展和诊断预测中起重要作用。本文就近几年Nephrin、Podocin与肾小球疾病的相关研究进行综述。     

肾脏病足细胞损伤及其防治研究进展

足细胞是肾小球主要的固有细胞之一,随着对足细胞生物学研究的深入,尤其是在发现足细胞中表达的一些特异性蛋白分子之后,足细胞已被认为是各种原发或继发性肾小球疾病进展的关键细胞。一、足细胞的生理特性和病理改变足细胞,即肾小球脏层上皮细胞,附着于肾小球基膜(GBM)外侧,连同GBM和毛细血管内皮细胞一起,构成肾小球血液滤过屏障,参与稳定肾小球毛细血管,维持肾小球滤过屏障的功能,调节超滤系数Kf以及保持GBM的正常形态,是维持肾小球滤过膜结构和功能正常的主要细胞之一[1]。足细胞呈多突状,由结构和功能不同的3个部分组成:细胞体、主…     

miR-155在高糖诱导足细胞损伤的表达及其与足细胞损伤相关蛋白表达的相关性

目的 探讨高糖(HG)诱导足细胞损伤中miR-155的表达变化及miR-155与足细胞损伤相关蛋白表达的关系。方法 体外培养人肾小球足细胞(AB8/13),用30 mmol/L的D-葡萄糖溶液刺激AB8/13 48 h作为HG组,同时以终浓度为5 mmol/L的D-葡萄糖溶液处理细胞48 h作为正常对照(NC)组。用CCK8法检测细胞增殖活性。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测nephrin、F-actin、synaptopodin、p-cadherin的mRNA和miR-155的表达。Western blot法检测nephrin、F-actin、synaptopodin、p-cadherin蛋白的表达。鬼笔环肽染色观察细胞骨架变化。细胞免疫荧光检测蛋白nephrin、synaptopodin。结果 HG可抑制足细胞增殖,降低细胞存活率(P<0.01)。HG作用的Ab8/13中的miR-155表达水平升高,nephrin、F-actin、synaptopodin、p-cadherin的mRNA与蛋白表达水平降低(P<0.05)。HG会导致足细胞骨架紊乱。结论 H...     

舒洛地特对糖尿病肾病患者足细胞损伤的影响

目的 探讨舒洛地特对糖尿病肾病(DN)患者足细胞损伤的影响.方法 选择2018年3月至2020年2月阜外华中心血管病医院收治的136例DN患者为研究对象,按照随机数字表法将患者分为观察组和对照组,每组68例.2组患者均给予皮下注射胰岛素或口服降糖药降低血糖、血管紧张素转换酶抑制剂和血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂降血压、他汀类药...     

Cdk5和TGF-β1在糖尿病肾病足细胞中的表达及其作用

目的应用糖尿病肾病模型,观察周期素依赖性蛋白激酶5(Cdk5)和转化生长因子-β1(TGF-β1)在糖尿病肾病足细胞中的表达及其在足细胞损伤中的作用。方法分实验组和对照组2组,实验组,应用13周db/db小鼠作为糖尿病肾病小鼠模型;对照组,应用13周C57BL/6J小鼠作为正常对照模型。相同条件下喂养小鼠,1周后处死,取小鼠肾脏组织切片,免疫组化染色方法测定小鼠足细胞中TGF-β1、Cdk5及肿瘤蛋白-1(WT1)的表达,并进行统计学分析。结果实验组(db/db小鼠)足细胞中Cdk5表达水平(0.30±0.03)较对照组(0.27±0.25)明显升高(P<0.05);TGF-β1表达水平(0.26±0.03)较对照组(0.23±0.02)明显升高(P<0.05);足细胞特异性标志物WT1表达水平实验组(0.23±0.12)较对照组(0.26±0.02)明显降低(P<0.05)。结论糖尿病肾病小鼠足细胞中Cdk5和TGF-β1表达增多,可能是导致足细胞数量减少的原因,说明Cdk5、TGF-β1与足细胞凋亡机制密切相关。     

CD2相关蛋白与其他足细胞相关蛋白间互相作用的研究进展

足细胞足突融合消失和蛋白尿是肾小球疾病的共同特征,了解足细胞的生物学特性,对研究足细胞损伤机制、靶向治疗具有重要意义。裂孔隔膜作为足细胞重要组成部分之一,对维持肾小球滤过屏障结构及功能、限制蛋白滤过起关键作用。CD2相关蛋白(CD2AP)作为裂孔隔膜的代表性蛋白之一,与细胞骨架相关蛋白、其他裂孔隔膜蛋白、基底膜区蛋白、顶膜区蛋白和离子通道蛋白存在相互作用,共同影响足细胞形态学和动力学。本文围绕CD2AP与足细胞相关蛋白的相互作用进行综述,为探讨蛋白尿的发生机制提供参考。     

尿液足细胞标志蛋白Podocalyxin在糖尿病肾病早期诊断中的意义

目的通过对51例糖尿病（DM）和36例糖尿病肾病（DN）患者尿液中的足细胞标志蛋白podocalyxin（PCX）定量检测和分析比较,了解足细胞标志蛋白podocalyxin在糖尿病肾病早期诊断中的意义。方法定量检测患者和正常对照人群尿液中的足细胞标志蛋白Podocalyxin和血液中的各项肾功能指标,对结果进行统计学分析。结果PCX与CysC、Cr、BUN呈正相关,DM组患者PCX阳性率为17．5％,水平为（3．68±1．63）mg／mL,与正常对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05oDN组患者PCX阳性率为66．7％,水平为（54．0±18．2）mg／mL,与正常对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论PCX的检测对发现肾小球的早期损害有重要意义。     

CD2相关蛋白在足细胞分化中的作用

为研究肾脏足细胞的分化特点及CD2相关蛋白（CD2-associated protein,CD2AP）在足细胞分化过程中的作用。采用RP—MI1640培养液在33C许可条件下培养永生化小鼠足细胞系（未分化组）．转染针对CD2AP的小分子干扰RNA（small interfering RNA．siRNA）后置于37C非许可条件下培养（转染组）,并将非许可条件下未转染组作为对照组。用MTT、法检测足细胞的生K速度;用RT—H、R方法检测CD2AP、WTI、synaptopodin和ncphrin mRNA表达;用Western blot检测CD2AP、     

益气活血法对糖尿病肾病患者尿液足细胞标记蛋白的影响

目的观察益气活血法对气虚血瘀型糖尿病肾病早中期患者尿液足细胞标记蛋白的影响。方法选取60例中医辨证属于气虚血瘀型的糖尿病肾病早中期患者,随机分为治疗组和对照组,各30例,对照组采用常规糖尿病健康教育、控制血压血糖以及对症支持治疗,治疗组在对照组治疗的基础上加用当归补血汤,治疗3个月后观察2组患者临床症状以及尿液足细胞标记蛋白的变化。结果在改善临床症状和体征,降低尿液足细胞标记蛋白等方面,治疗组作用比对照组更为明显,且差异有统计学意义（P〈0.05）。结论益气活血法能有效改善早中期糖尿病肾病气虚血瘀型患者的临床症状,保护肾功能,延缓病情进展。     

大鼠足阳明胃经循经部位发现特异蛋白电泳条带的实验研究

目的:通过蛋白质凝胶电泳技术,寻找大鼠循经部位与非循经部位蛋白质条带的差异,证实循经部位是否存在特异蛋白.方法:在大鼠足阳明胃经循经部位与非循经部位选取皮下结缔组织,提取蛋白质制备电泳样品,进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,观察二者蛋白电泳条带差异.结果:在电泳图谱中可观察到大鼠循经部位存在特异蛋白电泳条带(非循经部位不存在).结论:初步证明大鼠足阳明胃经循经部位存在特异蛋白质.     

狼疮性肾炎患者尿液足细胞和podocalyxin变化及其意义*

目的：探讨狼疮性肾炎（LN）患者足细胞损伤及尿液中podocalyxin（PCX）浓度变化与肾脏损害的关系。方法：选择SLE患者60例,其中LN 43例,无肾脏损害SLE 17例,肾病综合征患者（NS）20例,健康对照组10例。肾病组63例包括狼疮性肾炎和肾病综合征;非肾病组27例包括系统性红斑狼疮无肾脏受累和健康对照组。根据SLEDAI评分,将LN患者分为中/重度活动组（≥10分）23例和轻度活动/稳定组（＜10分）20例;采用ELISA法检测尿液PCX浓度,免疫荧光法检测尿液中足细胞数目;收集LN患者的相关临床和实验室资料,分析各组患者尿液PCX水平及与临床和实验室指标之间的相关性。结果：（1）肾病组患者尿液PCX浓度183.06±79.59 ng/L高于非肾病组16.75±4.97 ng/L;中/重度活动组LN患者尿液PCX浓度270.8±25.50 ng/L高于轻度活动/稳定组90.10±14.08 ng/L和对照组12.74±2.28 ng/L;轻度活动/稳定组尿液PCX浓度高于对照组。（2）LN、NS患者尿液PCX浓度与24小时尿蛋白定量呈正相关（P<0.01）。（3）LN患者尿液PCX浓度与抗ds-DNA抗体水平、SLEDAI评分呈正相关,与C3、C4呈负相关（P<0.01）。（4）肾病组尿液足细胞数目及阳性率均高于非肾病组。结论：PCX是足细胞重要的靶蛋白,可作为LN肾损伤和疾病活动度的标志之一。